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垂盆草水溶性成分的免疫活性研究



全 文 :要成分是西洋参 、 黄芪 、 山楂 、 鳖甲等 。现
代药理研究表明:西洋参 、 黄芪能提高机体
整体的免疫功能[ 4] ;焦山楂具有抗氧化 、 增
强机体细胞免疫和体液免疫的功能;鳖甲也
能增强免疫功能。反复呼吸道感染与机体的
免疫功能低下有密切的关系。本方通过补肺
健脾 , 提高机体的免疫功能 , 为对抗外界有
害因素的侵袭奠定了物质基础 。
参考文献:
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垂盆草水溶性成分的免疫活性研究
张邦祝
(广东新北江制药股份有限公司 , 广东清远 511515)
摘要:[ 目的] 研究垂盆草水溶性成分的药理活性。[ 方法] 采用水提醇沉法将垂盆草的水提液与乙醇分别
按 2∶1、 1∶1 、 1∶2 进行醇沉 , 将所得的 I、 II、 III 三组水溶性成分 , 进行正常小鼠及免疫低下小鼠的迟发型过
敏 (delayed type hypersensitivity)实验 、 血清溶血素实验。[ 结果] 在细胞免疫方面 , 组分 I、 II 对免疫低下小鼠
有免疫增强作用 , 而对正常小鼠无影响 , 组分 III 对正常小鼠有免疫抑制作用 , 对免疫低下小鼠无影响。[ 结
论] 垂盆草 3 种水溶性成分的免疫活性和免疫调节作用与机体所处的免疫状态密切相关 , I、 II对免疫受抑状
态小鼠可能起免疫调整作用。
关键词:@垂盆草/免疫学;细胞免疫/药物作用;体液免疫/药物作用;迟发型过敏反应/药物作用;血清
溶血素/分析;
中图分类号:R285.5    文献标识码:A   文章编号:1003-9783 (2001)06-0430-03
  垂盆草 (Sedum Sarmentosum Bunge), 又名
地蜈蚣草 、佛甲草 , 是常用的一种民间草药 。
性凉 、 味甘淡 、 微酸 、 无毒。主治痈 、 蜂窝
组织炎 、腮腺炎 、 乳腺炎 、 蛇虫咬伤 、 烫伤 、
烧伤等 , 亦可捣汁内服配合有关药物治疗肺
脓疡 、 阑尾炎。随着垂盆草的药用价值被广
泛的认可 , 其成分研究的报道越来越多[ 1-5] 。
本实验旨在进行垂盆草水溶性成分的免疫活
性研究 , 现将结果报道如下。
1 仪器与试剂
1.1 仪器 800型离心沉淀机;LXJ-II 型离
心沉淀机;751-GW 分光光度计;螺旋测微
器;电热恒温水浴箱等。
1.2 试剂  刚果红 , 批号 911212;肝素钠
(DNCB), 批号 990806;2 , 4 -二硝基氯苯 ,
批号 890901;醋酸泼尼松片 , 批号 990808;
2 , 4 , 6-三硝基氯苯 (PC), 批号 V2K4524;
都氏液 (Drabkin);注射用环磷酰胺 981207;
绵羊血 。
1.3 动物 昆明种小鼠 , 雌雄不拘 , 广东新
收稿日期:2001-08-22
作者简介:张邦祝 (1966-), 男 , 工程师 , 从事中药工艺研究
·430· 中药新药与临床药理 2001 年 11月第 12卷第 6期
北江制药股份有限公司动物房提供 。
2 方法与结果
2.1 水溶性成分的提取
2.2 水溶性成分 I 、 II、 III 的非特异性免疫
功能试验 结果见表 1。
表 1 垂盆草 3 种水溶性成分
对小鼠免疫器官胸腺 、 脾脏重量的影响
组别 剂量/ (mg·g -1) N/只
胸腺指数
/ (mg·g-1)
脾指数
/ (mg·g-1)
对照组 - 10 5.493±0.5830 3.711±0.9813
I 50 11 6.653±0.7882*** 4.099±1.3688
II 50 10 4.873±0.9905 4.216±1.1530
III 50 10 5.116±0.7971 3.992±1.2082
  注:与对照组比较 , ***P<0.01。
  结论:水溶性组分 II、 III 对小鼠免疫器
官胸腺 、 脾脏重量无明显影响 , 组分 I 对小
鼠免疫器官胸腺有增重作用 (P<0.01)。
2.3 对特异性细胞免疫功能的影响
2.3.1  组分 III对 PC所致的接触性皮炎
(PC-DTH)的影响:取昆明种小鼠随机分
组 , 刮腹部之毛 , 涂 0.1%PC 无水乙醇溶液
致敏。自致敏当天开始灌胃给予 25 、 50 、 100
mg/kg 组分 III , 对照组给予同体积蒸馏水 ,
连续 6 d , 末次给药 1 h 后 , 以 0.1%PC 橄榄
油溶液 30μL 涂于小鼠右耳两面进行攻击 。24
h 后测量两耳厚度 , 以两耳厚度差表示 DTH
强度。见表 2。
表 2 垂盆草水溶性成分Ⅲ对小鼠
PC-DTH 的影响 ( x±s)
组别 剂量/(mg·kg -1) N/只
肿胀度
/ 10-2mm
抑制率
/ %
对照组 - 12 8.45±1.50 -
III 50 8 5.62±0.52*** 33.4
III 100 8 5.88±1.81*** 30.5
III 25 12 6.08±0.67*** 45.7
  注:与对照组比较 , ***P<0.01。
  结果表明:组分 III 对 PC-DTH 的抑制
作用呈剂量依赖性 , 其中 25 mg/kg III 对 PC
-DTH有明显抑制作用 。
2.3.2 对醋酸泼尼松引起的免疫功能低下小
鼠 PC-DTH 的影响:取昆明种小鼠随机分组 ,
腹部刮毛 , 涂以 0.1%PC 无水乙醇溶液 0.1
mL 致敏。致敏当天开始灌胃给药 , 每天 2
次 。第 1 次除对照组给予同体积水外 , 其余
各组均给 20 mg/kg 醋酸泼尼松;第 2 次除对
照组和泼尼松组给予同体积的水外 , 其余各
组分别给予 100 、 250 mg/mL 的组分 I、 II 、
III。连续给药 6 d , 末次给药 1 h 后 , 以
0.1%PC 橄榄油溶液 30 μL 攻击小鼠右耳正反
两面 。24 h 后用螺旋测微器测量两耳厚度 ,
以两耳厚度差表示 DTH 强度 。结果见表 3。
3 讨论
以往研究对垂盆草中的有效成分垂盆草
苷的药理活性已有深入的报道[ 1-5] 。为了进
一步开发民间广泛使用的垂盆草 , 我们着眼
其水溶性成分的研究 , 以期有所突破 。
·431·中药新药与临床药理 2001年 11 月第 12卷第 6 期
表 3 垂盆草水溶性成分对免疫功能低下小鼠 PC-DTH 的影响 ( x±s)
组 别 剂量/(mg·kg-1) N/只 肿胀度/ 10-2mm 脾指数/(mg·g -1) 胸腺指数/(mg·g -1)
对照组 - 9 11.2±1.30 3.325±0.68 3.658±0.82
醋酸泼尼松 20 11 3.36±0.50 1.243±0.26■■■ 0.396±0.15■■■
I+醋酸泼尼松 100 11 6.82±0.60*** 1.692±0.23*** 0.838±0.27***
250 10 6.40±0.84*** 1.380±0.33*** 0.887±0.19***
II+醋酸泼尼松 100 11 7.09±0.54*** 1.763±0.43*** 0.779±0.19***
250 10 7.10±1.29*** 1.884±0.51*** 0.815±0.33***
III+醋酸泼尼松 100 11 3.73±0.65 1.780±0.36*** 0.739±0.28***
250 15 3.67±0.98 1.796±0.37*** 0.874±0.31***
    注:与醋酸泼尼松组比较 , ***P<0.01;与对照组比较 , ■■■P<0.01。
  本实验在进行垂盆草水溶性成分提取时 ,
采用了直火加热浓缩和乙醇分级沉淀两种可
减少垂盆草苷 (水溶性成分)析出的办法 。
而且经预实验证明 , 实验分离得到的水溶性
组分 I 、 II、 III 均无降酶效果 , 故我们认为 ,
垂盆草苷在实验所提组分 I 、 II、 III 中含量极
微 , 对实验无影响。
在免疫器官增重实验中除组分 I 对胸腺
重量有明显影响外 , 其余各组分对胸腺和脾
脏均无明显影响 。故可认为组分 I 、 II、 III 对
正常小鼠的外周免疫器官没有影响 , 不能增
强机体的非特异性免疫。组分 I 对胸腺的作
用有待进一步实验。
在各组分的特异性细胞免疫功能测试中 ,
发现组分 III 低剂量时对免疫正常鼠 DTH 有
明显抑制作用 , 而对免疫低下鼠无明显影响 ,
组分 I、 II 对正常免疫状态下的小鼠 DTH 无
明显影响 , 对免疫受抑小鼠的细胞免疫有增
强作用 , 故可认为组分 I 、 II、 III 在对不同免
疫状态下的 T 细胞介导的免疫应答有显著影
响 , 说明组分 I、 II 对免疫低下小鼠的胸腺依
赖性免疫应答有调节作用 , 而组分 III 则对正
常免疫状态小鼠的免疫力有一定的抑制作用 ,
且不影响免疫器官生长。
当用醋酸泼尼松处理 , 使小鼠成为免疫
抑制状态时 , I、 II 组分可增强 PC-DTH , 显
示其具有免疫增强作用 , 而组分 III 对免疫低
下小鼠的 PC-DTH 无明显影响 。本实验说明
组分 I 、 II 对正常免疫状态下的小鼠 DTH 无
明显影响 , 对免疫受抑小鼠的细胞免疫方面
有增强作用;而组分 III 对正常免疫状态下的
小鼠 DTH 呈抑制作用 , 对免疫受抑小鼠的
DTH 无影响。
本实验显示垂盆草水溶性成分 I 、 II、 III
主要对 T 细胞介导的特异性细胞免疫有显著
的影响 , 对非特异性免疫和特异性体液免疫
无明显影响 , 提示组分 I、 II 、 III 的免疫作用
与机体所处的免疫状态密切相关 , I 、 II 对免
疫受抑状态小鼠可能起免疫调整作用 。
参考文献:
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·432· 中药新药与临床药理 2001 年 11月第 12卷第 6期