全 文 :线回归方程:Y =5025.073+7057733X ;相关系数:
r=0 .9999 ;23-乙酰泽泻醇B 进样量在99 ~ 1388.8
ng 之间呈良好线性关系。
3.5 空白试验 原方去泽泻 ,按制剂工艺法 ,进行
提取 ,浓缩后 102℃烘干 ,得空白制剂 。空白制剂研
碎 ,取 0.2g ,依含量测定法处理及分析 ,空白样品色
谱在 23-乙酰泽泻醇 B 相应保留时间上没有干扰
峰。
3.6 精密度试验和稳定性考察
对同一浓度的供试液 ,连续 7次进样 ,以 23-乙
酰泽泻醇 B 的峰面积计算 , 精密度 RSD(%)=
0.7%。隔 2h进样 1次 ,共测 5次 ,结果表明供试品
在 8h内稳定 , RSD(%)=1.30%。
3.7 重复性试验
同一批号制剂 ,精密称样 6份 ,以制剂中 23-乙
酰泽泻醇 B的含量计算 ,其 RSD(%)=2.1%(n =
6)。
3.8 加样回收率试验
取含量已测定的制剂 , 进行加样回收率试验 。
精密称取 23-乙酰泽泻醇B对照品 4mg定容至 5mL
量瓶中 。精密称取同批号制剂 6 份 ,每份约 0.25g ,
分3 组 ,分别加入甲醇 9.6 , 9.5 , 9.4mL ,再分别加
入对照品液 0.4 , 0.5 ,0.6mL。如法超声提取 ,依法
测定 ,并计算回收率为 103.05%, RSD %=2.41%。
结果见表 1。
3.9 样品测定
对 3批止眩颗粒剂(000105 ,000107 , 000109),
依法测定 ,结果见表 2。
表 1 加样回收率试验结果
序号 样品重(g)
样品含量
(μg)
加入量
(μg)
检出量
(μg)
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 0.2515 383.9 320 697.5 98.01
2 0.2504 382.2 320 714.3 103.78
3 0.2514 383.7 400 800.5 104.2
4 0.2517 384.9 400 800.2 103.83
5 0.2521 384.8 480 887.1 104.65
6 0.2522 384.9 480 883.3 103.83
103.05 2.41
表 2 止眩颗粒剂中 23-乙酰泽泻醇 B的含量(n=3)
制剂批号 23-乙酰泽泻醇 B(mg·g -1) RSD(%)
000105 1.54 1.21
000107 1.53 1.08
000109 1.55 0.97
4 讨论
4.1 为确保色谱定性的准确性 ,除采用上述流动相
外 ,曾以乙腈-水(63∶35)、(60∶40)等作为流动相 ,
进行了样品与标准品的定性比较 ,表明样品中均有
与标准品一致的保留值 。
4.2 23-乙酰泽泻醇 B为泽泻利水渗湿的活性成
分 ,可用来作为中成药中泽泻的定量指标成分。
4.3 该方法简便可靠 ,精密度高 ,分离度好 ,可用于
止眩颗粒剂的含量测定和质量控制。
参考文献:
[ 1] 彭国平 ,朱国元 ,陈东军,等.泽泻化学成分的研究[ J] .天然产
物研究与开发 , 2001 , 17(3):154.
[ 2] 文红梅 ,彭国平 ,李伟 ,等.泽泻药材的质量标准研究 I[ J] .药物
分析杂志 , 1998 , 18(6):375.
复方垂盆草冲剂质量标准研究
朱文荣
(江阴天江药业有限公司 ,江苏 江阴 214429)
收稿日期:2002-12-06
作者简介:朱文荣(1968~ ),男 ,江苏省泰兴市人 ,工程师 ,从事中药配方颗粒质量标准的研究。电话:0510-6408091 , E-mail:txzw r@sina.
com
关键词:复方垂盆草冲剂;异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷;HPLC;TLC;质量标准
摘要:目的:建立复方垂盆草冲剂(垂盆草 , 矮地茶)的质量标准。方法:采用 T LC 法对处方中垂盆草 、矮地茶进行定性鉴
别;用 HPLC法测定异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷的含量。结果:TLC 色谱检出异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷 、矮地茶;异
鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷的线性范围为 0.86~ 4.3μg , r=0.9996 , 平均加样回收率为 98.22%, RSD 为 1.72%(n =6)。
结论:该方法灵敏 、简便 、重现性好 , 可作为该制剂的质量控制标准。
中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2003)06-0456-03
456
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中 成 药
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June , 2003
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Study on quality standards for Compound Chuipencao Granules
ZHU Wen-rong
(Jiangyin Tianj iang Pharmaceutical Co., Ltd , Jiangsu Jiangyin 214434)
Key words:Compound Chuipencao Granules;isorhamnetin-3-7-O-D-glucoside;HPLC;TLC;quality standards
Abstract:Objective:To establish the quality standard for Chuipencao Granules(Herba Sedi , Herba Ardisiae
Japonicae).Methods:Herba Sed and Herba Ardisiae Japonicae in this prescription were identified by T LC.
Iso rhamnet in-3-7-O-D-glucoside w as determined by HPLC.Results:Isorhamnetin-3-7-O-D-glucoside and could
be detected by T LC.The linear range of Isorhamnetin-3-7-O-D-g lucoside w as 0.86 ~ 4.3μg , r =0.9996 , The
average recovery was 98.22%, RSD =1.72%(n =6), respectively.Conclusion:The method w as easy to op-
erate with accurate result , high sensitivity and good reproducibility.It can be used as the quality control of this
preparat ion.
复方垂盆草冲剂为卫生部药品标准(中药成方
制剂)第七册收载品种 ,由垂盆草 、矮地茶组成 ,具有
清热解毒 ,活血利湿 ,降低谷丙转氨酶的作用 。临床
用于急性肝炎及迁延性肝炎 ,慢性肝炎的活动期 。
原标准中无定性 、定量方法 ,本文对其定性 、定量方
法进行了探索 ,现将结果报道如下 。
1 仪器 、试剂与试药
Waters 600E 高效液相色谱仪(美国Waters 公
司);Nova-Pak-C18(3.9mm ×150mm)色谱柱(美国
Waters公司);Waters 2487双通道紫外-可见检测
器(美国Waters公司);JS-3030色谱工作站(大连江
申分离技术公司);超声清洗机(无锡超声电子设备
厂);甲醇 、乙腈为色谱纯;水为高纯水;其它试剂均
为分析纯 。异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷中国药品
生物制品检定所提供 ,复方垂盆草冲剂市售。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1 垂盆草的薄层鉴别
取样品 1g ,研细 ,加 85%的乙醇 20mL ,超声处
理 30min ,滤过 ,滤液水浴蒸干 ,残渣加水 10mL 溶
解 ,用水饱和的正丁醇萃取 2 次 ,每次 10mL ,合并
正丁醇液 ,用水洗涤 2 次 ,每次 5mL ,正丁醇液水浴
蒸干 ,残渣加甲醇 1mL 溶解 ,作为供试品溶液 。另
取异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷对照品 ,加甲醇制成
每毫升含 0.5mg 的溶液 ,作为对照品溶液。再取垂
盆草对照药材 2g ,加水 50mL 加热煮沸 30min , 过
滤 ,浓缩至 10mL ,同样品方法制成对照药材溶液 ,
再取缺垂盆草的阴性样品 1g ,同样品方法制成阴性
样品溶液 , 分别吸取上述 4 种溶液各 5 , 2 , 5μL 和
5μL 点与同一硅胶 G薄层板上 ,以苯-丁酮-甲醇(3∶
1∶1)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,置紫外灯(365nm)
下检视。供试品色谱中 ,在于对照品和对照药材色
谱相应的位置上 ,显相同颜色的蓝色荧光斑点。阴
性对照品无干扰。(见图 1)
2.1.2 矮地茶薄层鉴别
取样品 1g , 研细 , 加甲醇 20mL , 超声处理
30min ,滤过 ,滤液浓缩至 5mL ,作为供试品溶液。
另取矮地茶药材 2g , 加水 100mL ,煮沸 30min ,滤
过 ,滤液浓缩至干 ,残渣加甲醇 10mL ,同法制成对
照药材溶液 ,再取缺矮地茶的阴性样品 1g ,同样品
方法制成阴性样品溶液 。照薄层色谱法(中国药典
2000年版一部附录 VIB)试验 ,吸取上述 3种溶液
各 10μL ,分别点于同一硅胶 G 薄层板上 ,以氯仿-
甲醇(8∶2)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以重氮化
试剂 ,热风加热至斑点显色清晰 。供试品色谱中 ,在
与对照药材色谱相应的位置上 ,显相同颜色的斑点。
阴性对照品无干扰 。(见图 2)
图 1
1.异鼠李素对照品
2.垂盆草对照药材
3.样品 4.缺垂盆草阴性样品
图 2
1.矮地茶对照药材
2.样品 3.缺矮地茶阴性样品
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件
457
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Chinese T raditional Patent Medicine
June , 2003
Vol.25 No.6
色谱柱:Kromasil C18(中科院大连化学物理研
究所 ,150mm×4.6mm ,5μm);流动相:甲醇-水-
乙腈-冰醋酸(10∶80∶8∶2);检测波长:355nm ;柱
温:室温;流速:1.0mL·min-1;灵敏度:2.00AUFS 。
2.2.2 对照品溶液的制备
精密称取置 P2O5 干燥器中真空干燥 24h 的异
鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷 10.81mg ,置 25mL 量瓶
中 ,加甲醇使溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得对照品
溶液 。
2.2.3 供试品溶液的制备
取样品适量 ,研细 ,精密称取 2g ,加 85%的乙醇
25mL超声处理 30min ,滤过 ,滤液水浴蒸干 ,加水
20mL使溶解 ,用水饱和的正丁醇萃取 2 次 ,每次
20mL ,合并正丁醇液 ,用水洗涤2次 ,每次 10mL ,合
并正丁醇液水浴蒸干 , 残渣加甲醇溶解定溶至
10mL ,作为供试品溶液。
2.2.4 线性关系考察
精密吸取对照品溶液 2 , 4 ,6 ,8 , 10μL 注入液相
色谱仪 , 进样 2 次 , 测得平均峰面积为 84529 ,
162843 , 255186 , 331144 、420184 , 以对照品进样
量(μg)为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,求得回归方程:
Y =97629.2X -1106.1 , r =0.9996(n=5)。结果
表明 ,异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷在 0.86 ~ 4.3μg
范围内呈良好的线性关系 。因曲线不通过原点 ,故
用外标两点法计算。
2.2.5 稳定性试验
精密吸取异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷对照品
溶液及供试品溶液 5μL 和 10μL ,在8h 内每隔2h进
样测定 1次 ,结果峰面积积分值前后变化不大 ,对照
品溶液 RSD 为 0.61%(n =5),供试品溶液 RSD
为 0.84%(n=5)。
2.2.6 精密度考察
精密吸取异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷对照品
溶液及供试品溶液 5μL 和 10μL ,重复进样 5次。结
果峰面积积分值前后基本不变 ,对照品溶液 RSD
为 0.93%,供试品溶液 RSD 为1.04%(n=5)。
2.2.7 重复性试验
取同一样品 5份 ,依法测定异鼠李素-3-7-O-D-
葡萄糖苷含量 , 其平均含量为 0.13%, RSD 为
1.64%(n =5)。
2.2.8 空白干扰试验
精密称取缺垂盆草阴性样品 2g ,按供试品溶液
制备方法制备阴性样品溶液 ,进样 10μL ,结果表明 ,
阴性样品在异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷色谱峰位
置无相应峰出现(见图 1)。
A
B
C
图 1 HPLC图
A 缺垂盆草阴性样品HPLC图 B对照品异鼠李素HPLC图
C 样品 HPLC图
2.2.9 回收率试验
取样品细粉 1g ,精密称定 ,分别精密加入对照
品溶液 3 , 4.5 ,6mL ,按供试品溶液制备试液 ,进样
10μL ,依法测定异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷含量 ,
计算回收率 ,结果平均加样回收率为 98.22%, RSD
为 1.72%(n=6)(见表 1)。
表 1 回收率试验
样品重量
(g)
样品含量
(mg)
加标量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
%
平均回
收率%
RSD
%
0.9989 1.2986 1.2972 2.5815 98.9
1.0154 1.3200 1.2972 2.5809 97.2
1.0023 1.3030 1.9458 3.2527 100.2 98.22 1.72
1.0145 1.3189 1.9458 3.2277 98.1
0.9994 1.2992 2.5944 3.7768 95.5
0.9794 1.2732 2.5944 3.8520 99.4
2.2.10 样品测定
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Chinese T raditional Patent Medicine
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Vol.25 No.6
按上述含量测定方法 ,对照品溶液和供试品溶
液分别进样5μL ,10μL ,采用外标两点法测定3批样
品中异鼠李素-3-7-O-D-葡萄糖苷的含量 ,每批平行
3份 ,结果 3 批样品含量分别为 0.13%, 0.15%和
0.11%(见表 2)。
表 2 复方垂盆草冲剂含量测定结果(n=3)
产地 批号 样品含量(%) RSD(%)
上海 20010924 0.13 0.97
宁波 20020208 0.15 0.67
江西 20020516 0.11 0.54
3 讨论
垂盆草中有垂盆草苷 、黄酮等主要活性成
分[ 1] ,但文献报道垂盆草苷不太稳定 , 尤其在受热
条件下更易被破坏[ 2] 。复方垂盆草冲剂系水煮浓
缩工艺制成的制剂 ,垂盆草苷含量甚微 ,故采用异鼠
李素-3-7-O-D-葡萄糖苷做指标建立定性 、定量方
法 ,结果比较满意 。
参考文献:
[ 1] 叶淳渠 ,李静芳.垂盆草化学成分的研究[ J] .化学学报 , 1980 ,
38(6):601.
[ 2] 潘金火 ,何满堂 ,罗兰.垂盆草药材质量控制方法研究[ J] .成
都中医药大学学报 , 2002 , 25(1):44-45.
双波长薄层扫描法测定促血生颗粒中人参三醇的含量
韩正洲1 , 李 宇2
(1.深圳三九药业有限公司 ,广东 深圳 518029;2.三九医药股份有限公司 ,广东 深圳 518029)
收稿日期:2002-09-14
作者简介:韩正洲(1964~ ),男 ,湖北武汉市人 ,高级工程师 ,执业药师 ,主要从事中药制剂和质量标准研究。电话:0755-83360999-3243 , E-
mail:gulf@999.com.cn.
关键词:薄层扫描法;促血生颗粒;人参三醇;含量测定
摘要:目的:建立促血生颗粒(人参 , 生地黄 ,黄芪 , 绞股蓝等)中人参三醇的定量分析方法。 方法:采用甲醇提取 , 硫酸溶
液水解 ,双波长薄层扫描法(λS=530nm ,λR=650nm)。结果:平均回收率 98.16%。结论:该方法稳定 、可行 、专属性好 ,
具有实用性。
中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2003)06-0459-03
Determination of panaxatriol in Cuxuesheng Granules by dual wavelength TLC-
scanning
HAN Zheng-zhou1 , LI Yu2
(1.Shenzhen Sanj iu Pharmaceutical CO ., L TD.Shenzhen 518029 , China;2.Sanj iu Medical & Pharmaceut ical CO., L TD., Shenzhen
518029 , Ch ina)
Key words:T LC-scanning ;Cuxuesheng Granules;panaxat riol;determination
Abstract:Objective:To establish a quanti tative method fo r determination of panaxat riol in Cuxuesheng Gran-
ules(Radix Ginseng , Radix Rehmanniae , Radix Astragali , etc.).Methods:The g ranules were ext racted w ith
methanol and hydrolyzed w ith sulfuric acid solution and then determined by dual wavelength TLC-scanning (λS
=530nm ,λR=650nm).Results:The average recovery w as 98.16%.Conclusions:The method is stable , spe-
cific and feasible.
促血生颗粒是由我公司研制的新药 ,由人参 、生
地黄 、黄芪 、绞股蓝等 10味药组成;具有补肾益气生
血 、壮元生精回阳之功效 。人参为方中君药 ,由于方
中有绞股蓝药材 ,对人参皂苷的测定有干扰 。综合
查阅的文献资料及我们所做的 T LC实验 ,证明绞股
蓝中与人参相同的只有原人参二醇类皂苷 ,而不含
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2003 年 6 月
第 25 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
June , 2003
Vol.25 No.6