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紫叶李休眠芽离体诱导培养技术



全 文 :刘 洋,建德锋. 紫叶李休眠芽离体诱导培养技术[J]. 江苏农业科学,2012,40(10) :164 - 165.
紫叶李休眠芽离体诱导培养技术
刘 洋,建德锋
(吉林农业科技学院,吉林吉林 132101)
摘要:以紫叶李的休眠芽为外植体,对其进行 4 种不同的切割处理接种,以比较最佳的外植体处理方法,另诱导
阶段采用 5 种不同的培养基配方,以比较最佳的培养方案。结果表明:带枝芽苞经过消毒后,将芽苞从枝上切下,拨去
鳞片,露出顶端分生组织,保留叶原基 2 ~ 4 mm 进行接种,萌发率最高,诱导阶段采用 MS + 6 - BA 0. 5 mg /L + KT
0. 02 mg /L配方培养效果最好。
关键词:紫叶李;休眠芽;培养基
中图分类号:S687. 104 + . 3 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2012)10 - 0164 - 01
收稿日期:2012 - 03 - 23
作者简介:刘 洋(1979—) ,女,吉林吉林人,硕士,讲师,从事园艺植
物学教学与研究工作。E - mail:82642444@ qq. com。
紫叶李(Prunus ceraifera cv. pissardii)为落叶小乔木,是
蔷薇科李属的一个栽培品种,其叶片自春季萌发至秋季落叶
始终呈紫红色,尤以春夏季最为鲜艳,被广泛应用于园林中,
是我国北方地区著名的观叶树种。目前紫叶李多以嫁接方式
繁殖,需用山桃作为砧木,繁殖速度较慢,且过程复杂,成活率
低,因此寻找一种快捷高效的繁殖方法对于紫叶李生产非常
重要。本研究采用紫叶李的休眠芽作为外植体进行离体繁殖
技术研究,旨在为紫叶李高效离体繁殖提供依据[1]。
1 材料与方法
1. 1 材料
2011 年 11 月于吉林农业科技学院校园内 6 年生紫叶李
树木上采集带休眠芽的枝条。
1. 2 方法
1. 2. 1 外植体处理 将采集的枝条带回实验室,截成长 1 ~
2 cm的小段,每段带芽,在准备室内先用流水冲洗 20 min,沥
干水后放入 0. 1%HgCl2 溶液中消毒 5 ~ 8 min,倒去消毒液,
用蒸馏水冲洗 3 ~ 4 次,沥干水放入接种室的超净工作台。接
种前在超净工作台内用 75%乙醇浸泡 30 min,再用蒸馏水冲
洗 3 ~ 4 次,用消毒过的药棉拭干,分别采用 4 种方法切割芽:
A1:将芽从枝上切除下来,在双筒解剖镜下用解剖刀将芽苞
拨去鳞片,露出顶端分生组织,保留 2 ~ 4 mm 叶原基;A2:将
芽从枝上切除下来后,将芽苞一切两半,保留芽苞的上半部
分;A3:将芽从枝上切除下来后,保留完整,稍加修剪;A4:将
带芽苞的枝条修剪成长 1 cm左右,保留位于枝条小段上半部
的 1 个芽苞[2]。
1. 2. 2 诱导培养基配方 芽诱导培养基采用 5 种配比,均以
MS作为基本培养基,添加不同比例的 6 - BA 或 KT,添加蔗
糖 30 g /L,琼脂 6 g /L,培养基 pH 值调节为 5. 8,各培养基分
别记作:B1:MS +6 - BA 0. 5 mg /L + KT 0. 01 mg /L;B2:MS +
6 - BA 0. 5 mg /L + KT 0. 02 mg /L;B3:MS +6 - BA 1. 0 mg /L +
KT 0. 01 mg /L;B4:MS + 6 - BA 1. 0 mg /L + KT 0. 02 mg /L;
B5:MS +6 - BA 1. 5 mg /L + KT 0. 01 mg /L。
1. 2. 3 培养条件 人为控制培养室环境,诱导阶段将培养室
温度控制在 15 ~ 30 ℃之间,湿度控制在 80%左右,光照强度
为 1 500 ~ 2 000 lx,光照时间 12 h /d[3]。
2 结果与分析
2. 1 外植体不同处理对紫叶李芽苞萌发的影响
将“1. 2. 1”中 4 种休眠芽分别接种到 5 种配方培养基
上,每瓶接 1 块原材料,每种培养基接 50 瓶,每种处理接 250
瓶,共接 1 000 瓶,30 d后调查芽苞诱导情况(表 1)。
表 1 外植体 4 种处理方法对芽苞萌发率的影响
外植体处理
接种瓶数
(瓶)
污染瓶数
(瓶)
芽萌发成活瓶数
(瓶)
萌发率
(%)
A1 250 5 210 85. 71
A2 250 4 0 0
A3 250 4 0 0
A4 250 5 0 0
注:萌发率 =芽萌发成活瓶数 /(接种瓶数 -污染瓶数)×100%。
由表 1 可知,A1 处理的芽苞萌发率最多,达到 85. 71%。
A1处理的外植体在 5 种培养基上均能正常萌发,萌发后的幼
芽能迅速正常生长,并能形成试管小植株,幼芽基部有愈伤组
织形成;A2 处理的外植体始终没有萌发,外植体由于缺少营
养逐渐干枯死亡;A3 处理的外植体芽萌发生长,10 d 后干枯
死亡;A4 处理的外植体叶片萌发后,20 d 左右由于缺少营养
干枯死亡。由此可知,A1 为最佳的外植体处理方法。
2. 2 不同诱导培养基对紫叶李芽苞萌芽的影响
将经过 A1 处理的外植体重新接种到 5 种诱导培养基
上,每种培养基接种 100 瓶,共 500 瓶,每瓶 1 块外植体,30 d
调查芽苞萌发情况。由表 2 可知,A1 处理后的外植体在 5 种
表 2 不同诱导培养基对紫叶李芽苞萌发的影响
培养基
接种瓶数
(瓶)
污染瓶数
(瓶)
芽萌发瓶数
(瓶)
萌发率
(%)
B1 100 2 62 63. 26
B2 100 1 98 98. 99
B3 100 0 83 83. 00
B4 100 2 93 94. 89
B5 100 1 72 72. 72
( 下转第 165 页)
—461— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 10 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2012.10.129
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( 上接第 164 页)
培养基上均能萌发,萌发率均大于 50%,但 5 种培养基中的
萌发情况不同。外植体在 B2 中的萌发率最高,达到
98. 99%,B1 萌发率最低,为 63. 26%,说明 B2 培养基是较理
想的紫叶李芽诱导培养培养基。
3 结果与讨论
目前关于紫叶李的离体培养方案研究较少,而在木本植
物的离体培养中,外植体的诱导阶段即初代培养阶段最为重
要,因此本试验主要针对初代培养阶段的外植体处理及诱导
培养基配方进行研究,采用休眠芽作为外植体,可以打破反季
节外植体材料来源少的局限,另外灭菌相对容易,能降低接种
污染率[4 - 5]。本研究表明,采用剥去紫叶李的休眠芽鳞片,露
出叶原基 2 ~ 4 mm的处理方法进行接种萌芽率最高,芽诱导
阶段采用 MS +6 - BA 0. 5 mg /L + KT 0. 02 mg /L配方培养效
果最好。
参考文献:
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林业科技,2008,33(4) :64 - 66.
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[5]马志波,王恭祎. 紫叶李组织培养及其移植成活率研究[J]. 林
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童晓利,陈月红,郭成宝,等. 草醋液对草莓生物学特性及果实品质的影响[J]. 江苏农业科学,2012,40(10) :165 - 167.
草醋液对草莓生物学特性及果实品质的影响
童晓利,陈月红,郭成宝,张 琼,孙永平,桂勇武
(江苏丘陵地区南京农业科学研究所,江苏南京 210046)
摘要:研究了不同浓度的草醋液对脱毒草莓幼苗生长、种苗繁殖及草莓果实品质的影响。结果表明:草醋液根施
对脱毒草莓幼苗叶柄粗、叶片长、叶片宽、叶面积均产生促进作用,以 100 倍稀释液的效果最佳;草醋液对草莓幼苗冠
径、株高、叶柄长无显著影响;草醋液液面喷施可有效促进草莓种苗生长,以 400 倍稀释液对新增叶片数量、新增子苗
数的影响最明显,以 600 倍稀释液对草莓种苗高度增长值、冠径增长值的影响最有效;草醋液根施可显著提高草莓果
实的可溶性固形物、维生素 C含量,以 100 倍稀释液的效果最佳,对果实硬度、可滴定酸的含量无显著影响。
关键词:草醋液;草莓;品质;营养成分;生物学特性
中图分类号:S668. 401 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2012)10 - 0165 - 03
收稿日期:2012 - 06 - 05
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(10)461]。
作者简介:童晓利(1964—) ,男,江苏南京人,副研究员,研究方向为
果树栽培生理。Tel:(025)86192873;E - mail:tongxl64@ 163. com。
草莓(Fragaria ananassa Duch.)是我国的主要果品之一,
具有很高的经济价值。2004 年,我国草莓播种面积为 8. 29
万 hm2,至 2009 年达到 9. 01 万 hm2,栽培面积逐年增加[1 - 2]。
近年来,随着人们生活水平和生活质量的不断提高,对草莓质
量安全提出了更高的要求。研究表明,随着收入水平和文化
程度的提高,消费者对草莓鲜果价格的敏感程度下降,而质
量、安全、营养等因素成为主要考虑因素[3]。
肥料是作物生长必需物质,有机肥可以改善土壤的理化
性质、提供更为丰富的养分、稳定和持续地释放养分,提高农
产品的品质[2,4 - 5];无机肥在农业增产增效方面起到了不可替
代的作用,但由于部分地区化肥施用不当、施用量不断增加也
带来一些负面效应,如长期大量施用化肥破坏了土壤结构,导
致土壤板结,土壤肥力下降,污染环境,降低农产品品质[1]。
对草莓而言,有机肥能为其优质、高效和无公害生产创造条
件,而且在冬季土温较高,苗体生长速度快,采果期提前,产量
提高[6 - 7]。南京林业大学张齐生院士的国家专利技术“农作
物秸秆高效利用新方法及关键技术的研究”,是通过将农业
废弃秸秆变成高附加值的草醋液即“生物质提取液 + 秸秆
炭”,在生产中发挥营养和防病虫害的双重功效,是一种安
全、低碳、高效的有机肥。本试验研究不同浓度草醋液对草莓
幼苗生长、种苗繁殖与果实品质的影响,为草醋液在草莓生产
上应用提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
试验在江苏丘陵地区南京农业科学研究所金陵绿谷现代
园艺有限公司草莓试验基地进行,供试品种为红颊。
1. 2 方法
1. 2. 1 脱毒草莓幼苗的生物性状测定 2010 年 11 月 20 日
对草莓组培苗进行移栽。12 月 26 日根施草醋液,共设 4 个
处理,即按草醋液稀释倍数,分别设 100 倍液(M100)、300 倍
液(M300)和 500 倍液(M500)等 3 种浓度,以清水为对照,采
用随机区组设计,每处理重复 3 次,12 个小区,每处理种 10
行,行距 20 cm,株距 5 cm,60 d 后测定幼苗的冠径、株高、叶
柄长、叶柄粗、叶片长、叶片宽、叶面积。幼苗的冠径、株高、叶
柄长、叶柄粗、叶片长、叶片宽用电子数显卡尺测定,测量均按
—561—江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 10 期