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海金子中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的分离及含量测定



全 文 :海金子中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的
分离及含量测定
〔摘要〕 目的 研究海金子 70%乙醇提取物的化学成分;建立 HPLC 测定海金子中柽柳素-3-O-芸香糖苷、芦丁的
含量。方法 采用硅胶柱色谱进行分离纯化,利用波谱技术、色谱技术进行结构鉴定。采用 Agela Technologies Promosil
C18(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(34∶66),流速为 1.0 mL/min,检测波长为 254 nm,柱温为
40 ℃对不同采集时间、不同部位的海金子中的柽柳素-3-O-芸香糖苷、芦丁进行含量测定。 结果 分离鉴定了 2 个黄
酮苷类化合物,分别为柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁。 柽柳素-3-O-芸香糖苷在 0.254~1.145 μg 范围、芦丁在 0.341~
1.533 μg 范围与其峰面积呈良好的线性关系;平均回收率:柽柳素-3-O-芸香糖苷为 100.08%,RSD 为 1.09%(n=6),芦
丁为 99.89%,RSD 为 1.41%(n=6)。 结论 两种化合物首次从该植物中分离得到。 所建立的 HPLC 简便、准确、重现性
好,结果准确可靠,可用于海金沙中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的测定。
〔关键词〕 海金子;柽柳素-3-O-芸香糖苷;芦丁;高效液相色谱
〔中图分类号〕R284.1 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕doi:10.3969/j.issn.1674-070X.2012.07.013.045.05
Separation and determination of tamarix prime -3 -O -ruti-
noside and rutin in Pittosporum. Illicioides Mak.
PENG Yi-bo1,2, LIU Yang1,2, LI Na1,2, LIU Yu-qing1,2, XIE Yi2, WANG Shi-qiang2
(1. TCM University of hunan, Changsha, Hunan 410208, China;
2. Institute of Chinese Materia Medica, TCM Academy of Hunan, Changsha, Hunan 410013, China)
〔Abstract〕 Objective To investigate the chemical constituents in 70% alcohol extract of Pit-
tosporum. Illicioides Mak. and develop an HPLC method for determination of tamarix prime-3-O-
rutinoside and rutin in Pittosporum. Illicioides Mak. Methods The chemical constituents were iso-
lated by column chromatography over silica gel. The Structures of the two compounds were eluci-
dated by spectroscopic and chromatographic analysis. Agela Technologies Promosil C18 column
(200 mm×4.6 mm, 5 μm) was used with methanol-0.4% phosphoric acid (34:66) as mobile phase.
The flow rate was 1.0 mL/min. The UV detection wavelength was 254 nm and the column temper-
ature was 40 ℃. According to these conditions, the contents of tamarix prime-3-O-rutinoside and
rutin in different parts of Pittosporum. Illicioides Mak cropped at different time were determined.
Results The two flavone glycosides were identified as tamarix prime-3-O-rutinoside and rutin. The
linear response range of tamarix prime -3 -O -rutinoside and rutin were 0.254 ~1.145 μg and,
0.341 ~1.533 μg, respectively. The average recoveries of these compounds were 100.08% (RSD =
1.09%) and 99.89%(RSD=1.41%), respectively. Conclusion The two kinds of compounds were iso-
lated from Pittosporum. Illicioides Mak for the first time. This established method in this study is
simple, reliable, reproducible and accurate for the analysis of tamarix prime-3-O-rutinoside and
rutin in Pittosporum. Illicioides Mak.
〔Key words〕 Pittosporum. Illicioides Mark; tamarix prime-3-O-rutinoside; rutin; HPLC
彭一波 1,2,刘 阳 1,2,李 娜 1,2,刘玉琴 1,2,谢 谊 2,王实强 2*
(1.湖南中医药大学,湖南 长沙 410208;2.湖南省中医药研究院中药研究所,湖南 长沙 410013)
〔收稿日期〕2012-04-14
〔作者简介〕彭一波(1987-),女,浙江安吉人,在读硕士研究生,从事天然药物化学专业。
〔通讯作者〕* 王实强,研究员,硕士研究生导师,E-mail:wsq8135@163.com。
2012 年 7 月第 32 卷第 7 期
Jul. 2012 Vol. 32 No. 7
湖 南 中 医 药 大 学 学 报
Journal of TCM Univ. of Hunan 45
海桐花科 (Pittosporaceae) 海桐花属(Pittospo-
rum Banks) 植物海金子 (Pittosporum. illicioides
Mak.)分布于福建、浙江、江苏、安徽、江西、湖北、湖
南、贵州等省,国外产地有日本 [1]。 海金子的根民间
用于风湿性关节炎、坐骨神经痛、骨折、胃痛、牙痛、
高血压及神经衰弱,还具有良好的杀精子作用 [2-3]。
海金子叶可用于蛇咬伤,疮疖肿毒,过敏性皮炎和
外伤出血[3]。海金子的干燥种子称为“山枝仁”,被贵
州和四川两省的地方标准收载, 具有清热利湿、生
津止咳、收敛止泻的功效。 用于心烦,口渴咽痛,痢
疾,肠炎,白带,体倦乏力等 [4-5]。 海金子在四川几乎
都为野生,多生长在悬崖峭壁或斜坡上,采集十分
困难,加上利润微薄,少有人愿意采集,导致商品来
源不足。
为了更深入地研究海金子的活性物质, 从海金
子叶中提取、 分离得到活性化合物柽柳素-3-O-芸
香糖苷和芦丁,这两种化合物在海金子中首次发现。
目前关于海金子中这两种化合物的高效液相色谱分
析方法未见文献报道。 本文建立了快速预处理、分
离效果好的高效液相色谱分析法, 测定不同采集时
间、 海金子不同部位两种化合物的含量。 为开发和
利用海金子提供参考依据。
1 实验材料
1.1 实验仪器
岛津 LC-10ATvp 高效液相色谱仪(日本岛津公
司),N2000双通道色谱工作站 (浙江大学智能信息
工程研究所);岛津 UV-2450 型紫外分光光度仪(日
本岛津公司);INOVA-400 核磁共振仪 (Varian 公
司 );Avatar 370 FT -IR 型 红 外 光 谱 仪 (Thermo
Nicolet 公司 );LCQ Advantage 型质谱仪 (Thermo
Finnigan 公司 );C10558 型 TLC visualizer 成像仪
(瑞士卡玛公司);SZ-93A 双蒸馏水器(上海亚荣生
化仪器厂);KQ2200B 型超声波清洗器(昆山市超声
仪器有限公司);AE240 型分析天平 (METTLER 公
司)。
1.2 药品与试剂
柽柳素-3-O-芸香糖苷对照品(自制),HPLC 测
定含量大于 98%;芦丁对照品(中国药品生物制品
检定所提供,含量测定用,批号 100080-200707);甲
醇、磷酸为色谱纯;其他试剂均为分析纯;水为双重
蒸馏水。 海金子样品由课题组成员从保靖、吉首、花
垣采集, 经湖南省中医药研究院中药研究所生药室
鉴定,为海金子(Pittosporum. illicioides Mak.)全草,
取其叶、茎皮、果实阴干,供样品含量测试用。
2 方法与结果
2.1 提取分离
将海金子(花垣 8 月)叶(500 g)的 70%乙醇提
取物,依次用石油醚、水饱和正丁醇萃取,回收正丁
醇得提取物(3.5 g)。 采用硅胶柱进行分离,从石油
醚∶乙酸乙酯(1∶1,V/V)洗脱液中得到深黄色颗粒状
晶体,重结晶得化合物Ⅰ(约 200 mg),从乙酸乙酯∶
甲醇=(4∶1,V/V) 洗脱液中得到黄色粉末状结晶,重
结晶得化合物Ⅱ(约 300 mg)。
2.2 结构鉴定
化合物Ⅰ进行 UV、1H -NMR、13C -NMR、ESI -
MS、IR光谱鉴定, 化合物Ⅱ进行 UV、TLC、HPLC 鉴
定。
2.2.1 化合物Ⅰ的波谱数据及鉴定
UV λMeOmaxH nm(logε):254(4.32),356(4.26),可初
步判断有黄酮化合物基本母核。
ESI -MS m/z:623 [M -H] - 。 IRνKBrmax/cm:
3382,1652,1604,1500,1452,1360,1291。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ:6.44(d,1H,J=
1.6 Hz,H-6),6.21 (d,1H,J=1.6 Hz,H-8),7.86(d,
1H,J=1.2 Hz,H-2′),7.52(dd,1H,J=8.4 Hz,1.2Hz,
H-6′),6.91(d,1H,J=8.4 Hz,H-5′),3.84(s,3H,4′-
OCH3),5.44 (d,1H,J=7.2 Hz,glc-H-1"),3.22~3.41
(m,6H,glc-H-2"~6"),0.98 (d,3H,J=6.0 Hz,rha-
CH3)。
13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ:156.8(C-2),
133.3 (C-3),177.7 (C -4),161.5 (C-5),99.0 (C-6),
164.4(C-7),94.1(C-8),156.8(C-9),104.3(C-10),
121.4(C-1′ ),113.6(C-2′),147.2(C-3′),149.7(C-
4′ ),115.6 (C-5′ ),122.6 (C-6′ ),101.5 (C-1"),76.7
(C-2"),76.2(C-3"),70.6(C-4"),74.6(C-5"),67.1
(C-6"),101.2(C-1),70.4(C-2),70.9(C-3),
72.1(C-4),68.6(C-5),18.0(C-6)。 以上波谱
数据与柽柳素-3-O-芸香糖苷的文献数据[6]一致,故
鉴定为柽柳素-3-O-芸香糖苷。
2.2.2 化合物Ⅱ的结构鉴定
薄层鉴别: 取化合物Ⅱ 10.1 mg, 用甲醇定容
至 10 mL, 制成化合物Ⅱ溶液 ; 取芦丁对照品
湖南中医药大学学报 2012 年第 32 卷46
1.芦丁;2.柽柳素-3-O-芸香糖苷
图 1 对照品(A)及海金子药材叶(花垣 8月)供试品(B)HPLC图
10.5 mg,用甲醇溶解定容至 10 mL,即得芦丁对照
品溶液。 照薄层色谱法[7]试验,吸取上述两种溶液各
5 μL,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,分别以不同
的展开剂展开:(1)二氯甲烷∶甲醇∶甲酸(15∶7∶0.5);
(2)三氯甲烷 ∶甲醇 ∶水(2∶1∶0.3)下层 20 mL 加甲酸
0.2 mL;(3)三氯甲烷∶丙酮∶冰醋酸(2∶1.5∶0.2)。 展距
为 15 cm,取出,晾干。 置紫外光灯(365 nm)下检
视。 结果化合物Ⅱ溶液的色谱中, 在与芦丁对照品
相应的位置处显黑色斑点。
紫外鉴别: 向化合物Ⅱ的甲醇溶液(26.8 μg/mL)
分别加入甲醇钠、乙酸钠、乙酸钠/硼酸、三氯化铝及三
氯化铝/盐酸诊断试剂, 试验数据(λmaxnm):256,266
sh,296 sh,358 (MeOH);272,328,410 (NaOMe);
272,302 sh,420 (AlCl3);268,300,366 sh,398(AlCl3/
HCl);272,324,382 (NaOAc);262,298,378 (NaOAc/
H3BO3)。 将上述各种 UV图谱与文献[8]比较,结果与芦
丁一致。
高效液相色谱鉴别: 取芦丁对照品适量, 制成
100 μg/mL 对照品溶液; 取化合物Ⅱ适量, 制成
100 μg/mL 的化合物Ⅱ试液,在“2.3.1”色谱条件下
分别检测。 发现化合物Ⅱ与芦丁对照品在相同的保
留时间(15.4 min)出峰。 综上,化合物Ⅱ鉴定为芦
丁。
2.3 含量测定
2.3.1 色谱条件与系统适应性 采用 Agela Tech-
nologies Promosil C18(200 mm×4.6 mm,5 μm)色谱
柱;流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(34∶66);流速
为 1.0 mL/min; 检测波长为 254 nm; 柱温为
40 ℃; 理论塔板数按柽柳素-3-O-芸香糖苷计不
低于 5 000。 结果见图 1。
2.3.2 对照品溶液的制备 称取柽柳素-3-O-芸香
糖苷对照品和芦丁对照品适量,精密称定,用 50%
甲醇溶解并定量稀释成含柽柳素-3-O-芸香糖苷
100 μg/mL,芦丁 100 μg/mL的混合对照品溶液。
2.3.3 供试品溶液的制备 药材粉碎 (过一号筛),
取粉末 0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入
50%甲醇 25 mL,称定重量,超声提取 30 min,放冷
至室温,用 50%甲醇补足失去的质量,摇匀,用微孔
滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液即得。
2.3.4 线性关系的考察 精密称取柽柳素-3-O-芸
香糖苷对照品和芦丁对照品适量,用 50%甲醇分别
配成每 1 mL 含柽柳素-3-O-芸香糖苷 0.254 4 mg
和每 1 mL 含芦丁 0.340 8 mg 的 2 份母液, 分别
吸取柽柳素-3-O-芸香糖苷母液 2、3、5、7、9 mL
于 10 mL 容量瓶 ; 分别吸取芦丁母液 2、3、5、7、
9 mL 于 10 mL 容量瓶, 用 50%甲醇稀释至刻度。
分别吸取以上 10 个稀释液和 2 个母液各 5 μL 注
入液相色谱仪。 以对照品进样量(μg)为横坐标,色
谱峰面积积分值(mv)为纵坐标,绘制标准曲线。 结
果见表 1。
2.3.5 精密度实验 精密吸取海金子(花垣 8月)叶
供试品溶液,按上述色谱条件和测定方法,连续进样
6 次, 以柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁峰面积积分
值计算,RSD 分别为 1.71%和 1.82%,结果表明本法
精密度良好。
2.3.6 稳定性实验 精密吸取同一份海金子 (花垣
8 月)叶供试品溶液,按上述色谱条件和测定方法,
分别在0、2、4、6、8、10、12 h 进样,测定色谱峰面积,
表 1 柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的线性关系考察
对照品
柽柳素-3-O-芸香糖苷
芦丁
回归方程
y=704 505x+47 694
y=546 174x+26 976
r
0.999 8
0.999 8
线性范围(μg)
0.254~1.145
0.341~1.533
15
.4
07
31
.7
48
15
.3
12
31
.4
26
A
B
彭一波,等 海金子中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的分离及含量测定第 7 期 47
表 3 芦丁回收率试验 (n=6)表 2 柽柳素-3-O-芸香糖苷回收率试验 (n=6)
样品称样
量(mg)
248.34
251.38
249.05
241.08
248.80
250.88
样品中的
量(mg)
1.365 9
1.382 6
1.369 8
1.325 9
1.368 4
1.378 9
加入对照
品量(mg)
1.102 1
1.102 1
1.484 0
1.484 0
1.725 5
1.725 5
测得量
(mg)
2.478 2
2.499 3
2.848 6
2.795 8
3.111 5
3.088 1
回收率
(%)
100.75
101.06
99.62
98.94
101.29
98.82
平均回
收率(%)
100.08
RSD
(%)
1.09
样品称样
量(mg)
234.12
232.65
231.19
238.67
241.23
245.60
样品中的
量(mg)
1.123 8
1.116 7
1.109 7
1.145 6
1.157 9
1.178 9
加入对照
品量(mg)
0.750 9
0.750 9
1.040 2
1.040 2
1.330 8
1.330 8
测得量
(mg)
1.856 1
1.888 8
2.134 5
2.179 6
2.487 2
2.523 6
回收率
(%)
98.34
101.90
98.61
99.46
99.87
101.2
平均回
收率(%)
99.89
RSD
(%)
1.41

  
     
9 9 5 9 9 3 8 9 5 9 3 8 9 9 8



0.69 0.80 0.69 1.07 0.91 0.90 0.55 0.05 0.05 0.05 0.05 0.01 0.07 0.15 0.18
 0.38 1.08 0.72 0.53 1.26 0.17 0.48 0.01 0.07 0 0 0.03 0 0.25 0.33
表 4 不同采集地、时间海金子叶、茎皮、果实中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁含量 (n=2,%)
以柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁峰面积积分值计
算,RSD 分别为 1.52%和 1.73%,结果表明供试品在
12 h内基本稳定。
2.3.7 重复性实验 按“2.3.3”方法制备海金子(花
垣 8 月)叶样品 5 份,在“2.3.1”色谱条件下分析,测
得柽柳素-3-O-芸香糖苷的平均含量为 0.54%,RSD
为 1.76% , 芦丁的平均含量为 0.47% ,RSD 为
1.34%,结果表明该方法重现性良好。
2.3.8 加样回收率试验 精密称取已知柽柳素-3-
O-芸香糖苷和芦丁含量的海金子(花垣 8 月)叶粉
末(过一号筛)12 份,每份 0.25 g,分两组,一组精密
加入柽柳素-3-O-芸香糖苷, 另一组精密加入芦丁
对照品适量,按“2.3.3”方法制备待测液,各精密吸取
5 μL 进样,在“2.3.1”色谱条件下分析测定,计算回
收率。 测定结果见表 2~3。
2.3.9 样品含量测定 取不同采集时间的海金子
叶、茎皮、果实的粉末(过一号筛),按“2.3.3”项下方
法制备供试品溶液,精密吸取对照品溶液和供试品
溶液各 5 μL,注入液相色谱仪,依照“2.3.1”色谱条
件测定,采用外标法计算含量,结果见表 4。
注:表中 9 月表示老叶,9 月’表示嫩叶。
3 讨论
3.1 色谱条件选择
色谱柱: 本实验分别使用了伊利特 Hypersil
BDS C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm) 柱,Agela Tech-
nologies Promosil C18 (200 mm×4.6 mm,5 μm) 柱,
Waters Symmetry C18(3.9 mm×150 mm,5 μm)柱,发
现 Agela Technologies Promosil C18 (200 mm ×
4.6 mm,5 μm)柱,分离情况较好。
流动相的选择:甲醇-0.2%磷酸[9],拖尾,适当增
加磷酸百分含量,甲醇-0.4%磷酸,峰形好。 摸索流
动相比例,甲醇-0.4%磷酸水溶液(34∶66),分离情况
较好。
检测波长的选择: 柽柳素-3-O-芸香糖苷的紫
外光谱图有两个特征吸收峰, 最大吸收波长分别为
254 nm 和 356 nm。 因 254 nm 处的 ε 值大于
356 nm 处的 ε值,故选用 254 nm 为检测波长。
柱温的选择: 比较柱温 30、35、40 ℃时的色谱
图,在 40 ℃时分离度符合要求、理论塔板数较高。
3.2 样品处理方法的选择
提取溶剂考察:取海金子(花垣 8月)叶粉末(过
一号筛),8 份,每份 0.5 g,分别用不同的溶剂提取:
95%、70%、50%、20%乙醇及 100%、70%、50%、20%
甲醇,其他提取和测定条件相同。 测得样品含量,结
果 50%甲醇提取最完全。
提取方法考察:取海金子(花垣 8月)叶粉末(过
一号筛),2 份,每份 0.5 g,分别回流、超声30 min,
其他提取和测定条件相同。 测得样品含量, 结果超
湖南中医药大学学报 2012 年第 32 卷48
(本文编辑 杨 瑛)
[6] 李子璇,江 海,曹小勇,等.石蒜植株中加兰他敏的分布与含量
测定[J]. 江苏农业科学,2009(3): 290-292.
[7] 栾 伟.石蒜中加兰他敏的微波辅助提取、分离和分析的研究[D].
中山大学硕士学位论文, 2004.
[8] 聂媛媛,周海翔,彭 菲,等.HPLC 法测定黄花石蒜不同部位的加
兰他敏含量[J].湖南中医药大学学报,2009,29(5):51-53.
[9] 李子璇,江 海,曹小勇,等.石蒜植株中加兰他敏的分布与含量
测定[J].江苏农业科学,2009(3):290-292.
[10] Liang P, Pardee A B. Differtential display of eukaryot-
ic messenger RNA by mean of the polymerase chain reaction
[J]. Science,1992,257(5072):967-971.
[11] 唐金凤,鲁耀邦,桂柳姿.黄花石蒜花蕊和花葶组织中总 RNA 提
取方法的比较[J].湖南中医药大学学报,2012,32(1):31-34.
[12] 梁宏伟,王长忠,李 忠,等.聚丙烯酰胺凝胶快速、高效银染方
法的建立[J].遗传,2008,30(10):1 379-1 382.
[13] 王永成,巩振辉,李大伟,等.利用 mRNA 差异显示技术克隆辣椒
抗疫病相关基因片段[J].北方园艺,2008(12):149-152.
[14] 陶 杰,单 颖,荆迎军,等.mRNA 差异显示法筛选和克隆东亚
飞蝗抗药性相关基因[J].南开大学学报(自然科学版),2009,42
(1):107-111.
[15] 茹巧美,裴真明,郑海雷.忽地笑愈伤组织培养条件对加兰他敏
合成的影响[J].广西植物,2010,30(3):411-415.
[16] 赵志敏,钟湘云,杨 帅,等.黄花石蒜愈伤组织培养研究[J].湖南
中医药大学学报,2009,29(5):48-50.
[17] 肖 艳,彭 菲,王 清,等.黄花石蒜的组织培养研究[J].湖南中
医学院学报,2006,26(1):27-28.
[18] 王晓燕,王鹏凯,黄敏仁,等.加兰他敏在忽地笑营养器官中的定
位(简报)[J].分子细胞生物学报,2007,40(5):339-345.
[19] 袁菊红,胡绵好,夏 冰.石蒜属不同种间生物碱含量差异性研
究[J].江西农业大学学报,2010,32(3):560-565.
[20] 陈 斌.石蒜生物碱的高速逆流色谱制备、含量动态变化及合成
途径关键酶 PAL 基因核心片段克隆的研究[D].重庆:西南大学
硕士学位论文,2009.
声效果比回流好。
提取时间考察:取海金子(花垣 8月)叶粉末(过
一号筛),4 份, 每份 0.5 g, 分别超声 20、30、45、
60 min 放冷,其他提取和测定条件相同。 测得样品
含量,结果 30 min 样品可提取完全。
3.3 结果分析
芦丁结构鉴定中,由于有中检所对照品提供,采
用液相色谱结合薄层色谱进行鉴别, 比照样品与对
照品的保留时间与 Rf值确定该化合物为芦丁;而柽
柳素-3-O芸香糖苷无法定对照品,故选用波谱技术
进行结构鉴定。
从表 4中可以看出海金子叶、茎皮、果实中柽柳
素-3-O-芸香糖苷和芦丁含量差异显著, 两个化合
物叶含量最高; 不同采集时间海金子柽柳素-3-O-
芸香糖苷和芦丁含量差异显著, 其中柽柳素-3-O-
芸香糖苷 8月含量较低, 芦丁 3月含量较低。 本文
采用 HPLC 测定几个不同采集时间海金子叶、茎皮、
果实中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的含量, 为海
金子的开发利用提供了实验依据。
参考文献:
[1] 中国科学院《中国植物志》编辑委员会.中国植物志[M].北京:科学
出版社,2005,53(2):16.
[2] 秦松云,吴 红,钟明芳.四川省海桐花属药用植物的种类与分布
[J].资源开发与保护,1991,8(4):265-267.
[3] 聂田田,白 虹,王元书.海桐花属植物化学成分及药理活性研究
进展[J].齐鲁药事,2010,29(6):354-357.
[4] 罗达尚.新修晶珠本草[M].成都:四川科学技术出版社,2004:513.
[5] 张 俊,蒋桂华,敬小莉 .山枝仁质量标准初步研究[J].中药与临
床,2011,2(1):15-19.
[6] El -Sayed N H, Abu Dooh A M, El -KhrisySAM, et al.
Flavonoids of Cassia italica[J].Phytochemistry,1992,31(6):2 187-
2 189.
[7] 中华人民共和国卫生部药典委员会 .中华人民共和国药典[S].北
京:中国医药科技出版社,2010:附录 34.
[8] 匡海学.中药化学[M].北京:中国中医药出版社,2003:157.
[9] 王锦军,杨成雄.马齿苋中黄酮化合物的高效液相色谱分析[J].解
放军药学学报,2010,26(4):345-347.
(上接第 36页)
(本文编辑 杨 瑛)
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彭一波,等 海金子中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的分离及含量测定第 7 期 49