全 文 ：CHINESE JOURNAL OF ANATOM Y Vol.27 No.1 2004 解剖学杂志　2004年第 27卷第 1期
菘蓝对小鼠胚胎发育的保护作用
王　莉　买尔江　邢绥光　安长新
(新疆医科大学组织胚胎学教研室 , 乌鲁木齐　830054)
摘要　目的:研究菘蓝叶氯仿提取物对环磷酰胺(CP)引起的胚胎发育障碍的保护作用。方法:采用小鼠胚胎致畸
试验 ,观察了受孕母鼠的体重变化 , 活胎率 ,死胎率 , 吸收胎率 ,以及胎鼠的身长 、尾长 、体重等指标 。并用骨骼染色
法观察胎鼠有无骨骼畸形。结果:菘蓝叶氯仿提取物本身对胚胎发育无毒性 ,而对 CP引起的胚胎发育障碍有一定
的保护性抑制作用。 CP+菘蓝叶提取物 100 mg·kg -1·w-1剂量组与阳性对照组相比可显著增加胎鼠的活胎率(增
加 59.60%)、降低吸收胎率(降低 86.91%)、及胎鼠畸形率的发生 , 也可明显增加胎鼠的身长 、尾长和体重等指标。
结论:中药菘蓝具有保护小鼠胚胎发育的作用 。
关键词　菘蓝;胚胎发育
Protective effects of chloroform extracts from Isatis indigotica leaves on mouse embryo development
WANG Li , MAI ER JIANG , XING Sui-Guang , AN Chang-Xin
(Department of Histology and Embryology , Xinjiang Medical University , Urumqi 830054 , China)
Abstract　Objective:To study the protective effects of chlo rofo rm ex tracts from Isatis indigotica leaves on the damage of
embryo development induced by cyclopho sphamide(CP)in mice.Methods:The parent mice w eight , fetus w eight and the
fetus body and tail length were measured;the survival , death and abso rb rates of fetus w ere calculated using embryonic
teratogenicity tests.The fetus skeletal development was observed by skeletal staining.Results:I satis indigo tica had no
embryotoxicity , but had significantly pro tective effects on embryonic development induced by CP.The group of chloro-
form ex tracts at the dose o f 100 mg/kg·w+CP 10 mg·kg-1·w -1 could obviously increase the survival rate(59.60%),
decrease absorb (86.91%), death and malformed rate.Furthermo re, it could also increase the fetus body and tail length
as w ell as fe tus weight.Conclusion:The Chinese medicine Isatis indigotica has the protective effects on embryonic devel-
opment induced by CP in mice.
Key words　 Isatis indigo tica Fo rt;embryonic development
　　菘蓝(Isatis indigotica Fort)为十字花科植
物 ,是常用中药大青叶 ,板蓝根的主要来源 ,在
我国南北各地都有大宗栽培。近年来研究资料
发现菘蓝具有增强免疫[ 1 , 2] 、清除自由基[ 3] 、抗
突变 、抗染色体畸变[ 4～ 6]和抗衰老[ 7]等多种药
理作用 。据查新 ,有关菘蓝对小鼠胚胎发育保
护作用 ,国内外尚未见报道。而且 ,随着工业的
发展和环境污染的加重 ,由胚胎发育异常引起
的先天畸形的发生率有上升趋势 ,受到人们的
高度重视 ,因此我们设计了本实验 ,观察菘蓝叶
氯仿提取物是否对 CP 引起的胚胎发育毒性有
抑制作用。
1　材料和方法
1.1　实验动物　昆明种小白鼠 ,由新疆地方病
研究所动物实验中心提供 ,鼠龄约 8 ～ 10 w ,体
重 20 ～ 25 g 。
1.2　受试物　菘蓝采集自新疆乌鲁木齐县大
湾乡 。取叶洗净 ,晾干 ,制成粗粉 ,以氯仿为溶
剂浸泡 48 ～ 72 h ,水浴加热回流 1 h 后减压蒸
—47—
馏浓缩 ,将氯仿挥发尽得氯仿粗提取物(1 g 提
取物相当于粗粉 20 g),以花生油为溶剂配成
50 、100 、200 mg/ml 备用。CP:上海华联制药
厂。
1.3　菘蓝叶提取物对胚胎发育的保护实验
1.3.1　实验分组　将雄性小鼠与雌性小鼠每
晚按 1∶2合笼交配 ,次日清晨观察阴栓 ,以发现
阴栓确定为妊娠0 d ,并将有阴栓的雌性小鼠随
机分成 8组 ,称重 、编号 ,使各剂量组孕鼠至少
达 15只。第 1组:溶剂对照组花生油 200 mg·
kg-1·w -1;第 2组:阳性对照组(CP), 10 mg·
kg
-1·w -1;第 3组:菘蓝叶氯仿提取物 ,50 mg·
kg-1·w -1;第 4组:菘蓝叶氯仿提取物 ,100 mg
·kg-1·w -1;第 5 组:菘蓝叶氯仿提取物 , 200
mg·kg-1·w -1;第 6组:菘蓝叶氯仿提取物 50
mg·kg-1·w -1+CP 10 mg·kg-1·w -1;第 7组:
菘蓝叶氯仿提取物 100 mg·kg-1·w-1 +CP10
mg·kg -1·w-1;第 8组:菘蓝叶氯仿提取物 200
mg·kg-1·w-1+CP 10 mg·kg-1·w -1 。
1.3.2　给药方式　菘蓝氯仿提取物采用经口
灌胃方式 ,CP 为皮下注射 ,同时给药 ,于妊娠第
9 d开始称重给药 ,每日一次 ,菘蓝叶氯仿提取
物连续给药 7 d ,CP 连续给药 3 d ,妊娠第 18 d
称重后以颈椎脱臼法处死 。
1.3.3　观察指标 　检查孕鼠的着床数 ,吸收
胎 、死胎及活胎数 ,逐个测量胎鼠的身长 、尾长
和体重 ,并检查胎鼠骨骼发育有无异常。
1.3.4　统计方法 　PEMS 软件 , t 检验 ,卡方
检验。
2　结果
2.1　菘蓝叶氯仿提取物对孕鼠体重及胚胎的
影响　对孕鼠体重的影响:单纯菘蓝氯仿提取
物 50 mg ,100 mg , 200 mg 剂量组与溶剂对照
组相比无显著性差异 ,说明单纯菘蓝氯仿提取
物对孕鼠无毒性作用 ,CP 组与其余各组相比均
有显著性差异 ,说明阳性对照成立 ,而菘蓝+
CP各组与阳性对照组相比也有不同程度的差
异 ,其中以菘蓝+CP (50+10)剂量组对母鼠体
重的增加最为明显 ,对胚胎的影响:阳性对照组
的活胎率 、死胎率 、吸收胎率与阴性对照组相比
均有显著性差异(P <0.01)。单纯菘蓝 3个剂
量组与花生油溶剂对照组相比 ,各指标均无显
著性差异 ,说明菘蓝叶氯仿提取物本身对孕鼠
的胚胎发育无毒性损伤作用 。菘蓝与 CP 同时
使用时各组的活胎率与阳性对照组相比明显升
高 、吸收胎率明显下降(P<0.01),死胎率也有
不同程度的下降。说明菘蓝叶氯仿提取物对
CP引起的小鼠胚胎发育障碍有一定的保护作
用 ,其中在增加活胎率和抑制吸收胎率的指标
中均以菘蓝 100 mg·kg-1·w -1+CP 组的剂量
组效果最明显(表 1)。
表 1　菘蓝叶氯仿提取物对孕鼠及胚胎的影响
Tab 1　Effect of chloroform extracts from Isatis indigotica leaves on pregnant mice weight and embryo
Group Dose(mg·kg-1) Increasing w eight of
p regnant mice(g)
Rate of survival
fetus(%)
Rate of death
fetus(%)
Rate of absorbed
fetus(%)
S olvent cont rol 200 21.47±5.48 97.45 1.91 0.64
Posit ive cont rol 10 　 12.07±5.56＊＊ 　 34.78＊＊ 　 7.25＊＊ 　57.97＊＊
Ii-1 50 24.39±4.57 98.58 0.71 0.71
Ii-2 100 21.29±4.10 98.53 0 1.47
Ii-3 200 24.20±5.77 96.53 2.08 1.39
Ii-1+CP 50+10 　 20.80±5.01## 　 77.30## 5.52 　17.18##
Ii-2+CP 100+10 16.46±5.09# 　　 86.08##　 6.33 　　7.59[ ##]
Ii-3+CP 200+10 　 17.91±2.83## 　　 81.46##　 6.62 　 11.92##
　　Compared wi th solvent cont rol , ＊＊P<0.01;com pared w ith positive control , ##P<0.01
2.2　菘蓝叶氯仿提取物对胎鼠生长发育的影 响　CP可明显造成胎鼠的身长 、尾长及体重的
—48—
下降 ,单纯菘蓝 3个剂量组与溶剂对照相比 ,可
显著增加胎鼠的身长 、尾长及体重(P<0.01);
菘蓝叶氯仿提取物与 CP 同时用时 ,可以显著
抑制 CP 引起的胎鼠这 3项指标的下降(P <0.
01),提示菘蓝叶氯仿提取物对 CP 引起的发育
毒性有一定的抑制作用(表 2)
表 2　菘蓝叶氯仿提取物对胎鼠的影响
Tab 2　Effect of chloroform extracts from Isatis indigotica leaves on fetus
Group Dose(mg·kg -1) Number of
survival fetus
Length of
fetus body
Length of
fetus tail
Weight of
fetus( x±s)
S olvent cont rol 200 153 2.33±0.17　　 1.07±0.08　　 1.32±0.19　　
Positi ve cont rol 10 48 2.04±0.17＊＊ 0.28±0.15＊＊ 0.99±0.10＊＊
Ii-1 50 139 2.43±0.11＊＊ 1.11±0.07＊＊ 1.43±0.12＊＊
Ii-2 100 134 2.41±0.13＊＊ 1.11±0.07＊＊ 1.41±0.17＊＊
Ii-3 200 139 2.45±0.15＊＊ 1.12±0.07＊＊ 1.48±0.16＊＊
Ii-1+CP 50+10 126 2.12±0.18## 0.75±0.26## 1.14±0.15##
Ii-2+CP 100+10 136 2.13±0.21## 0.75±0.23## 1.11±0.16##
Ii-3+CP 200+10 123 2.01±0.14　　 0.55±0.21## 1.02±0.14##
　　　Compared wi th solvent cont rol , ＊＊P<0.01;compared w ith positive control , ##P<0.01
2.3　单纯菘蓝叶氯仿提取物不引起胚胎骨骼
的畸形及骨化延迟 ,CP 阳性对照组可明显引起
胚胎骨骼的发育异常 ,CP与菘蓝叶提取物同时
使用时 ,可降低 CP 造成的骨骼异常率(图 1 ,
2)。
图 1　溶剂对照与 3个单纯菘蓝组骨骼比较
Fig 1　Compared with solvent control(SC)and 3 sample groups of Isatis indigotica(Ii-1 , Ii-2 , Ii-3)
3　讨论
CP 是临床上常用的抗肿瘤药物和免疫抑
制剂 ,同时它也可以引起胚胎畸形。CP在体内
代谢产生活性产物磷酰胺芥(PM)和丙烯醛
(AC)具有细胞毒作用[ 8] ,因此 ,有的学者认为
它是一种典型的染色体结构损伤剂[ 9] 。CP 还
可以影响卵巢功能和精子的产生以及胚胎的形
成 ,通过对亲代生殖系统的损害作用 ,造成胚胎
存活率的下降 、活胎鼠的生长发育迟缓及导致
胚胎畸形的发生 ,本实验研究进一步证实了这
一点 。给孕鼠注射CP后 ,结果发现孕鼠体重
—49—
图 2　溶剂对照 、CP+100 mg·kg-1·w-1菘蓝组与 CP组骨骼对比
Fig 2　Comparison among groups of solvent control(SC), Ii-2+CP and CP
明显下降 ,活胎数明显降低 ,死胎 、吸收胎大大
增加 ,且存活胎鼠的畸形率也明显高于其余各
组。单纯给予菘蓝叶氯仿提取物的各组可以显
著增加母鼠的体重及胎鼠的身长 、尾长 、体重等
指标 ,说明菘蓝叶氯仿提取物有促进胎鼠生长
发育的作用。CP 与菘蓝同时使用时 ,对 CP 造
成的胚胎发育障碍有显著的改善作用。菘蓝对
胚胎发育的保护作用机制可能与菘蓝叶氯仿提
取物具有抗突变 、抗染色体畸变的作用有关 。
而且胚胎生长的生物学基础是细胞体积的长大
和细胞数目的增多 ,其分子生物学基础是蛋白
质和核酸的生物合成 。而菘蓝中有多种氨基
酸 ,如精氨酸 、谷氨酸 、酷氨酸 、脯氨酸 、缬氨酸及
γ-氨基丁酸等 ,且菘蓝中还含有嘌呤 、嘧啶以及
合成核酸的成分腺甙等物质均和核酸的生物合
成有关[ 10 ,11] ,因此菘蓝有促进胚胎发育的作用。
此外菘蓝还具有抗炎 、抗病毒及增强免疫等功
能 ,可减少因病毒感染造成胚胎畸形 ,同时还可
以提高胚胎耐受力和抵抗力。而免疫功能增强 ,
可以显著提高CP 致畸作用的抵抗力[ 12] 。
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