全 文 ：文章编号:1001 － 4829(2015)05 － 2218 － 05 DOI:10． 16213 / j． cnki． scjas． 2015． 05． 070
收稿日期:2014 － 06 － 12
基金项目:云南省战略性新兴产业发展专项资金;昆明市科技计
划项目(2013-01-04-A-A-02-0001)
作者简介:杨春梅(1970 －) ，女，云南元江人，硕士，研究员，主
要研究方向为花卉高效繁育技术研究及新品种选育，E-mail:
ycm68@ yahoo． cn，* 为并列第一作者，＊＊为通讯作者，E-mail:
2580871932@ qq． com。
辣木组织培养和快繁技术研究
杨春梅1，2，屈云慧1* ，汪国鲜1，2，曹 桦1，2，单芹丽1，2，阮继伟1，2，吴丽芳1，2，蒋海玉3 ＊＊
(1．云南省农业科学院花卉研究所 /云南省花卉育种重点实验室 /国家观赏园艺工程技术研究中心，云南 昆明 650205;2． 玉溪云
星生物科技有限公司，云南 玉溪 653100;3．云南省农业科学院农业经济信息研究所，云南 昆明 650205)
摘 要:采用正交实验设计 L9(34)，以 MS培养基，分别加入不同质量浓度的 6-BA、NAA、ZT 和蔗糖进行辣木丛生芽增殖诱导;采
用正交实验设计 L9(34) ，以不同基本培养基，不同质量浓度的 IBA、NAA进行辣木组培苗不定根诱导。结果表明，MS +蔗糖 30 g /
L + 6-BA 1 mg /L + NAA 0． 2 mg /L +琼脂 7 g /L为辣木诱导丛生芽较佳的启动培养基，丛生芽诱导率可达 100 %;MS +蔗糖 30
g /L + ZT 0． 5 mg /L + 6-BA 0． 5 mg /L + NAA 0． 1 mg /L +琼脂 7 g /L，为辣木丛生芽增殖较佳的培养基，增殖系数为 6． 17;1 /2MS
+ IBA 0． 2 mg /L + NAA0． 1 mg /L，为辣木丛生芽生根较佳的培养基，不定根诱导率可达 100 %。
关键词:辣木;丛生芽;组织培养;正交实验;方差分析
中图分类号:S567． 19 文献标识码:A
Study on Tissue Culture and Ｒapid Propagation
Technique of Moringa oleifera Hance Meristem
YANG Chun-mei1，2，QU Yun-hui1* ，WANG Guo-xian1，2，CAO Hua1，2，
SHAN Qin-li1，2，ＲUAN Ji-wei1，2，WU Li-fang1，2，JIANG Hai-yu3 ＊＊
(1． Institute of Flower Ｒesearch，Yunnan Academy of Agricultural Sciences /Key Laboratory of Yunnan Flower Breeding /National Engineer-
ing Ｒesearch Center for Ornamental Horticulture，Yunnan Kunming 650205，China;2． Yuxi Yunxing Bological Science and Technology
Limited Company，Yunnan Yuxi 653100，China;3． Agricultural Economics and Information Ｒesearch Institute，Yunnan Academy of Agri-
cultural Sciences，Yunnan Kunming 650205，China)
Abstract:In order to establish rapid propagation technique for Moringa oleifera，the orthogonal experimental design L9(34)was used to as-
sess the effects of different basal mediums，varied concentrations of 6-BA，NAA and sucrose on induction of lateral buds using as explant at
initial culture stage to assess the effects of varied concentrations of 6-BA，NAA，ZT and sucrose，supplemented to MS medium，on shoot pro-
liferation rate;to assess the effect of different basal mediums，varyied concentrstions of IBA，NAA on shoot rooting． The results showed that
the medium composition of MS + 30 g / L sucrose + 1 mg / L 6-BA + 0． 2 mg / L NAA +7 mg / L agar was the optimum for induction of
lateral buds at initial culture stage;the medium composition of MS + 30 g / L sucrose + 0． 5 mg / L ZT + 0． 5 mg / L 6-BA mg / L + 0．
1 NAA +7 g / L agar was good for proliferation and proliferation rate was 6． 17;the medium compostion of 1 /2MS + 0． 2 mg /L IBA + 1． 5
mg / L NAA was good for shoot rooting．
Key words:Moringa oleifera ;Adventitious bud;Tissue culture;Orthogonal experiment design;ANOVA
辣木(Moringa oleifera Lam) ，又称鼓槌树，属辣
木科(Mofingaceae)、辣木属(Mornga )多年生乔
木［1］。辣木含有丰富的纤维、维生素、矿物质、蛋白
质、氨基酸、多糖、辣木素、皂苷、酚类和活性酶类等
成分，具有消炎、抑菌、降血糖、降胆固醇、凝血、抗氧
化、抗肿瘤和癌症等功能［2 ～ 4］，因此，辣木又被誉为
“神奇之树”。
古罗马时期世界上就有利用辣木的记载。现在
辣木广泛种植于亚洲、非洲和中美洲的 30 多个热
带、亚热带国家或地区［5］。中国台湾、海南、福建、
广东和云南等省已开始大面积引种辣木。种植辣木
的地区越来越多，传统的种子育苗不能满足市场需
8122
西 南 农 业 学 报
Southwest China Journal of Agricultural Sciences
2015 年 28 卷 5 期
Vol. 28 No. 5
表 1 辣木丛生芽诱导正交试验 L9(3
4)
Table 1 Orthogonal test L9(34)design layout of different adventitious buds induction of Moringa oleifera
水平
Level
A(基础培养基)
Medium
B(蔗糖) (g /L)
Sucrose
激素配比(mg /L)
Hormone combination
C(6-BA) D(NAA)
1 1 /2MS 20 0． 2 0． 2
2 MS 30 0． 5 0． 5
3 WPS 40 1． 0 1． 0
要，通过组织培养建立植株再生体系，是解决辣木种
苗供应的有效途径。本试验采用正交试验对辣木茎
段离体丛生芽诱导、增殖和生根进行研究，旨在建立
辣木组培快繁体系，为辣木资源更好地利用提供理
论参考。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
供试材料来自云南省农科院热带作物资源圃
(元谋)，引进的印度辣木(Moringa oleifera)种子。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 种子消毒及无菌苗的获得 选择饱满无皱
缩的辣木种子，去除纸质白翼，清水洗净，用 15 %
H2O浸泡 5 ～ 6 h 后，再用 0． 1 %升汞浸泡 15 ～ 20
min，无菌水冲洗 3 ～ 4 次，用干燥的无菌滤纸吸干
种子表面的水分后，将种子接种于 MS 培养基中，10
d后种子发芽，1 个月时取幼嫩无芽茎段为外植体进
行丛生芽诱导试验。
1． 2． 2 丛生芽诱导 将幼嫩无芽茎段接入以 MS +
7． 0 g /L 琼脂为基本培养基，附加 4 因素 3 水平 L9
(34)正交试验设计的不同植物生长调节剂培养基
中(表 1) ，诱导丛芽，培养 20 d，观察统计外植体丛
芽诱情况。
1． 2． 3 丛生芽增殖 将茎段诱导出的丛芽，继代培
养 20 d的试管苗叶片切下，切去叶柄和少量的叶尖
部分接入 MS + 7． 0 g /L琼脂培养基，附加 4 因素 3
水平 L9(3
4)正交试验设计的不同植物生长调节剂
表 2 辣木丛生芽增殖正交试验 L9(3
4)
Table 2 Orthogonal test L9(34)design layout of different adventi-
tious buds prohyeration of Moringa oleifera
水平
Level
A(蔗糖) (g /L)
Sucrose
激素配比(mg /L)
Hormone combination
B(ZT) C(NAA) D(6-BA)
1 20 0 0． 1 0． 2
2 30 0． 3 0． 3 0． 5
3 40 0． 5 0． 5 1
的培养基中(表 2) ，诱导丛芽分化和增殖，培养 25
d，观察统计丛生芽增殖情况。
1． 2． 4 壮苗及生根培养 诱导的植株生长细弱，本
研究在不添加任何生长调节剂的 MS 培养基进行中
培养 20 d后，选择生长健壮、大小基本一致的植株
接入 1 /2MS + 7． 0 g /L 琼脂，附加 3 因素 3 水平 L9
(33)正交试验设计的不同植物生长调节剂的培养
基中(表 3)，诱导丛芽生根，培养 25 d 后观察统计
生根情况。
实验于 2013 年 4 － 12 月在云南省农科院花卉
研究所组培中心九溪基地实验室进行。培养基 pH
值 5． 8 ～ 6． 0;温度:白天(27 ± 1)℃，夜晚(18 ± 1)
℃;湿度:65 % ～ 70 %;光强:3000 lx，光照时间:12
h /d，琼脂 0． 7 %。
2 结果与分析
2． 1 丛生芽诱导
由表 4 可知，4 种因子对印度辣木丛生芽诱导
产生效应的大小依次为 6-BA ＞基本培养基 ＞ 蔗糖
＞ NAA。在直观分析的基础上对丛生芽诱导率进
行方差分析表明，培养基种类、6-BA 和蔗糖各水平
对印度辣木丛生芽诱导影响均达到显著水平(P ＜
0． 05 )，而 NAA各水平对印度辣木丛生芽诱导的影
响则无显著差异。说明不同种类培养基、不同质量
浓度的 6-BA和蔗糖水平对印度辣木丛生芽诱导的
影响较大，NAA对影响较小。以上分析结合表 4 可
知:辣木丛生芽诱导最佳组合为 A2B2C3D1，即 MS +
表 3 辣木不定根诱导正交试验 L9(3
3)
Table 3 Orthogonal test L9(33)design layout of the adventitious
root induction of Moringa oleifera
水平
Level
激素配比(mg /L)
Hormone combination
A(IBA) B(NAA)
C(基本培养基)
Basic medium
1 0． 1 0． 1 1 /2MS
2 0． 2 0． 3 MS
3 0． 3 0． 5 WPS
91225 期 杨春梅等:辣木组织培养和快繁技术研究
表 4 辣木丛生芽诱导正交试验 L9(3
4)
Table 4 Orthogonal test L9(34)design layout of different adventitious buds induction of Moringa oleifera
培养基编号
Medium number
A(基础培养基)
Basic
medium
B(蔗糖)(g /L)
Sucrose
激素配比(mg /L)
Hormone combination
C(6-BA) D(NAA)
接种外植体数(个)
Inoculation
number of explants
诱导率(%)
Induction rate
1 1 /2MS 20 0． 2 0． 2 10 59． 2
2 1 /2MS 30 0． 5 0． 5 10 88． 5
3 1 /2MS 40 1． 0 1． 0 10 96． 8
4 MS 20 0． 5 1． 0 10 83． 4
5 MS 30 1． 0 0． 2 10 100
6 MS 40 0． 2 0． 5 10 67． 1
7 WPS 20 1． 0 0． 2 10 79． 9
8 WPS 30 0． 2 0． 5 10 63． 7
9 WPS 40 0． 5 1． 0 10 71． 3
k1 81． 500 74． 167 63． 333 76． 833
k2 83． 500 84． 067 81． 067 78． 500
k3 71． 633 78． 400 92． 233 81． 300
Ｒ 11． 87 9． 90 28． 90 4． 47
方差(F值) 0． 571* 0． 349* 3． 007* 0． 072
注:Ki 代表水平 i的平均值;* 表述差异达 0． 05 显著水平(F0． 05 = 4． 46) ，下同。
Notes:Ki meant the average of level i;* meant 0． 05 significant level(F0． 05 = 4． 46)． The same as below．
蔗糖 30 g /L + 6-BA 1 mg /L + NAA 0． 2 mg /L + 7
琼脂 g /L，丛生芽诱导率可达 100 %。
2． 2 丛生芽增殖
由表 5 可知，4 种因子对辣木丛生芽增殖诱导
产生效应的大小依次是 6-BA ＞蔗糖 ＞ NAA ＞ ZT。
在直观分析的基础上对辣木丛生芽增殖诱导率进行
方差分析，结果(表 5)表明，6-BA、蔗糖、NAA、ZT4
个因素对辣木丛生芽增殖诱导影响均达到显著水平
(P ＜ 0． 05 )，说明 6-BA、蔗糖、NAA、ZT4 个因素对
辣木丛生芽诱导丛生芽增殖都影响较大。辣木丛生
表 5 丛生芽增殖试验结果
Table 5 Ｒesults of cespitose bud multiplication
培养基编号
Medium numbers
A(蔗糖) (g /L)
Sucrose
激素配比(mg /L)
Hormone combination
B(ZT) C(NAA) D(6-BA)
接种外植体数(个)
Inoculation
number of
explants
增殖系数
Multiplication
coefficient
1 20 0 0． 1 0． 2 10 1． 22
2 20 0． 3 0． 3 0． 5 10 3． 75
3 20 0． 5 0． 5 1． 0 10 2． 54
4 30 0 0． 3 1． 0 10 2． 98
5 30 0． 3 0． 5 0． 2 10 5． 83
6 30 0． 5 0． 1 0． 5 10 6． 17
7 40 0 0． 5 0． 2 10 5． 24
8 40 0． 3 0． 1 0． 5 10 1． 69
9 40 0． 5 0． 3 1． 0 10 4． 33
k1 2． 503 3． 147 3． 027 3． 793
k2 4． 993 3． 757 3． 687 5． 053
k3 3． 753 4． 347 4． 537 2． 403
Ｒ 2． 490 1． 20 1． 510 2． 650
方差(F值) 1． 462* 0． 340* 0． 541* 1． 658*
0222 西 南 农 业 学 报 28 卷
表 6 辣木丛生芽生根诱导试验结果
Table 6 Ｒesult of adventitious root induction of Moringa oleifera
培养基编号
Medium
numbers
激素配比(mg /L)
Hormone combination
IBA NAA
基础培养基
Basic medium
接种外植体数
(个)Inoculation
number of
explants
不定根分化数量
(个)
Number of
adventitious root
不定根诱导率
(%)
Induction rate
of adventitious
root
1 0． 1 0． 1 1 /2MS 20 19． 32 96． 6
2 0． 1 0． 3 MS 20 18． 46 92． 3
3 0． 1 0． 5 WPS 20 14． 74 73． 7
4 0． 2 0． 1 MS 20 15． 84 79． 2
5 0． 2 0． 3 WPS 20 17． 14 85． 7
6 0． 2 0． 5 1 /2MS 20 20 100
7 0． 3 0． 1 WPS 20 14． 52 72． 6
8 0． 3 0． 3 1 /2MS 20 17． 96 89． 8
9 0． 3 0． 5 MS 20 12． 04 60． 2
k1 87． 533 82． 800 95． 467
k2 88． 300 89． 267 77． 233
k3 74． 200 77． 967 77． 333
Ｒ 14． 100 11． 300 18． 234
方差 F 1． 124* 0． 575* 1． 971*
芽增殖诱导最佳组合为 A2B3C1D2，即 MS +蔗糖 30
g /L + ZT 0． 5 mg /L + 6-BA 0． 5 mg /L + NAA 0． 1
mg /L +琼脂 7 g /L，增殖系数为 6． 17。
2． 3 丛生芽诱导生根
由表 6 可知，3 种因子对辣木丛生芽诱导生根
效应的大小依次是基本培养基 ＞ IBA ＞ NAA。在直
观分析的基础上对辣木丛生芽诱导生根进行方差分
析，结果表明，基本培养基、IBA 、NAA 各水平对辣
木丛生芽诱导生根的影响均达到显著水平(P ＜
0. 05)。说明基本培养基、不同质量浓度的 IBA 和
NAA对辣木丛生芽诱导生根都影响较大。辣木丛
生芽诱导生根的最佳组合为 A2B3C1，即 1 /2MS +
IBA0． 2 mg /L + NAA0． 5 mg /L，不定根诱导率可达
100 %。
3 讨 论
辣木的传统繁育方式:种子播种和枝条扦插，难
以满足种苗的需求。因此，辣木植物组织培养和快
速繁殖成为其种苗繁殖最有效的方法。到目前为
止，辣木植物组织培养和快速繁殖技术的研究报道
不多，只有 6 篇［6 ～ 11］。发表的文章都没采用正交试
验优化试验因子。本试验采用正交设计，研究不同
基本培养基，激素的种类、浓度及其配比对辣木组织
培养的影响，与传统单因子比较分析相比，能容纳更
多的因素和水平，大大减少了试验次数，提高准确
率［12］。本试验研究结果表明，辣木诱导丛生芽较佳
的启动培养基为 MS +蔗糖 30 g /L + 6-BA 1 mg /L
+ NAA 0． 2 mg /L +琼脂 7 g /L，丛生芽诱导率可达
100 %，与发表的 6 篇文章有差异［6 ～ 11］。辣木丛生
芽增殖较佳的培养基为 MS +蔗糖 30 g /L + ZT 0． 5
mg /L + 6-BA 0． 5 mg /L + NAA 0． 1 mg /L +琼脂 7
g /L，增殖系数为 6． 17，与发表的 6 篇文章有差
异［6 ～ 11］，但与罗云霞等［6］报道辣木丛生芽切割后在
MS +6-BA 0． 6 mg /L + NAA 0． 1 mg /L +蔗糖 30%
+琼脂 6 g /L继代增殖，与王洪峰等［9］报道辣木继
代培养培养基 MS +6-BA 0． 4 mg /L + NAA 0． 2 mg /
L +卡拉胶 5 g /L +糖 30g /L，与向素琼等［10］报道印
度辣木愈伤组织诱导与丛生芽分化培养基 MS + 6-
BA 0． 6 mg /L + NAA 0． 1 mg /L 差异较小。辣木丛
生芽诱导生根的适宜培养基为 1 /2MS + IBA 0． 2
mg /L + NAA 0． 1 mg /L，不定根诱导率可达 100 %，
与发表的 6 篇文章有差异［6 ～ 11］。
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(责任编辑 王家银)
2222 西 南 农 业 学 报 28 卷