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不同激素配比对辣木组培苗生长的影响



全 文 :J.SHANXI AGRIC.UNIV.(Natural Science Edition)
学报(自然科学版)2012,32(5) 002934
收稿日期:2012-08-04   修回日期:2012-08-22
作者简介:武新琴(1968-),女(汉),山西灵石人,讲师,研究方向:花卉、林木栽培,植物组织培养。
基金项目:山西林业职业技术学院科研资助基金(200903)
不同激素配比对辣木组培苗生长的影响
武新琴,智顺
(山西林业职业技术学院,山西 太原030009)
摘 要:以辣木嫩梢茎段为外植体,在25种不同激素配比的培养基上进行培养,探讨不同激素配比对辣木组培苗生长
的影响,并在6种不同生根培养基上进行生根试验。研究结果表明:在 MS+6-BA0.02~0.5mg·L-1+NAA0.02
mg·L-1+蔗糖3%的培养基上辣木组培苗生长良好,增殖倍数达5.6~8.1。在1/2MS+NAA0.2mg·L-1+蔗糖2%
的培养基上生根率最高达79%。用形态学上端朝上与朝下两种方式接种到生根培养基上均能在形态学下端生根。
关键词:辣木;激素;组培苗生长;形态学上端朝下
中图分类号:S644.9  文献标识码:A  文章编号:1671-8151(2012)05-0387-04
Effects of Different Growth Hormone Ratios on Tissue-cultured Plantlet Growth of Moringa oleifera
Wu Xinqin,Zhi Shun
(Shanxi Forestry Vocational Technical College,Taiyuan Shanxi 030009,China)
Abstract:Young stems of Moringa Oleifera were selected as explants,and were cultured on substrate using 25kinds of
ratios of growth hormone to study the effects of the hormone ratios on the tissue-cultured shoots growth of Moringa
Oleifera.Besides,rooting tests were done on six kinds of substrates.The results showed that the regenerated plant-
lets on the substrate of MS+6-BA 0.02~0.5mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1+3%sucrose developed best with 5.6
~8.1times of proliferation.The rooting rate on the substrate of 1/2MS+ NAA 0.2mg·L-1+2%sucrose reached
79%.Both morphological top up and top down seeding ways can lead to morphological rooting at the lower end.
Key words:Moringa Oleifera;Growth hormone;Tissue-cultured plantlet growth;Morphological top down
  辣木(Moringa oleifera Lam.)又称鼓槌树、
马萝卜、不死树、萝卜树等,属辣木科,原产于印度。
辣木叶片、果荚富含多种矿物质、维生素,作为蔬菜
和食品有增进营养、食疗保健功能,根据测定,辣木
干叶粉所含的钙质是牛奶的4倍,蛋白质是牛奶的
2倍,钾是香蕉的3倍,铁是菠菜的3倍,维生素C
是柑橘的7倍,维生素A(β胡萝卜素)是胡萝卜的
4倍。只要3汤匙的辣木叶粉,就含有幼儿每日所
需的270%维生素 A、42%的蛋白质、125%的钙、
70%的铁及22%的维生素C。它丰富的蛋白质、
维生素及氨基酸,不但对先进国家素食者有极大益
处,而且在对抗营养不良及提升免疫力方面也功效
显著[1,2]。我国广东、广西、台湾、云南、福建、厦门
均有栽培。
辣木种子比较昂贵,通过组织培养建立植株再
生体系,是解决辣木种苗供应的有效途径[3]。本研
究选择印度传统辣木嫩梢为外植体,应用25种激
素配比的培养基进行初代诱导试验,建立了辣木的
植株再生体系,总结了辣木组培快繁的培养方式,
为辣木幼苗组培快繁提供了有用的数据及技术支
持。此研究比其它辣木组培研究者的激素浓度及
配方均有扩大[3~6],总结了不同激素配比对辣木再
生体系的影响,并提出了不同的辣木组培方式。
1 材料与方法
1.1 试验时间、地点
  辣木组培研究试验于2009年8月开始在山西
林业职业技术学院组培实验室及温室中进行。
1.2 试验材料
利用传统辣木实生苗的嫩梢为外植体。实生
苗于5月在温室容器育苗,6月移栽至校园苗圃。
8月开始采摘嫩梢试验。
1.3 试验方法
剪取辣木实生苗约6cm长的嫩梢,摘除叶片,
剪成两段,上段放在一起,下段放在一起,分别用清
水清洗,用2%洗衣粉浸泡清洗约5min,再用自
来水冲洗干净后放入无菌操作台备用;在无菌操作
台上,将外植体分批灭菌,先用70%酒精震荡漂洗
30s,酒精灭菌后的外植体用无菌水冲洗2次后,
用0.1%升汞浸泡并震荡5min,用无菌水冲洗
4~5次[7,8],用无菌滤纸吸干剪切为1cm长带芽
茎段,接种。以 MS为基本培养基,琼脂0.6%,蔗
糖3%,pH 6.5,培养基中采用激素为5个浓度的
6-BA:0mg·L-1、0.02mg·L-1、0.2mg·L-1、
0.5mg·L-1、1.0mg·L-1与5个浓度的NAA:
0mg·L-1、0.02mg·L-1、0.2mg·L-1、0.5mg·
L-1、1.0mg·L-1,共25个处理。每个处理5瓶,
每瓶接入2个茎段,每个茎段均带一个侧芽。接种
时将上段与下段的芽分别接入同一处理的不同培
养瓶内,使每个处理的接种材料保持一致。
培养条件为每天光照13h,温度为25~30℃,
20天后调查茎段生长情况。计算10个茎段的芽
长度平均值为芽平均长度;增殖倍数=腋芽数/接
种数[9];每个处理中选取有代表性的茎段并量取茎
段一侧愈伤组织生长量为愈伤组织生长。
将继代培养形成的组培苗剪成单芽茎段转接
于生根培养基上,以1/2MS(大量元素减半)为基
本培养基,琼脂0.6%,蔗糖2%,PH 6.5,添加不
同浓度 NAA、6-BA及IBA形成6个处理。分别
为:1/2MS+6-BA0.5+NAA0.2;1/2MS+6-
BA0.02+NAA0.2;1/2MS+NAA0.2;1/2MS+
NAA0.5;1/2MS+ NAA0.2+IBA0.5;1/2MS+
NAA0.0。20天后调查茎段生根情况。
利用茎段形态学上端朝上或朝下两种不同方
式接种在生根培养基上,观察茎段生根情况,并通
过驯化移栽,观察成活情况。
2 结果与分析
2.1 不同激素配比对辣木茎段诱导的影响
  将初代及继代接种20天后的芽生长高度、茎
段增殖倍数及愈伤组织生长情况,调查汇总,结果
见表1。由图1可见,培养基中加入0.02mg·
L-1 NAA和0.02mg·L-16-BA比不加6-BA和
加0.2~1.0mg·L-16-BA的芽长度大,但加入
0.2mg·L-16-BA比加入0.02mg·L-16-BA的
芽长度减小,节间缩短,茎稍粗壮。加入0.5mg·
L-1和1.0mg·L-16-BA,芽长度更小,节间更短。
6-BA在0.02mg·L-1至1.0mg·L-1浓度范围
内,6-BA浓度越高,侧芽生长越明显。所以随植物
生长调节剂6-BA的添加在抑制组培苗高生长的
同时,却刺激了其腋芽的萌发,与对水曲柳组培苗
的影响效果相似[9]。
图1 6-BA与NAA不同配比对芽长度的影响
Fig.1 6-BA and NAA different ratio to the influence of
length of bud
从图2可以看出,培养基中加入6-BA0.5mg
·L-1 NAA和0~0.2mg·L-1 6-BA茎段增殖倍
数均比其它组合高,其中 MS+6-BA0.5mg·L-1
+ NAA 0.02mg·L-1茎段增殖倍数最高达8.1,
腋芽数多,茎健壮,节间长短适中,为最适宜的诱导
及增殖培养基。MS+6-BA 1.0mg·L-1+ NAA
0.2mg·L-1虽然茎段增殖倍数达7.9,但节间很
短不利于进行单芽茎段剪切。从图1和图2均可
看出,培养基中加0.02mg·L-1 NAA 比不含
NAA的培养基茎生长速度快,但随着 NAA含量
增加,茎生长速度受到抑制。
图2 6-BA与NAA不同配比对茎段增殖倍数的影响
Fig.2 6-BA and NAA different ratio of the influence of
proliferation
883 山 西 农 业 大 学 学 报(自然科学版) 2012
由表1可以看出,随着培养基中 6-BA 和
NAA含量增加,愈伤组织生长也增加。当培养基
中含6-BA 1.0mg·L-1,NAA 0.5mg·L-1时愈
伤组织生长最旺盛。
表1 不同培养基上芽生长结果
Table 1 The differentiation result of the different culture medium
序号
Number
6-BA/mg·L-1  NAA/mg·L-1
芽平均长度/cm
Average length of bud
茎段增殖倍数
Proliferation multiple
愈伤组织生长/mm
Calus growth
1  0  0  1.0j  2.0  0.2
2  0  0.02  2.4cd  3.4  1.5
3  0  0.2  2.0ef  3.3  1.2
4  0  0.5  0.8k 1.5  1.0
5  0  1.0  0.5lm  1.3  0.5
6  0.02  0  2.5bc  4.5  0.5
7  0.02  0.02  4.0a* 5.6  0.5
8  0.02  0.2  2.3d 3.8  2.0
9  0.02  0.5  0.8k 1.6  1.5
10  0.02  1.0  0.4mn  1.3  1.0
11  0.2  0  2.1e 5.6  1.8
12  0.2  0.02  2.6b* 6.2  2.5
13  0.2  0.2  1.9efg  4.5  3.2
14  0.2  0.5  0.6l 1.3  3.0
15  0.2  1.0  0.4mn  1.2  3.0
16  0.5  0  1.5h** 7.4  2.3
17  0.5  0.02  1.8fg** 8.1  1.8
18  0.5  0.2  1.8g** 7.8  2.0
19  0.5  0.5  0.3no  1.1  2.2
20  0.5  1.0  0.3nop  1.0  2.4
21  1.0  0  1.2i** 6.0  2.5
22  1.0  0.02  1.5h*** 7.8  2.8
23  1.0  0.2  1.8g*** 7.9  2.8
24  1.0  0.5  0.1p  1.0  4.0
25  1.0  1.0  0.2op  1.0  3.5
  注:芽平均长度数值后带“*”者表示有侧芽生长,带“**”者表示侧芽生长较多,带“***”者表示侧芽生长更多。
Note:*means growth of Lateral bud,**means many Lateral bud,***means more Lateral bud
2.2 不同激素配比对辣木茎段生根的影响
由表2可见,在1/2MS+0.2mg·L-1 NAA
培养基上生根率最高达79%,加入0.5mg·L-1
NAA时生根率降为75%,在0.2mg·L-1 NAA
基础上再加0.5 mg·L-1 IBA 时生根率降为
72%,加入生长素比对照生根率明显提高,但随着
生长素浓度的升高生根率反而下降。在1/2MS+
NAA 0.2mg·L-1的基础上再加0.02mg·L-1
6-BA,生根率明显降低,在1/2MS+ NAA 0.2mg
·L-1的基础上再加0.5mg·L-16-BA生根率为
0,可见加6-BA不利于生根。
98332(5) 武新琴等:不同激素配比对辣木组培苗生长的影响
表2 不同培养基对生根的影响
Table 2 Effect of the root in the different culture medium
序号
Number
培养基成分/mg·L-1
Ingredient of medium
接种数/个
Inoculative number of bud
生根数/个
Number of taking root
生根率/%
Inductivity of root
1  1/2MS+6-BA0.5+NAA0.2  25  0  0
2  1/2MS+6-BA0.02+NAA0.2  25  12  48
3  1/2MS+NAA0.2  24  19  79
4  1/2MS+NAA0.5  24  18  75
5  1/2MS+NAA0.2+IBA0.5  25  18  72
6  1/2MS+NAA0.0  23  12  52
2.3 不同接种方式对茎段生根及移栽成活的影响
将辣木带芽茎段以形态学上端朝上与朝下(倒
插)两种方式接种在1/2MS+NAA 0.2mg·L-1+
蔗糖2.0%培养基上,均可以在形态学下端生根,
生根率相近,形态学上端朝上比朝下接种根系生长
较快。但由于辣木根系较脆,形态学上端朝上在清
洗移栽时,根系容易受损[5],形态学上端朝下,根系
不沾琼脂,容易清洗,移栽成活率可提高10%。
3 结论与讨论
本研究结果表明,以辣木嫩茎为外植体,采用
无菌微型扦插法[10]诱导及增殖培养,在 MS+6-
BA0.02~0.5mg·L-1+NAA0.02mg·L-1+
蔗糖3%的培养基上辣木组培苗生长良好,增殖倍
数达5.6~8.1。其中 MS+6-BA 0.5mg·L-1+
NAA 0.02mg·L-1增殖倍数最高达8.1,为芽诱
导及增殖的最佳培养基。虽然 MS+6-BA 1.0mg
·L-1+NAA 0.2mg·L-1增殖倍数也可达7.9,
但茎节过短,不利于单芽剪切。培养基中加6-BA
不利于生根,加很少量也会使生根率降低。在1/2
MS+NAA0.2mg·L-1的培养基上生根率达到最
高。随生长素浓度增加生根率降低,与其他学者的
试验结果相似[4~6],利用低浓度NAA、IBA均可促
进生根,但高浓度生长素不利于生根。总之,辣木
茎和根的生长均喜欢较低浓度的生长调节物质。
辣木根系很脆,移栽清洗培养基时,根系容易
断裂,不利于移栽,在诱导生根阶段,采用形态学上
端朝下接种,仍在形态学下端生根,根部没有培养
基使清洗变得容易,有利于移栽成活。
参 考 文 献
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(编辑:马荣博)
093 山 西 农 业 大 学 学 报(自然科学版) 2012