全 文 ：分光光度法测定辣木多糖含量
张　涛 ,马海乐 ,钟慧慧
(江苏大学 生物与环境工程学院 , 江苏 镇江　212013)
摘　要:采用分光光度法 ,经苯酚-硫酸显色 ,于 490mm波长处对辣木中多糖的含量进行了测定。
该方法简便 、快速 、准确 ,灵敏度高 ,可作为辣木质量控制标准。
关键词:辣木;多糖;分光光度法;含量测定
中图分类号:O 657.3　文献标识码:B　文章编号:1007-7561(2004)01-32-02
　　辣木(Moringa oleifera)又称鼓槌树(Drumstick
tree),商业名称奇树(Miracle Tree),为辣木科辣木属
植物。起源于印度西北部的喜马拉雅山南麓 ,现在
非洲 、阿拉伯半岛 、东南亚 、太平洋地区 、加勒比诸岛
和南美洲都有种植。近几十年的研究发现 ,辣木有
许多有价值的营养特性 ,大有开发的意义。辣木除
了具备丰富的营养外 ,在印度及非洲还用作治疗糖
尿病 、高血压 、皮肤病 、免疫力低下 、贫血 、骨骼疾病 、
抗忧郁 、关节炎 、消化器官肿瘤等疾病的传统药材 。
辣木多糖为辣木中重要的有效成分之一 ,其化学组
成及结构的研究工作正在进行中。我们对辣木多糖
的含量进行了测定 ,结果表明 ,辣木干叶中含有比较
丰富的多糖成分。现将采用苯酚-硫酸分光光度法
对辣木中多糖含量进行测定的结果报告如下 。
1　材料和仪器
1.1　药材
辣木干叶:100℃烘干 ,粉碎 ,过 50目筛 。购自
海南英豪高科技农业有限公司 。
1.2　试剂和仪器
葡萄糖标准品(AR),105℃干燥至恒重;浓硫酸
(AR),98%;5%苯酚试剂:取苯酚 5g ,置 100mL 容量
瓶中 ,加蒸馏水至刻度 ,摇匀 ,避光 ,冷藏 。WFJ型可
见光分光光度计(尤尼柯(上海)仪器有限公司)。
2　方法与结果
2.1　多糖的提取与精制
称取辣木叶粉 15.00g 于索氏提取器中 ,依次以
石油醚(30℃～ 60℃)250mL 、乙醚 250mL ,分别提取
12h。残渣挥干溶剂后 ,连同纸包用水 500mL 浸提
24h ,滤液减压浓缩至100mL ,浓缩液用Sevage法(三
收稿日期:2003-06-20
作者简介:张涛(1979-), 男 ,山东莱芜人 ,硕士研究生.
氯甲烷∶正丁醇=4∶1的溶剂萃取)反复处理以除去
蛋白质 。用乙醇调含醇量至 80%, 80℃水浴加热
20min ,滤过 ,沉淀以无水乙醇 、丙酮反复抽洗多次 ,
50℃烘干即得辣木精制多糖。
2.2　标准曲线的制备
精密称取葡萄糖 0.1011g , 以蒸馏水定容至
100mL 容量瓶中 ,摇奖。精密吸取该溶液 10mL 于
100mL 容量瓶中 ,用蒸馏水定容 ,摇匀 ,得葡萄供试
液 ,浓度为101.1μg/mL。精密吸取上述葡萄糖溶液
0mL、0.3mL 、0.6mL 、0.9mL 、1.2mL 、1.5mL 、1.8mL 于
具塞试管中 ,分别中入 5%苯酚试剂 1.5mL ,浓硫酸
6.0mL , 混匀 , 放置 30min 后 , 再分别加蒸馏水至
12mL;以0mL 组为空白 ,于 490nm处测定吸收度。
以吸收度为纵座标 ,葡萄糖用量为横座标 ,绘制
标准曲线 ,如图 1。作回归处理得回归方程为 A=
0.2937x -0.0092 , R2 =0.9972。葡萄糖浓度在 0.
2639 ～ 15.1650μg/mL 范围内 ,与吸收度呈良好的线
性关系 。
图 1　葡萄糖—吸光度标准曲线
2.3　换算因素测定
准确称取精制辣木多糖 43.5mg ,用水溶解于
100mL 容量瓶中 ,用蒸馏水稀释至刻度 ,摇匀 。取其
20mL ,定容于100mL容量瓶作贮备液 。
精密吸取多糖贮备液 2mL ,按 2.2标准曲线项
下自加入“5%苯酚试剂 1.5mL”起 ,测定吸收度 ,从
质量控制 粮油食品科技 第 12卷 2004年 第 1期
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回归方程求出供试液中葡萄糖浓度 ,按下式计算换
算因素:f=W/CD ,其中W 为多糖重量(mg),C 为多
糖液中葡萄糖浓度 ,D为多糖的稀释因素 。测得 f=
3.7949。
2.4　样品测定
准确称取辣木干叶 1.0004g ,置索氏提取器中以
90%乙醇回流提取 6h ,药渣挥尽乙醇 ,连同滤纸置
于烧瓶中 ,加蒸馏水 250mL ,80℃水浴加热提取 1h ,
趁热过滤 ,残渣用 80℃热蒸馏水洗涤 3次 ,洗液与
滤液合并 ,冷却后移入 500mL 容量瓶 ,定容 。准确
吸取该溶液 5.0mL 于 100mL 容量瓶中 ,定容 ,作供
试液;精密吸取供试液2.0mL ,按 2.2标准曲线项下
自加入“苯酚试剂 1.5mL”起测定吸收度 ,按回归方
程求出供试液中葡萄糖含量 ,按下式计算多糖含量:
多糖含量(%)=C·D·fW×100 ,其中 C 为供试液的
葡萄糖浓度(mg/mL),D 为供试液的稀释因素 , f 为
换算因素 ,W为供试品重量(mg)。测定结果为辣木
中多糖含量为 15.36%。
2.5　稳定性试验
取供试液 ,每隔一定时间测定吸收度 ,结果在显
色 2h内吸收度值无变化 。
2.6　回收率测定
准确称取辣木样品 1.0g ,加入一定量辣木多
糖 ,按 2.3试液制备和含量测定操作 。计算回收率
为 99.24%。
3　讨论
3.1　本实验原理为多糖在浓硫酸的作用下水解生
成单糖 ,并迅速脱水成醛 ,然后与苯酚缩合生成有色
化合物 ,用分光光度法测定其含量。本法简单快速 ,
灵敏度高 ,显色稳定 ,重现性好。
3.2　本实验首先采用 90%乙醇处理样品 ,消除了
亲脂性杂质 、单糖 、低聚糖及甙类等成分的干扰 ,结
果可靠 。
3.3　植物多糖作为免疫增强剂已引起人们的广泛
关注 ,临床用于糖尿病和肿瘤病人的治疗已取得较
好疗效 。辣木多糖可否作为免疫增强药物应作进一
步深入研究 。
3.4　本研究结果在评价辣木内在质量及资源开发
利用方面具有一定价值 。
参考文献:略 。　完
(上接第 31页)
酸少量多次转入 10mL 聚四氟乙烯容量瓶中并定容
至刻度。
1.5　标准曲线绘制
将标准工作液(0.00 、2.00 、4.00 、6.00 、8.00 、
10.00μg/mL)依次导入火焰进行吸光度测定 ,绘制出
标准曲线 ,结果表明 ,标准曲线线性良好 ,相关系数
r=0.9992。
2　结果与分析
2.1　测定结果
表1为对动物性食品中铅污染状况的测定 。
表 1　动物性食品中铅的含量(mg/ kg 干重)
样品
名称
样品
数量
铅
含量
样品
名称
样品
数量
铅
含量
猪心 6 0.5193 猪肉 21 0.9098
猪肝 25 1.2467 猪肾 8 1.2629
羊肝 30 0.7185 羊肉 9 0.3163
牛肉 9 0.8118 牛肝 14 0.8976鸡肉 20 1.2190 鸡肝 26 1.4593
鸡蛋 13 0.4725 鸭蛋 10 0.1399
鲢鱼 8 0.5287 鲫鱼 7 0.7129
带鱼 11 1.4762 鲤鱼 6 0.5547
罗氏虾 7 0.5031 海虾 26 0.6141
2.2　污染状况
通过对凤阳地区市场销售的主要动物性食品中
的铅含量测定表明(表 1),该地区出售的动物性食
品都有程度不等的铅蓄积 ,超过了国家食品卫生规
定的肉类≤0.1mg/Kg ,鱼类≤0.1mg/Kg ,蛋类≤0.05
mg/Kg标准〔4〕 。在测定的动物性食品中以带鱼含铅
量最高 ,达到 1.4762mg/Kg ,其次是肝 、肾 ,平均为 0.
9542mg/Kg ,余下依次为肉类平均为 0.8363mg/Kg ,
淡水鱼类为 0.5988mg/Kg ,虾类为 0.5586mg/Kg ,蛋
类为0.3062mg/Kg 。
2.3　污染程度
凤阳地区市售的 18种动物性食品铅污染程度
各有差异。鱼类中:带鱼>鲫鱼>鲤鱼>鲢鱼;肉类
中:鸡肉>猪肉>牛肉>羊肉;内脏:鸡肝>猪肾>
猪肝>牛肝>羊肝>猪心;虾类:海虾>罗氏虾;蛋
类:鸡蛋>鸭蛋。造成上述铅污染程度差异的原因 ,
一方面可能与动物的生活环境和饲料中铅污染状况
有关 ,另一方面也与不同动物 、不同组织器官对铅的
蓄积能力差异有关 。
参考文献:
[ 1]郭笃发.环境中铅和镉的来源及其对人和动物的危害[ J] .环境科
学进展 , 1994 ,2(30):71-76.
[ 2] 王化杰,王兰.铅对生殖系统的作用[ J] .劳动医学 ,1986,3(2):51-55.
[ 3] 匡少平 , 徐仲.农村土壤环境激素污染与防治[ J] .环境工程 ,
2002 ,20(增刊).
[ 4]中国预防科学院标准处.卫生食品国家标准汇编[M] .北京:中国
标准出版社 , 1987.　完
粮油食品科技 第 12 卷 2004 年 第 1 期 质量控制
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