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辣木组培育苗技术研究总结
黎国运 ,李大周 ,徐佩玲 ,陈培 ,陈显臻
摘要:以当年生辣木实生苗顶芽 、幼嫩侧芽为繁殖材料 ,在培养基改良 MS+BA0.5-2.0+NAA0.05-0.3+蔗糖
20g/L+卡拉胶 9g/L上诱导获得丛芽 ,在培养基改良 MS+BA0.3-1.0+NAA0.1-0.2+蔗糖 20g/L+卡胶 9g/L上继
代增殖 ,增殖倍数 3.0以上 ,生根诱导在 1/3改良MS+NAA0.2-0.5+IBA0.2-0.5+蔗糖 10-20g/L+卡拉胶 10g/L
的培养基上获得健壮的生根苗 ,生根诱导率 90%以上 ,移栽苗圃获得成功 。
关键词:辣木;组培技术
中图分类号:S603.6 文献标识码:B
外殖体类型 外殖体数量 光照强度 褐变率%
茎段 100 1000～ 1500Lux 88
茎段 100 全暗培养 41
顶芽 100 100～ 1500Lux 95
顶牙 100 全暗培养 5
辣木 (Moringa oleifera)是辣木科辣木属乔木树
种 , 俗名叫洋椿树 , 商品名叫奇树 , 是极富营养价值
的食物 , 在塞内加尔和海地的人们常用其叶干粉治
疗小孩 、孕妇与哺乳妇女的营养不良 , 故有“母亲之
友” 之称 。辣木属有 13个种 , 我国目前仅引种一个
种 , 是目前栽培比较普遍食用较多的印度传统品种
(Moringa oleifera), 其全身都是宝 ,营养丰富 , 可供食
用 、医疗制药和工业应用等。辣木有“生命之种”之
称 ,其根 、茎 、叶 、花 、果 、种子 、树皮等均可供药用 ,是
高蛋白质 、高钙 、高钾 、高镁 、高纤维 、高维生素 、低脂
肪 、低胆固醇 ,是增加体力 、减肥健身 、降血压 、控制
糖尿病 、克服失眠 、治疗贫血 、抑制病菌的优质保健
食品。正由于它如此神奇功效及潜在的市场前景 ,
种植的人越来越多 , 传统的种子育苗不能满足市场
需要 ,本研究采用辣木的成年芽器官 ,不经过愈伤组
织获得大量丛生芽 , 壮苗生根 , 大田移栽获得成功 ,
减缓了种苗市场的压力 。至目前为止 , 辣木组培育
苗国内外尚未见报导。
1 材料与方法
1.1 材料
以当年生辣木实生苗顶芽 、 幼嫩侧枝为繁殖材
料。
1.2 方法
1.2.1 外殖体消毒
将采回的枝条剪去叶片 ,用自来水冲洗干净 ,在
超净工作台上用 75%乙醇擦拭表面 , 0.1%升汞溶
液消毒 12 ～ 15min , 用无菌水冲洗 5次 , 截取带 1～ 2
个腋芽茎段接种于诱导培养基上 。
1.2.2 培养基
诱导腋芽萌动培养基:改良 MS+BA0.5-2.0+
NAA0.05-0.3+蔗糖 20g/L+卡拉胶 9g/L pH5.8
丛芽诱导及继代增殖培养基:改良 MS+
BA0.5-2.0+NAA0.05-0.3+蔗糖 20g/L+卡拉胶
9g/L pH5.8
生根诱导培养基:1/3改良 MS+NAA0.2-0.5
+IBA0.2-0.5+蔗糖 10-20g/L+卡拉胶 10g/L
pH5.8
1.2.3 培养条件
培养室温度 25℃±5℃, 自然散射光培养 , 阴雨
天加白炽灯照明 。
2 研究结果
用当年生辣木实生苗侧枝的幼嫩茎段诱导腋牙
培养 , 在半年时间内经过 6 ～ 8代的丛生芽诱导及继
代增殖培养 ,不经过愈伤组织获得大量丛生芽 ,增殖
倍数 3.0以上 。再经过半年时间的壮杆与生根诱导
培养 , 获得生根苗一批 , 生根诱导率 90%, 移栽成活
率达 80%以上 。
2.1 初代培养外殖体防止褐变的研究
木本植物茎段接种后 ,易发生褐变死亡 ,对初代
丛芽诱导很不利 。通过暗培养很好地解决了这个问
题 ,对比试验结果如下:
不同光照条件对外殖体褐变的影响
上表是接种 15d后观察的结果 , 可见 , 采取全部培养
可以基本解决辣木外殖体氧化褐变的现象。外殖体在培养
基中全暗培养15d后 ,转入光培养 ,以促进腋芽萌动生长。
2.2 丛芽诱导及其继代增殖的研究
2.2.1 培养基配方的研究 培养过程发现 , 外殖体
林业科技
TROPICAL FORESTRY VOL.34 NO.1 Mar.2006
激素浓度 愈伤组织生长情况 丛芽生长情况 丛芽繁殖系数
BA0.2+NAA0.05 基中肿大 ,愈伤化不明显+ 芽伸长明显 ,丛芽不明显++ 1.　20
BA0.5+NA0.1 基部肿大 ,愈伤化不明显+ 芽伸长明显 ,丛芽明显+ 5.　50
BA0.5+NAA0.2 基部肿大 ,愈伤化不明显+ 芽伸长明显 ,丛芽不明显++ 2.　00
BA1.0+NAA0.2 基部肿大 ,愈伤明显++ 芽伸长不明显 ,丛芽明显 + 3.　00
BA1.0+NAA0.5 基部肿大 ,愈伤明显++ 芽伸长不明显 ,丛芽明显++ 2.　00
BA1.5+NAA0.5 基部肿大 ,愈伤化严重+++ 芽明显不伸长 ,丛芽明显+++ 3.　50
BA2.0+NAA0.5 基部肿大 ,愈伤化严重++++芽不伸长 ,丛芽不明显++++ 1.　90
温度 光源 光照响度(Lux) 每瓶有效芽数 生长情况
20℃ 日光灯 1000～ 1500 5 极易生长玻璃化苗 ++++
自然散射光 3000～ 7000 14 丛芽生长正常 ,不易产生玻璃苗+
26 ～ 28℃ 日光灯 1000～ 1500 10 易产生玻璃化苗++
自然散射光 3000～ 7000 27 丛芽生长正常 ,叶片舒展无玻璃苗
28 ～ 33℃ 日光灯 1000～ 1500 8 形成大量淡绿色肉质玻璃苗++++
自然散射光 3000～ 7000 23 无玻璃苗 ,芽生长正常
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培养基中无机盐浓度 生长素类型 生根率(%) 生长情况
改良MS全量无机盐 NAA+IBA 15～ 20 切口易形成愈伤组织 ,根系呈放射线状
改良MS1 2无机盐 NAA+IBA 33～ 40 根细小 ,无侧根
改良MS1 3无机盐 NAA+IBA 80～ 90 根正常 ,有健壮侧根3 ～ 5条
改良MS1 3无机盐 IBA 60～ 75 易形成愈伤组织后生根 ,移栽不易成活
改良MS1 3无机盐 NAA 75～ 85 根系正常 ,有健壮侧根 2～ 3条
培养天数 10 13 15 18 20 25 30
生根率 % 室内弱光 30 36 50 70 80 80 80
室外散射光 30 38 50 75 85 90 90
基部极易产生愈伤组织 , 影响芽苗的生长。通过大量不
同激素配比的试验 ,以求找到最佳配方 ,其结果如下:
不同激素浓度对丛芽诱导的影响
上表是连续培养 3代观察的结果 , 每个水平接
种 10瓶。结果显示 BA0.5+NAA0.1或 BA1.0+
NAA0.2的激素配比浓度较适合辣木的丛芽诱导及
继代增殖培养。
2.2.2 培养条件的研究 初代诱导获得丛生芽
后 , 每月可以继代一次 , 当繁殖到一定的量后 , 即可
壮苗生根。实验证明:丛芽的继代增殖培养 ,自然散
光比日光灯好;一年四季培养 ,又受冬春低温和夏秋
高温的影响 。结果见下表:
不同温度和光照强度对有效芽分化的影响
从上表可以看出 , 自然散射光比日光灯的有效
苗数增加一倍以上 , 且芽苗正常 , 生长健壮 , 少有玻
璃苗;温度以 26～ 28℃最好 , 室温高达 33℃也影响
不大 ,室温 20℃以下 ,则有效芽大量减少 。
2.3 生根诱导的研究
2.3.1 无机盐浓度等对试管苗生根的影响
试验表明 , 培养基中无机盐浓度高低对生根率
影响最大 ,其次是生长素种类和培养条件 。(详见以
下二表)
无机盐浓度与生长素种类对试管苗生根的影响
从上表可以看出:1/3改良 MS+NAA+IBA组
合诱导生根效果最好 。高无机盐对生根不利 , 且易
形成愈伤组织 , NAA与 IBA组合使用比单独使用任
何一种效果都好 。
不同培养条件对生根率的影响
一般地 , 生根接种完成后 , 先在室内弱光条件
下培养 15d左右 ,生根率达到 50%以上时 ,才搬到室
外在自然散射光下培养 ,同时炼苗。10～ 15d后生根
率达 90%以上 , 小苗根系良好 , 叶片舒展 , 叶色浓
绿 ,茎杆伸长 ,半木质化 ,即可移栽 。
2.4 生根苗炼苗移栽技术的研究
2.4.1 生根瓶苗在 75%的遮荫网上炼苗 10～ 15d ,
小苗根系良好 、叶片舒 、叶色浓绿 、茎杆伸长 、半木
质化 ,即进行移栽 。
2.4.2 洗净瓶苗 , 500倍多菌灵浓液浸泡 2min , 移
栽于 0.3%高锰酸钾消毒了的红心土+河沙(4:1)的
基质上 , 800倍多菌灵溶液叫定根水 。
2.4.3 薄膜+90%遮荫网覆盖 ,每天喷雾保湿降温
管理 2～ 5次 , 7 ～ 10d后 , 500倍多菌灵溶液喷雾消
毒一次 , 然后逐步撤去薄膜 、遮荫网 , 15～ 20d左右 ,
小苗基本成活 , 可以全自然条件下管理 , 60d后即可
移栽大田 ,成活率达 80%以上 。
3 结果讨论
3.1 本研究采用芽器官离体培养快速繁殖 , 其优
点是繁殖速度快 、繁殖系数高 、遗传性状稳定 、增产
效益大。原因:芽器官不经过脱分化过程 ,避免了脱
分化诱导愈伤组织引起的染色体变异;腋芽茎尖的
细胞常是均一的二倍体细胞 , 不易受培养条件的影
响而发生变异 ,较好地保持母体性状。
3.2 本研究解决了两个技术关键:在适当激素的
作用下使潜伏芽萌动成为无菌芽 , 同时分化有效苗
的频率高 。而褐化和玻璃苗是影响木本植物快速繁
殖的最大障碍 , 本研究过程中设计的暗培养及不同
浓度的激素配比使用 ,很好的解决了这两个问题 。
3.3 无机盐浓度对试管苗生根的影响研究表明:
木本植物试管苗的生根不同于一般草本植物 , 高盐
对生根不利。瓶内生根较耗时耗力 ,成本较高 ,瓶外
生根 ,简化组培育苗程序 ,在桉树育苗生产中已普遍
应用 ,值得在本项目中作进一步的研究 。
参考文献
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养 ,中国林业出版社 。
[ 2]陈正华主编 .木本植物组织培养及其应用 .高等教育版
社出版 , 1986:P45 ,P197 ～ 198 , P34 ～ 38。
[ 3]王怀智 .,植物造林与组织培养 .林业科学 , 1983年 。
[ 4]中国植物学会编 .木本植物组织培养法 .P41～ 48。
林业科技
2006年 3月 第 34卷 第 1期热带林业