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辣木组织培养试验研究



全 文 :江西林业科技 2008年第2期
收稿日期:2007-04-19
作者简介:罗云霞,女,硕士,主要从事经济林培育方面的研究。
通讯作者:陆斌,男,研究员,主要从事经济林培育方面的研究。
辣木组织培养试验研究
罗云霞 1,陆 斌 2,石卓功 1
(1.西南林学院,云南 昆明650224;2.云南省林业科学研究院,云南 昆明650204)
摘 要:辣木种子消毒后,剥壳后接种在MS培养基上,10天能萌发,种子萌发率达79%。适合辣木种子的消毒方
法是:双氧水浸种6~8h,清水洗净,0.1%升汞消毒25~40min;室温下,发芽种子的茎段在 MS+6-BA0.1mg/L+KT
0.5mg/L+蔗糖 30%+琼脂 6g/L的培养基上诱导产生不定芽,繁殖系数在 6倍以上;不定芽切割后在 MS+6-BA0.6mg/
L+NAA0.1mg/L+蔗糖 30%+琼脂 6g/L继代增殖,增殖倍数可达 5.8倍;生根诱导在 1/2MS+IBA0.05~0.5+蔗糖 15%+
琼脂6g/L培养基上均能获得健壮的生根苗,生根率达80%以上,IBA0.1mg/L时,达 98%;移栽苗圃成活率可达 80%。
辣木各阶段最佳的PH值范围是5.8~6.2。
关键词:辣木;组织培养;丛生芽;炼苗移栽
分类号:Q813.12 文献标识码:A 文章编号:1006-2505(2008)02-0020-07
辣木 (MoringaOleiferaLam),又称鼓槌树(Drumstick
tree),为辣木科(Moringaceae)、辣木属(MoringaAdans)植物,
多年生速生乔木树种。辣木的原始栖息地在印度西北部的喜
马拉雅山南麓,现广泛种植于亚洲、非洲和中美洲的 30多个
热带、亚热带国家和地区[1]。辣木种子圆形、褐色,其上有3个
纸质白翼,剥开外壳可看到乳白色的种仁。辣木用途广,经济
价值高,是一种多功能的经济树种。其叶、果荚、种仁含有丰
富的维生素、纤维、蛋白质、矿物质、钙、镁、磷、钾等许多人体
所必须的元素。在印度,辣木的叶、花、果荚均是很普遍的蔬
菜。辣木叶子中所含的糖苷类化合物具有降低血压的功能。
叶子晒干后磨成粉可当牛奶冲喝,1天 3汤匙,可以提供一个
儿童每天所需的营养物质。果荚可作驱虫剂,也可治疗肝、脾
疾病和关节炎。树根、树皮、树脂都可用于治疗某些疾病。在
亚非拉美洲的传统医学中,辣木早已被广泛地利用着。
辣木被西方科学界形容为“植物界的超人”、“奇迹之
树”,日本人称它为“不可思议之树”,在非洲东部还被称为
“母亲最好的朋友”,被世界联合国粮农组织列为推广项目之
一[1],由于辣木神奇的功效和潜在的市场价值,种植辣木的地
区越来越多,传统的种子育苗不能满足市场需要[2]。近几年,
我国台湾省、海南省和云南省已开始大面积引种辣木。良种
是引进发展辣木的重要基础,开展辣木离体培养可以解决引
种初期面临的种苗缺乏问题,为进一步推广辣木提供优质的
种质资源。在辣木的原产地,由于辣木资源丰富,主要采用常
规的种子繁殖和扦插繁殖,也有少数进行芽接的。在组织培
养方面,国内仅有一篇关于此方面的报道[2]。但利用辣木种子
产生丛生芽的微繁殖,至今国内外尚未见报道。辣木种子适
宜随采随播,发芽率随储存时间的延长而降低[3],利用种子进
行快速繁殖,不仅有利于辣木种质资源的离体保存,而且保持
了种子的变异性,有利于品种改良[4],为选择提供更多的材
料。由于辣木生长迅速,在适宜的培养基条件下更是如此,在
短期内可以得到大量整齐均匀的健壮种苗,因此辣木离体繁
殖具有广阔的发展前景,使实现种苗商品化生产成为可能。
据此,本研究探讨了辣木种子的消毒方法,不定芽诱导、增殖
和生根培养基中不同浓度的植物生长调节剂配方,以期筛选
出最佳的培养基配方和培养基程序,为辣木的快速繁殖提供
参考。
1材料和方法
1.1材料
从印度引进的优良的辣木种子。
1.2方法
1.2.1初代培养
1)辣木种子的预处理:选择饱满无皱缩的辣木种子,去掉
纸质白翼,清水轻轻洗干净后,双氧水(15%)浸泡6~8h。
2)消毒剂的选择:比较不同消毒剂(0.1%升汞 30min、
0.2%升汞 20min、漂白粉 20min、75%酒精 0.5min+0.1%升汞
25min、高锰酸钾 25min)的消毒效果,统计其结果,找出最适
宜的消毒剂。
3)最适消毒时间的探索:找到最适的消毒剂后,比较不同
消毒时间(15,25,40,60,80min)的消毒效果,探索种子较理
想的消毒时间范围。
4)消毒完成后置于无菌操作台上,无菌水冲洗 4~5次,
每次5mim,用干燥的无菌滤纸吸干种子表面的水分后待用[5]。
辣木种子发芽培养基采用MS+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
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DOI:10.16259/j.cnki.36-1342/s.2008.02.012
1.2.2不定芽或腋芽的诱导。将辣木发芽得到的无菌苗剪成两
段,接种在诱导培养基中(同一颗苗的两段接种在同一个培
养瓶中),诱导不定芽或腋芽的产生。
1.2.2.1植物生长调节剂对辣木茎段诱导的影响。将 6-BA
(0.2,0.5,0.8);NAA(0.2,0.5,0.8);KT(0.2,0.5,0.8)分别用于诱
导辣木不定芽的发生,以筛选适宜的种类与浓度。试验测定
指数为芽平均繁殖系数和平均芽长。15天后统计平均繁殖系
数(诱导后的芽数/诱导前的芽数)及平均芽长。
1.2.2.2植物生长调节剂配比对辣木茎段诱导的影响。辣木茎
段诱导除了做以上处理外,为了探索不同种类生长调节剂及
其浓度配比对辣木茎段诱导的影响,根据预处理试验和相关
资料[2],设计以下处理(见表1)。
表1 不同种类生长调节剂及其浓度配比
1.2.3继代增殖。诱导的不定芽数量少,不能满足大量繁殖的
需要,将诱导的单芽或丛生芽转接到继代培养基上,根据芽
的增殖情况来筛选适合辣木继代增殖的最适培养基。
本试验MS为基本培养基,添加琼脂6g/L,蔗糖30g/L,以细
胞分裂素 6-BA和生长素 NAA作供试因子,设置 6-BA
(0.3,0.6,0.9,1.2mg/L)4个水平,NAA(0.01,0.05,0.10,0.50mg/L)4
个水平,共组成16个处理。研究两者配合使用的综合效应。
1.2.4生根培养基。将增殖形成的 1~2cm[6]左右的健壮小苗接
种到生根培养基上,以 1/2MS为基本培养基,附加生长调节
剂 NAA(0.05,0.1,0.2,0.5mg/L),IBA(0.05,0.1,0.2,0.5mg/L)
和空白对照,15天后观察根的生长情况,统计平均生根率,平
均根数和平均根长。
1.2.5炼苗移栽。材料:瓶内带根健壮的辣木苗;炼苗:将瓶苗
置于露天下放 1周,打开瓶盖放 1周,取出试管苗,在自来水
下冲洗干净根部的琼脂,浸入 1000倍的多菌灵消毒 20s,取
出用湿毛巾包裹滤掉水分,移栽到不同基质中(见表 2),移栽
前,所有基质经过消毒 ,常规管理,30天后统计其成活率和
生长情况。
表2 移栽基质及其成分
1.3培养条件
均为培养室的自然光照和室温,培养基均为 MS,附加
蔗糖 30g/L(生根培养基 1/2MS,蔗糖 15g/L),琼脂 6g/L,
调节 pH值 5.8,设 3次重复,且每个处理中材料数均为 30
个以上。
2结果与分析
2.1初代培养
2.1.1不同的消毒剂对辣木种子消毒的影响。由表 3可知:5
种消毒方法均能达到一定的消毒效果,使用漂白粉和高锰酸
钾时,污染较严重,污染率分别高达 53.3%和 38.9%。污染情
况都是在种子周围出现一层白色不透明的物质,据观察是来
自于种子内部的一种分泌物。升汞消毒的污染较轻,但同时
考虑到发芽率,只有 0.1%升汞消毒的发芽率较理想,达
79.4%。用0.2%升汞和75%酒精+0.1%升汞消毒,污染率虽低
但死亡率太高,达50%。综合考虑各种指标,辣木种子消毒的
适宜消毒剂是0.1%升汞。
表3 不同消毒方法的消毒效果
2.1.2消毒时间的探索。找出种子最适宜的消毒剂后,比较
0.1%升汞(15,25,40,60,80min)的消毒效果,探索种子的极
限消毒时间,15天后统计结果(见表4)。
表4 不同消毒时间的消毒效果
由表 4可知:随着消毒时间的延长,污染率逐渐降低,死
亡率不断增加,80min时已杀死一半以上的种子,发芽率仅
36.5%;25min和 40min时消毒效果较理想,死亡率分别为
5.3%和13.9%,发芽率分别为78.9%和70.3%。故选择0.1%升
汞消毒 25min,消毒效果最理想。可以看出,从 25~40min,随
着时间的延长,污染率稍降低,但死亡率不断提高,且比污染
降低的幅度大,降低了辣木的发芽率。综合考虑各种指标,辣
木种子适宜的消毒时间范围是25~40min。
2.2不定芽诱导
选取健壮无污染的辣木苗,剪成两段,用于诱导不定芽或
腋芽发生。
2.2.1植物生长调节剂对辣木(茎段)诱导分化。通过观察发
现,上段茎尖诱导产生腋芽,5天后腋芽开始萌动;下段带种
子的茎段,3天后开始膨大,长出少量愈伤组织,10天后就长
出大量不定芽,有单芽也有丛生芽。统计20天后的诱导情况
并作分析(图1、2)。
序号 生长调节剂用及其浓度配比
1 MS+NAA0.05+6-BA0.1+KT0.5
2 MS+NAA0.2+6-BA0.2+KT1.5
3 MS+6-BA0.1+KT0.5
4 MS+NAA1.0+6-BA0.5+KT5.0
5 MS+NAA0.5+6-BA1.0+KT5.0
编号 1 2 3 4
基质 红壤 土∶砂=1∶1 土∶砂=1∶3 混合基质
消毒方法 消毒时间/min 平均污染率/% 平均发芽率/% 平均死亡率/%
0.1%升汞 30 11.8 79.4 8.8
0.2%升汞 20 11.4 57.1 31.5
漂白粉 20 53.3 36.7 10.0
75%酒精 +0.1%升汞 0.5+25 9.4 40.6 50.0
高锰酸钾 25 38.9 41.7 19.4
处理时间
(0.1%升汞)
指标/%
平均污染率 平均无菌率 平均死亡率 平均发芽率
15min 43.5 56.5 5.0 51.5
25min 16.4 83.6 5.3 78.9
40min 15.8 84.2 13.9 70.3
60min 15.4 84.6 25.7 58.9
80min 12.5 87.5 51.0 36.5
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由表5可知,辣木茎段在以上 5种培养基中,3天后,基
部肿大,产生少许愈伤组织。20天后可以观察到,不同配比的
5种培养基均能诱导不定芽的产生,不同处理的茎段开始出
愈时间差异不大,3号处理,出愈最早,增殖倍数最高,达 6
倍,处理 1、5效果较明显,都达到平均 3.5倍以上,而处理 2、
4都不足3倍。茎段丛生芽的诱导与 6-BA和 KT密切相关,
KT浓度过高,对辣木增殖不利。同时低浓度的6-BA和NAA
配合适当浓度的 KT对茎段的诱导起着较好的作用,但是试
验结果表明,不添加NAA,MS+6-BA0.1+KT0.5时效果更好。
2.36-BA和NAA配合对辣木继代增殖的影响
许多研究证明[7-12],各种激素在发挥作用时并不是孤立的,
各种激素之间,外源激素与内源激素之间的比例,形成了对植
物生理活动的调控。嫩茎的形成与增殖不仅取决于激素的浓
度,还取决于激素之间的相对比例。因此,在微体繁殖中,探讨
各个阶段最佳的激素配比是十分重要的。
本试验以6-BA和生长素 NAA作供试因子,分置 4个水
平,共组成 16个处理,重复 4次,统计 20天后平均增殖倍数
及平均芽长并进行方差分析,结果见表6。
表6 6-BA-NAA配比对辣木增殖系数和嫩茎长
对表6增殖倍数数据进行方差分析,结果见表7。
纵坐标为芽增殖系数,横坐标为生长调节剂浓度(mg/L)
图1不同处理对芽增殖系数的影响
由图1看出,随着6-BA浓度的提高,其平均繁殖系数也
逐渐提高,到0.8mg/L时达到最高5.44倍;随NAA浓度的提
高繁殖系数却逐渐降低,最高时也不足3倍;KT随着浓度的
提高芽增殖系数也逐渐降低。说明:6-BA对诱导辣木不定
芽的效果比较好,浓度为0.5mg/L,0.8mg/L时的增殖系数都高
于其它两种生长调节剂的诱导效果,0.8mg/L时的诱导效果最
好。NAA和KT诱导的效果相对差些。
纵坐标为平均芽长,横坐标为生长调节剂浓度(mg/L)
图2不同处理对苗平均伸长量的影响
由图 2看出,6-BA和 NAA诱导出不定芽的平均长度与
对芽增殖系数的影响正好相反。当6-BA浓度升高时,诱导出
的平均长度却呈下降趋势;当 NAA浓度升高时,芽的平均长
度呈上升趋势;随 KT浓度升高,芽平均长度呈上升——下降
的倒 V字型。6-BA对芽长的诱导效果与增殖系数正好相反
说明它更有助于腋芽由顶端优势的抑制下解放出来,更有利
于芽的增殖。
2.2.2生长调节剂配比对辣木诱导不定芽的影响
表5 诱导及分化培养基
处理 调节剂配比 愈伤组织情况 丛芽生长情况 平均增殖倍数
1 MS+NAA0.05+6-BA0.1+KT0.5 基部肿大+,愈伤组织明显+ 芽伸长明显++,丛芽不明显 4
2 MS+NAA0.2+6-BA0.2+KT1.5 基部肿大+,愈伤组织明显更硬++ 芽伸长明显,丛芽不明显+ 3.0
3 MS+6-BA0.1+KT0.5 基部肿大+,愈伤组织明显县疏松+ 芽伸长不明显,丛芽不明显++ 6.0
4 MS+NAA1.0+6-BA0.5+KT5.0 基部肿大+,愈伤组织明显+ 芽伸长不明显,丛芽不明显 2.7
5 MS+NAA0.5+6-BA1.0+KT5.0 基部肿大+,愈伤组织明显+ 芽伸长不明显,丛芽不明显 3.5
处理号 6-BA/mg/L NAA/mg/L 增值倍数 嫩茎长度/cm 6-BA/NA值
1 0.3 0.01 4.4 1.29 30∶1
2 0.6 0.01 3.6 0.92 60∶1
3 0.9 0.01 3.1 0.96 90∶1
4 1.2 0.01 3.1 1.01 120∶1
5 0.3 0.05 4.4 1.20 6∶1
6 0.6 0.05 4.9 0.87 12∶1
7 0.9 0.05 5.0 1.16 18∶1
8 1.2 0.05 2.8 0.76 24∶1
9 0.3 0.10 4.1 0.89 3∶1
10 0.6 0.10 5.8 0.94 6∶1
11 0.9 0.10 3.9 0.76 9∶1
12 1.2 0.10 3.3 0.66 12∶1
13 0.3 0.50 3.2 0.65 0.6∶1
14 0.6 0.50 3.6 0.93 12∶1
15
16
0.9
1.2
0.50
0.50
3.1
2.8
0.88
0.75
18∶1
24∶1
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表7 增殖系数方差分析
由表 7方差分析可以看出,6-BA各水平间达到了差异显著
水平,NAA各水平间也达到了差异显著水平,6-BA与 NAA
的互作效应不显著。对 6-BA和 NAA需要进行多重比较(见
表8、9)。
表8 6-BA内部差异比较
注:小写字母表示差异显著,大写字母表示差异极显著
表9 NAA内部差异比较
注:小写字母表示差异显著,大写字母表示差异极显著
由以上分析结果可以看出,6-BA以浓度 0.6mg/L最好,
增殖系数平均达到了 4.5,其次是 0.3mg/L,二者差异不明显,
再次是 0.9mg/L,1.2mg/L时增殖系数最低,后二者与 0.3的
差异不显著,但与 0.6之间差异显著。所以从总体上看来,BA
浓度在 0.3~0.9mg/L之间都有利于增殖,增殖系数均在 3.3
以上。NAA浓度以 0.05mg/L为最好,增殖系数平均达到了
4.3,其次是 0.1mg/L,再次是 0.01mg/L,三者差异不显著,以
0.5mg/L效果最差,与前三者之间的差异达到显著水平。因
此,从总体上看,NAA浓度在 0.01~0.1mg/L之间都适宜,增殖
系数在3.6以上,试管内分生苗生长也很正常。处理间比较,
以处理 10为最好,最佳组合是 6-BA0.6mg/L+NAA0.05mg/L,
6-BA/NAA比值为6∶1,平均增殖系数达到了 5.8,其次是处理
7、处理 5、处理 1、处理 6等也较好,繁殖系数均在 4.4以上,
相互之间的差异不显著,激素浓度与 6-BA、NAA各自多重比
较的结果一致。
6-BA—NAA配合对嫩茎长度的影响差异较显著,以 6-
BA0.3mg/L+NAA0.01mg/L组合最好,此时,6-BA/NAA的比值
为 30∶1,嫩茎长度最高达到了 1.29cm。但 6-BA各水平间、
NAA各水平间以及二者的交互效应差异都不显著。6-BA与
NAA配合使用时对嫩茎长度的影响,总的变化趋势是,嫩茎
长度随BA浓度的升高而降低,随 NAA浓度的升高而升高,
但6-BA与NAA浓度太高,对嫩茎的生长又起抑制作用。
综上所述,在试验所确定的浓度范围内,增殖系数和芽长
都有一定的变化规律,适应的激素浓度范围比较宽,但极值点
不同6-BA与NAA配合使用与单独使用效果不同,配合使用
的综合效果更为有效。获得最大嫩茎数量的6-BA/NAA比值
为6∶1,获得嫩茎最大生长量的激素比值以30∶1为好。一般来
说,在诱导和增殖阶段,以较高浓度的细胞分裂素配合低浓度
的生长素,而在生根阶段,则以低浓度的细胞分裂素与高浓度
的生长素搭配较好。这些说明了在一定激素浓度范围内,适
当提高 6-BA/NAA比值可获得较大的增殖系数,适当降低该
比值可以提高嫩茎长度,即有利于促进嫩茎增长。
总之,对辣木而言,嫩茎的增殖对激素浓度有一个较宽的
适应范围,培养基为 MS+6-BA0.3~0.9mg/L+NAA0.01~
0.1mg/L时都能促进组培苗的增殖,其中最适合的培养基为
MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.1mg/L时,增殖系数可达 5.8,同时
增殖苗质量较高,激素再增高虽然有利于嫩茎增殖,但当激素
浓度超过一定范围时,增殖变化不再明显,反而会对嫩茎的增
殖有抑制作用。
另外,嫩茎的形成和生长,不仅取决于 6-BA/NAA的比
值,而且还受制于各自绝对的添加量。6-BA/NAA比值相同
时,绝对量不同,效果也不同。如比值为 6∶1时,当 0.3/0.05
时,嫩茎数及嫩茎长度为 4.4和 1.20cm,而 0.6/0.1时,嫩茎数
和嫩茎长度则为5.8和0.94cm。
2.4生根培养
把辣木小苗接种到生根培养基上培养,发现辣木容易诱
导生根,不同浓度的IBA,NAA均能诱导生根。由表10可知,
在 IBA浓度为 0.1mg/L的时候,生根率最高,达到 98%,根白
色,粗壮,须根 4~5根;0.5mg/L时,生根率虽低,但须根数量
多,平均达7根以上。NAA诱导,生根率随着浓度的提高而降
低,NAA浓度为 0.5mg/L时,生根率仅为 40%且根数少,平均
根数为2,不利于移栽成活。
表10 不同浓度的IBA和NAA对辣木生根的影响
注:生根指数=平均根长×平均生根数×生根率
2.5炼苗移栽
生根瓶苗经过炼苗 1~2周后,移栽到不同基质中,常规
管理,30天后统计其成活率,结果见表11。
激素种类 浓度 /mg/L 平均生根素/% 平均根数 /根 平均根长 /cm 生根指数
1 对照 0 40 4.6 1.6 5.888
2 IBA 0.05 82 5.9 1.8 8.708
3 IBA 0.1 98 4.8 2.0 9.408
4 IBA 0.2 85 2.5 1.8 3.825
5 IBA 0.5 81 7.2 1.1 6.415
6 NAA 0.05 80 2.3 1.4 2.576
7 NAA 0.1 75 2.2 1.8 2.97
8 NAA 0.2 50 1.8 0.7 0.63
9 NAA 0.5 40 1.7 0.5 0.34
变因 平方和 自由度 方差 F值 F0.05 F0.01
6-BA/mg/L 3.49 3 1.16 3.31* 2.9 4.46
NAA/mg/L 3.12 3 1.04 2.97* 2.9 4.46
互作 3.14 9 0.35 1.0 2.19 3.01
剩余 11.17 32 0.35
总和 20.92 47
6-BA浓度/mg/L 增值倍数 α=0.05 α=0.01
0.60 4.5 a A
0.30 4.0 ab A
0.90 3.3 ab A
1.20 3.0 b A
NN浓度/mg/L 增值倍数 α=0.05 α=0.01
0.05 4.3 a A
0.10 4.0 ab A
0.01 3.6 ab A
0.50 3.0 b A
23· ·
表11 移栽基质对辣木试管苗成活率的影响
以上移栽基质中需要消毒处理(新鲜的河沙可直接使用),
移栽前喷50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液,试管苗也用一定
浓度的多菌灵溶液浸泡20s,移栽时先用树枝在基质上插一小
孔,再将辣木苗轻轻放入小穴中,注意不要伤到根,若小苗叶子
太多,也可用剪刀轻轻剪掉少许叶片,以减少蒸发量,提高苗木
成活率。从表10可以看出,土∶砂=1∶3的基质中辣木的移栽成
活率较高,达80%,在红壤中,移栽效果最差。
3结论与建议
1)辣木种子消毒是实验成功的第一步,种子消毒的适宜
方法是 0.1%升汞消毒 25~40min,用双氧水浸种也是影响种
子消毒成功与否的一个关键因素。由于辣木种子的污染是由
其分泌物造成的,建议更进一步弄清该物质的成分,以便采
取相应的措施降低污染率。
2)辣木无菌苗的茎段,容易诱导产生不定芽。NAA、6-BA
和 KT3种激素,单独使用,均能诱导辣木产生不定芽,但 6-
BA的作用效果最好,0.5mg/L时平均繁殖系数为 4.84,0.8mg/
L时繁殖系数在 5以上,且随着 6-BA浓度的提高,繁殖系数
有上升的趋势;6-BA和 KT配合使用,也能很好地诱导辣木
产生不定芽,6-BA0.1mg/L+KT0.5mg/L时,繁殖系数在 6以
上。因此,诱导分化阶段适宜的培养基为:MS+6-BA0.8mg/L
+3%蔗糖+琼脂 6g/L和 MS+6-BA0.1mg/L+KT0.5mg/L+3%蔗
糖+琼脂 6g/L,形成不定芽所需时间短,丛生芽数量多,质量
高,愈伤组织较少。
3)在继代培养时,提高增殖倍数是其重要的任务之一,
也是降低成本的一个重要方面。实验结果表明:6-BA和NAA
配合使用时,6-BA0.3~0.9mg/L+NAA0.01~0.1mg/L均能达到
较好的增殖效果,增殖倍数都在 3倍以上。但最适宜的继代
培养基配方是 MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.1mg/L+3%蔗糖+琼
脂 6g/L。由于辣木生长非常迅速,消耗营养也快,建议 20天
左右换一次培养基,若长时间不换,会导致叶片发黄脱落,影
响辣木增殖。
4)生根培养时,IBA和 NAA在适宜的浓度范围内(0.05、
0.1、0.2、0.5mg/L)均能诱导生根,且生根率较理想。但IBA诱
导,以0.1mg/L为最好,根的诱导率达到 98%,须根的数量多;
NAA诱导的根较细,数量很少,随着 NAA浓度的提高,生根
率降低,以 0.05mg/L为好,根的诱导率为 80%。为了取根时
方便,建议生根培养基可适当减少琼脂用量,使培养基稍微
稀一些。
5)辣木在移栽前,必须经过一段时间的炼苗,炼苗时间的
长短影响着辣木的移栽成活率,炼苗时间太短,苗仍然难以适
应外界的环境,会导致移栽成活率降低;时间太长,瓶苗容易
污染,严重影响辣木的成活,故掌握适宜的炼苗时间,是辣木
移栽成活率的关键。
6)辣木的移栽成活率还不太理想,主要是辣木的根比较
细弱,在取出清洗和种植的过程中易受损。辣木种植忌水浸,
红壤保水能力太强,透水透气性差,不适宜种植辣木;建议使
用土∶砂=1∶3的基质或混合基质,既能保持一定的水分又具有
较强的透水透气性;花盆种植时,可在白天温度高时罩上塑
料袋,以保持一定的湿度。
7)本试验只是综合其它植物组培的经验[2,4,6],初步探讨了
辣木组培各环节的适宜培养基组合。仍遗留有不少问题有待
深入探索,如外植体类型单一,没有对不同类型的培养基进行
比较和选优,继代增殖也仅限于不定芽分化一条途径,新技术
和新方法的应用不足等等。建议下一步可扩大外植体选择范
围,并且在炼苗移栽时,多选择一些移栽基质进行移栽,进一
步加强管理,提高成活率。
参考文献:
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[2]黎国运,李大周.辣木组培育苗技术研究总结[J].热带林业,2006,3
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究,2005,27(3):327-330.
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[6]曾长立,陶婷.非洲菊的组织培养与快速繁殖[J].江汉大学学报/自
然科学版,2005,12(4):35-37.
[7]韩得元.植物生长调节剂—原理与应用[M].北京:北京科学技术出
版社,1997.
[8]王小菁,李玲.植物生长调节剂在植物组织培养中的作用[M].北京:
化学工业出版社,2002:9.
[9]于亚军,代汉萍,李宝江.植物激素和生长调节剂在果树组织培养中
的应用[J].北方园艺,2002(6):68-70.
[10]刘云龙.组织培养中植物生长调节剂的调控[J].农业与技术,1996
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[11]王熊.激素对植物培养细胞生长的调节左右[J].细胞生物学杂志,
1993(2):13-18.
[12]Zhang.x.s.etal.Hormonalregulationofpostplinationdevelopmentof
Doritaeinopsisflowersbyauxinandethylene[J].ActaPhytophysiolgica
Sinica,1995,25(2):178-186.
栽培基质 栽植株数 成活株数 成活率/%
红壤 60 20 33.3
土∶砂=1∶1 60 34 56.7
土∶砂=1∶3 60 48 80.0
混合基质 60 44 73.3
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(上接第19页)
4.3施基肥
桉树专用基肥0.75kg/株施入穴内,将基肥与穴泥充分混
合均匀。
4.4穴抚
在桉树植株以1m直径范围内留出穴盘。
4.5喷除草剂
采用化学除草控制杂草,将杂草控制在不造成危害的水
平。选用41%草甘磷,喷洒在杂草绿色叶面后,与光合作用产
物结合吸收传导至杂草根部,杀死根系后杂草枯萎死亡。喷
药时机选择在桉树苗高 30~50cm时,杂草已全部萌发生长
旺盛时易吸收除草药物,效果最好。但桉树对草甘磷极其敏
感易发生药害,喷药前要采取保护措施,一般用套袋或盖罩
的方法,以免药液飘洒伤及桉树苗。41%草甘磷使用浓度为
150~200mL兑水15kg,一般一桶药可喷施0.1hm2左右。选
择在无雨、风力3级以下天气,要确保喷药后2h内不下雨。
喷施时尽量压低喷头,以喷湿杂草叶面为度。喷药后及时揭
去保护罩,否则会造成苗木萎蔫。
化学除草用于抚育具有除草彻底,死亡杂草自然覆盖林
地,具有保土保水保温保肥的作用。持效期长,可达 1年左
右;工效高,一般每人每天可完成 0.33hm2左右;成本低,约为
450元/hm2。
参考文献:
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[3]张栋,刘群华.桉树山地免炼山法造林技术初探[J].桉树科技,2003,
20(1):35-37.
EfectofNon-ControledBurningandControledBurningfor
AforestationontheGrowthofEucalyptus
ZHUChongsheng1,LUOZhaorong2
(1.JiangxiStatedZhaokengForestryFarmofQuannanCounty,QuannanJiangxi341800,China;
2.JiangxiGaofenEcologicalFarmingandForestryDevelopmentCo.,Ltd.QuannanJiangxi341800,China)
Abstract:Thetrialonefectofnon-controledburningandcontroledburningonthegrowthof1-year-oldplantationof
Eucalyptuswasinvestigatedofinfield.Theresultsshowedthatnon-controledburningforaforestationhasnoefectinthe
firstgrowthyear,themethodsofoperationwithsimple,lowcostandconsistentwiththerequirementsofsustainable
developmentmanagement.
Keywords:Eucalyptus;Non-controledburning;EcologicalPlanting;Growth
StudyonTissueCultureofMoringaLam
LUOYunxia1,LUBin2,SHIZhuogong1
(1.SouthwestForestryColege,KunmingYunnan650224,China;
2.YunnanAcademyofForestry,KunmingYunnan650204,China)
Abstract:ThesterilizedseedsofMoringaoleiferaLamstartedtogerminateaftertheywerestripedandgrownedonMS
mediafor10days.Thegerminateratewasupto79%.ThesuitabledisinfectionwayofM.oleifera’sseedswasthatsoaked
byH2O2for6~8h,cleanedbywater,thensterilizedwith0.1%HgCl225~40min.Underthecommontemperature,thesprig
ofgerminatedseedscouldproducebudclusterandproliferationonthemediaofMS+6-BA0.1mg/L+KT0.5mg/L+cane
suger30%+agar6g/L,andtheproliferationratecouldbemorethan6times.ThemediaformultiplicationwasMS+6-
BA0.6mg/L+NAA0.1mg/L+canesuger30%+agar6g/L,andtheproliferationratecouldbe5.8;Thesuitablemediafor
rootingwas1/2MS+IBA0.05~0.5+Suger15%,andtherootingratecouldbeover80%,thebestwasupto98%whenIBA
was0.1mg/L.Thesurvivalratiowas80%whengrowninnursery.ThebestpHrangeis5.8~6.2.
Keywords:MoringaoleiferaLam;Tissueculture;Crowdedbuds;Acclimatizationandtransplants
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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