全 文 ：辣木籽对大鼠糖尿病脑病的神经保护作用
刘　冰1 ,王永明2 ,徐　蓉3 ,应栩华1 ,蔺春红2 ,陈　朋3
(1.浙江省中医药研究院 中医临床研究所 ,浙江 杭州 310007;2.天津医科大学 公共卫生学院 ,天津 300070;
3.中国医学科学院 放射医学研究所 ,天津 300192)
　　摘　要:目的 初步探讨辣木籽对糖尿病脑病的神经保护作用。方法 将大鼠随机分为正常组 、模型组和辣
木籽组 。除正常组外 ,模型组和辣木籽组腹腔注射链脲佐菌素 65 mg/kg 复制糖尿病脑病模型 。辣木籽组灌胃
给予辣木籽0.2 g/kg ,其余两组给予等体积空白溶媒 。连续给药 8周。测试学习记忆功能 、血糖 、血清胰岛素
水平和海马神经元损伤。结果 与模型组比较 ,辣木籽组血糖明显降低 ,认知障碍明显改善 ,神经元损伤亦见明
显好转。结论 辣木籽对糖尿病脑病表现良好的神经保护作用 ,颇具进一步研究前景。
　　关键词:糖尿病脑病;认知功能障碍;胀亡;辣木籽;大鼠
　　中图分类号:R285.5　　　　　文献标志码:A　　　　　文章编号:1007-4813(2010)02-0179-02
　基金项目:浙江省中医药研究院院内基金项目(2009001)
　作者简介:刘　冰(1969-),医学博士 ,师从张伯礼院士。研究方向:神经退行性疾病中医药防治。
　　辣木(Moringa oleifera)为辣木科辣木属植物 ,原
产印度北部及非洲 ,对糖尿病等多种疾病有明显疗
效 ,但辣木防治糖尿病脑病未见相关报道。本观察辣
木籽对血糖和胰岛素水平 、认知功能障碍和神经元损
伤的影响 ,现报道如下。
1　材料与方法
1.1　实验动物　Wistar 雄性大鼠 ,体重 280 ～ 320 g ,
北京维通利华实验动物技术有限公司 ,合格证编号
SCXK(京)2002-2003。
1.2　药物与仪器　链脲佐菌素(streptozocin , STZ ,美
国 sigma公司),辣木籽(厦门天竺辣木食品有限责任
公司惠赠),胰岛素放免试剂盒(北京华英生物技术研
究所),稳步倍加型血糖仪(美国强生公司),Morris水
迷宫动监控仪(中国医学科学院药物研究所)。
1.3　模型复制与分组　取大鼠 20只 ,STZ 65 mg/kg
(用0.1mmoL pH 4.5柠檬酸缓冲液溶解)腹腔注射造
模 。造模后 4 d , 禁食 8 h , 测试血糖。血糖大于
8.0 mmoL/L为合格模型大鼠 。将其随机分为模型和
辣木籽两组 。另取大鼠 10只 ,注射等体积柠檬酸缓
冲液 ,设为正常组 。
1.4　给药　自第 8 d 开始 ,各组动物按如下剂量给
予相应药物:正常组及模型组(1%羧甲基纤维素钠 ,
1 mL),辣木籽组(辣木籽 ,研磨成极细粉末 ,以适量
1%羧甲基纤维素钠制成混悬液 ,0.2 g/kg),各组均连
续给药 8周。
1.5　Morris水迷宫　考察模型大鼠认知功能变化及
表 1　对大鼠血清总胆固醇 、甘油三酯的影响( x±s)
组　　　　　别 剂量/(g/ kg) TC/(mmol/ L)TG/(mmol/ L)
蒸 馏 水 组 - 1.19±0.27 0.45±0.32
高脂模型对照组 - 2.84±0.43 0.83±0.38
紫孢侧耳低剂量组 0.17 2.36±0.56#　 0.30±0.31■
紫孢侧耳中剂量组 0.34 2.29±0.48#■ 0.37±0.22■
紫孢侧耳高剂量组 0.68 2.47±0.55#　 0.68±0.65　
　　注:与空白组比较 , #P<0.05,与模型组比较 , ■P <0.05。
表 2　对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响( x±s)
组　　别 剂量/(g/ kg) OD值/ 570 nm
空 白 组 - 0.148±0.13　
紫孢侧耳低剂量组 0.24 0.124±0.08　
紫孢侧耳中剂量组 0.48 0.246±0.11#
紫孢侧耳高剂量组 0.96 0.233±0.10#
　　注:与空白组比较 , #P<0.05。
3　讨论
本实验结果表明 ,高脂模型对照组大鼠与蒸馏水
组大鼠相比血清 TC 、TG均显著升高。粗多糖粗提物
中剂量组可以明显降低高脂大鼠血清TC 、TG ,并存在
一定的量效关系 。其它剂量组虽然也有一定的改善
作用 ,但其作用强度不如中剂量组。提示粗多糖粗提
物中剂量组在治疗高脂血证 ,降低血脂方面具有一定
作用。本实验通过对正常小鼠和实验对照小鼠腹腔
巨噬细胞吞噬作用的检测 ,结果表明紫孢侧耳粗多糖
粗提物能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用 ,与
空白组相比较(P <0.05),证实了紫孢侧耳粗多糖粗
提物能够增强非特异性免疫功能。
(收稿日期:2010-03-02)
—179—
第26卷第2期
2010 年 4月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1.26
4 , 2010
DOI :10.13463/j.cnki.cczyy.2010.02.056
辣木籽的影响。测试于给药后 2 h 进行。测试前先
采用Morris水迷宫训练6 d ,以潜伏期(从入水到找到
平台所用时间)和游泳距离(从入水到找到平台的总
行程)为测试成绩的指标 ,每天每只大鼠在 4个象限
共训练4次 ,每次游泳时间为 60 s ,第 7 d成绩记做测
试成绩。于实验结束前 1周测试 。
1.6　血糖与胰岛素　末次给药 12h 后 ,大鼠水合氯
醛麻醉 ,腹主动脉取血 ,以血糖仪测试空腹血糖;另取
血液 ,3 000 rpm/15 min离心 ,放射免疫方法检测血清
胰岛素 ,严格按照设备及试剂盒说明书进行操作。
1.7　电镜　末次给药12 h后 ,每组取大鼠3只 ,水合
氯醛麻醉 ,分离胰岛 、大脑皮层和海马 ,戊二醛-锇酸
固定 ,漂洗 ,浸入饱和醋酸铀溶液过夜 ,脱水 ,包埋 ,超
薄切片 ,透射电镜观察并摄片 。考察有无胀亡相关亚
细胞结构变化。
1.8　统计学处理　所有描述性参数以均数加减标准
差( x±s)表示 ,组间比较采用单因素方差分析 。用
SPSS 13.0软件包进行分析 , P<0.05为差异有显著性。
2　结果
2.1　辣木籽对血糖和胰岛素水平的影响　见表 1。
表 1　辣木籽对血糖和胰岛素水平的影响
组　别 血糖/(mmoL/L) 胰岛素/(U/mL)
正 常 组 5.52±0.97　　 30.12±5.76　　
模 型 组 17.15±1.55■■ 15.85±1.76■■
辣木籽组 11.28±1.13#　 17.73±2.54　　
　　注:与正常组比较 , ■■P <0.01;与模型组比较 , #P <0.05。
2.2　辣木籽对学习记忆的影响　见表 2。
表 2　辣木籽对学习记忆的影响
组　别 潜伏期/ s 游泳距离/ cm
正 常 组 17.32±5.67　　 521.86±41.28　　
模 型 组 31.92±7.78■■ 845.78±45.20■■
辣木籽组 22.74±6.43#　 611.09±32.81　　
　　注:与正常组比较 , ■■P <0.01;与模型组比较 , #P <0.05。
2.3　辣木籽对神经元损伤的影响　模型组动物海马
神经元超微结构发生胀亡相关变化 ,胞体与胞核肿
胀 ,染色质分散 、边聚 ,质膜与核膜破溃等变化 ,内质
网等细胞器肿胀变形 ,电子密度升高;辣木籽则可明
显改善这些变化(图略)。
3　讨论
糖尿病脑病(diabetic encephalopathy)由于严重损
害中枢神经系统功能而发生糖尿病性认知功能障碍
是严重临床综合征 ,主要表现为学习记忆能力减退 、
注意力分散 、思维迟钝 、分类概括等抽象思维能力降
低 ,最终导致痴呆的发生 。糖尿病脑病的发病机制尚
未完全阐明 ,可能与脑血管损伤 、脑神经递质改变 、脑
内糖皮质激素改变 、tau蛋白异常磷酸化 、脑神经细胞
凋亡 、氧化应激等有关[ 1-2] 。
胀亡是以胞内高渗 ,外水内流 ,致胞浆肿胀与空
泡化 、胞膜通透性增加 、完整性破坏 ,内质网储钙能力
下降 ,线粒体肿胀 、嵴结构破坏 、呼吸链受阻 、ATP 缺
乏和胞核内染色质聚集等为主要形态学表现的死亡
方式[ 3] 。胀亡相关机制有细胞膜损伤 、Na+-K+ATP
酶功能障碍 、线粒体功能障碍 、蛋白激酶 、钙超载 、死
亡受体 、解耦联蛋白 2等 。这些环节相互关联 ,互为
因果。多种机制使胞外水分内流 ,引起胞浆及内容物
肿胀 ,胞内环境逐渐失衡并形成恶性循环 ,最终导致
胞体崩解死亡[ 4] 。
辣木有明显的降压 、降糖 、降低胆固醇和抗氧化
应激等功效 ,对糖尿病 、高血压 、老年性痴呆等多种疾
病有明显疗效[ 5-8] ,但未见辣木防治糖尿病脑病相关
研究报道。
本文研究发现 ,辣木籽可显著降低糖尿病大鼠血
糖水平 ,并明显改善其认知功能障碍和神经元损伤 ,
提示辣木籽对大鼠糖尿病脑病具有保护作用 ,值得深
入探讨 。
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(收稿日期:2010-01-09)
—180—
第26卷第2期
2010 年 4月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1.26
4 , 2010