全 文 :植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture
野生山马兰的组织培养和快速繁殖
李 岩 吴延军(浙江大学园艺系 ,杭州 310029)
Tissue Culture and Rapid Propagation of Kalimeris lautureana
LI Yan , WU Yan-Jun(Department of Horticulture , Zhejiang University , Hangzhou 310029)
1 植物名称 山马兰(Kalimeris lautureana)。
2 材料类别 幼嫩叶片 。
3 培养条件 以 MS 为基本培养基。(1)诱导愈
伤组织培养基:MS+6-BA 1.5 mg·L-1(单位下同)
+NAA 0.5;(2)诱芽培养基:MS +6-BA 1.5 +
NAA 0.3;(3)继代增殖培养基:MS+6-BA 1.5+
IAA 0.1;(4)生根培养基:MS+ IAA 0.5。所有培
养基中均加入 3%蔗糖;诱芽培养基中加入 1%琼
脂 , 其 余 为 0.7%, pH 6.0 。培 养 温 度 为
(25±2)℃;黑暗条件下培养 1周后 ,转入光照条件
下 ,光照度为 1 500 lx ,培养时间为 12 h·d-1 。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 从野生山马兰植株上取下
幼嫩叶片 ,用自来水冲洗数次 ,然后放入 70%的酒
精中浸泡 5 min ,再用 0.1%的升汞溶液浸泡 5
min ,在超净台内用无菌水冲洗 3 次。将叶片切成
0.5 cm×0.5 cm 大小的方块 ,接种到(1)号培养基
中 ,7 d后产生白色的愈伤组织 ,15 d后愈伤组织变
绿 ,诱导率为 90%。
4.2 芽的诱导 将诱导出的愈伤组织转移到诱芽
培养基上 , 20 d后从愈伤组织上分化出很多高约 2
cm 的丛生芽(图 1),诱发率为 100%。
4.3 继代增殖培养 将生长在(2)号培养基上的
丛生芽从基部切下 ,接种到(3)号培养基上 , 20 d后
又可分化出许多增殖芽 ,增殖率为 10 ~ 12倍 。
4.4 生根培养 将继代增殖培养产生出的小芽 ,
逐一转接至(4)号培养基上诱导生根 ,10 d后即长
出大量辐射状根 ,诱导生根率 100%。
4.5 壮苗和移栽 将长有试管苗的瓶盖打开 ,在
实验室内自然光照条件下 ,炼苗 5 d ,将小苗连同培
养基一起取出 ,在水中小心洗去培养基 ,移栽到经
0.1%高锰酸钾溶液消毒过的珍珠岩中 ,先放置在
高湿(湿度在 85%以上)、弱光(3 000 lx 以下)条件
下缓苗2周 ,然后置于湿度 70%~ 75%、光照5 000
lx 条件下培养 2周 。每周喷施 1次 10%的 MS 营
养液 , 4周后移入土壤 ,成活率达 90%。
5 意义与进展 山马兰属菊科马兰属多年生草本
植物 ,叶肥茎嫩 ,营养价值非常高 ,可谓野菜中之精
品 。其药用价值也很高 ,全株均可入药 ,有清热解
毒 、凉血利尿 、消肿祛痛的作用。经常食用山马兰
可预防高血压 、中风的发生 ,收明目之功效 。山马
兰作为一种蔬菜日益受到广大消费者的青睐 。时
下野生山马兰已供不应求 ,而且采摘的野生山马兰
老嫩不一 ,产品供应常受季节限制 。采用组织培养
方法快速繁殖 、常年供应新鲜的山马兰是一条值得
考虑的途径 。目前国内外尚未见到山马兰组织培
养和快速繁殖的报道 。
图 1 山马兰诱导成芽
收稿 2001-11-02 修定 2002-03-28
580 植物生理学通讯 第 38 卷 第 6 期 , 2002 年 12 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2002.06.016