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第 1 6卷 第 3 期
2014 年 3 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 16 No. 3
Mar .，2014
亚 贡Smallanthus sonchifolius（Poepp. et Endl.）
H. Robinson为菊科Smallanthus属多年生草本植物，
原产于南美洲安第斯山脉，俗称“雪莲果”“雅龙果”，
英文名为“YACON”。亚贡至今已有500余年的使
用历史，是当地印第安人的传统根茎食品，被认为是
可缓解糖尿病、肠道功能紊乱等多种慢性疾病的南
美药食两用植物之一[1]。民间将亚贡叶加工成茶泡
饮用于治疗糖尿病，近期亚贡叶的降血糖作用得到
现代药理学实验证明，其中倍半萜内酯类成分沼菊
素（Enhydrin）被认为是亚贡叶降血糖作用的主要成
分[2-7]，本研究参照《中华人民共和国药典》2010版
及相关文献建立了亚贡叶中沼菊素含量的测定方
法[8-10]，并对不同批次亚贡叶中沼菊素的含量进行
了测定，为其资源的合理开发和质量控制提供科学
依据。
1 仪器与试药
Agilent 1100 series 高效液相色谱仪（真空脱
气机、四元泵、柱温箱、紫外检测器、HP 1100 化学
工作站，美国安捷仑科技有限公司）；Acculab型万
分之一分析天平（Sartorius group）；CP225D型十万
分之一分析天平（Sartorius group）；KQ-250DE型
超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；高速
万能粉碎机（武义县屹立工具有限公司）；沼菊素
对照品（自制，经HPLC面积归一化法检测纯度＞
98%）；液相用甲醇为色谱纯（Oceanpak alexative
chemical），水为超纯水。亚贡叶样品5份，采自
于不同产地，由珍奥集团提供，经辽宁中医药大
学药学院王冰教授鉴定为菊科亚贡Smallanthus
sonchifolius的干燥叶。
2 方法与结果
2.1 含量测定方法的确定
2.1.1 测定波长的选择
将沼菊素对照品溶液在200~400 nm扫描，在
210 nm处有最大吸收，所以检测波长选择为210 nm。
2.1.2 色谱条件
色 谱 柱：Agilent Eclipse XDB-CN（4.6 mm×
250 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（34∶66）；流速：
1.0 mL·min-1 ；柱温：30 ℃；检测波长：210 nm ；检
测时间：30 min。在选定色谱条件下沼菊素与相邻
组分分离良好，HPLC图见图1。
HPLC测定亚贡叶中沼菊素含量
李德伟1，王晓彤1，窦德强1，董锋2
（1.辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600 ；2.珍奥集团股份有限公司，辽宁 大连 116600）
摘 要：目的：建立亚贡叶中沼菊素的含量测定方法，为亚贡叶的质量控制提供科学依据。方法：采用高效液
相色谱法，条件为：Agilent Eclipse XDB-CN（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以甲醇-水（34∶66）为流动相，流
速1.0 mL·min-1，检测波长：210 nm，柱温30 ℃。结果：沼菊素在0.081~5.190 μg（r=1）线性关系良好，平均回收
率为96.69%（RSD=1.35%）。结论：该方法操作简便、准确、重现性好，其结果可为亚贡叶的质量控制和新药研究提
供参考。
关键词：亚贡叶；沼菊素；HPLC；含量测定
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2014) 03- 0053- 02
收稿日期：2013-08-20
基金项目：辽宁省高等学校创新团队课题（LT2013020）；辽宁省教育厅项目（L2013364）
作者简介：李德伟（1988-），男，辽宁本溪人，2011级硕士研究生，研究方向：中药化学及新药研发。
通讯作者：窦德强（1967-），男，吉林镇赉人，教授，博士，研究方向：天然药物的研究与开发。
Determination of Enhydrin in Leaves of Smallanthus Sonchifolius by HPLC
LI Dewei1，WANG Xiaotong1，DOU Deqiang1，DONG Feng2
（1. College of Pharmacy，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian
116600，Liaoning，China ；2. Zhen Ao Co. Ltd.，Dalian 116600，Liaoning，China）
Abstract ：Objective ：To establish an analytical method for determining enhydrin in leaves of
Smallanthus sonchifolius to provide scientific basis for its quality control. Methods ：The determination was
measured by HPLC with Agilent Eclipse XDB-CN column（4.6 mm×250 mm，5 μm），using MeOH-
water（34 ：66） as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL·min-1. The detection wavelength was 210 nm
and column temperature was 30℃ . Result ：There was a good linear relationship with a range of 0.081-5.190
μg for enhydrin，r=1. The average recovery rate for enhydrin was 96.69%，RSD=1.35%. Conclusion ：This
method is easy to operate with the high precision and excellent repetition，and it is suitable for the quality
control of leaves of Smallanthus sonchifolius and new drug development.
Key words ：leaves of Smallanthus sonchifolius ；enhydrin ；HPLC ；determination
DOI ：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.03.019
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辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 1 6 卷
S. 沼菊素，A. 对照品，B. 供试品
图1 对照品和供试品的HPLC图
2.1.3 对照品溶液制备
精密称取沼菊素对照品适量，用70%的甲醇溶
解后定容，制成浓度为0.1038 mg·mL-1的沼菊素对
照品溶液。
2.1.4 线性关系考察
精密吸取对照品贮备液适量，加70%的甲醇
制 成 浓 度 分 别 为0.5190、0.2595、0.1298、0.0649、
0.0324、0.0162、0.0081 mg·mL-1的对照品溶液，分
别吸取上述对照品溶液10 μL注入高效液相色谱
仪。按2.1.1项下色谱条件进行测定，以进样量为
横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，线性方程
为Y=1 992.4X-11.297，r=1，结果表明，沼菊素在
0.081~5.190 μg范围内线性关系良好。
2.1.5 供试品溶液制备
取亚贡叶粉末（过四号筛，并测定水分）约1 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70%的甲醇25 mL，
称定重量，超声提取10 min，放冷，再称定重量，用
70%的甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即
得。
2.1.6 精密度试验
取同一亚贡叶样品（S1），按2.1.5项制备供试品
溶液，按2.1.1项下色谱条件检测，连续进样6次，进
样体积为10 μL，记录峰面积。6次测定沼菊素峰面
积的RSD为0.75%，表明精密度良好。
2.1.7 稳定性试验
取同一亚贡叶样品（S1），按2.1.5项制备供试
品溶液，分别于0、2、4、8、12、24 h各进样1次，进样
体积10 μL。6次测定沼菊素峰面积值的RSD为
0.81%，说明供试品溶液在24 h内基本稳定。
2.1.8 重复性试验
精密称取同一亚贡叶样品（S1）1 g，共6份，按
2.1.5项制备供试品溶液，测定亚贡叶中沼菊素的含
量。结果样品中沼菊素的平均含量为4.154 4 mg/g，
RSD为1.53%，表明本方法重复性良好。
2.1.9 加样回收率试验
精密称取6份S1亚贡叶样品各0.5 g，分别加入
沼菊素对照品2 mg，按2.1.5项制备供试品溶液，按
既定色谱条件检测。测得沼菊素的平均回收率为
96.69%，RSD为1.35%，结果见表1。
表1 加样回收率试验
序号 取样量（g）
样品含
量（mg）
加入量
（mg）
测得量
（mg）
回收率
（%）
平均回收
率（%）
RSD
（%）
1 0.499 6 2.075 5 2.01 4.001 1 95.80
96.69 1.35
2 0.500 5 2.079 3 2.02 4.056 8 97.90
3 0.503 4 2.091 3 2.08 4.080 0 95.61
4 0.506 5 2.104 2 2.06 4.100 4 96.90
5 0.502 2 2.086 3 2.03 4.086 5 98.53
6 0.500 4 2.078 9 2.11 4.092 1 95.41
2.2 样品含量测定
分别精密称取5批次亚贡叶样品各1 g，按2.2.5
项制备供试品溶液，按既定色谱条件进行测定，用外
标一点法计算样品中沼菊素的质量分数（以干燥品
计）。结果见表2（n=3）。
表2 样品含量测定
序号 产地 采收时间 沼菊素含量（%） RSD（%）
S1 辽宁海城 20100825 0.41 1.07
S2 云南嵩明县 20110828 0.38 0.84
S3 辽宁鞍山 20100830 0.15 1.77
S4 广西南宁 20111211 0.26 1.62
S5 辽宁大连 20121001 0.44 1.93
3 讨 论
3.1 供试品溶液制备考察
本研究通过超声提取和回流提取对比，发现超
声提取的沼菊素含量稍高，且操作简便，故选取超声
提取法。比较了水及不同浓度甲醇等6种提取溶剂，
结果表明，采用70%的甲醇作为提取溶剂提取效率
最高。比较了超声处理5、10、15、20、30 min，实验结
果表明，超声提取10 min沼菊素提取量不再增加。
3.2 色谱条件的选择
本研究分别选择了甲醇-水和乙腈-水二元洗
脱系统，并根据文献[6]考察了Agilent Eclipse XDB-
CN柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）和Agilent ZORBAX
SB-C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），其 中Agilent
ZORBAX SB-C18柱在较短时间内对部分样品的分
离度不佳，而Agilent Eclipse XDB-CN柱能够分离样
品，保留时间适中，且峰形良好，遂选择该色谱柱作
为亚贡叶中沼菊素的含量测定，经多次调整测试，流
动相定为甲醇-水（34∶66）。
样品含量测定结果表明，不同产地亚贡叶样
品中沼菊素的含量在0.15%~0.44%，相差约3倍，
差异性较大，建议亚贡叶中沼菊素的最低含量为
0.20%。◆
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