全 文 ：收稿日期: 1999-10-11;　修订日期: 1999-11-08
基金项目: 国家“九五”科技攻关项目 No . 96-005-02-04-05
作者简介: 伍义行 ( 1972-) ,男 (土家族 ) ,重庆市酉阳人 ,现任中国　
农业科学院中兽医研究所研究实习员 ,在读硕士研究生 .
●药理药化●
火绒草抑菌作用试验研究
伍义行 , 王建国 , 郭福存 , 李宏胜 , 胡振英
(中国农业科学院中兽医研究所 ,甘肃 兰州　 730050)
提要　采用“管碟法”用 8种细菌对火绒草水提物、水提醇沉物、水提物 3个分离组分、水提醇沉物 3个分离组分进行
了体外抑菌试验。 结果表明: 8种提取物对金色葡萄球菌 84184有较好的抑菌作用 ,其中水提物、水提物第 1分离组分和
水提醇沉物第 2分离组分的抑菌环直径均在 20 mm以上。 而对鸡白痢沙门氏菌、沙门氏菌、溶血性大肠杆菌、大肠杆
菌、猪丹毒杆菌、禽巴氏杆菌、绿脓杆菌 10104等 7种细菌抑菌作用较差或无抑菌作用。 提示火绒草提取物对革兰氏阳性
球菌有较好的抑制作用。
关键词　火绒草 ;　提取物 ;　管碟法 ;　抑菌试验
中图分类号: R285. 5　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2000) 04-0289-02
Study on the Bacteriostasis in Vitro of Leontopodium Leontopodiodes Extractives
W U Yi-hang , W ANG Jian-guo , GUO Fu-cun, L I Hong-sheng , HU Zhen-ying
( Institute of Traditional Chinese Veterinary Medicine,
China Academy of Agricultural Sciences , Lanzhou , Gansu 730050, China )
Abstract　 Th e aga r - diffusion method w as adopted to study the bacteriostasis in v itro o f the 8 kinds of
leontopodioides ex trac tiv es. The 8 kinds of ex tractiv es a re th e solution of wa ter- ex t raction and alcohol pr ecipitation,
the w ater - ex tr act so lution and its 3 separ ated par ts. The experim enta l r esults indica ted that the 8 kinds of
ex tra ctiv es inhibited the g rowth o f Staphylococcus aureus str onge r than that of Salmonella pullo rum , Salmonella
bacteria, Esch erichia coli. Haemo lytica , Escherichia co li. Er ysipelo thrix rhuriopa thiae, Pa steurella multocida poultr y
and Pseudomonas aeruginosa. Most impo rtant o f all, the bacteria- inhibiting ring diame ter o f the 3 of 8 ex tr activ es
exceeded 20 mm. In conclusion, the bacteriostasis o f leontopodioides is v ery str ong , Suggesting tha t ex tr activ es of
Leontopodioies have quite g ood bacte rio stasis for g ram s stain positiv e coccus.
Key words　 Leontopodium leontopodioides;　 Ex tractiv e;　 The aga r- diffusion method;　 Bacterio sta sis
　　火绒草 Leontopodium leontopodioides (Willd) Beauv别名老
头草、薄雪草、老头艾。 系菊科火绒草属植物火绒草的干燥全草。
夏、秋季采割 ,洗净晒干。以地上全草入药。味微苦 ,性寒。具有清
热凉血、消炎利尿等功效。 多生于草原、山坡、地埂等处 ,广泛分布
于我国东北、西北、华北和西南等地 ,野生资源极其丰富 ,是我国北
方民间常用中草药之一 [1]。 目前 ,有关火绒草的研究报道很少 ,虽
然其化学成分的抗炎、利尿作用已有报道 [2, 3, 4] ,但有关火绒草提
取物的抗菌活性研究至今尚无报道。 本文仅就火绒草 8种粗提物
的体外抑菌试验结果报道如下:
1　材料
1. 1　药物: 火绒草采自甘肃省甘南藏族自治州临潭县 ,将其全草
洗净晒干 ,粉碎备用。
1. 1. 1　水提物 :用水连续提取 3次 ,并将 3次提取液混合 ,浓缩成
1. 0 g /m l备用。
1. 1. 2　水提醇沉物: 先将火绒草水提物浓缩成棕黑色浸膏 ,然后
放入烘箱烘烤 ,待其水分蒸发完毕 ,再用 95%的酒精溶解 ,过滤。
滤液蒸发去掉酒精后 ,用水溶解成 0. 05 g /ml备用。
1. 1. 3　水提物 3个分离组分: 采用硅胶干柱层析法对水提物进行
分离 ,先用甲醇和水 ( 3∶ 2)作洗脱剂 ,分离得第 1组分 (褐色 ,粘
稠 )和第 2组分 (黄褐色 ,不粘稠 );再用乙醇和苯 ( 1∶ 1)作洗脱剂 ,
分离得第 3组分 (黄色 ,稍粘稠 )。 3个分离组分均用水溶解成 0. 05
g /ml备用。
1. 1. 4　水提醇沉物 3个分离组分: 采用硅胶干柱层析法对水提醇
沉物进行分离 ,先用甲醇和水 ( 3∶ 2)作洗脱剂 ,分离得第 1组分
(褐色 ,粘稠 )和第 2组分 (黄色 ,不粘稠 );然后用乙醇和苯 ( 1∶ 1)
作洗脱剂 ,分离得第 3组分 (淡黄色 ,稍粘稠 )。 3个分离组分均用
水溶解成 0. 05 g /ml。
1. 2　菌种: 金色葡萄球菌 84184 ,绿脓杆菌 10104 ,由中国兽药监察所
(北京 )提供 ;鸡白痢沙门氏菌、沙门氏菌、溶血性大肠杆菌、大肠杆
菌、猪丹毒杆菌、禽巴氏杆菌 ,由甘肃省兽医总站分离提供。
1. 3　培养基: 鲜血琼脂 ,普通肉汤 ,按实验室常规方法制备 ,冰箱
保存备用。
1. 4　牛津杯: 规格据《中国药典》 1990年版 10 mm× 7. 8 mm× ( 6
± 0. 1) mm,浙江省海宁健民医疗仪器厂生产。
2　方法
管碟法:取内径为 90 mm的灭菌平皿若干 ,依次编号 ,然后在
超净工作台 (或无菌间 )上 ,往平皿中各加入熔化的鲜血琼脂 20
ml,待琼脂冷却凝固后 ,用灭菌的棉拭子分别蘸取经 18 h培养和
1000倍生理盐水稀释的鸡白痢沙门氏菌、沙门氏菌、溶血性大肠
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LIS HIZHEN M EDICINE AND M ATERIA M EDICA RESEARCH 2000 VO L. 11 N O. 4 时珍国医国药 2000年第 11卷第 4期
杆菌、大肠杆菌、猪丹毒杆菌、禽巴氏杆菌、绿脓杆菌 10104 ,金色葡萄
球菌 84184肉汤培养液 ,依次均匀涂布在相应的平皿琼脂上。 待琼脂
表面干燥后 ,在每个平皿琼脂上均等距离放置 4只灭菌牛津杯 ,并
在每个平皿的每只牛津杯中用 200μl的加样器加入相应的试验
药液 0. 2 ml。 最后放入 37℃的培养箱中培养 18～ 24 h,再用游标
卡尺测量各种药物的抑菌环直径 ,并评价其抑菌效果。试验在相同
条件下重复 1次 ,两次结果应基本一致 ,否则不予报道。
3　结果
试验结果见表 1,表 2,表 3。
　　表 1　水提物、水提醇沉物对 8种病原菌的抑菌试验结果 mm
细　菌 抑菌环直径水提物 水提醇沉物
　鸡白痢沙门氏菌 8. 42 14. 60
　沙门氏菌 无 12. 81
　溶血性大肠杆菌 无 12. 54
　大肠杆菌 无 13. 40
　猪丹毒杆菌 无 无
　禽巴氏杆菌 无 13. 24
　绿脓杆菌 10104 12. 55 15. 43
　金色葡萄球菌 84184 20. 88 15. 68
　　表 2　水提物 3个分离组分对 8种病原菌的抑菌试验结果 mm
细　菌 抑菌环直径第 1组分 第 2组分 第 3组分
　鸡白痢沙门氏菌 无 无 无
　沙门氏菌 无 无 无
　溶血性大肠杆菌 无 无 无
　大肠杆菌 无 无 无
　猪丹毒杆菌 无 无 无
　禽巴氏杆菌 无 无 无
　绿脓杆菌 10104 无 无 无
　金色葡萄球菌 84184 20. 87 17. 29 18. 06
　表 3　水提醇沉物 3个分离组分对 8种病原菌的抑菌试验结果 mm
细　菌 抑菌环直径第 1组分 第 2组分 第 3组分
　鸡白痢沙门氏菌 无 无 9. 21
　沙门氏菌 无 10. 65 9. 20
　溶血性大肠杆菌 无 无 无
　大肠杆菌 无 无 无
　猪丹毒杆菌 无 无 无
　禽巴氏杆菌 无 9. 64 8. 78
　绿脓杆菌 10104 无 无 无
　金色葡萄球菌 84184 16. 59 22. 25 9. 17
　　从表 1,表 2,表 3的试验结果可以看出:水提物、水提醇沉物、
水提物 3个分离组分和水提醇沉物 3个分离组分对金色葡萄球
菌 84184皆有较强的抑制作用。其中水提物、水提物第 1分离组分和
水提醇沉物第 2分离组分对金色葡萄球菌 84184的抑菌环直径均在
20 mm以上 ,而 8种提取物对鸡白痢沙门氏菌、沙门氏菌、溶血性
大肠杆菌、大肠杆菌、猪丹毒杆菌、禽巴氏杆菌和绿脓杆菌 10104等 7
种细菌抑制作用较弱或无抑制作用。
4　分析与讨论
体外抑菌试验结果表明 ,火绒草 8种提取物对金色葡萄球
菌 84184均有较强的抑制作用 ,并且水提物、水提物第 1分离组分和
水提醇沉物第 2分离组分的抑菌环直径均在 20 mm以上 ,显然对
金色葡萄球菌 84184的抑制作用是相当强的。 然而 , 8种提取物可能
对革兰氏阳性球菌有较好的抑制作用 ,因此 ,下一步试验有必要就
火绒草提取物对链球菌的抑制作用进行探索。
火绒草作为一种民间草药 ,大量的临床试验已证明其具有抗
炎、利尿等良好疗效 [2, 3, 4]。 目前 ,研究人员已从火绒草中分离和鉴
定出: 咖啡酸、香草酸、原儿茶醛、反式桂皮酸、β -谷甾醇和 阿魏酸
等 6种化学成分 ,其中前 3种成分已证明具有抗炎作用 ,是治疗
急、慢性肾炎的主要有效成分 [5, 6, 7]。 此外 ,咖啡酸还具有抗菌抗病
毒活性 ,香草酸具有抗细菌和真菌活性 ,反式桂皮酸具有抗细菌和
霉菌活性 ,原儿茶醛也具有广谱抗菌活性 [8]。 显然 ,火绒草既具有
抗炎活性 ,也具有抗感染活性 ,而且还具有极其丰富的自然资源 ,
因此 ,深入研究和开发应用具有广阔的前景。本文仅就火绒草粗提
物的抗菌活性作一初步探索 ,供同行参考。
参考文献:
[1]　全国中草药汇编编写组 .全国中草药汇编 (上册 ,第 2版 ) [M ] .北京:
人民卫生出版社 , 1996∶ 144
[ 2]　常桂荣 .中药老头草乙醇剂治疗慢性肾炎 45例 [ J] .中西医结合杂
志 , 1987, 7( 11)∶ 669
[3 ]　李龙云 ,叶金梅 ,尹　航 ,等 .火绒草对动物变态反应性炎症的影响
[ J ].中国中药杂志 , 1994, 19( 3)∶ 174
[4 ]　江苏新医学院 .中药大辞典 (上册 ) [M ].上海:上海科学技术出版社 ,
1977∶ 1688
[ 5 ]　赵全成 ,吕景田 ,徐东铭 .老头草化学成分的研究 (Ⅰ ) [ J] .中草药 ,
1984, 15( 3)∶ 7
[6 ]　赵全成 ,吕景田 ,徐东铭 .老头草有效成分的研究 [ J] .中药通报 ,
1984, 9( 6)∶ 31
[7 ]　赵全成 ,周　丹 ,李春生 ,等 .老头草化学成分的研究 [ J] .中药通报 ,
1988, 13( 2)∶ 34
[8 ]　季宇彬 .中药有效成分药理与应用 [ J ].哈尔滨:黑龙江科学技术出版
社 , 1995∶ 91, 119, 197, 355, 443
　　　
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时珍国医国药 2000年第 11卷第 4期 LISHIZHEN M EDICIN E AND MA TERIA M EDICA RESEARCH 2000 VO L. 11 NO. 4