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香青兰水提物与乙酸乙酯提取物降血脂的实验研究



全 文 :60
第 1 3 卷 第 1 2 期
2011 年 12 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 12
Dec . ,2011
香青兰 Dracocephalum moldevica L, 是唇形科青
兰属植物 , 在民间广泛用于治疗冠心病及高血压等
疾病 [1-2]。本文主要研究该药不同提取物对大鼠实
验性高脂血症的作用。
香青兰味甘、苦、性凉,归肝、脾经,具有补益
心脑、活血化瘀、通络开窍的功能。在民间广泛用
于治疗冠心病及高血压等疾病 [5-7]。文章主要研
究该药不同提取物对大鼠实验性高脂血症的作
用。
1 材 料
1.1 药物
香青兰全草,购自新疆维吾尔药业有限公司,
香青兰水提物与乙酸乙酯提取物降血脂的实验研究
谭梦晖 1,于波 2,沈旭华 1,毕美琼 1,祝洁 1,朱灿伶 2,路瑶 1,陈玉玺 1
(1.上海中医药大学中药学院,上海 201203 ;2.上海中医药大学基础医学院,上海 201203)
摘 要 :目的 :建立实验性高脂血症大鼠模型,观察香青兰水提物、乙酸乙酯提取物对高脂血症大鼠血脂水平
的影响。方法 :采用脂肪乳剂灌胃制备高脂血症大鼠模型,造模同时连续给药10周,观察香青兰不同提取物对高脂
血症大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷
丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及肝组织SOD、MDA水平的影响。
结果 :与模型组比较,香青兰水提取物组能显著降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C、AST、MDA(P<0.05或
P<0.01),升高HDL-C、SOD(P<0.05或P<0.01),显著降低肝匀浆MDA(P<0.01);香青兰乙酸乙酯提取物能显著
降低高脂血症大鼠血清TC、LDL-C、ALT、AST、MDA(P<0.01),显著升高血清SOD(P<0.05),显著升高肝匀浆
SOD(P<0.01),显著降低肝匀浆MDA(P<0.01)。结论 :香青兰水提取物与乙酸乙酯提取物能调节高脂血症大鼠
脂质代谢紊乱,其调节血脂机制可能与抗脂质过氧化有关。
关键词 :香青兰水提取物 ;香青兰乙酸乙酯提取物 ;高脂血症 ;大鼠 ;抗脂质过氧化
中图分类号 :R222.19 文献标识码 :A 文章编号 :1673-842X (2011) 12- 0060- 03
收稿日期 :2011-06-05
基金项目 :上海市教委科研项目(08CZ010);上海中医药大学第二届大学生创新项目(SHUTCMCXHDZ16)
作者简介 :谭梦晖(1969-),女,山东人,讲师,博士,研究方向 :中药药理药效学与毒理学研究。
Effects of Dracocephalum Moldavica on Hyperlipidemia in Rats
TAN Meng-hui1,YU Bo2,SHEN Xu-hua1,BI Mei-qiong1,ZHU Jie1,
ZHU Can-ling2,LU Yao1,CHEN Yu-xi1
(1.College of Pharmacy,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 201203,China ;
2.College of Basic Medicine,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 201203,China)
Abstract :Objective :The experiment is to establish a rat model of experimental hyperlipidemia and
to observe,the effect of Dracocephalum moldavica and ethyl acetate extract on the total cholesterol(TC),
triglyceride(TG),low density lipoprotein-cholesterol(LDL-C),high density lipoprotein-cholesterol(HDL-C),
malondialdehyde(MDA),superoxide dismutase(SOD),alanine aminotransferase(ALT),aspartate
aminotransferase(AST) ;the impact of experimental hyperlipidemia on the liver tissue malondialdehyde
(MDA),superoxide dismutase(SOD)and to explore Dracocephalum moldavica extract the impact of high
blood cholesterol. Methods :To establish a hyperlipidemia rat model,after 10 weeks therapy,to observe the
effects of different parts of Dracocephalum moldavica and Dracocephalum moldavica of ethyl acetate extract
on serum lipid levels,anti lipid peroxidation ability. Results :Compared with model group,Dracocephalum
moldavica could lower the serum level of TC,TG,LDL-C,AST,MDA(P<0.05 or P<0.01),increase the
serum level of HDL-C,SOD(P<0.05 or P<0.01),and lower the liver homogenate level of MDA(P<0.01);
Compared with model group,Dracocephalum moldavica ethyl acetate extract could lower the serum level
of TC,LDL-C,ALT,AST,MDA(P<0.01),increase the serum level of SOD(P<0.05),and increase the
liver homogenate level of SOD(P<0.01),lower the liver homogenate level of MDA(P<0.01). Conclusion :
Dracocephalum moldavica extract can regulate lipid metabolism disorders and reduce the incidence of fatty
liver and its modulation may be related to its anti lipid peroxidation.
Key words :Dracocephalum moldavica ;Dracocephalum moldavica of ethyl acetate extract ;
hyperlipidemia ;rat ;lipid peroxidation
DOI:10.13194/j.jlunivtcm.2011.12.62.tanmh.068
61
1 3 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
经上海中医药大学中药学院周秀佳教授鉴定为
Dracocephalum moldevica L。
1.2 动物
SD 大 鼠,雄 性,体 重 160~180g,由 上 海 西
普 尔 - 必 凯 实 验 动 物 有 限 公 司 提 供,合 格 证 号
SCXK( 沪 )2008-0016,所有动物均饲养于上海中医
药大学实验动物中心清洁级动物实验室。
1.3 仪器
JA1003 上 皿 电 子 天 平,上 海 天 平 仪 器 厂 ;
SK2200LH 超 声 仪,上 海 科 导 超 声 仪 器 有 限 公
司 ;2-16K 低 温 冷 冻 离 心 机,美 国 Sigma 公 司 ;日
立 7080 全自动生化分析仪,日本日立贸易有限公
司 ;DENLEY DRAGON Wellscan MK3 酶标仪,芬兰
Thermo 公司 ;DK-S22 电热恒温水浴锅,上海精宏实
验设备有限公司。
1.4 试剂及配制
谷丙转氨酶(ALT)检测试剂盒,R1,批号 J921,
R2,批号 J916 ;谷草转氨酶(AST)检测试剂盒,R1,
批号 L922,R2,批号 J916 ;胆固醇(TC)检测试剂盒,
R1,批号 K917,R2,批号 A018 ;甘油三酯(TG)检测
试剂盒,R1,批号 J916,R2,批号 J916 ;以上均由日
本世诺临床诊断制品株式会社提供 ;高密度脂蛋白
试剂盒,R1,批号 AE746,R2,批号 AE747 ;低密度
脂蛋白试剂盒,R1,批号 AR153,R2,批号 AF385,
以上均由日本和光纯药工业株式会社提供 ;丙二
醛试剂盒(MDA),批号 20100603 ;超氧化物歧化酶
(SOD)试剂盒,批号 20100603,南京建成生物工程
研究所 ;胆酸钠,批号 080628,上海蓝季化学试剂
有限公司 ;胆固醇,批号 T20080415,1,2 丙二醇,批
号 T20090312,聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯(吐
温 -80),批号 T20090225,氨基甲酸乙酯(乌来糖),
批号 T20091109,均为国药集团化学试剂有限公司
提供 ;辛伐他汀片,批号 09222,杭州默沙东有限公
司。
1.4.1 脂肪乳的制备 [3-4]
胆固醇 25g,研磨,倒入烧杯中,加 50mL 丙二醇
和 50mL 吐 温 -80 溶 解,胆 酸 钠 5g,溶 解 于 50mL 蒸
馏水中,猪油 75g,置烧杯于热水中充分融化至透
明后,加于胆固醇溶液中,搅匀,将溶解的胆酸钠
加于胆固醇中,搅匀,最后将溶液用蒸馏水定容至
500mL。
1.4.2 香青兰水提物制备
取香青兰全草按 1∶8(W/V)加蒸馏水浸泡
24h,80℃水提取 2 次,每次 2h,合并滤液,低压浓缩
得干浸膏。配制 :取干浸膏 100g 加入 100mL 0.5%
羧甲基纤维素钠溶液,完全溶解后备用。
1.4.3 香青兰乙酸乙酯提取物制备
取香青兰全草按 1∶8(W/V)加乙醇浸泡 3 天
后进行 70℃水浴热回流提取 2 次,每次 1.5h,合并滤
液,将获得的乙醇提取物减压回收,得到浸膏状药
物,将浸膏状药物用 5 倍量的水溶解,依次用石油
醚、乙酸乙酯萃取,将获得的萃取物再次减压回收、
干燥,备用。配制 :取乙酸乙酯萃取干浸膏 0.8g 加入
50mL 0.5%羧甲基纤维素钠溶液,完全溶解后备用。
1.4.4 辛伐他汀
辛伐他汀 40mg 研磨后加入 50mL 0.5%羧甲基
纤维素钠溶液,完全溶解后备用。
2 实验方法[3-4]
2.1 香青兰提取物对高脂血症大鼠的影响
取 SD 大鼠适应性喂养 3 天,称重,随机分为
5 组,分别为空白对照组、模型对照组、阳性对照
组(辛伐他汀)、香青兰水提物组、香青兰乙酸乙酯
提取物组,每组动物各 6 只。参照文献方法 [3-4]
制备脂肪乳剂,4℃冰箱保存。使用时先于 37℃
水浴中融化。除空白对照组外,其它各组每天下
午灌胃给予脂肪乳剂,给药容积 1mL·100g-1 体
重,正常组灌胃等量蒸馏水溶液。各给药组在造
模的同时,每天上午灌胃给予相应药物。阳性对
照组灌胃辛伐他汀 8mg·kg-1 ;香青兰水提物组
灌胃 10000mg·kg-1 ;香青兰乙酸乙酯提取物组
灌胃 80mg·kg-1 ;正常对照与模型对照组 :灌胃
等量 0.5%羧甲基纤维素钠水溶液,每 5 天称重 1
次,随体重调整给药量,各组动物连续灌胃给药
70 天后处理。末次给药后各组动物禁食不禁水
12h。称重,25% 乌来糖腹腔注射麻醉,腹主动脉
取血,室温放置 0.5h 后,4000r·min-1 离心,分离
上清,-80℃保存备用。
2.2 统计方法
应用 SPSS11.5 统计软件,计量资料采用“均
数 ± 标准差(x—±s)”表示,两组间比较采用t 检
验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两
比较方差齐性时用 LSD 方法分析,方差不齐时用
非参数检验方法分析,P<0.05 为两者有显著性差
异。
3 结 果
3.1 香青兰提取物对高脂血症大鼠血清TC、TG、
HDL-C、LDL-C的影响
香青兰提取物对高脂血症大鼠血清总胆固
醇(TC)、甘 油 三 酯(TG)、低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇
(LDL-C)、高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇(HDL-C)的 影
响与模型组相比,辛伐他汀组显著降低高脂血症
大 鼠 TC、TG、LDL-C,显 著 升 高 HDL-C(P<0.05
或P<0.01);香青兰水提取物组显著降低 TC、TG、
LDL-C(P<0.05 或P<0.01), 显 著 升 高 HDL-C
(P<0.01);香青兰乙酸乙酯组提取物组显著降低
TC、LDL-C(P<0.01)。结果见表 1。
表 1 香青兰提取物对高脂血症大鼠血清 TC、
TG、HDL-C、LDL-C 的影响(n=6,x—±s)
组别 剂量(mg·kg-1)
TC
(mmol·L-1)
TG
(mmol·L-1)
HDL-C
(mmol·L-1)
LDL-C
(mmol·L-1)
正常组 - 1.05±0.212)0.45±0.052)0.83±0.191) 0.23±0.102)
模型组 - 1.76±0.30 1.07±0.18 0.64±0.13 0.89±0.12
辛伐他汀组 8 1.35±0.191)0.74±0.082)1.05±0.182) 0.61±0.231)
香青兰水提取物组 10000 1.44±0.261)0.65±0.232)0.93±0.152) 0.45±0.202)
香青兰乙酸乙
酯提取物组 80 1.27±0.35
2)0.95±0.27 0.69±0.04 0.32±0.232)
注 :与模型组比较,1)P<0.05,2)P<0.01。
3.2 香青兰提取物对高脂血症大鼠血清超氧化物歧
化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响
与模型组相比,辛伐他汀组、香青兰水提取物
组、香青兰乙酸乙酯提取物组均显著升高血清SOD
含量(P<0.05),显著降低血清MDA含量(P<0.01),结
果见表2。
62
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 1 3 卷
表 2 香青兰提取物对高脂血症大鼠血清
SOD、MDA 水平的影响(n=6,x—±s)
组别 剂量(mg·kg-1)
SOD
(U·mL-1)
MDA
(μmol·L-1)
正常组 - 266.11±21.382) 2.13±0.652)
模型组 - 193.14±18.43 18.81±9.49
辛伐他汀组 8 232.78±16.291) 5.47±2.132)
香青兰水提取物组 10000 236.26±28.111) 4.71±2.692)
香青兰乙酸乙
酯提取物组 80 235.72±36.73
1) 4.99±0.982)
注 :与模型组比较 ,1)P<0.05,2)=P<0.01。
3.3 香青兰提取物对高脂血症大鼠血清谷丙转氨酶
(ALT)、谷草转氨酶(AST)的影响
与 模 型 组 相 比,辛 伐 他 汀 组、香 青 兰 乙 酸 乙
酯 提 取 物 组 均 能 显 著 降 低 血 清 ALT、AST 含 量
(P<0.01),香青兰水提取物组能显著降低血清 AST
含量(P<0.05)。结果见表 3。
表 3 香青兰提取物对高脂血症大鼠
血清 ALT、AST 的影响(n=6,x—±s)
组别 剂量(mg·kg-1)
ALT
(IU·L-1)
AST
(IU·L-1)
正常组 - 110.33±17.362) 62.00±8.462)
模型组 - 185.33±40.24 129.67±34.07
辛伐他汀组 8 130.17±29.342) 78.33±28.742)
香青兰水提取物组 10000 153.17±26.41 93.50±21.381)
香青兰乙酸乙
酯提取物组 80 136.50±33.48
2) 83.67±36.932)
注 :与模型组比较,1)P<0.05,2)P<0.01。
3.4 香青兰提取物对高脂血症大鼠肝脏超氧化物歧
化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响
与模型组相比,辛伐他汀组、香青兰乙酸乙酯
提取物组均显著升高肝匀浆 SOD 含量(P<0.01),显
著降低 MDA 含量(P<0.01),香青兰水提取物组显著
降低 MDA 含量(P<0.01)。结果见表 4。
表 4 香青兰提取物对对高脂血症大鼠肝
脏 SOD、MDA 水平的影响(n=6,x—±s)
组别 剂量(mg·kg-1)
SOD
(kU·gprot-1)
MDA
(μmol·gprot-1)
正常组 - 32.44±1.452) 1.21±0.182)
模型组 - 21.54±5.98 2.75±0.60
辛伐他汀组 8 38.05±6.612) 1.41±0.392)
香青兰水提取物组 10000 26.72±4.16 1.22±0.182)
香青兰乙酸乙
酯提取物组 80 38.09±8.81
2) 1.35±0.162)
注 :与模型组比较,1)P<0.05,2)P<0.01。
4 讨 论
高脂血症与多种疾病的发生发展密切相关,
是导致动脉粥样硬化和冠心病等心脑血管疾病
发生的重要危险因素 [6-7]。本试验采用脂肪乳 10
周灌胃给予大鼠造模,试验结果显示 :与正常组
比较,模型组动物血清 TC、TG、LDL-C 明显升高,
HDL-C 明显下降,说明造模成功。TC 与 TG 是目
前作为临床初步诊断血脂异常的标准。LDL-C 的
主要作用是将 TC 从肝内转运到肝外组织,使 TC 形
成蓄积,是高脂血症导致动脉粥样硬化的危险因
子。HDL-C 与 LDL-C 的作用正好相反,它能将周
围组织和动脉壁上游离的胆固醇吸收下来,并把
它运输到肝脏中代谢,从胆汁排出 ;并促进胆固醇
转化。因此 HDL-C 可防止脂质在动脉壁上沉积,
防止脂肪在肝内堆积,具有抗动脉硬化和抗脂肪
肝的作用 [8-10]。本试验结果显示,香青兰水提取物
能显著降低 TG、TC、LDL-C,显著升高 HDL-C ;香
青兰乙酸乙酯提取物组能显著降低 TC、LDL-C。
说明香青兰水提取物、香青兰乙酸乙酯提取物可
能具有纠正高脂血症动物脂质代谢紊乱的作用。
研究表明,高血脂水平导致体内自由基的产生
与清除之间的失平衡,自由基清除剂超氧化物歧化
酶(SOD),其活性代表着体内氧自由基防御系统的
水平,对机体的氧化与抗氧化平衡起着重要作用,
SOD 可抑制 MDA 等物质的生成 ;而 MDA 是脂质过
氧化代谢物,可以反映体内脂质过氧化物程度,并间
接反映全身脂质代谢障碍的程度 [10-11]。本试验结果
显示与模型组比较,香青兰乙酸乙酯提取物能显著
升高血清与肝匀浆 SOD 含量,显著降低血清与肝匀
浆 MDA 含量 ;香青兰水提取物能显著升高血清 SOD
含量 , 显著降低血清与肝匀浆 MDA 含量。提示香青
兰水提取物与乙酸乙酯提取物可能通过提高机体抗
氧化能力,抑制脂质过氧化反应,从而起到改善机体
脂质代谢的功能。
ALT、AST 主要存在于肝细胞浆中,在肝细胞
损害、坏死甚至在细胞变性时升高,是临床上监测
肝功能的敏感指标 [16]。本试验结果显示,香青兰
水提取物显著降低 AST 含量 ;香青兰乙酸乙酯提
取物能显著降低 ALT、AST 含量。提示香青兰水取
提物与乙酸乙酯提取物可能具有恢复肝细胞活性
的能力。
综上所述,香青兰水提物与乙酸乙酯提取物具
有一定的降血脂作用,其机制可能与提高大鼠抗脂
质过氧化能力有关。本研究为临床开发香青兰提供
了一定的药理学实验依据。◆
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