全 文 ：·药典标准研究·
珠子参药材质量标准研究
宋小妹1 , 2 ,李伟东1 ,房方1 ,崔九成2 ,蔡宝昌1＊
(1南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室 ,江苏 南京　210046;2 陕西中医学院药学院 ,陕西 咸阳　712046)
摘要:目的　对不同批次珠子参药材样品进行分析研究 ,建立珠子参药材质量标准。方法　采用传统鉴别 、薄层色谱鉴
别及HPLC 法测定珠子参中竹节参皂苷Ⅳ a含量;同时 , 对其水分 、灰分 、酸不溶性灰分等进行测定。结果　不同批次珠
子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量存在一定差异。结论　所建立的方法操作简便 、重现性好 、专属性强 ,可用于珠子参药材
的质量评价。
关键词:珠子参;质量标准;竹节参皂苷Ⅳa
中图号:284.1　　　文献标识码:A　　　文章编号:1000-5005(2010)02-0143-03
　　珠子参为五加科植物珠子参(Panax japonicus
C.A.Mey.var.major(Burk.)C.Y.Wu etK.M.Feng
或羽叶三七(Panax japonicus C.A.Mey.var.bipin-
natifidus(Seem)C.Y.Wu et K.M.Feng)的干燥根
茎。主产于陕西 、四川 、云南 、甘肃 、贵州 、西藏等
地。具有补肺 、养阴 、活络 、止血之功效 ,主要用于
气阴两虚 、烦热口渴 、虚劳咳嗽 、跌扑损伤 、关节疼
痛 、咳血 、外伤出血等症的治疗[ 1] 。现代研究表
明 ,珠子参主要化学成分为多种皂苷类[ 2] ,而药理
实验结果显示 ,珠子参皂苷具有镇痛 、镇静[ 3] 、增
强免疫力[ 4-5] 、抗肿瘤[ 6]等多方面活性。本文在
对珠子参系统研究的基础上 ,以珠子参主要皂苷
类成分人参皂苷 Ro 、竹节参皂苷 IVa等为质量评
价指标 ,对珠子参药材进行质量评价研究 ,为规范
药材质量 ,保证临床疗效提供科学依据 。
1　实验材料
1.1　药材
珠子参药材分别购于陕西 、四川 、云南 、甘肃 、
贵州等省 ,经陕西中医学院药学院王继涛高级实
验师鉴定为五加科植物珠子参 Panax japonicus C.
A.Mey.var.major (Burk.)C.Y.Wu et K.M.
Feng的干燥根茎 。
1.2　仪器及试剂
岛津 LC-2010AHT 高效液相色谱仪;Shimadzu
LC solution工作站;SB-3200D型超声清洗机(宁波
新芝生物科技股份有限公司 , 180W , 40kHz);BP-
121S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公
司)
乙腈为色谱纯(SK Chemicals公司);其余均为
分析纯;水为娃哈哈纯净水;竹节参皂苷Ⅳa对照
品(自制 ,含量符合测定要求)。
2　方法与结果
2.1　性状
呈扁球形 、圆锥形或不规则菱角形 ,偶呈连珠
状 ,长约 0.8 ～ 4.5 cm ,直径0.2 ～ 2.0 cm 。表面棕
黄色或黄褐色 ,偶有圆形凹陷的茎痕 ,有明显的疣
状突起及皱纹 ,一侧或两侧残存细的节间 。质坚
硬 ,断面淡黄白色 ,粉性 ,可见黄色分泌道斑点。
气微 ,味苦 、微甘 ,嚼之刺喉 。蒸(煮)者断面黄白
色或黄棕色 ,略呈角质样 , 嚼之不刺喉 。
2.2　显微特征
横切面:木栓层为 5 ～ 10层细胞。皮层稍窄 ,
收稿日期:2009-10-19;修稿日期:2009-11-20
基金项目:国家药典委员会(YZ-123);陕西省教育厅科学研究计划项目(05JK168);陕西省科学技术研究发展计划项目(2006K16-G1
(2));陕西省教育厅重点实验室重点科研计划项目(09JS016)
作者简介:宋小妹(1963-),女 ,南京中医药大学 2007级博士研究生 ,陕西中医学院教授。 ＊通信作者:025-85811112
—143—南京中医药大学学报 2010 年 3月第 26 卷第 2期JOURNAL OF NANJING TCMUNIVERSITY Vol.26 No.2 Mar .2010
DOI :10.14148/j.issn.1672-0482.2010.02.021
有树脂道 ,呈圆形或长圆形 ,直径 32 ～ 500 μm ,周
围分泌细胞5 ～ 18个 。维管束外韧型 ,环状排列;
形成层不明显。韧皮部有树脂道。木质部导管多
数呈放射状排列或呈“V”字形排列;导管类多角
形 ,直径约至 76 μm 。中央有髓。薄壁细胞中含
草酸钙簇晶 ,直径 20 ～ 96μm;并含淀粉粒 。见插
页Ⅵ 图1 。
粉末:黄白色 、灰白色或棕黄色 。木栓细胞表
面观呈多角形 ,壁薄 ,非木化;切面观类方形。可
见圆形或长圆形的树脂道或其碎片 ,直径 32 ～
500μm ,内含红棕色分泌物。草酸钙簇晶多 ,整个
薄壁细胞组织均有分布 ,直径 20 ～ 76 μm ,棱角多
宽钝 , 少数较尖 。导管多为网纹 , 直径 20 ～ 46
μm ,螺纹 、梯纹导管可见。见插页Ⅵ 图 2。
2.3　薄层鉴别
取本品粉末 1 g ,加甲醇 30 mL 超声处理 40
min ,滤过 ,滤液蒸干 ,残渣加水 20 mL 加热溶解 ,
水饱和正丁醇萃取 5次(20 、10 、10 、5 、5 mL),合并
正丁醇萃取液 ,蒸干 ,残渣加甲醇 5 mL加热溶解 ,
作为供试品溶液。另取竹节参皂苷 Ⅳa 对照品 、
人参皂苷 Ro对照品 ,加甲醇制成每 1mL 各含 2.0
mg 的对照品溶液 。照薄层色谱法(附录 Ⅵ B)试
验 ,分别吸取竹节参皂苷Ⅳa对照品溶液 、人参皂
苷 Ro对照品溶液各 1μL ,供试品溶液 1 μL ,分别
点于同一硅胶G 薄层板上 ,以正丁醇-乙酸乙酯-
甲醇-甲酸-水(5∶10　0.5　0.3　3.5)上层液为展
开剂展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 10%硫酸乙醇溶液 ,
于 105℃加热至斑点显色清晰 ,置紫外灯(365 nm)
下检视 。供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应的
位置上 ,显相同颜色的荧光斑点。结果见封三图
3。
2.4　检查
2.4.1　水分测定
照《中华人民共和国药典》2005年版(一部)
水分测定法(附录 IX H 第一法)测定 ,计算含量。
结果见表 1。
2.4.2　总灰分及酸不溶性灰分测定
参照《中华人民共和国药典》2005 年版一部
总灰分及酸不溶性灰分测定法(附录 IX K)测定 ,
计算含量 。结果见表 1。
表 1　珠子参水分 、灰分 、酸不溶灰分及竹节参皂苷Ⅳa 含量
序号 产地 水分/ % 灰分/ % 酸不溶性灰分/ % 竹节参皂苷Ⅳa含量/ %
1 四川 12.48 4.28 0.10 2.42
2 甘肃 11.84 6.20 0.24 5.22
3 云南 11.12 5.06 0.17 3.40
4 贵州 13.60 5.10 0.06 4.99
5 四川 13.27 5.76 0.12 2.67
6 陕西 12.06 6.50 0.32 5.45
7 陕西 11.79 8.78 2.43 4.63
8 陕西 12.45 6.82 0.77 5.30
9 湖南 15.58 6.81 0.46 5.18
10 湖北 12.24 5.77 0.47 2.17
11 平均值 12.64 6.11 0.51 4.14
2.5　含量测定
2.5.1　色谱条件
色谱柱:Inertsil ODS-sp(4.6 mm ×150 mm , 5
μm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(35:65);检测
波长:203 nm;流速:1.0 mL/min;进样量:20μL;柱
温:30℃;理论板数按竹节参皂苷Ⅳa 峰计算应不
低于 3 000。
2.5.2　对照品溶液的制备
取竹节参皂苷Ⅳa对照品适量 ,精密称定 ,加
60%乙醇配制成 1.0076 mg/mL 的贮备液 ,待用。
精密吸取 2 mL于 10mL量瓶中 ,加60%乙醇至刻
度 ,摇匀 ,作为对照品溶液 。
2.5.3　供试品溶液的制备
取珠子参药材粉末约 0.1 g , 精密称定 ,加
60%乙醇溶液 25 mL ,超声处理 40 min ,取出 ,加
60%乙醇补足质量 ,滤过 。取续滤液即得。
2.5.4　线性关系的考察
分别精密吸取上述贮备液 0.5 , 1 , 2 , 3 , 4 , 5
mL ,于 10 mL 量瓶中 ,加 60%乙醇至刻度 ,摇匀 ,
配制成 0.050 4 , 0.100 8 , 0.201 5 , 0.302 3 , 0.403
0 , 0.503 8 mg/mL 的系列溶液 ,分别进样 20μL ,测
定峰面积 ,以竹节参皂苷Ⅳa 对照品进样量(μg)
—144— 南京中医药大学学报 2010年 3 月第 26卷第 2 期
为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,并计
算回归方程得:Y =391 102X -16 725 (r =
0.999 9),结果表明在 1.007 6 ～ 10.07 6 μg 范围
内 ,竹节参皂苷Ⅳa峰面积 Y 与进样量(μg)X 线
性关系良好。
2.5.5　精密度试验
取同一供试品溶液 ,照“2.5.1”项下色谱条
件 ,重复进样 6次 ,测定竹节参皂苷Ⅳa 峰面积。
结果表明本法精密度良好 , RSD 为 0.02%。
2.5.6　稳定性试验
取同一供试品溶液于 0 ,2 ,4 ,8 ,12 , 18 , 24 h内
重复进样 6次 ,照“2.5.1”项下色谱条件测定竹节
参皂苷Ⅳa峰面积 。结果表明样品在 24h内峰面
积稳定 , RSD 为 0.02%。
2.5.7　重复性试验
取同一批号样品 ,平行称取 6份 ,按“2.5.3”
项下方法制备供试品溶液 ,照“2.5.1”项下色谱条
件测定竹节参皂苷Ⅳa 含量。结果表明本法具有
较好的重复性 ,RSD 为 1.10%。
2.5.8　回收率试验
取已知含量的样品 6 份 , 各 0.05 g ,精密称
定 ,精密加入竹节参皂苷Ⅳa 对照品适量 , 按“2.
5.3”项下方法制备供试品溶液 ,照“2.5.1”项下色
谱条件测定竹节参皂苷Ⅳa 含量 。计算回收率 ,
见表 2。结果表明 ,本法回收率良好。
表 2　回收率试验结果(n=6)
序号 样品中量/mg 加入量/mg 测得量/ mg 回收率/ % 平均回收率/ % RSD/ %
1 2.299 6 2.508 0 4.917 8 104.39 103.46 0.81
2 2.247 5 2.508 0 4.857 0 104.05
3 2.311 6 2.508 0 4.885 9 102.64
4 2.272 9 2.508 0 4.857 0 103.03
5 2.271 6 2.508 0 4.883 6 104.15
6 2.287 1 2.508 0 4.857 2 102.48
2.5.9　样品含量测定
取不同珠子参药材粉末各 0.1g ,按“2.53”项
下方法制备样品溶液 ,按“2.5.1”项下色谱条件进
行测定 ,进样量 20 μL ,记录色谱峰面积 ,计算含
量。结果见表 2。高效液相图见封三图 4。
3　讨论
(1)根据不同产地珠子参药材实验测定结
果 ,按平均值的±20%作为限度制定幅度 ,暂定珠
子参药材的水分不得高于 15.0%,总灰分不得过
7.0%,酸不溶性灰分不得过 0.6%,竹节参皂苷
Ⅳa的含量不得低于 3.34%。
(2)化学研究表明 ,珠子参化学成分为多种皂
苷类 ,其中以人参皂苷 Ro 、竹节参皂苷Ⅳa含量较
高 ,故薄层色谱鉴别以二者作为对照品进行鉴别 ,
以提高鉴别的准确性 。
(3)采用 HPLC 法测定不同产地珠子参药材
中竹节参皂苷Ⅳa 的含量 ,结果显示 , HPLC 法操
作简便 、结果可靠 、重现性好 、专属性强 ,可用于珠
子参中有效成分含量测定和质量控制。
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-2601.
(编辑:李伟东)
—145—宋小妹 , 等:珠子参药材质量标准研究　第 2期