全 文 ：论著 文章编号:1000-5404(2010)20-2224-04
珠子参水提物抗炎镇痛作用的实验研究
贺海波 1 , 石孟琼 2 , 陈　涛1 , 卢训丛 1 , 覃宁玲 2 , 陈述威 2　　(443002湖北 宜昌 , 三峡大学医学院:中药药理实验室 1 ,基
础医学实验中心 2)
　　[摘要 ] 　目的　观察珠子参水提物的抗炎 、镇痛作用。方法　将 250只小鼠采用完全随机设计分组法分成 5组:空
白对照组 , 阿司匹林组及珠子参水提物低 、中 、高剂量组 , 每组 50只。分别进行抗炎和镇痛系列实验共 5种 , 每种实验各
组取 10只小鼠。其中珠子参水提物组分别给予珠子参水提物低(2.50 g/kg)、中(5.00 g/kg)、高剂量(10.00 g/kg)灌胃 ,阿
司匹林组给予阿司匹林(0.20g/kg)灌胃 , 空白对照组给予相同体积蒸馏水灌胃 ,均每天 1次 , 连续给药 7 d。采用二甲苯
致小鼠耳廓肿胀法 、角叉菜胶致小鼠足跖肿胀法和小鼠棉球肉芽肿法观察珠子参水提物的抗炎作用 , 采用醋酸扭体法和
热板法观察其镇痛作用。结果　与空白对照组比较 ,珠子参水提物低 、中 、高剂量组均可明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓的
肿胀度 , 抑制角叉菜胶所致小鼠足肿胀和小鼠棉球肉芽肿;可延缓醋酸所致小鼠扭体的出现时间 ,减少扭体反应次数 ,提
高热板所致小鼠痛阈值(P<0.05, P<0.01)。结论　珠子参水提物具有明显的抗炎镇痛作用。
　　[关键词 ] 　珠子参;抗炎;镇痛
　　[中图法分类号 ] 　R282.71;R961;971.1 [文献标志码 ] 　A
[通信作者 ] 　贺海波 , 电话:(0717)6396558, E-mail:shmq0212@126.com
Anti-inflammatoryandanalgesicefectofwaterextractiveofPanacisMajorisRhizo-
mainmice
HeHaibo1 , ShiMengqiong2 , ChenTao1 , LuXuncong1 , QinNingling2 , ChenShuwei2(1LaborataryofPharmacologyonTradi-
tionalChineseMedicine, 2ExperimentalCenterofBasicMedicalSciencesCollege, ChinaThreeGorgesUniversity, Yichang, HubeiProv-
ince, 443002, China)
　　[ Abstract] 　Objective　Tostudytheanti-inflammatoryandanalgesicactionsofPanacisMajorisRhizo-
ma.Methods　Atotalof250micewererandomlydividedin5groups.Theformer3groupswereusedforanti-
inflammatorystudy, withxylene-inducedauricletumefaction, carrageenan-inducedhindpawsswelingandcot-
ton-inducedgranulomarespectively.Theleft2 groupweresetforanalgesicinvestigationwithaceticacidwrit-
hingtestandhotplatetestrespectively.Eachgroupwasfurtherdividedinto5 subgroups, with10 animalsin
each.Subgroup1 wasgivendistiledwaterascontrolgroup, subgroup2 wasgivenlow-dosePanacisMajoris
Rhizoma(2.50 g/kg), subgroup3 wasgivenmiddle-dose(5.00 g/kg), subgroup4 wasgivenhigh-dose
PanacisMajorisRhizoma(10.00g/kg), andsubgroup5wasgivenaspirin(0.20 g/kg).Aldrugsweread-
ministeredonceadayfor7dintragastricaly, andthecorespondinginjurywasinflictedafterlastornexttolast
injection.Results　Comparedwithcontrolgroup, the3 diferent-dosegroupsofwaterextractiveofPanacis
MajorisRhizomawereabletosignificantlyinhibitthemiceauricletumefactioninducedbyxylene, hindpaws
swelinginducedbycarageenanandgranulomainducedbycoton.Thepainsinmicecausedbyaceticacidand
hotplate, suchaswrithingfrequencywereevidentlyatenuated, andthelatentperiodandpainthresholdwere
obviouslyelevatedbythewaterextractiveofPanacisMajorisRhizoma(P<0.05, P<0.01, respectively).
Conclusion　ThewaterextractiveofPanacisMajorisRhizomahasobviousanti-inflammationandanalgesic
efectsinmice.
　　[ Keywords] 　PanacisMajorisRhizoma;anti-inflammatory;analgesia
Correspondingauthor:HeHaibo, Tel:86-717-6396558, E-mail:shmq0212@ 126.com
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第 32卷第 20期
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第　三　军　医　大　学　学　报
ACTA　ACADEMIAE　MEDICINAE　MILITARIS　TERTIAE　　　　　
Vol.32, No.20
Oct.30　2010
DOI :10.16016/j.1000-5404.2010.20.003
　　珠子参(PanacisMajorisRhizoma)系五加科人参属
植物。别名扣子七 、钮子七 、竹鞭三七 、疙瘩七等。民
间习用其干燥根状茎入药。其味苦 、甘 ,微寒 ,归肝 、
肺 、胃经 ,具有补肺养阴 、祛瘀止痛 、止血等功效 ,主治
气阴两虚 、烦热口渴 、虚劳咳嗽 、关节痹痛 、咯血 、吐血 、
衄血 、崩漏及外伤出血等[ 1, 2] 。其主要化学成分为皂
苷类 ,主要为齐墩果烷型 、达玛烷型 、甾类 ,包括珠子参
苷 、竹节参苷 、人参皂苷 、齐墩果酸 、β -谷甾醇等;其次
为多糖 、倍半萜类以及人体必需微量元素 Fe、Cu、Zn、
Mn、Ni、Co、Mo等 [ 3, 4] 。现代药理学研究显示 ,珠子参
具有较广泛的药理作用 ,对心血管系统 、血液及造血系
统 、免疫系统 、肿瘤等均有作用[ 5, 6] 。在我们前期研究
中发现珠子参能诱导人肝癌细胞 SMMC-7721凋亡 ,对
H22肝癌小鼠具有良好的抑瘤作用;可减轻 5-FU化疗
后的骨髓抑制 ,并可延长荷瘤化疗小鼠生存时间[ 7-9] 。
近来我们研究发现珠子参对癌痛有非常好的镇痛效
果 ,为了进一步证实其作用 ,本实验通过给予小鼠不同
剂量的珠子参水提取物来进行抗炎镇痛活性实验研
究 ,以期为进一步开展其治疗癌痛的机制研究提供理
论依据 。
1　材料与方法
1.1　药品
　　珠子参购自宜昌市中医院。经宜昌市药检所鉴定为五加
科人参属(PanacisMajorisRhizoma)。阳性对照药阿司匹林片 ,
白云山药业有限公司生产 ,批号 080911。
1.2　动物
　　昆明种小鼠(清洁级), 4周龄 , 体质量(20±2)g, 湖北省实
验动物研究中心提供 ,许可证号:SCXK(鄂)2008-0005。动物
按性别分笼 , 饲养于空调室内 , 室温(22 ±2)℃, 湿度(60 ±
5)%,喂标准颗粒饲料 ,自由饮水和摄食。
1.3　仪器与试剂
　　SARTORIUS-BS124S型电子分析天平(德国赛利多斯股份
有限公司), RE-52型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂生产),
YLS-Q4耳肿打孔器(济南益延科技发展有限公司), YLS-6B智
能热板仪 (济南益延科技发展有限公司), BGZ-140电热鼓风
干燥箱 (上海博讯实业有限公司), 二甲苯 、冰醋酸均为分析
纯 , 由天津化工试剂厂提供;水为蒸馏水。
1.4　方法
1.4.1　供试样品的制备　　珠子参药材烘干称量 , 粉碎成粗
粉 , 蒸馏水浸泡 6 h, 置圆底烧瓶内 , 用 KDM型调温加热套加
热 , 挥发油提取器提取挥发油和芳香成分后 , 转为 50 ℃浸煎
0.5 h提取水溶性成分 , 纱布过滤取汁后 , 药渣加水再煮沸 ,
转为 50 ℃浸煎 , 共煎 3次。药液混合 , 加热浓缩定容 , 终浓度
为 1.0 g/ml, 经 0.22 μm微孔滤膜过滤除菌 , 4 ℃保存备
用 [ 9] 。
1.4.2　抗炎作用
1.4.2.1　耳廓肿胀实验　　取昆明种小鼠 50只 , 雌雄各半 ,
采用完全随机设计分组法分为 5组 , 每组 10只。给药组(珠子
参水提物低 、中 、高剂量组)分别灌胃给予珠子参水煎液 2.50、
5.00、10.00g/kg, 阳性药组灌胃给予阿司匹林 0.20 g/kg,空白
对照组灌胃 20ml/kg蒸馏水。均每日 1次 ,连续给药 7 d。末
次给药 0.5 h后 ,用二甲苯 50 μl涂于小鼠右耳廓的正反面 ,左
耳廓作为对照 , 0.5 h后剪下两耳 ,用直径 8 mm的打孔器在两
耳相同部位打下耳片 , 精密称量 , 以右耳的质量减去左耳的质
量作为耳廓炎性肿胀度 ,计算小鼠耳肿胀度及肿胀抑制率 [ 10] 。
　　肿胀度 =右耳片质量 -左耳片质量
　　肿胀抑制率 =(空白对照组耳肿胀度 -用药组耳肿胀度)/
空白对照组耳肿胀度 ×100%
1.4.2.2　足跖肿胀实验　　取昆明种小鼠 50只 , 雌雄各半 ,
分组 、给药同 1.4.2.1。连续灌胃给予相应药物 6 d, 第 7天每
只小鼠后右足足垫皮下注射 1.0 %角叉菜胶 30 μl致炎 , 并于
致炎后再灌胃给予相应药物 1次 , 次日处死小鼠 , 剪取双后足 ,
精确称量 , 以右足的重量减去左足的重量作为足跖炎性肿胀
度 , 计算小鼠足跖肿胀度及肿胀抑制率 [ 11] 。
　　肿胀度 =右后足跖质量 -左后足跖质量
　　肿胀抑制率 =(空白对照组足跖肿胀度 -用药组足跖肿胀
度)/空白对照组足跖肿胀度 ×100%
1.4.2.3　棉球肉芽肿实验　　取昆明种小鼠 50只 , 雌雄各
半 , 分组 、给药同 1.4.2.1。在乙醚浅麻醉下腹部切口 ,将已高
压灭菌的 10mg棉球植入小鼠右侧腋窝皮下。末次给药 1 h后
处死小鼠 , 取出棉球 , 在 70 ℃烘箱中干燥 2.0 h后称量 ,减去原
棉球质量即为肉芽肿质量 , 计算小鼠肉芽肿干质量和抑制
率 [ 12] 。
　　肉芽肿干质量 =肉芽 70 ℃干燥质量 -棉球质量
　　肉芽肿抑制率 =(空白对照组肉芽肿干质量 -用药组肉芽
肿干质量)/空白对照组肉芽肿干质量 ×100%
1.4.3　镇痛作用
1.4.3.1　醋酸扭体实验　　取昆明种小鼠 50只 , 雌雄各半 ,
采用完全随机设计分组法分为 5组 , 每组 10只。给药组(珠子
参水提物低 、中 、高剂量组)分别灌胃给予珠子参水煎液 2.50、
5.00g/kg和10.00g/kg,阳性药组灌胃给予阿司匹林 0.20g/kg,
空白对照组灌胃 20ml/kg蒸馏水。在给药 1 h后 ,各组小鼠分
别腹腔注射 0.7%醋酸溶液 0.2ml/10 g, 记录小鼠扭体潜伏期
及 15min内出现的扭体次数(以小鼠出现腹部内凹 、躯干与后
肢伸张 , 臀部高起为扭体反应), 计算扭体反应抑制率 [ 13] 。
　　抑制率 =(空白对照组扭体反应次数 -给药组扭体反应次
数)/空白对照组扭体反应次数)×100%
1.4.3.2　热板实验　　选用昆明种雌性小鼠 , 热板(55 ±
0.5)℃,观察小鼠出现舔足的潜伏期 , 作为痛阈指标 , 选择痛阈
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在 5 ～ 20 s的小鼠 50只 , 采用完全随机设计分组法分为 5组。
给药组(珠子参低 、中 、高剂量组)分别灌胃给予珠子参水煎液
2.50、5.00、10.00g/kg, 阳性药组灌胃给予阿司匹林 0.20 g/kg,空
白对照组灌胃 20ml/kg蒸馏水。每组给药前重复测定痛阈值 ,
取 2次痛阈平均值作为正常痛阈值 , 连续给药 7 d, 每天 1次 ,
第 7天给药后 , 在第 0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、 6.0小时测量小鼠
的痛阈值 , 记录结果 ,计算各组痛阈提高百分率 [ 13] 。
　　痛阈提高百分率 =(给药后痛阈值 -给药前痛阈值)/给药
前痛阈值 ×100%
1.5　数据统计分析
　　计量资料以 x±s表示 , 采用统计软件 SPSS13.0进行组间
方差分析 q检验。
2　结果
2.1　对二甲苯致小鼠耳廓肿胀作用的影响
　　与空白对照组比较 , 珠子参水提物低 、中 、高剂量均能明显
减轻二甲苯致小鼠耳廓炎性肿胀(P<0.05, P<0.01), 并且其
抗炎作用随剂量的增加而增强(表 1)。
表 1　珠子参水提物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 (n=10, x±s)
耳片质量(mg)组别 剂量(g/kg)
耳肿胀度
(mg)
肿胀抑制
率(%)左耳 右耳
空白对照组 - 8.10±0.56 15.17±1.27 7.07±1.36 -
珠子参低剂量组 2.50 8.06±0.78 13.53±1.99a 5.47±1.59a 22.6
珠子参中剂量组 5.00 8.11±0.69 13.21±1.75b 5.10±1.53b 27.9
珠子参高剂量组 10.00 8.03±0.69 12.35±1.58b 4.32±1.16b 38.9
阿司匹林组 0.20 7.90±0.73 11.21±1.20b 3.31±0.76b 53.2
a:P<0.05, b:P<0.01,与空白对照组比较
2.2　对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀作用的影响
　　从表 2可以看出 ,珠子参水提物低 、中 、高剂量均能明显减
轻角叉菜胶致小鼠足跖炎性肿胀, 其抑制作用随剂量的增加而
增强;与空白对照组比较 ,具有统计学差异(P<0.05, P<0.01)。
2.3　对小鼠棉球肉芽肿的影响
　　从表 3可见 , 珠子参水提物低 、中 、高剂量均能明显抑制小
鼠棉球肉芽肿 , 其抑制作用随剂量的增加而增强;与空白对照
组比较 , 具有统计学差异(P<0.05, P<0.01), 其中珠子参高
剂量组的抑制率为 20.0%, 几乎与阿司匹林相当。
表 2　珠子参水提物对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影响 (n=10, x±s)
足跖质量(mg)组别 剂量(g/kg)
足跖肿胀
度(mg)
肿胀抑制
率(%)左足 右足
空白对照组 - 114.61±19.60 205.86±18.91 91.25±7.00 -
珠子参低剂量组 2.50 115.96±20.68 195.31±25.52 79.35±13.09a 13.0
珠子参中剂量组 5.00 118.50±16.83 189.48±15.46a 70.98±13.24b 22.2
珠子参高剂量组 10.00 112.20±17.95 179.05±14.05b 67.85±13.28b 25.6
阿司匹林组 0.20 109.39±13.94 163.25±15.33b 53.86±11.89b 41.0
a:P<0.05, b:P<0.01,与空白对照组比较
表 3　珠子参水提物对小鼠棉球肉芽肿质量的影响 (n=10, x±s)
组别 剂量(g/kg) 肉芽肿干质量(mg) 抑制率(%)
空白对照组 - 12.46±1.73 -
珠子参低剂量组 2.50 10.88±1.97 12.7
珠子参中剂量组 5.00 10.58±1.59a 15.1
珠子参高剂量组 10.00 9.97±1.72b 20.0
阿司匹林组 0.20 9.58±1.55b 23.1
a:P<0.05, b:P<0.01,与空白对照组比较
2.4　对醋酸所致小鼠扭体反应的影响
　　从表 4可见 , 珠子参水提物低 、中 、高剂量均有镇痛作用 ,
能延缓冰醋酸所致的小鼠扭体出现时间 , 减少小鼠扭体反应次
数。与空白对照组比较 , 3组无论是延长扭体出现潜伏期 ,还是
降低扭体反应次数均具有统计学差异(P<0.05, P<0.01)。
表 4　珠子参水提物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响 (n=10, x±s)
组别 剂量(g/kg)
潜伏期
(min)
扭体次数
(次 /15min)
扭体反应
抑制率(%)
空白对照组 - 3.10±0.88 53.00±4.92 -
珠子参低剂量组 2.50 4.20±1.03a 31.10±6.12b 41.3
珠子参中剂量组 5.00 4.70±1.16b 28.20±4.34b 46.8
珠子参高剂量组 10.00 5.70±1.34b 21.50±4.84b 59.4
阿司匹林组 0.20 8.90±1.66b 13.50±3.50b 74.5
a:P<0.05, b:P<0.01,与空白对照组比较
2.5　对热板所致小鼠疼痛反应的影响
　　表 5结果显示 , 珠子参水提物低 、中 、高剂量组及阿司匹林
组在给药后均能显著提高痛阈值(P<0.05, P<0.01), 而且作
用时间较为持久;相同时间与空白对照组比较 , 珠子参水提物
不同剂量组及阿司匹林组在提高痛阈值方面具有统计学差异
(P<0.05, P<0.01)。
表 5　珠子参水提物对热板所致小鼠疼痛反应的影响 (n=10, x±s)
给药后痛阈值(s) 给药痛阈提高百分率(%)组别 剂量(g/kg)
给药前痛
阈值(s) 0.5h 1.0h 1.5h 2.0 h 3.0 h 6.0 h 0.5 h 1.0 h 1.5 h 2.0 h 3.0 h 6.0 h
空白对照组 - 15.02±3.53 16.18±3.87　 16.27±3.35　 15.69±4.48　 15.06 ±4.64　 16.33 ±5.28　 15.76±4.82　 7.7 8.3 4.5 0.3 8.7 4.9
珠子参低剂量组 2.5 16.09±4.00 19.47±5.33 19.89±4.31 20.18±5.60 20.66 ±5.47ac 21.01 ±4.53ac 21.37±6.14ac 25.3 23.6 25.4 28.4 30.6 32.8
珠子参中剂量组 5.0 16.11±3.24 20.19±5.10c 20.76±4.93ac 21.34±5.95ac 20.88 ±5.49ac 21.57 ±4.82ad 22.10±4.86bd 25.3 28.9 32.5 29.6 33.9 37.2
珠子参高剂量组 10.0 16.83±4.38 20.76±4.93a 22.05±5.81ad 23.33±3.99bd 24.63 ±8.17bc 24.91 ±6.14bd 25.12±5.50bd 23.4 31.0 38.6 46.3 48.0 49.3
阿司匹林组 0.2 15.97±4.39 22.02±5.67ac 23.07±5.14bd 24.07±4.80bd 25.28 ±5.09bd 26.19 ±5.95bd 27.37±6.14bd 37.9 44.5 50.7 58.3 64.0 71.4
a:P<0.05, b:P<0.01, 与空白对照组比较;c:P<0.05, d:P<0.01, 与给药前比较
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3　讨论
　　炎症反应参与许多疾病的基本病理过程。它与许
多疾病的发生 、发展密切相关 ,是具有血管系统的活体
组织对损伤因子所发生的防御反应 ,临床表现为病变
部位的红 、肿 、热 、痛和功能障碍及间或伴有不同程度
的全身性反应。事实证明 ,炎症反应和疼痛常常相伴
而生 ,并互相影响 。
　　现代药理学研究显示 ,珠子参具有较广泛的药理
作用 ,对心血管系统 、血液及造血系统 、免疫系统 、肿瘤
等均有作用;其主要有效成分为珠子参皂苷和多糖类
化合物 ,具有免疫调节 、抑菌消炎 、抗氧化 、抗衰老 、抗
癌防癌等诸多生理活性 ,结合我们多年来在其抗肿瘤
的研究中 ,发现珠子参对肿瘤及癌性疼痛具有较好的
疗效[ 7-9] ,为了进一步证实这一点 ,我们设计了抗炎镇
痛系列实验 。本实验结果表明 ,珠子参水提物能明显
抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀 、角叉菜胶致小鼠足跖肿
胀的急性炎症反应 ,而且其抑制作用随剂量的增加而
增强;在以肉芽组织增生为指标的小鼠棉球肉芽肿的
慢性炎症模型实验中 ,珠子参水提物能明显抑制棉球
所致小鼠炎症的肉芽增生 ,抗炎实验表明珠子参具有
明显的抗炎作用 。热板法致痛是通过热刺激足部的感
觉神经末梢而使机体产生痛觉 ,类似于急性锐痛。扭
体法致痛是通过化学刺激作用于机体感觉神经末梢 ,
产生痛觉 ,类似于炎性疼痛 /慢性钝痛 。上述两种镇痛
实验结果表明 ,珠子参能明显可延缓醋酸所致小鼠扭
体的出现时间 ,减少扭体反应次数 ,而且随剂量的增加
扭体反应的潜伏期明显延长 、次数明显减少 , 又能明
显延长热刺激小鼠痛阈值 ,说明该珠子参对急性锐痛
和慢性钝痛均有显著的镇痛作用。在我们的实验研究
中 ,珠子参短期抗炎镇痛作用效果比对照药阿司匹林
略差。分析其原因:其一 ,这是中药起效慢 、作用温和
的真实体现 ,珠子参含有皂苷 、多糖 、倍半萜类以及微
量元素等多种成分 ,具有多系统 、多层次 、多途径 、多靶
点的整合调节作用以及作用温和 、安全 、毒副作用小等
特点;其二 ,在用药量方面珠子参低 、中 、高剂量组的灌
胃给药量为 2.50、5.00 g/kg和 10.00 g/kg,分别相当
于临床用量的 1、2、4倍 ,而对照药阿司匹林灌胃给药
量为 0.20 g/kg, 相当于临床用量的几十倍;其三 ,本
研究选用的急性炎性 、疼痛实验模型 ,而西药多具有起
效迅速的特点。基于上述 3个方面的原因 ,出现珠子
参短期抗炎镇痛作用效果比对照药阿司匹林略差也就
可以理解 ,但是这并不影响其广阔的应用前景 。
　　本实验尽管初步证实了珠子参具有良好的抗炎镇
痛作用 , 但其作用机制有待进一步研究。通过对该药
有效成分珠子参总皂苷和多糖分别开展研究 ,检测炎
症局部的花生四烯酸 、前列腺素 、缓激肽等的含量分析
其抗炎作用的机制;通过进行 β -内啡肽 、脑啡肽及强
啡肽等的含量分析 ,探寻其镇痛的机制是涉及外周镇
痛还是中枢镇痛或者是二者兼而有之 。目前此项工作
正在有条不紊地开展 。
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(收稿:2010-06-03;修回:2010-06-22)
(编辑　王小寒)
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第 32卷第 20期
2010年 10月 30日　　　　
第　三　军　医　大　学　学　报
ACTA　ACADEMIAE　MEDICINAE　MILITARIS　TERTIAE　　　　　
Vol.32, No.20
Oct.30　2010