免费文献传递   相关文献

新疆党参多糖对小鼠癌性恶病质的实验研究



全 文 :北方药学 2010年第 7卷第 3期
新疆党参多糖对小鼠癌性恶病质的实验研究
韩丽(山东省济宁市第一人民医院 山东济宁 272111)
摘要目的:研究新疆党参多糖的治疗癌性恶病质的效果并研究其可能的机制。方法:通过 BALB/ c小鼠接
种结肠腺癌 26细胞株,建立小鼠恶病质模型。实验动物分为三组:正常对照组、模型组、多糖组。观察癌性恶
病质小鼠治疗后的生理情况并检测血清 TNF- α、IL- 6水平。结果多糖组小鼠生理状况明显改善,摄食量以
及体重均较模型对照组增加。多糖组小鼠血清 TNF- α、IL- 6水平均较模型组明显降低。结论:新疆党参多糖
具有明显的抗癌性恶病质的作用,其机制可能与其能抑制肿瘤生长、调节血清细胞因子 TNF- α、IL- 6的异
常升高有关。
关键词:新疆党参多糖 恶病质
中图分类号:R281.5 文献标识码:A 文章编号:1672- 8351(2010)03- 0017- 03
Experimental study of polysacchar ides of Sinkiang lanceolata on mice with cancer cachexin
han li
(jining first people,s hospital, shandong jining 272111)
Abstract:Objective To investigate the effect and possible mechanism of Codonopsis clematidea Clar polysaccharide
(CCP)in treating cancer cachexia ( CC) .Methods The animal cancer cachexia model was established by inoculating
mice BALB/ c withmurine colon 26 adenocarcinoma cells. The model mice we re divided into three groups : the normal
mice model group, the random mice model group and CCP model group. Observations were made on the improvement
of physiological conditi-ons (body weight and food intake) of the cachectic mice after treatment. ELISA was used to
detect the serum level of TNF-α、IL- 6. Results the physiological conditions in CCP groups are improved markedly,
body weight and f ood intake in CCP groups are improved at a f aster rate than those of the model mice ,The serum
level of TNF-α、IL- 6 in CCP groups are declined at a faster rate than the randommice model group.Conclusion CCP
has a significant counteractive effect on cancer cachexia . The possible mechanismmay be that it can inhibit the tumor
growth and can decrease the serum concent ration of TNF-α、IL- 6.
Key words: Codonopsis clematidea Clar polysaccharide cachexia
·药理学·
癌性厌食恶病质是一种进行性消瘦的综合征,
在大部分晚期恶性肿瘤病人中都存在此综合征[1],
而以胰腺癌与胃癌的发生率最高[2]。其主要症状有
厌食、早饱、肌力软弱、消瘦等,体重下降是其最明显
也是最重要的结果, 往往这些病人并非死于肿瘤本
身,而是死于严重的体重下降[1]。因此,研究癌性恶
病质的发生、发展机制,探讨抗恶病质的方法以改善
患者的生活质量, 延长患者的生存期具有非常重要
的临床价值。新疆党参多糖具有免疫条件功能,并具
有一定的抗肿瘤活性。为了全面了解新疆党参多糖
的生物学活性,我们利用小鼠恶病质模型,对其在癌
性恶病质方面的治疗作用做了初步研究。
1.材料和方法
1.1 实验动物:无特定病原体 (SPF) 级近交系
BALB/c雄性小鼠,鼠龄6~8周,体重20-25g ,由
南京军区南京总医院动物实验科提供。
1.2 癌株:小鼠结肠腺癌26细胞株购自中国医学科
学院药物研究所。
1.3 药品与试剂:新疆党参多糖由石河子大学药学
院惠赠;小鼠TNF-α、IL-6 ELISA试剂盒购自深圳
17- -
北方药学 2010年第 7卷第 3期
晶美。
1.4 癌性恶病质动物模型的建立及分组
将结肠腺癌26细胞株按要求进行体外培养,待
细胞数扩增到8×108- 8×109时,以胰蛋白酶液消
化,加培养液吹打,使细胞脱离瓶壁形成细胞悬液,
计数、调细胞浓度至1×107-1×108/mL ,于BALB/ c
小鼠腋窝皮下接种结肠腺癌26细胞1×106-1×107
(0.1mL/只) ,共接种40只。随机分为2组:模型对
照组、新疆党参多糖组。同时另选20只小鼠作为正
常对照组,在右侧腋窝皮下注射等量生理盐水。在第
八天时当小鼠明显消瘦,摄食量及饮水量明显减少,
出现厌食、虚弱、衰竭,即进入恶病质状态时开始治
疗。正常对照组及模型对照组每日灌服生理盐水
0.2mL ,多糖组每日灌服新疆党参多糖0.2mL,各组
均连续用药7天。
1.5 观察指标
①体重: 每日上午8 - 10 时用电子称测量每
只小鼠的体重,精确到0.01 g ,各接种肿瘤组小鼠
体重为除去瘤重后的体重。
②摄食量及饮水量:每组小鼠同笼喂养,提供同
一饲料和自来水。每天上午 8 - 10 时记录每
组小鼠摄食总量和饮水总量, 精确到 0.01 g 及
0.01 mL。
③小鼠血清标本收集:实验结束,摘取小鼠眼球
取血, 放置2h左右, 待凝后3000 r/ min离心15
min ,取血清置- 20℃冻存备检。
④TNF-α、IL-6检测严格按照试剂盒说明
操作。
1.6 统计学处理:所有数据输入SPSS10.0软件中进
行统计分析,计量资料用±s表示,组间比较采用
方差分析,显著性水准设为P <0.05。
2. 结果
2.1 一般情况
皮下接种肿瘤细胞后4~5天 , 肿瘤开始可以
触及。8天后长至1.2cm3 大小,小鼠开始出现颈背
部毛色发暗,活动迟缓,摄食量及饮水量明显减少,
出现厌食、虚弱等表现。此后肿瘤增长迅速,至3周
后小鼠开始出现死亡,肿瘤可长至6~8cm3。
2.2 体重变化
接种前两组小鼠体重差异无显著性(P>0.05),8
天后荷瘤小鼠开始出现体重下降,13天后由于肿瘤
迅速增大体重回升。但16天去除肿瘤后,各组小鼠
体重有显著性差异(P<0.01 ,表1)。
2.3 摄食量及饮水量
各组摄食量较正常对照组明显减少 (P <0.05)
,其中模型组累计摄食量最低,多糖组累计摄食量较
模型组明显增加(P<0.05 ,表2) ,各组饮水量比较
无显著性差异。
2.4 血清细胞因子的变化
模型组小鼠血清细胞因子 TNF-α 及 IL-6 水
平均显著高于正常对照(P<0.05)。新疆党参多糖可
以显著降低TNF-α及IL-6 水平(P<0.05,表3).
3 .讨论
恶病质是一切恶性肿瘤的最终结局。60%-80%的
晚期肿瘤患者都存在此综合征,并随进程而加重。既
往的研究结果显示,TNF-α、IL-6 介导了癌症恶病
质的发生[3-7]。通过有目的、有选择性的抑制细胞因
子的合成, 或纠正细胞因子造成的代谢异常是治疗
癌性恶病质的一种有效途径。
新疆党参具有补中益气、健脾益肺的功效,中医
临床常用于治疗脾肺气虚证。现代药理学研究证明,
党参还对一些损伤具有保护作用, 能增强机体免疫
功能。本文结果表明, 新疆党参多糖能够抗癌性恶
病质,明显改善恶病质小鼠一般状况,减轻厌食,提
高小鼠摄食量,抑制恶病质小鼠体重的进一步下降,
同时能显著降低血清TNF-α、IL-6的水平。这可能
与新疆党参多糖能够抑制肿瘤生长, 从而减少肿瘤
细胞分泌TNF-α、IL-6有关,其进一步(下转第 8页)
组别 数量 治疗前 治疗后
正常组
模型组
多糖组
20
20
20
22.83±1.01
23.28±0.96
22.77±1.14
24.17±0.7
20.02±1.84 *
21.75±0.76 * #
表 1 治疗前、后各组体重的比较(x±s)
注:与正常组比较 * P<0.05,与模型组比较 # P<0.05
组别 数量 累计摄食量(g/d) 累计饮水(mL/d)
正常组
模型组
多糖组
20
20
20
66.93±2.74
46.99±2.23 *
58.4±0.78 *#2
68.51±0.77
68.32±0.58
68.66±0.65
表 2 累计摄食量及饮水量的比较(x±s)
注:与正常组比较 * P<0.05,与模型组比较 # P<0.05
组别 数量 TNF-α(μg/ L) IL- 6(nmol/ L)
正常组
模型组
多糖组
20
20
20
2.25±0.13
3.86±0.25 *
2.75±0.21 *#
54.45±2.59
120.88±8.64 *
85.19±2.14 *#
表 3 16天时各组小鼠血清细胞因子 TNF-α及 IL- 6 水平(x±s)
注:与正常组比较 * P<0.05,与模型组比较 # P<0.05
18- -
北方药学 2010年第 7卷第 3期
(上接第 18页) 的作用机制还需要进行深入的研究,
以为新疆党参多糖的开发利用打下坚实的基础。
参考文献
[1] Ma G, Alexandar HR. Prevalence and pathophysiology of
cancercachexia. In : Bruera E , Portenoy RK, eds :
topics in palliativecare , vol2[M] . New York :Oxford
University Press ,1998. 91-29.
[2] Bozzetti F , Migliavacca S , Scotti A et al . Impact
of cancer ,type , site , stage and treatment on the
nutritionalstatusofpatients[J] . Ann Surg ,1982 ,196
(2) :170-179.
[3]高蕾,南清镇,白岚,等.食道癌患者血清可溶性肿瘤坏死因子受
体1测定及临床意义[J].第一军医大学学报,2000,20(3):260-261.
[4]Dülger H,Alici S,Sekero2Glu MR,et al.Serum levels of
leptinandproinflammatorycytokinesinpatientswith gast
rointestinal cancer [J].Clinical Practice,2004,58(6):
5452552.
[5]李从铸,李同度.癌症恶病质的发生及治疗的实验研究[J].中国
肿瘤临床, 1996,23(12):885-888.
[6] Rubin H. Cancer cachexia : its cor relation a nd caus-
es [J].ProcNatil Acad Sci USA,2003,100(9):5384-5389.
[7]李同度,李从铸.肿瘤坏死因子抗体和高聚金葡素对抗癌症恶病
质的初步探讨[J].中华肿瘤杂志,1997,19(3):188-191.
类圆形维管束外韧型。韧皮部较窄。木质部由导管、
木纤维和木薄壁细胞组成。木质部导管与射线呈放
射状排列;木纤维成束存在;木射线由2- 5列细胞
组成。木质部细胞木化程度较弱。 髓部宽广,由类
圆形薄壁细胞组成。髓部有大量石细胞群存在。(见
图一、三。)
根横切面 表皮为近方形细胞组成,外壁稍
厚,有的木栓化可见根毛。下皮层由1- 2列民椭圆
形细胞组成,排列较疏松。皮层宽广,由数列圆形或
椭圆形大型薄壁细胞组成。内皮。层细胞排列紧密,
凯氏点明显。维管束外韧型。韧皮部较窄。木质部由
导管、木纤维和木薄壁细胞组成。木质部五原型,导
管散在;木纤维成束存在;木射线由2- 3列细胞组
成。(见图二、四。)
粉末特征 本品粉末棕褐色。导管多为网纹及
螺纹,直径10-30微米,长80-230微米。纤维多成束
或散在,壁厚,木化。直径30-105微米,长50-580微
米。淀粉粒众多,多为单粒,脐点呈点状,裂缝状或人
字形,直径多为5-30微米。根毛少见,呈圆锥形。石
细胞稀少,呈类圆形或椭圆形,散在。(见图五)
3. 小结
利用性状与显微鉴定方法,以中草药鉴定学的
理论为依据,对缬草性状与显微进行系统研究,制定
了缬草的性状与显微鉴别指标。为控制缬草的质量
提供科学依据。
参考文献
[1]邓君.缬草的研究进展[J].国外医药.植物药分类,2000.(2):53- 5。
[2]杨春荣.毛节缬草的显微构造观察[J].黑龙江医药科学,2003,26
(6):25- 26.
[3]中华人民共和国卫生部药典委员会编《中华人民共和国卫生部药
品标准》[S](蒙药分册)203页.
[4]中国医学百科全书编委员会编《中国医学百科全书(蒙医分卷)》
[M]203页.
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
8- -