全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2012 年
收稿日期：2011－08－11
作者简介：肖凤艳（1977－），女，吉林舒兰人，讲师，在读硕士研究生，研究方向为中药学及中药新产品开发，（电话）15144239405（电子信箱）
gfxfyglz＠163．com。
随着使用化学农药种种弊端的出现，植物源农
药越来越受到人们的重视，中国丰富的中草药资源
是开发植物源农药的理想来源 ［1］。 尽管中草药对病
原菌的抑菌试验常有研究报道，但缺乏对药用植物
病害方面的研究。 薏苡是种传统中药，有着丰富的
药用价值和营养价值。 面对日益增长的国际国内市
场需求，薏苡栽培面积逐年扩大，但其病害也越来
越严重。 本试验在参考大量资料［2－7］基础上，测定了
辛夷、丁香、商陆、甘草、北豆根、萝藦、艾蒿、天南星
8 种中药醇提物对薏苡灰霉病菌的抑制作用， 旨在
为研制和开发防治薏苡灰霉病的新型植物源农药
提供依据。
1 材料与方法
1．1 供试菌种
薏苡灰霉病菌（Botrytis cinerea）从吉林农业科
技学院药用植物园得病寄主薏苡 （Coix lacroyma－
jobi L． var． ma－yuen（Roman．））果实上采用菌丝直
接挑取培养法分离并纯化得到，并经高郁芳教授等
专家确认，PDA斜面培养，4 ℃冰箱保存备用。
8种中药提取物对薏苡灰霉病菌的抑制作用
肖凤艳，高郁芳
（吉林农业科技学院，吉林 吉林 132101）
摘要：采用生长速率法和倍比稀释法测定了 8 种中药提取物对薏苡（Coix lacroyma－jobi L． var． ma－yuen
（Roman．））灰霉病菌（Botrytis cinerea）的生物活性。 结果表明，在浓度为 1．0 g ／ mL 时，丁香（Eugenia aro-
matica Baill）、辛夷（Magnolia biondii Pamp．）、商陆（Phytolacca acinosa Roxb．）提取物对薏苡灰霉病菌抑菌
率达 100％；北豆根（Menispermum dahuricmn DC．）、萝藦［Metaplexis japonica （Thunb．） Mark．］、甘草（Gly-
cyrrhiza uralensis Fisch．）、艾蒿（Artemisia argyi Levl．et Van．）提取物的抑菌率分别为 76．3％、76．3％、69．7％、
33．8％；天南星（Arisaema amurense Maxim．）提取物对薏苡灰霉病菌没有抑制作用；丁香、辛夷、商陆的最
小抑制浓度依次为 0．062 5、0．125 0、0．500 0 g ／ mL。
关键词：中药提取物；薏苡［Coix lacroyma－jobi L． var． ma－yuen （Roman．）］；灰霉病菌（Botrytis cinerea）；抑
制作用；最小抑制浓度
中图分类号：S482．2＋92 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2012）09－1784-02
Inhibitory Effect of Extract from Eight Chinese Herbal Medicines on Botrytis cinerea
of Coix lacroyma－jobi L． var． ma－yuen （Roman．） Stapf
XIAO Feng－yan，GAO Yu－fang
（College of Science and Technology of Agriculture in Jilin， Jilin 132101，Jinlin，China）
Abstract： Fungal inhibitory activity of extracts from 8 Chinese herbal medicines against Botrytis cinerea of Coix lacroyma－jobi
L． var． ma－yuen （Roman．） Stapf was determined by growth rate method and double dilution method． Results showed that at
the concentration of 1．0 g ／ mL， the extracts of Eugenia aromatica Baill， Magnolia biondii Pamp．， Phytolacca acinosa Roxb．
had 100％ inhibition rate． The extracts of Menispermum dahuricmn DC．， Metaplexis japonica （Thunb．） Mark．， Glycyrrhiza u-
ralensis Fisch．， Artemisia argyi Levl．et Van． had 76．3％ ， 76．3％ ， 69．7％ ， 33．8％ inhibition rate respectively． Arisaema a-
murense Maxim． had no inhibition effect． The MIC of the extracts of Eugenia aromatica Baill， Magnolia biondii Pamp．， Phyto-
lacca acinosa Roxb． were 0．062 5 g ／ mL， 0．125 0 g ／ mL， 0．500 0 g ／ mL， respectively．
Key words： Chinese herbal medicine extracts； Coix lacroyma－jobi L． var． ma－yuen （Roman．） Stapf； Botrytis cinerea； inhibitory
effect； minimum inhibition concentration．
第 51卷第 9期
2012年 5 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 51 No.9
May．，2012
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2012.09.040
第 9 期
1．2 供试中药材
辛夷（Magnolia biondii Pamp．）花蕾、丁香（Euge-
nia aromatica Baill）的花蕾、商陆（Phytolacca acinosa
Roxb．）的根、甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch．）的根
及根茎、北豆根（Menispermum dahuricmn DC．）的根
茎 、萝藦［Metaplexis japonica （Thunb．） Mark．］的全
草、艾蒿（Artemisia argyi Levl．et Van．）的叶、天南星
（Arisaema amurense Maxim．） 的块茎 8 种中药饮片
购自国营中药店，粉碎成粒度为 425μm的粉末备用。
1．3 仪器与试剂
YX－400 智能型全自动不锈钢立式电热高压灭
菌锅，LDEX-40SCⅠ型立式自动电热压力蒸汽灭菌
器，LRH-280 型微电脑控制生化培养箱， 无菌操作
台，回流提取器；乙醇（国产分析纯），无菌水。
1．4 方法
1．4．1 中药提取物母液的制备 取上述 8 种中药
材的粉末各 20 g，分别用 300 mL 的 80％乙醇（体积
分数，下同）浸润 0．5 h 后加热回流提取 2 次，每次
2 h，滤液合并后用旋转蒸发仪进行浓缩，得到辛夷、
丁香等 8 个中药提取物，再用 95％乙醇定容，使溶
液的质量浓度为 1 g ／ mL（即 1 mL 提取物中含有 1 g
干中药材样品），保存于 4 ℃的冰箱内，备用。
1．4．2 中药提取物抑菌活性的测定［8］ 采用生长速
率法， 以浓度为 1 g ／ mL供试中药材提取物样品，测
定其对薏苡灰霉病菌的抑制作用，对照组加入相同
量的 95％乙醇，将以上 8 种中药提取液制成含药培
养基，用直径为 0．6 cm 的灭菌打孔器取活化并均匀
生长在 PDA平板中的薏苡灰霉病菌菌盘，每处理重
复 3 次，25 ℃条件下培养 6 d 后用十字交叉法测量
薏苡灰霉病菌菌落直径，并计算抑菌率；对抑菌率
较高的中药样品再进行最小抑制浓度测定，按倍比
稀释法稀释至 25共 6个浓度， 重复 3 次，25 ℃条件
下培养 5 d 后， 以病菌不生长的最低浓度为最小抑
制浓度。
抑菌率＝（对照菌落直径－处理菌落直径） ／ （对
照菌落直径－6）×100％
2 结果与分析
2．1 中药提取物对薏苡灰霉病菌的抑制作用
由表 1 可知，除天南星外的其他 7 种中药提取
物都对病原菌的生长产生了抑制作用， 其中丁香、
辛夷和商陆的提取物对薏苡灰霉病菌的抑制效果
最好，浓度为 1 g/mL 样品抑菌率均达到 100.0％；北
豆根、 萝藦和甘草提取物也有较好的抑菌效果，抑
菌率分别为 76．3％、76．3％、69．7％；艾蒿的抑制效果
较差，抑菌率为 33．8％；天南星提取物对薏苡灰霉病
菌无抑制作用。
由表 2可知， 丁香抑菌效价达到 1∶16， 即 MIC
为 0．062 5 g ／ mL； 辛夷抑菌效价为 1∶8， 即 MIC 为
0．125 0 g ／ mL； 商陆抑菌效价为 1∶2， 即 MIC 为
0．500 0 g ／ mL。由此表明，8种中药乙醇提取物中，丁
香对薏苡灰霉病菌抑制效果最好， 在 0．062 5 g ／ mL
浓度下可以完全抑制薏苡灰霉病菌菌丝的生长，辛
夷在 0．125 0 g ／ mL 浓度下可以完全抑制病菌生长。
3 结论与讨论
研究结果表明， 在供试样品的浓度为 1 g ／ mL
时，丁香、辛夷、商陆的醇提取物对薏苡灰霉病菌的
抑制效果最好，抑菌率均可达到 100.0%；北豆根、萝
藦和甘草的醇提物都体现出较好的抑制效果，抑菌
率分别为 76．3％、76．3％、69．7％；而天南星的醇提取
物对薏苡灰霉病菌没有抑制作用。 稀释后的丁香、
辛夷、 商陆提取液对培养 6 d 的灰霉菌的最小抑制
浓度分别为 0．062 5、0．125 0、0．500 0 g ／ mL， 有望将
这 3 种中药提取物进一步研究成为高效无毒的植
物源杀菌剂。
中药化学成分复杂，本试验仅对辛夷、丁香、商
陆、甘草、北豆根、萝藦、艾蒿、天南星 8 种中药的乙
醇粗提物做了抑菌试验，没有对其他溶剂（如水、甲
醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚）的提取物进行
抑菌试验；另外，没有进一步对除天南星外的其他 7
种中药尤其是丁香和辛夷醇粗提物进行分离分析，
表 2 不同中药提取物对薏苡灰霉病菌的最小抑制浓度
中药材
丁香
辛夷
商陆
1∶1
-
-
-
MIC//mg/L
0.062 5
0.125 0
0.500 0
1∶2
-
-
-
1∶4
-
-
+
1∶8
-
-
+
1∶16
-
+
+
1∶32
+
+
+
效价
注：“-”表示无薏苡灰霉病菌生长，“+”表示有薏苡灰霉病菌生长。
表 1 不同中药提取物对薏苡灰霉病菌的抑制作用
提取物
辛夷
北豆根
艾蒿
天南星
甘草
商陆
丁香
萝藦
95%乙醇（CK）
菌落直径//mm
6.0
12.8
25.0
34.7
14.7
6.0
6.0
12.8
34.7
抑菌率//%
100.0 aA
76.3 bB
33.8 cC
0.0 dD
69.7 bB
100.0 aA
100.0 aA
76.3 bB
注：表中不同大、小写英文字母分别表示差异达极显著和显著水
平。
（下转第 1788页）
肖凤艳等：8 种中药提取物对薏苡灰霉病菌的抑制作用 1785
湖 北 农 业 科 学 2012 年
（责任编辑 王贵春）
以筛选出其抑菌活性的有效部位或有效单体化合
物；本试验仅对薏苡灰霉病菌的菌丝体进行抑菌率
测定，没做对孢子萌发和形成的影响试验；本试验
只针对室内的抑菌活性进行了研究，没做田间抑菌
试验（如田间试验的防治效果如何，田间与室内抑
菌试验效果是否一致；对筛选出抑菌活性强的提取
物制成何种剂型能被植物有效吸收，使用后是否能
完全降解等）， 因此今后需要针对上述情况进一步
加以试验研究，以期为开发植物源农药提供更加详
实的理论指导。
参考文献：
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菌活性的研究［J］． 植物保护，2009（3）：74－75．
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［7］ 杨 帮，丁 伟，赵志模，等．美洲商陆和姜黄提取物抑菌活性的
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抑制作用［J］． 农药，2008，47（6）：452－453．
（上接第 1785页）
用不同体积分数的乙醇浸提时的抑菌率可知，当乙
醇体积分数为 80％、浸提物浓度为 0．06 g ／ mL 时，抑
菌率达到最大值， 为 63．45％， 而乙醇体积分数为
90％、浸提物浓度为 0．04 g ／ mL 时抑菌率最小，仅为
39．99％。 由此可见，并非浸提时乙醇体积分数越高
浸提物抑制枯草芽孢杆菌的效果就最佳。
3 讨论
3．1 艾蒿的乙醇浸提物抑菌机制
通过对乙醇浸提液抑菌试验和水浸出液抑制
细菌试验结果 ［5］的比较发现，乙醇浸出液对细菌的
抑制作用明显优于水浸出液，可能与艾蒿含有黄酮
类、桉叶烷类、三萜类、醇类和脂类等主要化学成分
有关［6］，这些成分具有一定的抑菌功能。由于这些成
分大部分易溶于乙醇，因而其乙醇浸提液抑菌活性
更强。 但是，具体哪种物质属于抑菌的主要活性成
分有待于深入研究。
3．2 滤纸片法测抑菌作用
滤纸片法和测 OD 值法［5］测定浸提物的抑菌效
果具有较好的一致性，艾蒿提取液对菌落的抑菌率
随艾蒿提取液浓度的变化而变化， 呈正相关关系。
滤纸片扩散法是借助于浸提液在滤纸上的扩散作
用抑制了枯草芽孢杆菌在扩散区域内生长，从而形
成抑菌圈的。 该方法具有直观、设备要求简单的优
点，但是抑菌圈的大小可能也会因溶剂扩散程度的
不同而产生差异。 因此，在一定程度上存在误差和
局限性，此法更适于做定性分析［7］。
3．3 艾蒿浸提物的开发前景
由试验结果可知， 艾蒿浸提物对常见的细菌
（枯草芽孢杆菌）有抑制作用。 野生艾蒿分布广泛，
资源丰富。 艾蒿提取物和多数植物源农药一样，具
有高效、低毒、低残留、高选择性及对高等动物安全
等特点。 因此，艾蒿浸提液中的抑菌活性物质为开
发新型农用杀菌剂提供了广阔的应用前景［8］。
参考文献：
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展［J］． 时珍国医国药，2006，17（2）：174－175．
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（责任编辑 王贵春）
表 2 不同艾蒿浸提物浓度对枯草芽孢杆菌的抑制
作用差异显著性分析
浸提物浓度
g/mL
0.06
0.05
0.04
60%
1.83 aA
1.82 aA
1.60 aA
70%
2.04 aA
1.87 aA
1.89 aA
80%
2.19 aA
1.91 bB
1.74 cB
90%
1.64 aA
1.60 aA
1.33 bB
抑菌圈直径//cm
注：同列数据后不同小写字母表示在 5%水平差异显著，不同大
写字母表示在 1%水平差异显著。
表 3 不同艾蒿浸提物浓度对枯草芽孢杆菌的抑菌率
浸提物浓度
g/mL
0.06
0.05
0.04
60%
58.48
55.56
51.28
70%
60.86
57.65
57.15
80%
63.45
58.14
54.13
90%
51.34
50.00
39.99
抑菌率//%
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
1788