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分光光度法测定大飞扬草中总黄酮的含量



全 文 :中国药物与临床 2010 年 5 月第 10 卷第 5 期 Chinese Remedies & Clinics,May 2010,Vol.10,No.5
大飞扬草为大戟科大戟属植物大飞扬草的干燥全草,在
我国南方大部分地区均有分布,具有清热、解毒、杀虫止痒等
功效,外用于治疗皮炎、湿疹、疥癣、皮肤瘙痒、外伤出血等[1],
在南方民间广为流传。 据研究,其主要化学成分为黄酮类、酚
类、三萜类等[2],从大飞扬草中分离出来的栎素(quercitrin)具
有止泻作用[3]。药理试验表明,大飞扬草水煎剂对金黄色葡萄
球菌、绿脓杆菌均有抑制作用,临床上用于治疗急性肠炎、菌
痢及慢性气管炎。 有关其含量测定未见报道,本文采用可见
分光光度法建立了大飞扬草总黄酮的含量测定,为合理开发
大飞扬草提供质量评价方法。
1 仪器与试剂
UV—1601 型紫外可见分光光度计(日本岛津);大飞扬
草采自本地(鲜品洗净后晒干,置干燥器中备用);芦丁对照
品(中国药品生物制品检定所,批号:100080-200306);其他
试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备:精密称取减压 120 ℃干燥至恒重的
芦丁对照品 10 mg,置 50 ml 容量瓶中,加入 60%乙醇溶液适
量,微热使溶解,放冷,60%乙醇溶液定容摇匀,得到浓度为
0.2 mg/ml 的对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备:将大飞扬草粉碎,过 40 目筛,精密
称取粉末 1.0 g,置 100 ml 圆底烧瓶中,加入石油醚回流提取
至无色,弃去石油醚,残渣挥干,加入 60%乙醇 25 ml,水浴回
流提取 2 h,共提取 3 次,每次提取后静置,吸取上清液移入
100 ml 容量瓶中,加 60%乙醇溶液至刻度,摇匀待测。
2.3 测定波长的选择: 吸取对照品溶液及供试品溶液各 2
ml,按照标准曲线项下方法显色后,于 400~600 nm 波长范围
内扫描, 结果对照品溶液与供试品溶液在 510 nm 波长处有
最大吸收,故选取 510 nm 作为测定波长。
2.4 标准曲线制作:精密吸取对照品溶液 0、0.5、1.0、2.0、3.0、
4.0、5.0 ml 置于 10 ml 容量瓶中,加 60%乙醇至 5.0 ml。加 5%
NaNO3 溶液 0.5 ml,放置 6 min,再加 10%Al(NO3)30.5 ml,放
置 6 min,加 4% NaOH 2.0 ml,加 60%乙醇至刻度,摇匀,放置
分光光度法测定大飞扬草中总黄酮的含量
潘代勇
在头孢哌酮/舒巴坦配伍稳定性研究的方法学验证中,笔
者曾采用了三乙胺醋酸溶液(冰醋酸 17 ml 与三乙胺 13.9 ml
置于 100 ml 量瓶中,加水稀释至刻度)-乙腈-1 mol/L 醋酸溶
液-水(20∶140∶5∶835)[3]流动相,所得的峰形及分离效果欠佳,
后又调整流动相其中各成分比例,效果仍不好,后采用 0.005
mol/L 四丁基氢氧化铵-乙腈(70∶30),用 1.0 mol/L 的磷酸调
pH 到 3.6,仍不理想,最终采用 0.005 mol/L 四丁基氢氧化铵-
乙腈(70∶30),用 1.0 mol/L 的磷酸调 pH 到 3.0,作为流动相,
效果较好。
4.2 3 种药物的配伍稳定性:注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠与
转化糖电解质注射液配伍后 8 h 内溶液澄清透明, 室温条件
下无浑浊、沉淀及气体产生,pH 变化不大且头孢哌酮钠、舒巴
坦钠的含量在配伍后 8 h 内均在 97%以上, 表明两种药物在
临床上可以配伍使用。
注射用阿莫西林钠舒巴坦钠与转化糖注射液配伍后,0 h
时 pH 值为 7.80,5 h 内渐变为 7.70, 配伍液澄清透明, 无浑
浊、沉淀或气体产生。但配伍液中阿莫西林含量变化较大,5 h
时降低为原来的 87.6%,提示配伍液稳定性较差,临床不宜配
伍;如果必须使用,请现用现配并在 2 h 内用完。
头孢唑肟钠与转化糖电解质注射液配伍后在 0.5 h 内出
现白色浑浊,并随时间增长浑浊增多,产生沉淀。 因此,实验
结果显示, 头孢唑肟钠与转化糖电解质注射液存在配伍禁
忌;两种药物不能序贯输注,临床上联合使用治疗时,应在两
者间隔一组液体或更换输液管,以防发生反应[4,5]。
在我国糖类输液品种单一,葡萄糖输液一直占据着主导
地位。 葡萄糖输液在临床上虽具有重要的作用,但它也有许
多缺点,例如:输注后患者血糖波动较大、葡萄糖经尿流失多、
对有胰岛素抵抗的患者无能为力等。 转化糖电解质输液是果
糖与葡萄糖按 1∶1 的比例混合而成的液体。 作为胃肠外营养
剂和药物稀释剂,除了普通的补水、供能作用外,在安全性及
防止水、电解质的流失上具有明显的优势。 故对于合并细菌
感染的患者使用上述药物以转化糖电解质注射液作为载体
进行静脉滴注,在临床上具有很好的应用前景。
参 考 文 献
1 金慧萍,吴敏,张晓芬. 注射用头孢哌酮钠在 3 种输液中的含
量和杂质分析.安徽医药,2006,10(1):69-70.
2 郭美华,马满玲,马妍妍 .不同厂家注射用头孢哌酮/舒巴坦的
定量分析.医药导报,2006,25(8):831-832.
3 张哲峰,杨更亮,梁贵键,等 .注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠的
HPLC 分析及质量研究.中国药学杂志,2003,38(6):462.
4 赫爱平,王微,仲维贵,等.注射用阿莫西林/舒巴坦含量测定方
法的研究.中国药品标准,2000,1(3):50.
5 卢红文,钱美英.RP-HPLC 法考察 3 厂家注射用阿莫西林/舒巴
坦在生理盐水中的稳定性. 实用医技杂志,2006,13 (4):494-
496.
(收稿日期:2010-01-05)
作者单位:545002 柳州医学高等专科学校第一附属医院药剂科
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中国药物与临床 2010 年 5 月第 10 卷第 5 期 Chinese Remedies & Clinics,May 2010,Vol.10,No.5
15 min。 以第 1 瓶为空白溶液,于 510 nm 波长处测定吸光度
值 (A), 将 A 对浓度 C 进行回归得到线性方程 A=0.0095C+
0.0165,r=0.9991 结果显示在 10~100 μg/ml 范围内浓度与吸
收度呈良好的线性关系。
2.5 精密度实验:精密量取供试品溶液 6 份,按 4 项下方法
显色后于 510 nm 波长处测定其吸光度, 以吸光度值计算,
RSD 为 1.46%,表明本法测定精密度良好。
2.6 稳定性实验:精密吸取 2 ml 对照品溶液,按 4 项下方法
显色后,每间隔 10 min 测定其吸光度,结果显示对照品溶液
在 60 min 内稳定,以吸光度值计算,RSD 为 0.97%。
2.7 加样回收率实验:精确称取已知总黄酮含量的大飞扬草
粉末 1.0 g,加入一定量的芦丁对照品,同法进行提取、测定,
计算得平均回收率为 99.26%(n=6),RSD=2.78%。
2.8 样品总黄酮含量测定: 取大飞扬草供试品溶液 5 份,经
2.4 项下方法显色后于 510 nm 波长处测定吸收度,代入回归
方程计算,结果见表 1。
3 讨 论
黄酮类化合物广泛存在于植物界中, 具有多种生物活
性,是多种中草药的有效成分。 大飞扬草在我国分布广泛,资
源十分丰富,具有较高的药用价值,黄酮类化合物为其主要
活性成分之一,本实验采用分光光度法对其含量测定做了初
步的研究,有利于大飞扬草的开发与利用。 本法采用 60%乙
醇做提取剂,既避免了甲醇毒性的危害,又降低了成本,经石
油醚脱脂后减少了干扰,方法简便,结果可靠,重现性好。
参 考 文 献
1 章佩芬, 罗焕敏. 飞扬草药理作用研究概况. 中药材,2005,28
(5):437-438.
2 陈玲. 飞扬草叶中的多酚类成分研究. 中国中药杂志,1991,18
(1):38.
3 蔡幼清. 飞扬草提取物的止泻作用和一种活性黄酮类成分的
分离.国外医学中医中药分册,1994,16(3):38.
(收稿日期:2009-10-23)
表 1 大飞扬草中总黄酮含量(%)
吸光度
样品含量
(%)
平均含量
(%)
RSD
(%)
0.6634 3.40
0.6513 3.34
0.6692 3.44 3.37 1.70
0.6576 3.37
0.6416 3.29
序号 例数
1 5
2 5
3 5
4 5
5 5
·作者·编者·读者·
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结果和数据,有什么新发现,说明其价值及局限。叙述要具体、准确。并需给出结果的置信值、统计学显著性检
验的确切值。 ④结论( conclusion) :简要说明经验证、论证取得的正确观点其理论价值或应用价值,是否可推
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本刊编辑部
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