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草血竭酚类物对大鼠组织和红细胞抗脂质过氧化作用的研究



全 文 :4 讨 论
实验结果表明 , 6条健康家犬服用国产和进口
甲氧吡丁苯片剂后 ,它们的体内过程基本相似 ,其药
代动力学参数也相近 , cmax , tmax , AUC 分别经方差
分析法 ,双单侧检验法进行统计学分析[ 3] ,结果显
示二者均无显著性差异(P>0.05)。本实验中甲氧
吡丁苯国产片和进口片在犬体内的分布相半衰期
(t 1/2α)分别为(0.20±0.17)h和(0.20±0.15)h ,消
除半衰期(t1/2β)分别为(3.75±0.25)h 和(3.86±
0.25)h ,说明该药进入犬体内分布和消除均较快 ,
AUC国产片剂为(97.94±25.63)mg·h·L-1;进口
片剂为(99.13±23.22)mg·h·L-1 ,但统计学无显著
差异(P>0.05),国产片对进口片的相对生物利用
度为 98.57%,表明二者具有生物等效性 。
参考文献
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(收稿:1997-09-09)
草血竭酚类物对大鼠组织和红细胞抗脂质过氧化作用的研究
张振明 刘玉萍1 袁逸铭2(兰州 730000甘肃省人民医院药剂科;1 甘肃省人民医院老年病研究所;2 兰州医学院第二附属医院二院
耳鼻喉科)
  草血竭为传统中草药 , 有破瘀调经 、消食及止血功效。
草血竭酚类物(Phenols trom rhizoma poly goni po lecei , PRPP)
是将草血竭经乙醇冷浸提取 ,乙酸乙酯回流精制 、硅胶柱层
析分离而得到的棕色体物。作者用 OH 生成系统诱发大鼠
心 、肝 、肾与浆脂质过氧化 , TBA 比色法测 MDA 生成 , 用酵
母多糖 A刺激大鼠中性白细胞;NBT 还原法测 O -2·生成;用
H2O 2诱发大鼠红细胞氧化溶血;分光光度法测溶血度 ,探讨
草血竭酚类物的抗脂质过氧化和清除氧自由基作用。
1 实验方法与结果
1.1 酵母多糖 A 的配备 酵母多糖 A 用大鼠血清悬浮浓
度为 50g·L-1 , 37℃孵育 30min ,离心 10min , 300r·min-1 , 用
0.15mmol·L-1缓冲盐水洗涤后沉淀悬浮 , 低温贮存备用。
1.2 中性白细胞的制备 Wistar 大鼠 , ♀♂不拘 , 体重(176
±14)g , ip液体石蜡 10ml , 20h 断头处死 ,用 Hanks液 100ml
抽洗出腹腔渗出液 ,离心 10min , 500r·min-1用 Hanks 液洗涤
沉淀离心并悬浮 ,调中性白细胞计数为 1×106L -1 , 低温贮存
备用。
1.3 红细胞的制备 Wistar大鼠断头取肝素抗凝全血 , 离
心6min 后 2000r·min-1弃血浆 , 所剩红细胞用 NaCl洗涤离
心并悬浮 、调红细胞浓度为 5g·L-1 ,贮存备用。
1.4 PRRR对自发和 OH 诱发大鼠肝匀浆脂质过氧化的影
响 取大鼠肝脏用 T ris-KCl缓冲液配成 50g·L-1组织匀浆。
1ml反应体积内加入 12.5 ~ 100μg·ml-1 PRPP , 37℃孵育
10min , 加入诱发剂(Fe++VC)继续孵育 , 用 TBA 比色法测
丙二醛(MDA)含量。肝匀浆孵育 30min 与 120min 时自发
M DA 生成量各为(74.35±3.79)nmol·L -1和(91.61±8.33)
nmmol· L-1。 1.56 ~ 100μg·ml-1 PRPP 明显抑制自发肝
M DA 生成 ,其 IC50为 13.2μg·ml-1 。肝匀浆诱发后丙二醛
(MDA)增加 2.6 倍 , PRPP 25 ~ 100μg·ml-1显著抑制诱发肝
M DA 生成 ,其 IC50为 62.6μg·ml-1 , 呈明显浓度依赖性。
1.5 PRPP 对·OH 诱发大鼠心肾匀浆脂质过氧化的影响 
心肾匀浆诱发后 MDA 量分别增加 2.2 倍及 2 倍。 12.5 ~
100μg·ml-1明显抑制诱发心肾 MDA 生成 , 其 IC50分别为
635μg·ml-1及 92.6μg·ml-1 ,呈明显浓度依赖性。
1.6 PRRP对大鼠中性白细胞生成 O-2 的影响 1ml反应
体积中含 4×106mg·ml-1酵母多糖 A , 12.5 ~ 100μg·ml-1
PRPP , 37℃孵育 35min ,加 0.5mol·L-1HCl5ml终止反应 , 离
心 10min , 3000r·min-1用 3ml吡淀悬浮沉淀 , 置沸水浴反应
20min , 于 515nm 滤长处测光密度 , 用 NBT 还原物甲 的反
映O -2·的变化。中性白细胞用酵母多糖 A 诱导后 O-2·生成量
增加 1.6倍 , 12.5 ~ 100μg·ml-1PRPP使甲 量明显升高 , 表
明 PRPP 对酵母多糖 A 制激中性白细胞生成 O-2·有激活作
用。
1.7 PRPP 对 H2O2 诱发大鼠红细胞氧化溶血的影响 1ml
反应体积含 5g· L-1红细胞 , 100mmol·L-1 H2O2 , 12.5 ~
100μg·ml-1PRPP , 37℃温育 1h , 离心6min , 3000r·min-1上清
液于 415nm 波长处测吸光密度。 PRPP对 H2O2 诱发红细胞
氧化溶血有显著的抑制作用 ,其 IC50为 34.5μg·ml-1 ,呈明显
浓度依赖性。
2 讨 论
PRPP 抑制 Fe2++VC 诱导的脂质过氧化物 MDA生成 ,
提示该有效部分对OH 有清除作用;同时以能对抗 H2O 2所致
溶血 ,提示该物也能抑制 H2O 2引起的生物膜过氧化;但对酵
母多糖 A 刺激中性白细胞生成 O -2·有激活作用 , 提示 PRPP
有协同本反应体生成 O-2·的作用 , 而对生物体系中 O-2·影响如
何则有待进一步探讨。 氧自由基尤其·OH 是导致肝肾缺血
损伤及心脑组织缺血———再灌注损伤的关键因素。 结果提
示 PRPP对·OH 有清除作用 ,可能对上述损伤有防护作用。
(收稿:1998-02-26)
·479·中国药学杂志 1999年 7月第 34卷第 7期              Chin Pharm J , 1999 July , Vol.34 No.7