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Enhanced Carotenoids Production by a Rhodotorula sp. Under Stress Conditions

逆境对红酵母发酵生产类胡萝卜素的促进作用



全 文 :·研究报告·
生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2013年第1期
类胡萝卜素(Carotenoids)是一类呈黄色、橙
红色或红色的多烯类化合物,主要包括 β-类胡萝卜
素、虾青素、叶黄素和蕃茄红素等[1-3]。类胡萝卜
素广泛存在于细菌、藻类、真菌和植物中,具有重
要的生理保健功能,如吸收光能、保护光合作用系
统、屏障紫外线、清除自由基以及稳定色素蛋白的
功能构型等[1-4]。
国内外已报道的类胡萝卜素高产菌株主要有三
孢布拉氏霉(Blakesle a trispora)和红酵母(Rhodotorula
sp.)。三孢布拉氏霉发酵产率虽然较高,但存在发
收稿日期 :2012-07-02
作者简介 :史馨怡,女,研究方向 :发酵工程 ;E-mail: shixinyi9820@163.com
通讯作者 :陈欣,男,讲师,博士,研究方向 :资源微生物 ; E-mail: chenxin25250134@sina.com
逆境对红酵母发酵生产类胡萝卜素的促进作用
史馨怡  刘丹  陈黎黎  陈欣
(江苏科技大学生物与化学工程学院,镇江 212018)
摘 要 : 类胡萝卜素广泛存在于细菌、藻类、真菌和植物中,是一类具有重要的生理保健功能的呈黄色、橙红色或红色的
多烯类化合物。考察了不同逆境条件,包括低温、低温处理时间、酸处理及高浓度盐处理对促进一株红酵母(Rhodotorula sp.)发
酵生产类胡萝卜素的影响,并利用响应面分析方法研究了其交互作用。结果表明,低温,酸处理、高浓度盐的影响以及低温和酸
处理、低温和高浓度盐以及低温处理时间和酸处理的交互作用对类胡萝卜素产量的影响均显著,在温度为 15℃处理 48 h,pH3.5,
NaCl 浓度为 2 mol/L 的条件下,类胡萝卜素最高产量达到 31.04 mg/L,说明逆境对红酵母发酵生产类胡萝卜素具有促进作用。
关键词 : 红酵母 类胡萝卜素 逆境 响应面分析
Enhanced Carotenoids Production by a Rhodotorula sp.
Under Stress Conditions
Shi Xinyi Liu Dan Chen Lili Chen Xin
(School of Biological and Chemical Engineering,Jiangsu University of Science and Technology,Zhenjiang 212018)
Abstract:  Carotenoids, displaying yellow, orange, and red color, are a series of polyene compounds with important physiological
healthy function. They are found widely in microorganisms, including algae and plants. The effects of four factors, including low temperature,
treatment time at low temperature, acid treatment and high-concentration salt treatment, on the carotenoids production by a Rhodotorula sp. were
investigated. Based on this, response surface analysis method was used to elucidate the interaction of the four factors. The results showed that
the effects of low temperature, acid, high-concentration salt treatment and the interactive effects of low temperature-acid, low temperature- high-
concentration salt, treatment time at low temperature-acid on carotenoids production are significant. The maximum carotenoids yield of 31.04 mg/L
was obtained at the low temperature of 15 ℃ for 48 h, with pH 3.5 and 2 mol/L NaCl, which indicates that the carotenoids production can be
enhanced under stress conditions.
Key words:  Rhodotorula sp. Carotenoids Stress conditions Response surface analysis
酵技术工艺复杂、发酵周期长、成本高等缺点 ;而
红酵母生长对营养要求较简单,发酵工艺易于调控,
培养周期短,菌体可综合利用,且属于我国饲料行
业 12 种确认的饲用微生物,发酵过程易于产业化,
因而具有较高的应用价值和开发前景[1]。目前对
红酵母发酵生产类胡萝卜素的研究主要集中在对菌
株筛选、培养基和发酵条件的优化以及类胡萝卜素
的分离提取等方面[1,5-7],菌体中类胡萝卜素含量
可达到 35 mg/g DCW[8],发酵的最高产量也已超过
100 mg/L[7]。近年来利用代谢工程改造菌株进行发
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2013年第1期192
酵生产类胡萝卜素的报道也逐渐增多[9],而利用逆
境条件增加类胡萝卜素发酵的研究较为少见。研究
发现,酵母细胞中类胡萝卜素的含量会受到培养环
境的影响,南极嗜冷菌在 5℃培养时类胡萝卜素含
量比在 25℃培养时有明显增加[10,11],这是因为在
低温环境中,类胡萝卜素与膜结合可以增加膜的流
动性[2,12, 13];在酸处理条件下,酵母细胞利用胞内
大量的氨基酸合成胁迫响应蛋白,造成胞内氨基酸
匮乏,而胞内氨基酸的匮乏会引起胞内氧自由基的
积累[14],酵母细胞能通过增加类胡萝卜素的合成来
消除胞内氧自由基[2,15];细胞中的类胡萝卜素还能
清除活性氧(Reactive oxygen species,ROS)或通过
与其他抗氧化剂如维生素 E 或维生素 C 的协同作用,
增加其在干旱、高盐等环境中的抗逆性[16]。
本文研究了低温、低温处理时间、酸处理和高
盐处理及其交互作用对一株红酵母发酵生产类胡萝
卜素影响,旨在为红酵母对低温、高盐和酸处理的
生理应答机制的解析提供理论依据,同时对利用红
酵母发酵生产类胡萝卜素也具有一定的指导意义。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株与试剂 红酵母(Rhodotorula sp.),江
苏科技大学生物工程实验室保存。葡萄糖、蛋白胨、
酵母膏 :分析纯,均为国药集团化学试剂有限公司。
1.1.2 仪器与设备 SW-C-J-1F 超净工作台(苏州
安泰空气技术有限公司);310P-03 精密台式 pH 计
(上海杰晟科学仪器有限公司);YXQ-SC41-280A 手
提式压力蒸汽灭菌锅(上海核子仪器厂);UV-9100
紫外 / 可见光分光光度计(北京瑞利分析仪器公司);
TGL-16G 高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂);
202-00 干燥箱(北京化玻联医疗器械有限公司);
FLY-211B 卧式大容量全温培养振荡器(上海申贤恒
温设备厂)。
1.2 方法
1.2.1 培养基 斜面培养基(g/L):YEPD 培养基,
酵母膏 10,蛋白胨 20,葡萄糖 20,琼脂粉 2%(W/
V),pH 自然,121℃,15 min 灭菌。发酵培养基 :
同斜面培养基。
1.2.2 不同逆境条件处理方法 在 500 mL 的三角瓶
中配制发酵培养基,每瓶装液量为 100 mL,用接种
环接入斜面培养基活化的红酵母菌株 1 环,于 30℃
摇床 200 r/min 振荡培养。对低温(15℃)处理不同
时间的试验开始于(120-t)h,其他试验于培养菌浓
度至 OD600nm=2.0 时进行。分别考察不同低温(控制
T=5、10、15、20、25、30℃直至发酵结束)、低温
(15℃)处理不同时间(t=12、24、36、48、60、72 h)、
高盐处理(一次性加入灭菌的 NaCl 使其在发酵液中
的浓度分别为 1、2、3、4、5 mol/L),以及酸处理(一
次性加入 2 mol/L 的 HCl 溶液,使发酵液 pH 分别为
2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5)对发酵的影响。发酵
至 120 h 结束,进行类胡萝卜素含量及生物量(DCW)
的测定,每个处理 3 个重复,同时以不接菌发酵液
为空白对照。
1.2.3 不同逆境条件处理对红酵母发酵生产类胡萝
卜素的影响 选择低温(T)、低温处理时间(t)、
高盐和酸处理 4 种因素进行研究,每个因素 3 个水
平(表 1),确定 Box-Behnken 设计的自变量,以类
胡萝卜素产量为响应值,通过响应曲面分析(Resp-
onse surface analysis,RSA)考察 4 种逆境条件之间
的交互作用。
1.2.4 检测方法 将发酵液转入离心管中,8 000
r/min 离心 10 min,弃上清液,菌体用无菌水洗后再
离心,65℃左右烘干至恒重计算 DCW。
类胡萝卜素含量检测方法及产量计算方法参照
文献[1]进行。准确称取菌体 0.1 g 和石英砂 0.05
g,充分研磨,加入 6 mL 丙酮 ׃ 石油醚 =1 1(V V)
的混合液,28℃振荡浸提 30 min,然后 8 000 r/min
离心 15 min,上清液即为胡萝卜素浸提液。
类胡萝卜素含量(μg/g 干基)=(Aλmax×D×V)/
(0.16×W)
式中 :Aλmax 为类胡萝卜素浸提液最大波长处的
试验因素
因素水平与编码
-1 0 1
T(℃) 10 15 20
t(h) 36 48 60
pH 3.0 3.5 4.0
CNaCl(mol/L) 1.0 2.0 3.0
表 1 响应面分析因素与水平
2013年第1期 193史馨怡等 :逆境对红酵母发酵生产类胡萝卜素的促进作用
吸光度 ;D 为色素浸提液稀释倍数 ;V 为浸提所用丙
酮和石油醚的总体积(mL);W 为提取所用的发酵
培养物重量(g);0.16 为胡萝卜素的摩尔消光系数。
类胡萝卜素产量计算方法参照公式 :
类胡萝卜素产量(mg/L)= 生物量 × 类胡萝卜
素含量
2 结果
2.1 温度对红酵母发酵生产类胡萝卜素的影响
由图 1 可以看出,随着温度(T)的增加,生
物量(DCW)逐渐增加,当 T 为 30℃时,DCW 达
到最高值 17.46 g/L,说明 T 升高能促进细胞生长,
低温不利于细胞生长。由于类胡萝卜素对微生物膜
流动性的调节具有重要,所以低温能增加细胞类胡
萝卜素含量,类胡萝卜素含量随着 T 的升高呈现先
上升后下降的趋势,在 T 为 15℃时,类胡萝卜素
含量达到最高值 1.31 mg/g DCW。类胡萝卜素产量
与 DCW 和类胡萝卜素含量都相关,温度高能增加
DCW,但类胡萝卜素含量较低,而温度低时 DCW
较低,但类胡萝卜素含量高。随着 T 的增加,类胡
萝卜素产量呈现先上升后下降的趋势,在 T 为 15℃
时,类胡萝卜素产量达到最高值 19.07 mg/L。
的延长呈现先上升后略有下降的趋势,在 t 为 48 h 时,
类胡萝卜素含量达到最高值 1.35 mg/g DCW ;继续
延长处理时间,可能由于类胡萝卜素合成途经相关
的酶活性受到影响因而类胡萝卜素含量出现了下降。
由于类胡萝卜素产量受到 DCW 和类胡萝卜素含量
的影响,延长 t 能增加类胡萝卜素含量,但 DCW 降
低,而减少 t 时 DCW 增加,但类胡萝卜素含量降低,
随着 t 的增加,类胡萝卜素产量亦呈现先上升后下
降的趋势,在 t 为 48 h 时,类胡萝卜素产量达到最
高值 18.95 mg/L。
图 1 温度对红酵母发酵生产类胡萝卜素的影响
图 2 处理时间对红酵母发酵生产类胡萝卜素的影响
2.2 处理时间对红酵母发酵生产类胡萝卜素的影响
由图 2 可以看出,随着低温处理时间(t)的增
加,DCW 逐渐降低,当 t 为 72 h 时,DCW 达到最低
值 13.09 g/L,而 t 为 12 h 时,DCW 的最高值 17.18
g/L,说明 t 值越大对细胞生长影响越大,低温处理
不利于细胞的生长。类胡萝卜素含量随着处理时间
2.3 酸处理对红酵母发酵生产类胡萝卜素的影响
由图 3 可以看出,随着 pH 的增加,DCW 逐渐
增加,当 pH 为 2.0 时,DCW 仅为 6.22 g/L,当 pH 为 4.5
时,DCW 达到最高值 17.12 g/L,说明酸处理对菌体
生长不利,pH 较低不利于细胞的生长。由于酸处
理条件下红酵母细胞会增加类胡萝卜素的合成来替
代 SOD 行使抗氧化功能而保护细胞,所以当 pH 降
低时红酵母的类胡萝卜素含量将增加,类胡萝卜素
含量随着 pH 的升高呈现先上升后下降的趋势,在
pH 为 3.5 时,类胡萝卜素含量达到最高值 1.27 mg/g
DCW ;pH 较低时,可能由于类胡萝卜素合成途经相
关的酶活性受到影响因而类胡萝卜素含量出现了下
降。随着 pH 的增加,类胡萝卜素产量亦呈现先上
升后下降的趋势,在 pH 为 3.5 时,类胡萝卜素产量
达到最高值 19.79 mg/L。
2.4 高盐处理对红酵母发酵生产类胡萝卜素的影响
由图 4 可以看出,随着 NaCl 浓度(CNacl)的增
加,DCW 呈现先略有上升后明显下降的趋势,当
20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
5 15 25 302010
1.6
1.5
1.4
1.3
1.2
1.1
1.0
0.9
0.8
T ℃
D
C
W
g/L
, C
ar
ot
en
oi
d
yi
el
d m
g/
L
C
ar
ot
en
oi
d
yi
el
d m
g/
g
DCW
Carotenoid yield
Carotenoid content
D
C
W
g/L
, C
ar
ot
en
oi
d
yi
el
d m
g/
L
C
ar
ot
en
oi
d
co
nt
en
t m
g/
g
D
C
W

12
10
12
14
16
18
20
22
24 36 48 60 72
0.8
0.9
1.0
1.1
1.2
1.3
1.4
1.5
t h
DCW
Carotenoid yield
Carotenoid content
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2013年第1期194
归方程较好地拟合了试验数据。
由方差分析结果(表 3)可知,上述回归方程
描述了各因子与响应值之间线性关系显著性,由
F 值检验来判定,概率 P 值越小,则其相应变量
的 显 著 性 越 高。T,pH、CNaCl 的 影 响 以 及 T-pH、
T-CNaCl 和 t-pH 的交互作用对类胡萝卜素产量的影响
均 显 著(P>F 值 分 别 为 0.011 8,0.011 8,0.015 8,
0.025 3,0.018 8,0.017 1)。t,T-T,t-CNaCl,pH-
CNaCl 对类胡萝卜素产量的影响不显著(P>F 值分别
为 0.908 6、0.726 8,0.854 9 和 0.738 7)。Model 的
P>F 值 <0.000 1,表明该二次方程模型达到极显著
水平,失拟相 =1.06>0.05,表明失拟项相对于绝对
误差不显著,说明该方程对试验拟合较好。相关系
数 r=338.30/343.63×l00% =98.45%,说明响应值的
变化有 98.45%来源于所选变量,可以用此模型对类
胡萝卜素产量进行分析。
响应面图形是响应值对各试验因子 X1、X2、X3、
X4。所构成的三维空间的曲面图,从响应面分析图
上形象地看出最佳参数及各参数之间的相互作用。
本试验根据回归方程进行不同因子的响应面分析,
结果如图 5 示。从图 5 可以看出,在 t 为 48 h,CNaCl
为 2.0 mol/L 时,T 与 pH 的交互作用对类胡萝卜素
产量影响显著,T 与 pH 的提高可以增加类胡萝卜
素产量,但 T 要随着 pH 的变化而有所变化,因为
过高的处理温度会影响类胡萝卜素含量,过低的 pH
也会影响 DCW,从而影响类胡萝卜素产量。
在 t 为 48 h,pH 为 3.5 时,T 与 CNaCl 的交互作
用对类胡萝卜素产量影响显著,T 与 CNaCl 的提高可
图 3 pH 对红酵母发酵生产类胡萝卜素的影响 图 4 NaCl 浓度对红酵母发酵生产类胡萝卜素的影响
CNaCl 为 1.0 mol/L 时,DCW 达到最高值 17.46 g/L,而
CNaCl 为 5.0 mol/L 时,DCW 仅为 4.46 g/L,说明 CNaCl
的增加能提供细胞生长需要的无机盐而增加 DCW,
但过高的 CNaCl 造成较高的渗透压影响了细胞的生长。
由于红酵母在高盐的条件下会增加类胡萝卜素的合
成,所以增加 CNaCl 能增加细胞类胡萝卜素含量,但
过高的 CNaCl 可能通过影响类胡萝卜素合成途经相关
的酶活性而使类胡萝卜素合成受到影响,所以过高
的 CNaCl 也不利于类胡萝卜素含量的增加。类胡萝卜
素含量随着 CNaCl 的增加呈现先上升后下降的趋势,
在 CNaCl 为 2.0 mol/L 时,类胡萝卜素含量达到最高值
1.24 mg/g DCW ;CNaCl 继 续 升 高 为 5.0 mol/L 时, 类
胡萝卜素含量降低到最低值 0.98 mg/g DCW。由于类
胡萝卜素产量受到 DCW 和类胡萝卜素含量的影响,
随着 CNaCl 的增加,类胡萝卜素产量亦呈现先上升后
下降的趋势,在 CNaCl 为 2 mol/L 时,类胡萝卜素产
量达到最高值 19.86 mg/L。
2.5 不同逆境条件处理对红酵母发酵生产类胡萝
卜素的影响
根据 Box-Behnken 优化设计的 4 因素 3 水平实
验方案,并以变量 X1、X2、X3 和 X4 分别代表 T、t、
pH 及 CNaCl,结果见表 2。
通过 Design Expert 7.0 软件进行二次响应面回
归分析,得到多元二次响应面回归模型 :Y=27.02-
0.52X1-0.021X2+0.52X3+0.49X4-0.11X1X2+0.77X1X3-
0.82X1X4-0.83X2X3+0.057X2X4+0.10X3X4-5.76X1
2-
4.47X2
2-3.18 X3
2-2.21 X4
2, 其 决 定 系 数 R2= 0.9845,
试验值与预测值非常接近。方差分析表明,以上回
0.8
0.9
1.0
1.1
1.2
1.3
1.4
1.5
1.6
10
8
6
4
2
0
2.0 3.0 4.0 4.53.52.5
pH
12
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16
18
20
22
D
C
W
g/L
, C
ar
ot
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d m
g/
L
C
ar
ot
en
oi
d
co
nt
en
t m
g/
g
D
C
W

DCW
Carotenoid yield
Carotenoid content D
C
W
g/L
, C
ar
ot
en
oi
d
yi
el
d m
g/
L
C
ar
ot
en
oi
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t m
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g
D
C
W

DCW
Carotenoid yield
Carotenoid content
24
20
16
12
8
4
0
0 1 2 3 4 5
0.8
0.9
1.0
1.1
1.2
1.3
CNaCl mol/L
2013年第1期 195史馨怡等 :逆境对红酵母发酵生产类胡萝卜素的促进作用
以增加类胡萝卜素产量。但 T 要随着 CNaCl 的变化而
有所变化,因为过高的处理温度会影响类胡萝卜素
含量,过高的 CNaCl 也会影响 DCW 从而影响类胡萝
卜素产量。
在 T 为 15℃,CNaCl 为 2.0 mol/L 时,t 与 pH 的
交互作用对类胡萝卜素产量影响显著,t 与 pH 的提
高可以增加类胡萝卜素产量,但 t 要随着 pH 的变化
而有所变化,因为 t 的增加以及过低的 pH 会影响
DCW,过高的 pH 也会影响类胡萝卜素含量从而影
响类胡萝卜素产量。
利用 Design-Expert 7.0 计算得到类胡萝卜素发
酵的最佳条件为 :T=14.76℃,t=47.91 h,pH=3.54,
CNaCl=2.12 mol/L,类胡萝卜素产量的理论最高值为
27.08 mg/L。在该条件下重新进行 3 次重复试验,得
到类胡萝卜素产量为(31.04±0.89)mg/L,高于试
验中的最高值 28.10 mg/L,说明采用响应面分析法
优化得到的类胡萝卜素发酵条件参数准确可靠,具
有一定的实用价值。
3 讨论
类胡萝卜素广泛存在于细菌、藻类、真菌和植
物中,具有重要的生理保健功能。由于动物及人体
自身无法合成类胡萝卜素,因而常被作为饲料、保
健食品的添加剂。目前,通过大面积养殖盐藻获得
类胡萝卜素的方法最为成熟,但盐藻的养殖对培养
试验编号
变量 类胡萝卜素产量(mg/L)
X1(T) X2(t) X3(pH) X4(CNaCl) 试验值 预测值
1 1 0 0 -1 17.09 17.13
2 0 0 -1 -1 21.65 21.50
3 0 0 1 1 26.78 27.02
4 -1 0 0 -1 20.31 19.40
5 0 1 0 1 15.57 15.88
6 0 1 1 0 19.00 18.76
7 -1 0 -1 0 16.12 16.28
8 0 -1 0 1 21.11 20.88
9 -1 0 0 1 26.72 27.02
10 0 0 -1 1 19.13 18.86
11 -1 0 1 0 20.22 20.48
12 0 0 0 0 19.58 19.66
13 0 -1 0 -1 20.22 20.73
14 1 1 0 0 20.15 20.60
15 0 1 -1 0 21.28 21.55
16 0 -1 1 0 26.69 27.02
17 0 0 0 0 19.05 18.26
18 0 0 0 0 17.98 18.35
19 0 0 0 0 16.06 16.14
20 1 0 1 0 17.14 16.95
21 1 0 -1 0 23.13 22.74
22 0 0 0 0 20.34 20.52
23 1 0 0 1 18.06 18.86
24 1 -1 0 0 19.29 18.87
25 0 -1 -1 0 26.82 27.02
26 0 1 0 -1 28.10 27.02
27 -1 -1 0 0 18.19 17.77
28 0 0 1 -1 18.07 18.21
29 -1 1 0 0 19.16 19.50
表 2 响应面分析方案及试验结果
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2013年第1期196
条件要求较高。利用红酵母发酵生产类胡萝卜素具
有安全、成本低等优点因而备受关注。在前期的研
究中,经过对培养基的优化,该菌株类胡萝卜素
含量达到 0.52 mg/g DCW,发酵最高产量达到 11.61
mg/L[1]。由于低温、高盐度、酸处理等逆境有利于
类胡萝卜素的合成,为了进一步提高类胡萝卜素产
量,考察了低温、低温处理时间、酸处理及高盐处
理对该菌株发酵生产类胡萝卜素的影响。在此基础
上利用响应面分析法进一步优化培养条件,类胡萝
卜素产量达到 31.04 mg/L,较不利用逆境条件处理
时(11.61 mg/L)提高了 2.67 倍,类胡萝卜素含量
也显著提高。目前国内利用红酵母发酵生产类胡萝
卜素报道的产量大多较低(6-30 mg/L),菌体中类
胡萝卜素含量也不高(一般低于 1.0 mg/g DCW)[5,6],
而利用逆境培养条件增加类胡萝卜素发酵的研究较
为少见,通过将菌体在逆境条件下培养,类胡萝卜
素含量和产量均明显提高,若在此基础上利用流加
及高密度发酵等策略进一步增加类胡萝卜素的产量,
将有望达到或超过国外类胡萝卜素发酵的最高水平。
4 结论
本研究考察了低温、低温处理时间、酸处理及
方差来源 平方和(SS) 自由度(DF) 均方(MS) F 值(F Value) P>F
模型 338.30 14 24.16 63.43 <0.000 1
X1-T 3.19 1 3.19 8.38 0.011 8
X2-t 5.208E-003 1 5.208E-003 0.014 0.908 6
X3-pH 3.19 1 3.19 8.38 0.011 8
X4-CNaCl 2.87 1 2.87 7.54 0.015 8
X1X2 0.048 1 0.048 0.13 0.726 8
X1X3 2.39 1 2.39 6.27 0.025 3
X1X4 2.69 1 2.69 7.06 0.018 8
X2X3 2.79 1 2.79 7.32 0.017 1
X2X4 0.013 1 0.013 0.035 0.854 9
X3X4 0.044 1 0.044 0.12 0.738 7
X1
2 214.94 1 214.94 564.24 < 0.000 1
X2
2 145.67 1 145.67 382.40 < 0.000 1
X3
2 65.55 1 65.55 172.07 < 0.000 1
X4
2 31.72 1 31.72 83.27 < 0.000 1
残差 5.33 14 0.38
失拟项 3.87 10 0.39 1.06 0.522 7
误差 1.46 4 0.37
总差 343.63 28
图 5 不同逆境条件处理对类胡萝卜素产量影响的响应曲面
P>F 值小于 0.05,表示对应因素对响应值的影响显著
29.00
25.75
22.50
19.25
16.00
4.00
3.50
3.00 10.00
15.00
20.00 20.00
10.001.00
2.00 15.00
4.00
3.00 36.00
48.00
60.00
17.00
20.00
23.00
26.00
29.00
3.50
pH
C
NaCl mol/L
pH
T ℃ T ℃ t h
3.00
18.00
20.75
23.50
26.25
C
ar
ot
en
oi
d
Y
ie
ld
C
ar
ot
en
oi
d
Y
ie
ld
C
ar
ot
en
oi
d
Y
ie
ld
表 3 二次响应面回归模型方差分析
2013年第1期 197史馨怡等 :逆境对红酵母发酵生产类胡萝卜素的促进作用
高盐处理对一株红酵母(Rhodotorula sp.)发酵生产
类胡萝卜素的影响,在此基础上并利用响应面分析
方法研究了其交互作用。结果表明,在温度为 15℃
条件下处理 48 h,pH3.5,NaCl 浓度为 2 mol/L 的条
件下,类胡萝卜素最高产量达到 31.04 mg/L,说明
逆境对红酵母发酵生产类胡萝卜素具有促进作用。
参 考 文 献
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(责任编辑 李楠)