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作 者 ：孙芳;李玉霞;毛艳;凌焱;张小男;李伟东;刘刚;梁龙;陈珊;陈惠鹏;

期 刊 ：生物技术通报 2012年 0卷 07期 页码：108-113

关键词：Notch信号通路；N2ICD/pEGFP；N3ICD/pEGFP；真核表达；

摘 要 ：Notch信号通路与多种肿瘤的发生发展密切相关。对该通路中各受体功能的深入研究能够为揭示其致癌作用奠定基础。本研究采用RT-PCR的方法从人宫颈癌细胞系HeLa细胞的cDNA中克隆人Notch2和Notch3受体胞内区基因(N2ICD和N3ICD基因),并构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体N2ICD/pEGFP和N3ICD/pEGFP,将序列正确的重组质粒转染HeLa细胞,显微镜下可见明显的绿色荧光,并定位在细胞核内。Western blotting检测目的蛋白成功融合表达,并能够提高其下游靶基因Hes1的转录活性。

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