---

作 者 ：贾军会;李慎涛;刘振龙;赵文明;

期 刊 ：生物技术通报 2011年 0卷 04期 页码：137-142

关键词：IL-17A；IL-17F；蛋白纯化；柱上复性；活性测定；

摘 要 ：人IL-17A和IL-17F具有很高的同源性,在炎症性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤中都发挥着重要的作用,是当前研究的热点。应用原核表达系统在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了人IL-17A和IL-17F;经培养条件的优化,未发现可溶性目的蛋白的表达,免疫印记分析显示,重组蛋白位于包涵体中;对包涵体进行洗涤、凝胶过滤层析纯化和柱上复性,获得重折叠的可溶性蛋白;随后用SDS-PAGE对蛋白样品进行了纯度分析、采用免疫印记和质谱的方法鉴定蛋白产物成分、用MC3T3-E1和RAW264.7两个细胞株对IL-17A、IL-17F的生物学活性进行测定。结果显示,柱上复性的方法制备的该重组蛋白具有较高的纯度和活性。建立的重组人IL-17A和IL-17F的制备方法可为相关研究中细胞因子的大量应用提供参考。

---