全 文 ：第 １３卷第 ３期
２０１５年 ５月
生　 物　 加　 工　 过　 程
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
Ｖｏｌ􀆰 １３ Ｎｏ􀆰 ３
Ｍａｙ ２０１５
ｄｏｉ：１０􀆰 ３９６９ ／ ｊ􀆰 ｉｓｓｎ􀆰 １６７２－３６７８􀆰 ２０１５􀆰 ０３􀆰 ０１０
收稿日期：２０１４－０４－１６
基金项目：教育部春晖计划（１２２０５５４３）；四川省教育厅自然科学重点项目（０９ＺＡ１５８）；西华大学省级重点实验室开放研究基金
作者简介：蒲　 博（１９８９—），男，四川巴中人，硕士研究生，研究方向：食品科学；焦士蓉（联系人），教授，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｊｓｒｏｎｇ２００４＠ １６３．ｃｏｍ
反相高效液相色谱法测定石榴皮多酚类物质方法的
建立及分析
蒲　 博，张驰翔，王　 周，唐鹏程，焦士蓉
（西华大学 食品与生物工程学院，四川 成都 ６１００３９）
摘　 要：建立了同时测定石榴皮多酚中绿原酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素含量的反相高效液相色谱方法。 采用色
谱柱 Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２（２５０ ｍｍ×４􀆰 ６ ｍｍ，５ μｍ），其流动相为乙腈 ０􀆰 ４％磷酸溶液（体积比 １７ ∶ ８３），流速为 １􀆰 ０
ｍＬ ／ ｍｉｎ，检测波长 ３１０ ｎｍ，柱温为 ３０ ℃。 建立安石榴甙测量方法，色谱柱为 Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２（２５０ ｍｍ×４􀆰 ６ ｍｍ，
５ μｍ）；流动相为甲醇 ２％冰醋酸（体积比 ７ ∶ ９３）；体积流量为 １􀆰 ０ ｍＬ ／ ｍｉｎ；检测波长为 ２３２ ｎｍ；柱温２５ ℃。 结果
表明：绿原酸、表儿茶素、鞣花酸、槲皮素和安石榴甙在一定浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，其平均回收率
分别为 １００􀆰 ６６％（ＲＳＤ ＝ ２􀆰 ０６％）、１００􀆰 ０５％（ＲＳＤ ＝ ０􀆰 ５８％）、１００􀆰 ０５％（ＲＳＤ ＝ ０􀆰 ５１％）、９９􀆰 ５１％ （ＲＳＤ ＝ １􀆰 ２２％）和
９９􀆰 ７９％（ＲＳＤ＝ ０􀆰 ５２％）。 此结果说明反相高效液相色谱可用于测定石榴皮多酚类物质。
关键词：石榴皮多酚；色谱柱； ＲＰ ＨＰＬＣ
中图分类号：Ｏ６５７􀆰 ７２　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２－３６７８（２０１５）０３－００５５－０４
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｉｎ ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ ｐｅｅｌ ｂｙ
ｒｅｖｅｒｓｅ⁃ｐｈａｓｅ ＨＰＬＣ
ＰＵ Ｂｏ，ＺＨＡＮＧ Ｃｈｉｘｉａｎｇ，ＷＡＮＧ Ｚｈｏｕ，ＴＡＮＧ Ｐｅｎｇｃｈｅｎｇ，ＪＩＡＯ Ｓｈｉｒｏｎｇ
（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉｈｕａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ ６１００３９，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｗｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｒｅｖｅｒｓｅ⁃ｐｈａｓｅ ＨＰＬＣ ｔｏ ｓｅｐａｒａｔｅ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ
ａｃｉｄ， ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ， ｅｌｌａｇｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｉｎ ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ ｐｅｅｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ． Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ：Ｈｙｓｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２（２５０ ｍｍ×４􀆰 ６ ｍｍ，５ μｍ） ａｔ ３０ ℃ ｗｉｔｈ ＵＶ ｄｅｔｅｃｔｏｒ ａｔ ３１０
ｎｍ， ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ⁃０􀆰 ４％ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ （ １７ ∶ ８３ ）， ａｎｄ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ １􀆰 ０ ｍＬ ／ ｍｉｎ．
Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ，Ｗｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ａ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ． Ｔｈｅ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ：Ｈｙｓｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２（２５０ ｍｍ×４􀆰 ６ ｍｍ，５ μｍ）ａｔ ２５℃ ｗｉｔｈ ＵＶ
ｄｅｔｅｃｔｏｒ ａｔ ２３２ ｎｍ，ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ⁃０􀆰 ４％ ｇｌａｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ （ ７ ∶ ９３）， ａｎｄ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ １􀆰 ０
ｍＬ ／ ｍｉｎ􀆰 Ｃｈｌｏｒｏｆｅｎｉｃ ａｃｉｄ，ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ，ｅｌｌａｇｉｃ ａｃｉｄ，ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ａｎｄ ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｓｈｏｗｅｄ ａ ｇｏｏｄ
ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ ｐｅａｋ ａｒｅａ ｉｎ ａｎ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｒａｎｇｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｗｅｒｅ
１００􀆰 ６６％（ＲＳＤ ＝ ２􀆰 ０６％），１００􀆰 ０５％ （ＲＳＤ ＝ ０􀆰 ５８％），１００􀆰 ０５％ （ＲＳＤ ＝ ０􀆰 ５１％），９９􀆰 ５１％ （ ＲＳＤ ＝
１􀆰 ２２％）ａｎｄ ９９􀆰 ７９％ （ＲＳＤ ＝ ０􀆰 ５２％）， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｏｕｒ ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｐｒｏｖｅ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｒｅｖｅｒｓｅ⁃ｐｈａｓｅ ＨＰＬＣ
ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｉｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ ｐｏｍｅｇｒｕｎａｔｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ ｐｅｅｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ； ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ；ＲＰ⁃ＨＰＬＣ
　 　 石榴皮为石榴干燥果皮，其性酸、味涩。 石榴
皮中含有绿原酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素及安
石榴甙等多酚类化合物，具有抗癌、抗氧化等生物
活性［１－４］。 对于石榴皮成分的高效液相测定法，大
多都是针对其鞣花酸含量的测定，另外对其儿茶素
和表儿茶素的测定也较多，对于石榴皮中安石榴
甙、槲皮素、绿原酸测定的文献较少［５－１１］。
本实验中，笔者建立同时测定石榴皮多酚中绿
原酸、表儿茶素、鞣花酸、槲皮素的反相高效液相色
谱方法 （ ＲＰ ＨＰＬＣ），并建立安石榴甙的 ＲＰ
ＨＰＬＣ的测定方法和参数，以期为石榴皮药材的质
量评价、控制及其规范化种植研究提供科学依据。
１　 材料与方法
１􀆰 １　 材料与仪器
石榴皮，成都中药饮品有限公司；乙腈、甲醇
（色谱纯），Ｆｉｓｈｅｒ 公司；鞣花酸、槲皮素、绿原酸、表
儿茶素、安石榴甙，Ｓｉｇｍａ公司。
ＬＣ２０高效液相色谱系统、配 ＳＰＤ Ｍ２０Ａ 型二
级管阵列检测器、ＣＴＯ ２０Ａ型柱温箱和 ＳＩＬ ２０ＡＣ
型自动进样器，岛津（ＳＨＩＭＡＤＺＵ）公司；水相、有机
相 ０􀆰 ４５ μｍ微孔滤膜、０􀆰 ４５ μｍ微孔滤头，天津津腾
实验设备有限公司；ＫＱ １００ＤＥ 型数控超声波清洗
器，昆山市超声波仪器有限公司。
１􀆰 ２　 实验方法
１􀆰 ２􀆰 １　 波长的选择
通过全波谱扫描，对绿原酸、表儿茶素、鞣花
酸、槲皮素和安石榴甙的检测波长进行选择［１２－１３］。
１􀆰 ２􀆰 ２　 色谱条件
绿原酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素混标色谱
条件［１４－１５］：色谱柱为 Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２ （２５０ ｎｍ × ４􀆰 ６
ｎｍ，５ μｍ，大连依利特公司）；流动相为乙腈 ０􀆰 ４％
磷酸溶液（体积比 １７ ∶ ８３）；流速为 １􀆰 ０ ｍＬ ／ ｍｉｎ；检
测波长 ３１０ ｎｍ；柱温为 ３０ ℃；理论塔板数按鞣花酸
计大于 ８ ０００；鞣花酸（保留时间为 ８􀆰 ６８１ ｍｉｎ）、槲
皮素（保留时间为 １７􀆰 ２３８ ｍｉｎ）、绿原酸（保留时间
为 ４􀆰 ３９２ ｍｉｎ）、表儿茶素（保留时间为 ５􀆰 ４６３ ｍｉｎ）
的分离度大于 １􀆰 ５。
安石榴甙色谱条件：色谱柱为 Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２
（２５０ ｍｍ×４􀆰 ６ ｍｍ，５ μｍ，大连依利特公司）；流动相
为甲醇 ２％冰醋酸溶液（体积比 ７ ∶ ９３）；体积流量为
１􀆰 ０ ｍＬ ／ ｍｉｎ；检测波长为 ２３２ ｎｍ；柱温 ２５ ℃；理论塔
板数按安石榴甙计大于 ８ ０００；分离度大于 １􀆰 ５。
１􀆰 ２􀆰 ３　 对照品溶液的准备
精密称取干燥至恒质量的对照品鞣花酸 ５ ｍｇ、
槲皮素 ５ ｍｇ、绿原酸 ２ ｍｇ、表儿茶素 ５ ｍｇ和安石榴
甙 ５ ｍｇ，用 ５０％（体积分数）的甲醇溶解至 ５０ ｍＬ，
将配好的溶液超声脱气 ２０ ｍｉｎ，冷却至室温，摇匀，
过滤，滤液即为标准品溶液，待用。
１􀆰 ２􀆰 ４　 供试品溶液的制备
石榴皮经干燥、粉碎过 １８０ μｍ 筛，以多酚为考
察指标提取条件：温度 ７５ ℃、料液比 １ ∶ ３０ ｇ ／ ｍＬ、提
取时间 １４０ ｓ，经水提取得到的提取物多酚质量分数
为 ２２􀆰 ０６％，浓缩、冻干，精密称取冻干粉 ５００ ｍｇ，用
５０％的甲醇定容至 ５０ ｍＬ，用于绿原酸、表儿茶素、
鞣花酸和槲皮素的测量。 称取冻干粉 ５０ ｍｇ，用
５０％的甲醇定容至 ５０ ｍＬ，用于安石榴甙的测量。
将配好的溶液都超声脱气 ２０ ｍｉｎ，将其冷却至室温，
振荡摇匀，过滤，滤液即为供试品溶液，待用。
１􀆰 ２􀆰 ５　 纯化品试样的制备
将石榴皮提取物经 Ｄ１０１ 型大孔树脂纯化，浓
缩、冻干，得到石榴皮纯化物。 用福林酚比色法测
得其中多酚含量为 ７１􀆰 ６３％。 按照方法 １􀆰 ２􀆰 ３ 制备
纯化品溶液，待用。
２　 结果与讨论
２􀆰 １　 波长的选择
通过全波谱扫描发现，在 ３１０ ｎｍ 波长下，绿原
酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素均有较强吸收峰，且
无干扰物质出现，因此选用在 ３１０ ｎｍ波长下检测绿
原酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素。 而安石榴甙在
２３２ ｎｍ波长下有最大吸收度，故选用 ２３２ ｎｍ 作为
安石榴甙的检测波长。
２􀆰 ２　 色谱分析结果
绿原酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素的对照品
及样品色谱图见图 １。
安石榴甙的对照品及样品色谱图见图 ２。
２􀆰 ３　 线性关系考察
取鞣花酸、槲皮素、表儿茶素和安石榴甙对照
品 ４个梯度溶液 ２５、５０、７５ 和 １００ μｇ ／ ｍＬ；取绿原酸
对照品 ４个梯度溶液 １０、２０、３０ 和 ４０ μｇ ／ ｍＬ。 在上
述色谱条件下分别对每个标准品的每个浓度进样
６５ 生　 物　 加　 工　 过　 程　 　 第 １３卷　
１—绿原酸；２—表儿茶素；３—鞣花酸；４—槲皮素
图 １　 绿原酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素的
标准品与供试品 ＨＰＬＣ图谱
Ｆｉｇ􀆰 １　 ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ，
ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ， ｅｌｌａｇｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｉｎ
ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｓａｍｐｌｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ
图 ２　 安石榴甙的标准品与供试品 ＨＰＬＣ图谱
Ｆｉｇ􀆰 ２　 ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ
ｉｎ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｓａｍｐｌｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ
２０ μＬ，测定其峰面积。 以进样浓度为横坐标（Ｘ），
以峰面积为纵坐标（Ｙ）绘制标准曲线，得到各自的
回归方程。 鞣花酸：Ｙ ＝ １􀆰 ５ × １０６ Ｘ－ ５􀆰 ３ × １０５（Ｒ２ ＝
０􀆰 ９９９ ４）；绿原酸：Ｙ ＝ ７􀆰 ４ × １０７ Ｘ － １􀆰 ２ × １０５ （Ｒ２ ＝
０􀆰 ９９９ ３）；槲皮素 Ｙ ＝ １􀆰 ６ × １０８ Ｘ － ７􀆰 ５ × １０５ （Ｒ２ ＝
０􀆰 ９９９ ４）；表儿茶素 Ｙ ＝ ２􀆰 １ ×１０５ Ｘ－６􀆰 ９ ×１０４（Ｒ２ ＝
０􀆰 ９９９ ５）；安石榴甙 Ｙ ＝ ３􀆰 ９×１０５Ｘ－２􀆰 ９×１０５，（Ｒ２ ＝
０􀆰 ９９９ ５）。
２􀆰 ４　 精密度试验
精密吸取绿原酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素
混合对照品溶液 ２０ μＬ 以及安石榴甙对照品 ２０
μＬ，重复进样 ５ 次，测定其峰面积。 它们峰面积相
对标准偏差 （ ＲＳＤ） 值分别为 ０􀆰 ６８％、 ０􀆰 ７２％、
０􀆰 ３８％、０􀆰 ８０％和 １􀆰 ５０％（ｎ均为 ５）。 结果表明仪器
精密度较好。
２􀆰 ５　 稳定性试验
分别将绿原酸、表儿茶素、鞣花酸、槲皮素混合
供试液和安石榴甙供试液于 ０、２、６、８ 和 １０ ｈ 各进
样 ２０ μＬ，测定其峰面积，它们峰面积 ＲＳＤ值分别为
１􀆰 １２％、 ０􀆰 ７５％、 ０􀆰 ２０％、 ０􀆰 ７４％和 ０􀆰 ４９％ （ ｎ 均为
５）。 结果表明供试液在常温下 １０ ｈ内较稳定。
２􀆰 ６　 重现性试验
按照供试溶液制备的方法，对同一批样品，分
别取样平行测定 ５ 次，进样 ２０ μＬ，测定其峰面积。
它们峰面积 ＲＳＤ 值分别为 １􀆰 １４％、１􀆰 ９０％、０􀆰 ３５％、
１􀆰 ０４％和 １􀆰 ０１％（ｎ均为 ５）。 该方法重现性良好。
２􀆰 ７　 加样回收试验
精密称取已测含量未纯化（绿原酸 ０􀆰 ４１％、表
儿茶素 ０􀆰 ３０％、鞣花酸 ６􀆰 ２３％、槲皮素 ０􀆰 ６１％和安
石榴甙 ２８􀆰 ７３％）的石榴皮提取物冻干粉若干，加入
适当的对照品，按上述方法制备 ５份样品溶液，进样
２０ μＬ，分别进行回收率测定（ｎ＝ ５），结果见表 ４。
表 ４　 回收率试验结果
Ｔａｂｌｅ ４　 ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ
多酚物质 均回收率 ／ ％ ＲＳＤ ／ ％
鞣花酸 １００􀆰 ０５±０􀆰 ５１ ０􀆰 ５１
槲皮素 ９９􀆰 ５１±１􀆰 ２１ １􀆰 ２２
绿原酸 １００􀆰 ６６±２􀆰 ０７ ２􀆰 ０６
表儿茶素 １００􀆰 ０５±０􀆰 ５８ ０􀆰 ５８
安石榴甙 ９９􀆰 ７９±０􀆰 ５２ ０􀆰 ５２
２􀆰 ８　 石榴皮纯化品中多酚物质的含量测定
采取上面绿原酸、表儿茶素、鞣花酸和槲皮素
混标及安石榴甙单标的色谱方法对石榴皮纯化品
中多酚物质的含量进行测定，进样量为 ２０ μＬ，结果
见表 ５。 由表 ５ 可知，纯化后石榴皮提取物中多酚
物质的含量都得到了提高。
表 ５　 纯化前与纯化后多酚物质含量
Ｔａｂｌｅ ５　 ｃｏｎｔｅｎｔ ｂｅｆｏｒｅ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｅｄ
ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
多酚物质 纯化后质量分数 ／ ％ 纯化前质量分数 ／ ％
鞣花酸 ９􀆰 ４４ ６􀆰 ２３
绿原酸 ０􀆰 ５３ ０􀆰 ４１
槲皮素 ０􀆰 ７５ ０􀆰 ６１
表儿茶素 ０􀆰 ３２ ０􀆰 ３０
安石榴甙 ４６􀆰 ９１ ２８􀆰 ７３
７５　 第 ３期 蒲　 博等：反相高效液相色谱法测定石榴皮多酚类物质方法的建立及分析
３　 结论
通过实验得到石榴皮提取液冻干粉的鞣花酸
含量为 ６􀆰 ２３％；槲皮素的含量为 ０􀆰 ６１％；绿原酸的
含量为 ０􀆰 ４１％；表儿茶素含量为 ０􀆰 ３０％；安石榴甙
含量为 ２８􀆰 ７３％。 通过精密性、稳定性、重现性试验
等，表明按本实验方法检测石榴皮中绿原酸、表儿
茶素、鞣花酸、槲皮素和安石榴甙比较简便和可靠。
最后对石榴皮提取物纯化品中多酚物质进行了
ＲＰ ＨＰＬＣ法测量，测得结果为鞣花酸含量 ９􀆰 ４４％，
绿原酸含量 ０􀆰 ５３％，槲皮素含量 ０􀆰 ７５％，表儿茶素
含量 ０􀆰 ３２％，安石榴甙含量 ４６􀆰 ９１％。
参考文献：
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ｄｉｅｔ⁃ｉｎｄｕｃｅｄ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｈｙｒｏｉｄ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｒａｔｓ［ Ｊ］ ．
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Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ ｐｅｃａｎ ｎｕｔｓ ｓｈｅｌｌ
（Ｃａｒｙａ Ｉｌｌｉｎｏｅｎｓｉｓ）， ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ ｈｕｓｋ （ Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｍ） ａｎｄ
ｃｒｅｏｓｏｔｅ ｂｕｓｈ ｌｅａｖｅｓ （ Ｌａｒｒｅａ ｔｒｉｄｅｎｔａｔａ Ｃｏｖ．） ａｇａｉｎｓｔ ｐｌａｎｔ
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ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｕｎｉｃａｌｉｎ ｆｒｏｍ ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ ｈｕｓｋ ｂｙ ｈｉｇｈ⁃ｓｐｅｅｄ
ｃｏｕｎｔｅｒｃｕｒｒｅｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ［ Ｊ ］ ． Ｓｅｐ Ｐｕｒｉｆ Ｔｅｃｈｎｏｌ， ２０１０，
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［１５］ 　 刘振平，陈祥贵，彭海燕，等．ＲＰ ＨＰＬＣ 法测定石榴汁中的 ４
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（责任编辑　 荀志金）
８５ 生　 物　 加　 工　 过　 程　 　 第 １３卷