全 文 ：第 １３卷第 １期
２０１５年 １月
生　 物　 加　 工　 过　 程
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
Ｖｏｌ􀆰 １３ Ｎｏ􀆰 １
Ｊａｎ􀆰 ２０１５
ｄｏｉ：１０􀆰 ３９６９ ／ ｊ􀆰 ｉｓｓｎ􀆰 １６７２－３６７８􀆰 ２０１５􀆰 ０１􀆰 ０１８
收稿日期：２０１４－０７－０８
基金项目：国家自然科学基金（２１１０２０１１）；江苏省自然科学基金（ＢＫ２０１４１１７２）；常州市生物医药科技专项（ＣＥ２０１１５０５１）
作者简介：张丹平（１９９０—），男，江苏徐州人，硕士研究生，研究方向：生物催化；何玉财（联系人），副教授， Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｈｅｙｕｃａｉ２００１＠ １６３．ｃｏｍ
微生物硫酸酯酶研究进展：来源、催化机制及应用
张丹平，何玉财
（常州大学 制药与生命科学学院 生物工程研究室，江苏 常州 ２１３１６４）
摘　 要：手性醇是合成医药、农用化学品和其他精细化学品的关键中间体。 硫酸酯酶可催化水解硫酸酯键裂解形
成无机硫酸盐和相应的仲醇。 笔者综述了硫酸酯酶微生物来源、催化反应机制及其应用，也介绍了固定化提高催
化稳定性及通过添加金属离子或有机助溶剂提高硫酸酯酶选择性的方法。
关键词：硫酸酯酶；手性仲醇；生物转化；选择性
中图分类号：Ｑ９３； Ｘ７０３　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２－３６７８（２０１５）０１－０１０６－０７
Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ： ｓｏｕｒｃｅ，ｃａｔａｌｙｔｉｃ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ＺＨＡＮＧ Ｄａｎｐｉｎｇ，ＨＥ Ｙｕｃａｉ
（Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｎｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，
Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ ２１３１６４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｈｉｒａｌ ａｌｃｏｈｏｌｓ ａｒｅ ｋｅｙ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ， ａｇｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ， ａｎｄ
ｏｔｈｅｒ ｆｉｎｅ ｃｈｅｍｉｃａｌｓ． Ｓｕｌｆａｔａｓｅ ｃａｎ ｃａｔａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｌｙｔｉｃ ｃｌｅａｖａｇｅ ｏｆ ｓｕｌｆａｔｅ ｅｓｔｅｒｓ ｂｙ ｌｉｂｅｒａｔｉｎｇ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ
ｓｕｌｆａｔｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｌｃｏｈｏｌ． Ｉｎ ｔｈｉｓ ｒｅｖｉｅｗ，ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｏｕｒｃｅｓ，ｃａｔａｌｙｔｉｃ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，
ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｕｌｆａｔａｓｅ ｗｅｒｅ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ． Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｃａｔａｌｙｔｉｃ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｂｙ
ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔａｌ ｉｏｎｓ ｏｒ ｏｒｇａｎｉｃ ｃｏｓｏｌｖｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ􀆰
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ；ｃｈｉｒａｌ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｌｃｏｈｏｌ；ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ；ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ
　 　 手性醇是医药、化妆品和农用化学品等领域不
可缺少的中间体，也是不对称合成中重要的手性助
剂，因此光学活性仲醇化合物的制备越来越受到人
们的关注［１－３］。 许多方法用于合成手性仲醇［４］。 与
传统化学合成法相比，生物催化合成具有立体选择
性强、活性高及反应条件温和等优势。 生物不对称
还原潜手性酮、氧化拆分外消旋醇和水解拆分环氧
化合物等技术实现了高光学纯手性醇的高效合
成［３－５］。 近些年研究发现，硫酸酯酶能够催化水解，
使得硫酸酯键的裂解从而形成无机硫酸盐和相应
的醇［６－７］，并且可实现手性仲醇的高效合成，引起了
许多专家和学者的极大兴趣。
笔者对硫酸酯酶微生物来源、催化反应机制及
其应用进行了综述，也对固定化技术提高硫酸酯酶
催化稳定性和通过添加金属离子或有机助溶剂提
高硫酸酯酶选择性的方法进行了介绍，以期为相关
领域的研究者提供参考。
１　 硫酸酯酶的微生物来源
目前已经筛选到 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ ＦＣＣ０９８、
Ｇｕｌｏｓｉｂａｃｔｅｒ ｍｏｌｉｎａｔｉｖｏｒａｘ ＤＳＭ１３４８５、 Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ ｓｐ􀆰
ＤＳＭ６３９２、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ􀆰 Ｓ７、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ ＤＳＭ⁃
４４５４１、 Ｒｈｏｄｏｐｉｒｅｌｌｕｌａ ｂａｌｔｉｃａ ＤＳＭ１０５２７、 Ｓｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓ
ｓｐ􀆰 ＲＣＣ５５６ 和 Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ ＤＳＭ６３９ 等
硫酸酯酶菌株［８－１９］，如表 １所示。 研究发现，大多数
仲烷基硫酸酯酶对（ω １） 烷基硫酸酯的对映体选
择性与烷基的大小有关，它的映体选择性（Ｅ 值）范
围为 ２１到 ２００［１３］。 在催化过程中，硫酸酯酶能够对
映体选择性催化底物发生立体构型反转或立体构
型保留，从而催化外消旋硫酸酯水解生成同手性或
异手性混合产物（图 １）。
表 １　 立体和对映选择性烷基硫酸酯酶
Ｔａｂｌｅ １　 Ｓｔｅｒｅｏ⁃ ａｎｄ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ
微生物体 底物类型 转化率 ／ ％ 对映体选择性 Ｅ值 文献
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ ＦＣＣ０９８ 脂肪族 ＜５ １ ［８］
Ｇｕｌｏｓｉｂａｃｔｅｒ ｍｏｌｉｎａｔｉｖｏｒａｘ ＤＳＭ１３４８５ 脂肪族 ＞１０ ５ ［８］
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ􀆰 Ｃ１２Ｂ （ＮＣＩＭＢ１１７５３） 脂肪族 ＜５～１０ ４～１３ ［９］
Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ ｓｐ􀆰 ＤＳＭ６３９２ 脂肪族 ＜５～１０ １～３ ［１０］
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ􀆰 Ｓ７ 脂肪族 — — ［１１］
Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ ＤＳＭ４４５４１ 脂肪族和芳香族 ４～６８ １～２１ ［１１］
Ｒｈｏｄｏｐｉｒｅｌｌｕｌａ ｂａｌｔｉｃａ ＤＳＭ１０５２７ 脂肪族 ２６ — ［１２］
Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ􀆰 ＰＣＣ７９４２ 脂肪族 ＜５～２４ １～３ ［１０］
Ｓｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ􀆰 ＲＣＣ５５６ 脂肪族 ＜５～１０ — ／ １ ［１０］
Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ ＤＳＭ６３９ 脂肪族和芳香族 １０～４３ ５～ ＞２００ ［１３］
Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ ｓｏｌｆａｔａｒｉｃｕｓ ＤＳＭ１６１７ 脂肪族和芳香族 ２０～５６ ２～３５ ［１３］
图 １　 生物催化外消旋仲烷基硫酸酯
Ｆｉｇ􀆰 １　 Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｃ⁃ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ ｅｓｔｅｒｓ
２　 硫酸酯酶催化机制简介
迄今为止，对硫酸酯水解酶的研究主要集中在
仲烷基硫酸酯的酶水解［１４－１８］：羟基负离子亲核进攻
硫和碳使得 Ｓ—Ｏ和 Ｃ—Ｏ键被断开（图 ２）。 进攻 Ｓ
原子断裂 Ｓ—Ｏ键和进攻 Ｃ 原子断裂 Ｃ—Ｏ 键分别
导致了底物的结构以碳原子为手性中心的保留和
倒置反转。
催化裂解硫酸酯键的硫酸酯酶主要存在着以
下的类型（图 ３）：①真核芳基硫酸酯酶，这是目前研
究最为透彻的一种硫酸酯酶，它的作用机制如图 ３
（ａ）所示；②依赖 Ｆｅ２＋硫酸酯酶，属于能够氧化裂解
７０１　 第 １期 张丹平等：微生物硫酸酯酶研究进展：来源、催化机制及应用
硫酸酯为相应的醛和无机硫酸盐的双加氧酶（图 ３
（ｂ）），并且需要 α 酮戊二酸作为电子受体。 因为
该反应伴随着碳手性中心的破坏，所以它对硫酸酯
的生物转化的立体选择性是有限制的；③与金属 β
内酰胺有关的硫酸酯酶，活性中心需 ２ 个 Ｚｎ２＋，
Ｚｎ２＋能够活化水分子形成 ＯＨ－，进一步 ＯＨ 在底物
上亲核攻击，从而形成无机硫酸盐和相应的醇（图 ３
（ｃ））。
图 ２　 酶催化水解烷基硫酸酯的立体化学途径
Ｆｉｇ􀆰 ２　 Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐａｔｈｗａｙｓ ｏｆ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ ｅｓｔｅｒｓ
图 ３　 可能的硫酸酯酶催化机制
Ｆｉｇ􀆰 ３　 Ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｃａｔａｌｙｔｉｃ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ
８０１ 生　 物　 加　 工　 过　 程　 　 第 １３卷　
３　 硫酸酯酶在生物转化中的应用
硫酸酯酶在生物转化的最早应用研究主要是
利用它们对于烷基硫酸酯（例如，一些去污剂）的生
物降解作用。 首次发现烷基硫酸酯酶具有对映体
选择性催化水解仲烷基硫酸酯的特性是偶然发现
的。 最近 １０年，人们才对仲烷基硫酸酯酶的立体和
对映体选择性进行深入的研究［１４］。 硫酸酯酶在各
生物进程中还有着关键的作用（例如，细胞信号传
导、调节内分泌及发病机制），因此它们已经在生物
医学研究领域做了深入的研究。 这些是“生物医学
技术” ［１５］的研究领域，本文不做深入探讨。
３􀆰 １　 硫酸酯酶的扩大筛选
为了避免对于烷基硫酸酯酶选择性的低效和耗
时的筛选，主要是在能代谢无机硫的微生物酶源中筛
选硫酸酯酶。 这些硫酸酯酶可催化包括所有的氧化
态硫转化为硫酸盐，也可分解有机硫物质（如烷基硫
酸盐）。 许多硫酸酯酶菌株已筛选并应用于生物转化
和生物降解。 从洗涤剂污染的土壤中分离出的
Ｐ􀆰 ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ＭＴＣ １０３１１可在 ４８ ｈ内降解 １􀆰 ４ ｇ十二
烷基磺酸（ＳＤＳ），并可在 ４０ ℃条件下降解 ９０％的表
面活性剂［１３］。 菌株 Ａ􀆰 ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ 和 Ｐ􀆰 ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ
可在 １３０ ｈ 完全降解 ＳＤＳ ［１０］。 Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ
ｓｐ􀆰 ＣＺ１１２７对海参岩藻聚糖硫酸酯具有较好的活性，
其硫酸酯酶活力可达 ２２􀆰 ８８ Ｕ ／ ｍＬ ［９］。 Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ
ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ ＤＳＭ６３９可转化直链和支链仲烷基硫酸
酯，其对映体选择性 Ｅ可高达 ２００以上［１３］。 Ｈｅ等［１９］
首次利用 Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ􀆰 ＣＣＺＵ１０ １、Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｓｐ􀆰 ＣＣＺＵ１２ １和 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ􀆰 ＣＣＺＵ１１ １ 转化 １，３
丙二醇环硫酸酯合成 １，３ 丙二醇，硫酸酯酶活力分
别为 ４􀆰 ８、１􀆰 ６和 １􀆰 ３ Ｕ ／ ｇ （干质量细胞）。
另外，从生物资源库中可以搜索出理想活性的
硫酸酯酶。 寻找这些酶的指导原则如下：与催化底
物立体构型倒置的烷基硫酸酯酶相比，催化立体构
型保留硫酸酯酶的催化机理及结构研究得较清
晰［２０］，通过对从 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ和哺乳动物
中获得的芳基硫酸酯酶 Ａ 进行研究，几乎所有硫酸
酯酶生成后都需经历一种翻译修饰后才能产生活
性的过程，这个过程发生在硫酸酯酶多肽折叠成天
然结构之前；若某种硫酸酯酶的翻译修饰出现异
常，致使酶活性降低或缺乏，会造成各种硫酸酯酶
的硫酸酯底物堆积在细胞溶酶体和其他细胞器中，
损害细胞的正常功能，从而出现一系列复杂的临床
表现［２１］，如芳基硫酸酯酶 Ａ被怀疑与人类乳腺癌的
发病机制有关。 在原酶中，一种丝氨酸或半胱氨酸
残基的翻译后修饰提供 １ 个醛基的 Ｃα 甲酰甘氨
酸。 这种酶的催化循环从载入 １ 个水分子开始，然
后产生相应的醛水合物。 作为一个强亲核试剂，后
者对硫原子进行亲核进攻，它们的活性位点为二价
金属离子 Ｃａ２＋或 Ｍｇ２＋。 因此，硫酸酯中 Ｓ—Ｏ 被破
坏，并且其手性中心不受影响。 虽然硫酸基团仍然
是通过共价基团连接到催化水合醛基上，从而产生
水解产物仲醇，并且其构型是不变的。 硫酸氢从活
性位点上消除后再生成醛基，然后催化循环停止
（如图 ３（ａ））。
对于一固定硫酸酯酶的搜索主要可根据已知
的硫酸酯酶作用机制即 Ｃ ／ Ｓ Ｘ Ｐ Ｘ Ａ Ｘ４
Ｔ Ｇ，这个机制可在哺乳动物以及低等真核生物和
原核生物的硫酸酯酶中发现，但是 Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ 硫酸
酯酶 ＲＳ２ 的转化作用不遵循此机制。 与基因组数
据库的序列比较，发现在海洋菌属 Ｒｈｏｄｏｐｉｒｅｌｌｕｌａ
ｂａｌｔｉｃａ ＤＳＭ１０５２７中其在编码硫酸酯酶的基因含量
是很高的［１２］。 研究表明，其静息细胞能够水解一系
列的仲烷基硫酸酯，并且具有很高的对映体选择性
（Ｅ ＞ ２００ ），推测其具有严格的构型保留催化
机制［２２］。
尽管微生物来源的硫酸酯酶已经应用于手性
醇的合成（表 １），但是大部分硫酸酯酶主要作用于
脂肪族的硫酸酯，芳香族硫酸酯酶源的扩大筛选及
其用于芳香族手性醇的合成仍然是目前值得的研
究工作。
３􀆰 ２　 纯化的硫酸酯酶的生物转化
与已报道的全细胞催化相比，只有极少的纯
化烷基硫酸酯酶被证实其对于烷基硫酸酯有良好
的底物耐受性（表 ２）。 然而，利用全细胞催化表
现出了较为低的对映体选择性，这可能主要由于
全细胞中含有多种不同（或相反）对映选择性的烷
基硫酸酯酶。 利用纯化的硫酸酯酶可实现较为优
秀的对映选择性。 从纯化酶的来源来看，大部分
分离纯化出的硫酸酯酶来自于原核生物，只有少
数例外，例如 Ｈｅｌｉｘ ｐｏｍａｔｉａ 芳基硫酸酯酶［２３］ 。 但
是，未发现有从古细菌中分离纯化硫酸酯酶的报
道，尽管古细菌很可能对于烷基硫酸酯具有较高
的催化活性［２４］ 。 大多数纯化硫酸酯酶是源自于变
形细菌门，像 Ｐｉｓａ１、ＰＡＳ、ＳｄｓＡ１、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ Ｓ１
３ （ＮＣＩＢ１１７５３）和 ＳｄｓＡＰ 等硫酸酯酶有着很高的
９０１　 第 １期 张丹平等：微生物硫酸酯酶研究进展：来源、催化机制及应用
Ｅ 值 和 活 性。 Ｃｏｍａｍｏｎａｓ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ ＣＳ１ 和
Ｃｏｍａｍｏｎａｓ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ Ｓ２ 硫酸酯酶还可水解一些仲
烷基硫酸酯，然而没有关于其具体 Ｅ 值的报
道［２５］ 。 Ｃｏｒｙｎｅｆｏｒｍ ｓｐ􀆰 Ｂ１ａ硫酸酯酶对于碳链长度
３ ～ ７个碳原子的伯烷基硫酸酯具有一定的活性。
Ａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ ＡＴＣＣ ９６２１ 和 Ｈｅｌｉｘ ｐｏｍａｔｉａ 硫
酸酯酶底物谱较窄，它们仅仅对伯烷基硫酸酯酶
表现 出 了 一 定 的 活 性［２６］ 。 Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ
ＤＳＭ４４５４１ 硫酸酯酶 ＲＳ２ 是一种单体可溶性蛋白，
在催化过程中无需辅助因子或金属离子的辅助参
与，它的相对分子质量为 ４􀆰 ３×１０４ ｋＤａ。 在催化反
应过程中，ＲＳ２ 严格对映体选择地催化底物发生
立体构型倒置。 仲烷基硫酸酯酶对映选择性的高
低范围是不同的。 当催化外消旋 ２ 辛基硫酸酯
水解时，其对映选择率 Ｅ 值可达 ２１。 与全细胞相
比，纯化酶的成本较高，但是其良好的对映选择性
和催化特性，仍然在合成高附加值的手性醇方面
具有潜在的应用价值。
表 ２　 纯化硫酸酯酶的底物范围、活性和对映体选择性
Ｔａｂｌｅ ２　 Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｓｃｏｐｅ，ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｎｄ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｆｏｒ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ
纯化硫酸酯酶 底物类型 转化率 ／ ％ Ｅ 文献
Ｃｏｍａｍｏｎａｓ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ ＣＳ１ 脂肪族 — — ［１０］
Ｐｉｓａ１ 脂肪族和芳香族 ５～５７ １０～ ＞２００ ［２５］
ＰＡＳ 脂肪族和芳香族 ４６～６５ ２～ ＞２００ ［２５］
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ Ｓ１ 脂肪族 — — ［１０］
Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ Ｓ２ 脂肪族 — ２１～ ＞２００ ［１０］
３􀆰 ３　 外消旋 ｓｅｃ 硫酸酯的化学 酶法去消旋化
化学 酶法组合催化也应用于去消旋化 ｓｅｃ 硫
酸酯的研究，如图 ４所示。 第一步，外消旋仲醇硫酸
酯的动力学拆分，然后通过 Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ 反转硫酸酯
酶 ＲＳ２催化，在生物水解过程中形成了同手性的仲
醇以及未反应完的硫酸酯混合物；第二步，混合物
利用叔甲基丁基醚、二咽恶烷和对甲苯磺酸的混合物
进行处理，催化未转化的硫酸酯以保持原构型进行
水解。 通过以上步骤使得水解产物为单一立体构
型的仲醇作为唯一的水解产物［６］。 可见，外消旋
ｓｅｃ 硫酸酯的化学 酶法去消旋化可实现手性醇的
高效合成。
图 ４　 化学 酶法去消旋化仲烷基硫酸酯
Ｆｉｇ􀆰 ４　 Ｄｅｒａｃｅｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｃ⁃ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ ｅｓｔｅｒｓ ｕｓｉｎｇ ｂｉｏ⁃ａｎｄ ｃｈｅｍｏ⁃ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ
３􀆰 ４　 硫酸酯酶选择性的强化
当使用全细胞或者纯化酶催化硫酸酯时，其对
映体选择性经常会有一些不足，这主要是由于多种
不同硫酸酯酶立体选择性的相互竞争或抑制作用。
因此，研究人员研究了一些方法以解决硫酸酯酶在
催化过程中所遇到的这些问题。 例如，各种添加剂
对酶对映体选择性的影响主要表现在促进剂或对
映选择性抑制剂方面，这是众所周知的烷基硫酸酯
０１１ 生　 物　 加　 工　 过　 程　 　 第 １３卷　
酶手性识别调节因子［１６］。 研究发现聚合物、非离子
洗涤剂以及多羟基化合物对于烷基硫酸酯酶的对
映选择性的影响不明显。 然而，离子型去污剂（例
如，十六烷基三甲基溴化铵）对其表现出了较显著
的影响。 有机助溶剂可提高全细胞和纯化酶等生
物催 化 剂 的 选 择 性。 对 于 从 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ｓｐ􀆰 ＤＳＭ６６１１纯化得到的硫酸酯酶 Ｐｉｓａ１，在一个较
广泛的范围内进行了极性和非极性有机溶剂的选
择研究，发现二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）可抑制含有活性
烯丙基和苄基官能团的硫酸酯的水解。 加入助溶
剂 ＤＭＳＯ后，硫酸酯酶 Ｐｉｓａ１ 的选择性明显增加。
在蓝藻全细胞催化中加入有机助溶剂，其对映体选
择性也有了较为明显的提高，例如 Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓ
ｅｌｏｎｇａｔｕｓ ＰＣＣ７９４２ 和 Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ ｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ
ＤＳＭ６３９２可选择类似甲醇和乙醇等低碳醇作为有
机助溶剂。 加入低碳醇助溶剂后，尽管这 ２ 种菌株
的转化成本有所提高，但是它们的 Ｅ 值可以提高到
２００ 以 上［１０］。 在 叔 丁 醇 水 两 相 体 系 中，
Ｐ􀆰 ｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ ＤＳＭ ６３９２ 催化获得的产物 ｅ􀆰 ｅ􀆰 值＞
９９％［１０］。 研究发现，几种烷基和芳基硫酸酯酶的催
化反应依赖于金属离子。 例如 Ｐ􀆰 Ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ 芳基硫
酸酯酶 ＰＡＳ主要依赖于 Ｃａ２＋，引导酶与带负电荷的
底物正确的结合［１９］，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ􀆰 ＤＳＭ６６１１ 烷基
硫酸酯酶 Ｐｉｓａ １需要 ２ 个 Ｚｎ２＋激活水，从而为硫酸
酯酶催化水解反应提供一个良好的亲核试剂
［ＯＨ－］。 Ｆｅ２＋和 Ｆｅ３＋对 Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ ＤＳＭ４４５４１
硫酸酯酶 ＲＳ２的对映体选择性具有显著的影响，当
加入 ５ ｍｍｏｌ ／ Ｌ 的 ＦｅＣｌ３时，其对映体选择性从 ３􀆰 ６
提高到了 ２００ 以上［１７］。 因为选择性的增加通常会
使活性降低，所以这种选择性强化的技术并不适合
大规模的生产［１４］。
３􀆰 ５　 硫酸酯酶的固定化
生物催化制剂的可回收以及可重复利用的特
性使其在工业上有着广阔的应用前景。 目前固定
化硫酸酯酶的研究较少。 Ｔｈｏｍａｓ 等［９］首次利用聚
丙烯酰胺微球固定 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ Ｃ１２Ｂ 细胞，经研究
发现固定化后的细胞对伯烷基硫酸酯盐的活性与
游离酶相近。 固定化后的细胞可在 ４８ ｈ 内将硫酸
酯盐催化水解完全，并且其经过 １３次的使用后仍然
保留着 １３％的活性。 Ｈｅ等［１９］利用海藻酸钙固定化
Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ􀆰 细胞转化 １，２ 和 １，３ 丙二醇环硫
酸酯，固定化催化剂操作 １９２ ｈ，可合成高产率的
（Ｒ） １，２ 丙二醇（ ｅ􀆰 ｅ．＞９９％）和 １，３ 丙二醇。 进
一步研究发现，可以利用固定化的 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
Ｃ１２Ｂ和 Ｃｏｍａｍｏｎａｓ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ Ｎ３Ｈ 作为污水处理厂
的生物膜［２７］。 Ｃ􀆰 ｔｅｒｒｉｇｅｎａ Ｎ３Ｈ 对 ＳＤＳ 并没有表现
出活性，但是 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ Ｃ１２Ｂ 作为众所周知的
ＳＤＳ降解器，其在固定化的形态下依然能够水解表
面活性剂［２７］。 利用 ＤＥＡＥ 和 Ｅｃｔｅｏｌａ 纤维素固定
化 Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ ＤＳＭ４４５４１ ＲＳ２的粗酶，其残留
活性分别约为 １００％和 ２２％［１７］。 采用合适的固定化
载体开发新型的硫酸酯酶固定化技术是值得研究
的方向。 由于烷基硫酸酯酶对底物构型的反转或
者保留作用机制的发现［２８ ３１］，具有同样作用机制的
酶很快被人们在其他的微生物中发现。
４　 结语
在未来，可以有望利用转基因技术来大量表达
产生一系列的重组硫酸酯酶，大规模用于催化各种
硫酸酯发生去消旋化，产生相应的仲醇。 另外，对
环硫酸酯的酶法对映选择性水解也是目前研究的
热点。 可以预期，硫酸酯酶在生物转化中具有广阔
的工业应用前景。
参考文献：
［ １ ］ 　 何玉财，许建和．腈水解酶在羧酸合成中的研究进展［ Ｊ］ ．生物
加工过程，２００９，７（１）：７⁃１２．
［ ２ ］ 　 郁惠蕾，黄磊，倪燕，等．羰基生物还原法合成手性醇的研究
进展［Ｊ］ ．生物加工过程，２０１３，１１（３）：７１⁃８２．
［ ３ ］ 　 许建和，谢谚，赵丽丽，等．工业生物催化前线动态及名家观
点［Ｊ］ ．生物加工过程，２００７，５（１）：１⁃８．
［ ４ ］ 　 刘湘，潘争光，许建和．手性芳基邻二醇的不对称合成［ Ｊ］ ．化
学进展，２０１１，２３（５）：９０３⁃９１３．
［ ５ ］ 　 Ｏｒｒｕ Ｒ Ｖ，Ａｒｃｈｅｌａｓ Ａ，Ｆｕｒｓｔｏｓｓ Ｒ，ｅｔ ａｌ． Ｅｐｏｘｉｄｅ ｈｙｄｒｏｌａｓｅｓ ａｎｄ
ｔｈｅｉｒ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ［ Ｊ］ ． Ａｄｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｅｎｇ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，
１９９９，６３： １４５⁃１６７．
［ ６ ］ 　 Ｗａｌｌｎｅｒ Ｓ Ｒ， Ｐｏｇｏｒｅｖｅ Ｍ， Ｔｒａｕｔｈｗｅｉｎ Ｈ， ｅｔ ａｌ． Ｂｉｏｃａｔａｌｙｔｉｃ
ｅｎａｎｔｉｏｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｃ⁃ａｌｃｏｈｏｌｓ ｕｓｉｎｇ ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ［Ｊ］ ．
Ｅｎｇ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ，２００４，４（６）：５１２⁃５１６．
［ ７ ］ 　 Ｈａｇｅｌｕｅｋｅｎ Ｇ， Ａｄａｍｓ Ｔ Ｍ， Ｗｉｅｈｌｍａｎｎ Ｌ， ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅ ｃｒｙｓｔａｌ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＳｄｓＡｌ， ａｎ ａｌｋｙｌｓｕｌｆａｔａｓｅ ｆｒｏｍ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，ｄｅｆｉｎｅｓ ａ ｔｈｉｒｄ ｃｌａｓｓ ｏｆ ｓｕｌｆａｒａｓｅｓ［Ｊ］ ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ
Ｓｃｉ ＵＳＡ，２００６，１０３（２０）：７６３１⁃７６３６．
［ ８ ］ 　 Ｇａｄｌｅｒ Ｐ， Ｆａｂｅｒ Ｋ． Ｈｉｇｈｌｙ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｂｉｏｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｏｆ
ｓｅｃａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ ｅｓｔｅｒｓ ｗｉｔｈ ｉｎｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ ｃａｔａｌｙｓｅｄ ｂｙ
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ［Ｊ］ ．Ｅｕｒ Ｊ Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ，２００７，３３：５５２７⁃５５３０．
［ ９ ］ 　 Ｔｈｏｍａｓ Ｏ Ｒ Ｔ， Ｗｈｉｔｅ Ｇ Ｆ． Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ
ｄｅｇｒａｄｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ Ｃ１２Ｂ ｉｎ ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ ｇｅｌ：
ＩＩＩ． ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｆｏｒ ｒａｗ ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ ａｎｄ ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ
ｗａｓｔｅｓ［Ｊ］ ．Ｅｎｚｙｍｅ Ｍｉｃｒｏｂ Ｔｅｃｈｎｏｌ，１９９１，１３：３３８⁃３４３．
１１１　 第 １期 张丹平等：微生物硫酸酯酶研究进展：来源、催化机制及应用
［１０］　 Ｇａｄｌｅｒ Ｐ， Ｒｅｉｔｅｒ Ｔ Ｃ， Ｈｏｅｌｓｃｈ Ｋ， ｅｔ ａｌ． Ｅｎａｎｔｉｏｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ
ｉｎｖｅｒｔｉｎｇ ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌｓｕｌｆａｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｃｙａｎｏ⁃ ａｎｄ ｔｈｉｏ⁃ ｂａｃｔｅｒｉａ
Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓ ａｎｄ Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ ｓｐｐ．： ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｂｙ
ｍｅｄｉｕｍ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ［ Ｊ ］ ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ， ２００９， ２０：
１１５⁃１１８．
［１１］ 　 Ｙｅｌｄｈｏ Ｄ，Ｒｅｂｅｌｌｏ Ｓ，Ｊｉｓｈａ Ｍ Ｓ．Ｐｌａｓｍｉｄ⁃ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ
ｏｆ ｔｈｅ ａｎｉｏｎｉｃ ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ ｓｏｄｉｕｍ ｄｏｄｅｃｙｌ ｓｕｌｐｈａｔｅ ｂｙ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ Ｓ７ ［ Ｊ ］ ． Ｂｕｌｌ Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｃｏｎｔａｍ Ｔｏｘｉｃｏｌ， ２０１１， ８６：
１１０⁃１１３．
［１２］ 　 Ｇｌｏｃｋｎｅｒ Ｆ Ｏ， Ｋｕｂｅ Ｍ， Ｂａｕｅｒ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｇｅｎｏｍｅ
ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｒｉｎｅ ｐｌａｎｃｔｏｍｙｃｅｔｅ Ｐｉｒｅｌｌｕｌａ ｓｐ． ｓｔｒａｉｎ １［ Ｊ］ ．
Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，２００３，１００（１４）：８２９８⁃８３０３．
［１３］ 　 Ｗａｌｌｎｅｒ Ｓ Ｒ，Ｎｅｓｔｌ Ｂ Ｍ，Ｆａｂｅｒ Ｋ．Ｈｉｇｈｌｙ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｓｔｅｒｅｏ⁃
ｉｎｖｅｒｔｉｎｇ ｓｅｃａｌｋｙｌｓｕｌｆａｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈｙｐｅｒｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｉｃ Ａｒｃｈａｅａ
［Ｊ］ ．Ｏｒｇ Ｂｉｏｍｏｌ Ｃｈｅｍ，２００５，３（１４）：２６５２⁃２６５６．
［１４］ 　 Ｐｏｇｏｒｅｖｃ Ｍ， Ｋｒｏｕｔｉｌ Ｗ， Ｗａｌｌｎｅｒ Ｓ Ｒ， ｅｔ ａｌ． Ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ
ｓｔｅｒｅｏｉｎｖｅｒｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｋｉｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｃ⁃ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ
ｅｓｔｅｒｓ ｂｙ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｗｉｔｈ ａｎ ａｌｋｙｌｓｕｌｆａｔａｓｅ ｆｒｏｍ Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ
ＤＳＭ４４５４１ ｆｕｒｎｉｓｈｅｓ ｈｏｍｏｃｈｉｒａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ［ Ｊ］ ． Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ Ｉｎｔ
Ｅｄ，２００２，４１（２１）： ４０５２⁃４０５４．
［１５］ 　 Ｈａｎｓｏｎ Ｓ Ｒ， Ｂｅｓｔ Ｍ Ｄ， Ｗｏｎｇ Ｃ Ｈ． Ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ： ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，
ｍｅｃｈａｎｉｓｍ， ｂｉｏｌｏｇｉｃａＩ ａｃｔｉｖｉｔｙ， ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ， ａｎｄ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｕｔｉｌｉｔｙ
［Ｊ］ ．Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ Ｉｎｔ Ｅｄ，２００４，４３（４３）：５７３６⁃５７６３．
［１６］ 　 Ｆａｂｅｒ Ｓ Ｋ， Ｏｔｔｏｌｉｎａ Ｇ， Ｒｉｖａ Ｓ． Ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ⁃ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ
ｈｙｄｒｏｌａｓｅ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ［ Ｊ ］ ． Ｂｉｏｃａｔａｌ Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍ， １９９３， ８ （ ２ ）：
９１⁃１３２．
［１７］ 　 Ｐｏｇｏｒｅｖｃ Ｍ， Ｓｔｒａｕｓｓ Ｕ Ｔ， Ｒｉｅｒｍｅｉｅｒ Ｔ， ｅｔ ａｌ． Ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ⁃
ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｉｎ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔｅｓ ｂｙ
ａｎ ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔａｓｅ ｆｒｏｍ Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ ＤＳＭ４４５４１ ［ Ｊ ］ ．
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，２００２，１３（１３）：１４４３⁃１４４７．
［１８］ 　 Ｐｏｇｏｒｅｖｃ Ｍ，Ｆａｂｅｒ Ｋ．Ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｓｔｅｒｅｏｉｎｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌ
ｓｕｌｆａｔｅｓ ｂｙ ａｎ ａｌｋｙｌｓｕｌｆａｔａｓｅ ｆｒｏｍ Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｕｂｅｒ ＤＳＭ４４５４１
［Ｊ］ ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，２００２，１３（１３）： １４３５⁃１４４１．
［１９］ 　 Ｈｅ Ｙ Ｃ，Ｔａｏ Ｚ Ｃ，Ｚｈａｎｇ Ｄ Ｐ，ｅｔ ａｌ． Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ １，３⁃
ｐｒｏｐａｎｅｄｉｏｌ ｃｙｃｌｉｃ ｓｕｌｆａｔｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｔｏ ｄｉｏｌｓ ｂｙ
Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ． ［ Ｊ ］ ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｌｅｔｔ， ２０１４， ＤＯＩ： １０． １００７ ／
ｓ１０５２９⁃０１４⁃１６７０⁃７
［２０］ 　 Ｂｏｌｔｅｓ Ｉ， Ｃｚａｐｉｎｓｋａ Ｈ， Ｋａｈｎｅｒｔ Ａ， ｅｔ ａ１． １． ３ Ａ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ
ａｒｙｌｓｕｌｆａｔａｓｅ ｆｒｏｍ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｓ ｔｈｅ
ｃａｔａｌｙｔｉｃ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｓｕｌｆａｔｅ ｅｓｔｅｒ ｃｌｅａｖａｇｅ ｉｎ ｔｈｅ ｓｕｌｆａｔａｓｅ
ｆａｍｉｌｙ［Ｊ］ ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，２００１，９（６）：４８３⁃４９１．
［２１］ 　 孟岩，黄尚志，魏珉．多种硫酸酯酶缺乏症研究进展［ Ｊ］ ．医学
研究杂志，２００６，３５（６）：６８⁃６９．
［２２］ 　 Ｗａｌｌｎｅｒ Ｓ Ｒ， Ｂａｕｅｒ Ｍ， Ｗｕｒｄｅｍａｎｎ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｈｉｇｈｌｙ
ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｒｉｎｅ
ｐｌａｎｃｔｏｍｙｃｅｔｅ Ｒｈｏｄｏｐｉｒｅｌｌｕｌａ ｂａｌｔｉｃａ ｓｈｏｗｓ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｏｆ
ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ ［ Ｊ ］ ． Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ Ｉｎｔ Ｅｄ， ２００５， ４４ （ ３９ ）：
６３８１⁃６３８４．
［２３］ 　 Ｔｈｉｅｓ Ｗ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅ ｓｕｌｆｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ
ｉｎ ｔｈｅ ｅｄｉｂｌｅ ｓｎａｉｌ，Ｈｅｌｉｘ ｐｏｍａｔｉａ［Ｊ］ ．Ｎａｔｕｒｗｉｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｅｎ，１９７９，
６６（７）：３６４⁃３６５．
［２４］ 　 Ｗａｌｌｎｅｒ Ｓ Ｒ，Ｎｅｓｔｌ Ｂ Ｍ，Ｆａｂｅｒ Ｋ，ｅｔ ａｌ． Ｈｉｇｈｌｙ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ
ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌｓｕｌｆａｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ ＤＳＭ６３９
［Ｊ］ ．Ｏｒｇ Ｌｅｔｔ，２００４，６（２６）：５００９⁃５０１０．
［２５］ 　 Ｂａｒｒｅｔｔ Ｃ Ｈ，Ｄｏｄｇｓｏｎ Ｋ Ｓ，Ｗｈｉｔｅ Ｇ Ｆ，ｅｔ ａｌ．Ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ
ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｅｒｅｏｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＳ２
ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｌｋｙｌｓｕｌｐｈｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ ｏｆ Ｃｏｍａｍｏｎａｓ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ ［ Ｊ ］ ．
Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ，１９８０，１９１：４６７⁃４７３．
［２６］ 　 Ｓｃｈｒöｄｉｎｇｅｒ， ＬＬＣ． Ｓｃｈｒöｄｉｎｇｅｒ Ｒｅｌｅａｓｅ ２０１３⁃１［Ｍ］． Ｍａｅｓｔｒｏ，
ｖｅｒｓｉｏｎ ９．４．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｓｃｈｒöｄｉｎｇｅｒ ＬＬＣ，２０１３．
［２７］ 　 Ｒｏｉｇ Ｍ Ｇ， Ｐｅｄｒａｚ Ｍ Ａ， Ｓａｎｃｈｅｚ Ｊ Ｍ． Ｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｓｏｔｈｅｒｍｓ ａｎｄ
ｋｉｎｅｔｉｃｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｉｏｎｉｃ ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ ｂｙ
ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ ｂａｃｔｅｒｉａ： Ｉ．Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ Ｃ１２Ｂ［ Ｊ］ ． Ｊ Ｍｏｌ Ｃａｔａｌ Ｂ：
Ｅｎｚｙｍ，１９９８，４（５ ／ ６）：２５３⁃２７０．
［２８］ 　 Ｓｃｈｏｂｅｒ Ｍ，Ｔｏｅｓｃｈ Ｍ，Ｋｎａｕｓ Ｔ，ｅｔ ａｌ． Ｏｎｅ⁃ｐｏｔ ｄｅｒａｃｅｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ
ｓｅｃ⁃ａｌｃｏｈｏｌｓ： ｅｎａｎｔｉｏｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｏｆ
ａｌｋｙｌｓｕｌｆａｔｅｓ ｕｓｉｎｇ ｓｔｅｒｅｏｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ ［ Ｊ ］ ． Ａｎｇｅｗ
Ｃｈｅｍ Ｉｎｔ Ｅｄ，２０１３，５２：３２７７⁃３２７９．
［２９］ 　 Ｓｃｈｏｂｅｒ Ｍ，Ｋｎａｕｓ Ｔ，Ｔｏｅｓｃｈ Ｍ，ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ
ｔｈｅ ｉｎｖｅｒｔｉｎｇ ｓｅｃ⁃ａｌｋｙｌｓｕｌｆａｔａｓｅ ｐｉｓａ１［Ｊ］ ．Ａｄｖ Ｓｙｎｔｈ Ｃａｔａｌ，２０１２，
３５４： １７３７⁃１７４２．
［３０］ 　 Ｇａｄｌｅｒ， Ｐ， Ｆａｂｅｒ Ｋ． Ｎｅｗ ｅｎｚｙｍｅｓ ｆｏｒ ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ：
ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｌｋｙｌ ｓｕｌｆａｔａｓｅｓ ｄｉｓｐｌａｙｉｎｇ ｓｔｅｒｅｏ⁃ ａｎｄ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ
［Ｊ］ ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００７，２５（２）：８３⁃８８．
［３１］ 　 吕吉祥，吴小飞，刘均洪．微生物中的烷基硫酸酯酶在生物转
化中的应用研究进展 ［ Ｊ］ ．化学工业与工程技术，２００７，２８
（４）：１６⁃２２．
（责任编辑　 荀志金）
２１１ 生　 物　 加　 工　 过　 程　 　 第 １３卷