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2003年11月 吴坛珍等：微生物提高原油采出率的室内研究 ‘55‘————一———————————————————————————————————————————————————————————————————一表1各岩芯基本参数T出Iel Ba西c瑚瑚me幢rme啦h∞【e0fr响k
表2水溶性培养基组成配方
Table2 1WhIer_soluble8ubg吨kcmls忸tutefomlIdaⅡon
原料 水 氯化钠 硫酸钠 氯化镁
用量幢 140 2．5 O．04 04
原料 氯化钙 氯化铵磷酸二氢钾氯化铁
用量，g 0．12 O1 0．1 微量
2室内试验
2．1菌种的培养与筛选
为r适应地层状况，本试验所要的细菌必须满
足兼氧性、抗40℃以上温度、能适应10万耐L高
矿化度的环境-sJ。
2．1．1培养菌种
在6瓶水溶液培养基中，加入菌种(杆菌)和少
量乳化原油，在不除氧的情况下，用棉塞封口，放入
25℃的培养箱中培养，原菌种中，能适应此环境的
细菌得以生存。一天后，经化验，培养基中有极少量
的杆菌存在。再经过4天的培养，经镜检，培养基已
有大量的杆菌存在。以上说明，原细菌已经培养成
杆菌。
2．1．2培养耐高矿化度的菌种
将培养基的矿化度提高至27000n耐L，同时温
度保持不变，补加NHd、KH2P04，以提供微生物生
长所需要的氧源、磷源。在此环境培养一天后有少
量杆菌存在。4天后，有大量杆菌存在。之后，将培
养基的矿化度逐渐提高至10万吲L左右，每次提
高27000耐L，且不断补充氧源、磷源。最后，经化
验，在10万n耐L的高矿化度培养基中，有大量杆菌
存在，且体积较当初小一些。
2．1．3耐高温、耐高矿化度菌种的培养
在矿化度为lO万n耐L条件下，逐步将温度提
高到40℃，每次提高5℃，每次培养3d，最后经镜
检在温度40气，矿化度为10万n洲L的培养基中，
有大量细小杆菌存在。
综合以上所述，经过每一步的培养、筛选后，所
培养出的细菌，能在矿化度为10万耐L、40℃的环
境中生存。此环境的pH值为5—6。
2．1．4扩大培养
另外配制840mL矿化度为10万n∥L的水溶
液培养基共两瓶，每瓶中加入上述已培养出的菌种
100mL和少量乳化原油，然后摇匀，放在40气的培
养箱中，等待试验。
2．2室内岩芯驱替试验
本试验所用岩芯为人造砂岩岩芯，所用的原油
是两种性质不同的油，一种是稠油，在常温下能流
动，另一种是重质油，常温下固态，凝固点为36℃。
岩芯驱替试验示意图如图1。
圈1岩芯驱替试验示意图
Fig-lsketchrmp0fc呲0ffock8xpe—me址0fdi刚ac咖ent
2．2．1重质油试验过程
(1)用水驱出岩芯中的煤油，同时饱和水45
ndn：
(2)将岩芯(同夹持器)放在45℃水浴锅中，油
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．58． 生物加工过程 第1卷第2期———————————————一———————————————一⋯4试验结论通过本次室内试验，结论如下：
(1)微生物提高采出率在技术上是可行的；
(2)在残余油饱和度太于某一』临界值时，注入微
生物后的原油产量仅与注入的细菌量和细菌降解原
油的时间有关；
(3)野油菜花黄单胞杆菌对原油的降解作用具
有选择性；
(4)岩心驱替实验说明野油菜花黄单胞杆菌有
很强的提高采收率性能，是一个很好的提高采收率
的菌种。
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(上接第49页)
有较强的醇氧化酶启动子肌嘎l，测序表明插入的
sGD序列与国外报道有98％的同源性，通过诱导表
达，表达的蛋白的分子量约为39．8kD，与文献报道
的乙醇酸氧化酶分子量相近。酶活达到了40．8IU，
g湿菌体，比不含有目的片断的重组菌酶活提高了
17倍。成功地构建了含乙醇酸氧化酶基因的毕赤
氏酵母菌，为进一步进行生物法制备乙醛酸的应用
奠定了基础。
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