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ＱＩＮＹｉｎｇｃｈｕｎ，ＬＩＵＰｅｎｇ，ＹＡＮＧＬｉｒｏｎｇ，ＸＵＧａｎｇ，ＷＵＪｉａｎｐｉｎｇ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００２７，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＢｙｔｈｅｅｒｏｒｐｒｏｎｅＰＣＲａｎｄｈｉｇｈｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｃｒｅｅｎｉｎｇｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｃｏｌｏｒｒｅａｃｔｉｏｎｏｆｃｈｌｏｒｉｄｅ
ｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ａｍｕｔａｎｔｌｉｂｒａｒｙｏｆＲ２ＣＰＡｄｅｈａｌｏｇｅｎａｓｅｗａｓｃｒｅａｔｅｄａｎｄｓｃｒｅｅｎｅｄ．Ｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃ
ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅｍｕｔａｎｔｓ，ｃａｌｅｄｔｈｅＤｅｈＤＩＶＧ２ａｎｄＤｅｈＤＩＶＥ７，ｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ２４８％ ａｎｄ３９６％，
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＭｏｌｅｃｕｌａｒｄｏｃｋｉｎｇｏｆｔｈｅｅｎｚｙｍｅｓｗｉｔｈｓｕｂｓｔｒａｔｅｓｗａｓｃａｒｉｅｄｏｕｔｗｉｔｈＳＹＢＹＬ．Ｄｏｃｋｉｎｇ
ｓｃｏｒｉｎｇｄｉｓｐｌａｙｅｄｔｈａｔＤｅｈＤＩＶＧ２ｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｅｎｅｒｇｙｏｆ０９６１４ｋＪ／ｍｏｌ，ａｎｄＤｅｈＤＩＶＥ７
ｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｅｎｅｒｇｙｏｆ２５４９８ｋＪ／ｍｏｌ．Ｔｈｅｍｕｔａｎｔｅｎｚｙｍｅｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｅｎｅｒｇｙ，
ａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅａｆｉｎｉｔｙｗｉｔｈＲ２ＣＰＡ，ｔｈｕｓｔｈｅｅｎｚｙｍｅｓｐｅｃｉｆｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：２ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐｉｏｎｉｃａｃｉｄ；ｄｅｈａｌｏｇｅｎａｓｅ；ｄｉｒｅｃｔｅｄｅｖｏｌｕｔｉｏｎ；ｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｏｃｋｉｎｇ
　　
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。
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：
［１］　ＡｇｅｒＤＪ．Ｈａｎｄｂｏｏｋｏｆｃｈｉｒａｌｃｈｅｍｉｃａｌｓ［Ｍ］．ＮｅｗＹｏｒｋ：Ｍａｒｃｅｌ
ＤｅｋｋｅｒＩｎｃ，１９９９．
［２］　
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，
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［Ｊ］．
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，２００５，２１（６）：
５３７５４１．
［３］　
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，２０１１．
８６
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［４］　ＣｈｅｎＫ，ＡｒｎｏｌｄＦＨ．Ｔｕｎｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｎｅｎｚｙｍｅｆｏｒｕｎｕｓｕａｌ
ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ：ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｒａｎｄｏｍｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓｏｆｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎＥｆｏｒ
ｃａｔａｌｙｓｉｓｉｎｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ［Ｊ］．ＰＮＡＳ，１９９３，９０：５６１８５６２２．
［５］　ＴｒａｃｅｗｅｌＣＡ，ＡｒｎｏｌｄＦＨ．Ｄｉｒｅｃｔｅｄｅｎｚｙｍｅｅｖｏｌｕｔｉｏｎ：ｃｌｉｍｂｉｎｇ
ｆｉｔｎｅｓｓｐｅａｋｓｏｎｅａｍｉｎｏａｃｉｄａｔａｔｉｍｅ［Ｊ］．ＣｕｒＯｐｉｎＣｈｅｍＢｉｏｌ，
２００９，１３：３９．
［６］　ＨｉｒｏｋｉＫ，ＫｅｎｔａｒｏＭ，ＡｋｉｒａＡ．ＤｉｒｅｃｔｅｄｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｔｈｅＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ
ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＰ４５０ＭｏｘＡ（ＣＹＰ１０５）ｆｏｒｅｎｈａｎｃｅｄａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｂｉｏｓｃｉ
ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌＢｉｏｃｈｅｍ，２００９，７３（９）：１９２２１９２７．
［７］　ＲｅｅｔｚＭ Ｔ，Ｔｏｒｅ Ｃ，ＥｉｐｐｅｒＡ，ｅｔａｌ．Ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｔｈｅ
ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｎｅｐｏｘｉｄｅｈｙｄｒｏｌａｓｅｂｙｄｉｒｅｃｔｅｄｅｖｏｌｕｔｉｏｎ
［Ｊ］．ＯｒｇＬｅｔ，２００４，６（２）：１７７１８０．
［８］　
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［Ｍ］．３
:
．
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：
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，２００５．
［９］　ＫｏｕｒｉｓｔＲ，ＨｏｈｎｅＭ，ＢｏｒｎｓｃｈｅｕｅｒＵＴ．Ｄｉｒｅｃｔｅｄｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｎｄ
ｒａｔｉｏｎａｌｅｓｄｅｓｉｇｎ［Ｊ］．ＣｈｅｍＵｎｓｅｒｅｒＺｅｉｔ，２００９，４３：１３２１４２．
［１０］　
º»¼
．
efxþ×ìÓ;<
［Ｍ］．
«T
：
?@0:g
，１９９９．
［１１］　ＹａｎｇＡＧ，ＭａｏＪＦ，ＹａｏＬＢ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙ
ｐｒｏｔｏｃｏｌ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＨｉｇｈＥｄｕｃａｔｉｏｎＰｒｅｓｓ，２０１１．
［１２］　ＣａｌｄｗｅｌＲ Ｃ，ＪｏｙｅｅＧ Ｆ．ＲａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｓｂｙＰＣＲ
ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．ＰＣＲＭｅｔｈｏｄｓＡｐｐｌ，１９９２，２（１）：２８３３．
［１３］　ＹｏｕＬ，ＡｒｎｏｌｄＦＨ．ＤｉｒｅｃｔｅｄｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎＥｉｎＢａｃｉｌｕｓ
ｓｕｂｔｉｌｉｓｔｏｅｎｈａｎｃｅｔｏｔａｌａｃｔｉｖｉｔｙｉｎａｑｕｅｏｕｓｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ
［Ｊ］．ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇ，１９９６，９（１）：７７８３．
［１４］　ＧｉｖｅｒＬ，ＧｅｒｓｈｅｎｓｏｎＡ，ＦｒｅｓｋｇａｒｄＰＯ，ｅｔａｌ．Ｄｉｒｅｃｔｅｄｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆ
ａｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅｅｓｔｅｒａｓｅ［Ｊ］．ＰＮＡＳ，１９９８，９５（２２）：
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