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Effect of fertilization on extractable organic nitrogen in wheat monoculture cropping systems

施肥对麦田土壤可溶性有机氮的影响



全 文 :第 36 卷第 14 期
2016年 7月
生 态 学 报
ACTA ECOLOGICA SINICA
Vol.36,No.14
Jul.,2016
http: / / www.ecologica.cn
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31372137, 31401947)
收稿日期:2014⁃12⁃12;     网络出版日期:2015⁃10⁃30
∗通讯作者 Corresponding author.E⁃mail: jbzhou@ nwsuaf.edu.cn
DOI: 10.5846 / stxb201412122482
梁斌,李俊良,杨学云,周建斌.施肥对麦田土壤可溶性有机氮的影响.生态学报,2016,36(14):4430⁃4437.
Liang B, Li J L, Yang X Y, Zhou J B.Effect of fertilization on extractable organic nitrogen in wheat monoculture cropping systems.Acta Ecologica Sinica,
2016,36(14):4430⁃4437.
施肥对麦田土壤可溶性有机氮的影响
梁  斌1,2,李俊良1,杨学云2,周建斌2,3, ∗
1 青岛农业大学资源与环境学院,青岛  266109
2 西北农林科技大学资源环境学院,杨凌  712100
3 农业部西北植物营养与农业环境重点实验室,杨凌  712100
摘要:利用长期定位试验,研究施肥和小麦生长对土壤可溶性有机氮(EON)的影响。 长期不同施肥土壤包括不施肥(No⁃F)、施
用化肥(NPK)和有机肥与化肥配施(MNPK)3种。 EON含量范围为 7.5—29.3 kg / hm2,No⁃F、NPK和 MNPK土壤中 EON分别占
可溶性总氮的 40%、56%和 56%。 长期有机肥与化肥配施显著提高 0—15 cm土层 EON含量,但对 30 cm以下土层 EON含量无
影响。 在小麦开花期,可溶性有机氮的含量及其相对含量显著高于拔节期和收获期。 虽然施用氮肥对当季 EON含量无显著影
响,但同位素示踪微区试验表明,土壤耕层(0—15 cm)中仍有 0.4%—2.8%的可溶性有机氮来源于当季施入的肥料氮。 可见,
化学氮肥向可溶性有机氮的转化缓慢,但农田土壤中可溶性有机氮含量与矿质态氮含量相当,发生淋溶损失的风险大。
关键词:长期定位施肥试验;小麦生长期;淋溶;15N标记
Effect of fertilization on extractable organic nitrogen in wheat monoculture
cropping systems
LIANG Bin1,2, LI Junliang1, YANG Xueyun2, ZHOU Jianbin2,3,∗
1 College of Resources and Environmental Sciences, Qingdao Agriculture University, Qingdao 266109, China
2 College of Resources and Environmental Sciences, Northwest Agriculture and Forestry University, Yangling 712100, China
3 Key Laboratory of Plant Nutrition and the Agri⁃Environment in Northwest China, Ministry of Agriculture, Yangling 712100, China
Abstract: Soil extractable organic nitrogen ( SON) is an important nutrient pool involved in N transformations, and the
content and conversion of SON are affected by fertilization practices. However, many gaps remain in our understanding of
SON, especially in agricultural soil. The effects of long⁃term (1990—2009) fertilization on SON at elongation, flowering,
and harvest stages in wheat were evaluated in a loess soil (Eum⁃Orthic Anthrosol) in northwestern China. The treatments
included no fertilization (No⁃F), application of inorganic NPK fertilizer (NPK), and combined application of inorganic
NPK and manure (MNPK). Using 15N tracer techniques, 15N⁃labeled urea (165 kg N / hm2) was applied to microplots
within each treatment to investigate the effect of short⁃term addition of N on content of SON during the wheat⁃growing season
in wheat monoculture cropping systems. The SON content was 7.5—29.3 kg / hm2 and accounted for 40%, 56%, and 56%
of total extractable N in No⁃F, NPK, and MNPK, respectively. Compared with No⁃F, application of inorganic NPK
fertilizer increased SON content significantly (55% on average) in the 0—15 cm soil layer. Soil extractable organic N
content in the MNPK treatment was significantly higher (by 32%—35%) than that in the NPK treatment in the 0—15 cm
layer. Long⁃term fertilization had no effect on SON content below 30 cm. SON was highest at flowering and was significantly
higher during flowering than at the elongation stage in NPK and MNPK (by 48% and 82%, respectively) . In relation to No⁃
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F, fertilization treatments increased the SON significantly in the 0—100 cm soil profile, SON was 43.1, 51.6, 55.2 kg / hm2
in No⁃F, NPK, and MNPK, respectively. Addition of N had no significant effect on SON content in the 0—15 cm soil layer
during the same growing season; however, 0.4%—2.8% of SON was derived from the 15N⁃labeled fertilizer applied before
seeding, representing 0.03%—0.24% of the fertilizer, and short⁃term addition of N increased SON in the 0—100 cm soil
profile by 35%, 30%, and 14% in No⁃F, NPK, and MNPK, respectively. We conclude that the conversion of inorganic N
to extractable organic N was slow. However, long⁃term fertilization increased SON content in the topsoil, and SON is a
significant nitrogen pool in agriculture soils.
Key Words: long⁃term fertilization; wheat growth stage; leaching; 15N labeling
土壤可溶性有机氮(Extractable organic N, EON)虽仅占土壤全氮的很小部分,但近年来的研究表明,它是
土壤氮库中最活跃的组分之一,对土壤氮素循环影响很大[1]。 在林地土壤中可溶性有机氮占可溶性总氮的
比例可高达 90%以上[2],土壤 EON与土壤氮素迁移和供应的关系不可忽视[3]。 可溶性有机氮含量与土壤氮
素矿化和土壤微生物量氮显著相关[4],研究表明土壤不溶性有机氮向 EON 的转化是土壤中有机氮矿化的限
制因子[3]。 可溶性有机氮除了是土壤微生物氮素的重要来源之外[5],一些低分子量的 EON 可以直接或者通
过菌根被植物吸收利用[3]。 在一些降雨量大或灌溉地区,可溶性有机氮的淋溶损失是氮素损失的重要途径
之一[6⁃7],在林地生态系统中 EON是氮素损失的主要形态[8]。 综上说明 EON 在土壤氮素组成、转化、供应和
损失方面都具有重要的意义。
土壤可溶性有机氮含量及其行为易受土地利用方式、施肥状况和种植作物等因素影响。 目前对农田土壤
可溶性有机氮含量的影响因素研究相对较少,且得出的一些结果不尽一致。 比如,Currie 等[9]研究表明,施用
化学氮肥提高土壤中 EON含量,McDowell等[10]也得出类似的结论。 但 Vestgarden 等[11]却发现,连续九年施
用化学氮肥(每年 30 kg / hm2)使土壤溶解性有机氮含量显著降低;Gundersen等[12]报告指出,施用氮肥并不影
响溶解性有机氮的含量。 因此,有必要进一步研究施肥对农田土壤中可溶性有机氮的影响。 在林地中,可溶
性有机氮是氮素损失的主要形态[8],那么在农田中可溶性有机氮的淋溶情况也是值得关注的问题。 因为有
机氮的淋溶不但关系到氮肥的利用状况,还可能带来一系列生态环境问题。
本研究利用已经进行了 19a的田间试验,研究了长期不同施肥处理对麦田土壤耕层及 0—100 cm剖面可
溶性有机氮的影响以及短期内氮肥向可溶性有机氮转化情况,揭示施肥对土壤有机氮含量及其淋溶特性的影
响,同时阐明了小麦不同生长阶段对土壤表层 EON含量的影响,以期为完善土壤氮素循环理论、有效调控土
壤氮素供应提供依据。
1  材料与方法
1.1  试验设计
长期定位试验开始于 1990年,种植制度为小麦单作,小麦收获后休闲至下季小麦种植。 设对照(No⁃F,不
施肥)、施用 NPK化肥(NPK)、有机肥配施 NPK化肥(MNPK)3 个处理。 其中氮肥为尿素,磷肥为过磷酸钙,
钾肥为氯化钾。 NPK处理施用量分别为 N 135.0 kg / hm2、P 47.1 kg / hm2、K 56 kg / hm2。 MNPK处理中过磷酸
钙和氯化钾的施用量与 NPK处理相同,氮肥用量与 NPK处理相同,其中 70%的氮来源于牛厩肥,30%的氮由
尿素提供,各施肥处理的肥料均于小麦播种前一次性施用。 小区面积为 399 m2(21 m×19 m)。 土壤经 19 年
不同施肥处理后其 0—20 cm土层基本理化性状见表 1。 土壤质地为重壤土,土壤颗粒<0.002 mm、0.002—
0.02 mm和 >0.02 mm的粘粒、粉粒和砂粒含量分别为 168、516、316 g / kg。
2009年 10月小麦种植施肥前,在每处理土壤内用 PVC管设置氮同位素示踪微区试验,PVC 管长 63 cm,
直径为 24.5 cm,其中 60 cm打入土中,3 cm留在地表之上。 微区设施氮肥(+N)和不施氮肥(CK)两处理,重
复 3次,其中施入的氮肥为15N标记的尿素(丰度为 19.58%)。 在小麦种植前将所有处理土柱内 0—15 cm 土
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层土壤取出施入微区以外相同的磷、钾肥,在+N 处理中按 165 kg N / hm2的量加入标记尿素,CK 处理不加氮
肥,施肥后回填到原来 PVC管中。 于 2009 年 10 月 18 日播种,播种量为每 PVC 管 30 粒,小麦出苗后间苗至
20株。
表 1  长期不同施肥处理 0—20 cm土层理化性状
Table 1  Soil property in 0—20 cm soil layer after 19⁃year different fertilization managements
项目
Items
不施肥
No fertilization
施用化肥
Application of inorganic
NPK fertilizer
有机肥配施化肥
Combined application of inorganic
NPK and manure
有机碳 Soil organic C / (g C / kg) 7.5 (0.3) c 9.2 (0.3) b 13.2 (0.2) a
全氮 Total N / (g N / kg) 0.86 (0.02) c 1.04 (0.00) b 1.40 (0.00) a
有效磷 Available P / (mg P / kg) 3.2 (0.6) c 44.4 (7.2) b 110.7 (18.6) a
速效钾 Available K / (mg K / kg) 176 (14) c 278 (23) b 345 (17) a
    以上数据为平均值(标准差)(n= 3);同一行不同小写字母表示差异达显著水平
1.2  土壤样品的采集
于小麦拔节期(2010年 3月 26日)、开花期(2010年 5月 4日)和收获期(2010年 6月 15日)在微区试验
处理内采集土壤样品(0—15 cm),利用土钻在每土柱内采集混合样,过 2 mm 筛,测定其中可溶性总氮、矿质
氮含量及其15N丰度。 于小麦收获期在各长期定位试验处理中按 10 cm 一层采集 0—100 cm 土壤剖面样品,
测定土壤剖面可溶性有机氮和矿质氮含量。
  图 1  小麦不同生长阶段土壤中(0—15 cm)来源于当季氮肥的可
溶性有机氮百分比
Fig.1   Percent of soil extractable organic N derived from 15N⁃
labeled fertilizer in soils ( 0—15 cm) under long⁃term different
fertilization managements during stem elongation ( ET ),
flowering (FT), and harvest (HT) stage of wheat
1.3  样品测定与数据分析
土壤样品采集过筛后,用 0.5 mol / L硫酸钾浸提(土水比 1∶4),浸提液中可溶性总氮用过硫酸钾氧化—紫
外分光光度计比色法测定,矿质氮利用流动分析仪测定,可溶性有机氮含量为可溶性总氮和矿质氮含量之差,
可溶性有机氮相对含量是指可溶性有机氮占可溶性总氮含量的百分比。 微区试验处理中一部分土壤浸提液
经过硫酸钾氧化后扩散[13],测定其中可溶性总氮的15N 丰度,另一部分浸提液直接扩散,测定其中矿质态氮
的15N丰度。 扩散后的15N丰度用质谱仪测定,样品15N丰度测定由美国加利福尼亚大学戴维斯分校稳定同位
素研究所完成。 可溶性有机氮中的15N 含量为可溶性总氮和矿质态氮中15N 含量之差,来源于肥料的可溶性
有机氮百分比用 Ndff(%)表示,施入肥料向可溶性有机氮转化率用 Con(%)表示,计算公式如下:
Ndff(%)=可溶性有机氮15N原子百分超 /肥料15N丰度 (1)
Con(%)=可溶性有机氮含量×Ndff /施氮量 (2)
图表中的数据,用 SAS Version 8.1 for Windows 作
方差分析,若差异显著,采用 LSD 法进行多重比较。
2  结果与分析
2.1  施肥对土壤可溶性有机氮含量的影响
土壤可溶性有机氮的含量为 7.5—29.3 kg / hm2(表
2),占全氮的比例为 0.6%—0.8%,其中来源于当季施
入肥料氮的比例为 0.5%—2.8%(图 1),仅占施入氮肥
的 0.03%—0.24%。 长期不同施肥显著影响 EON 含量
(P < 0. 01) (表 3)。 与 No⁃F 相比,长期施用化肥使
EON显著增加 34%—89%,平均增幅为 55%(表 2)。 长
期有机无机配施土壤可溶性有机氮含量范围为 12.2—
25.6 kg / hm2,平均为 19.0 kg / hm2,显著高于 NPK 处理
(表 2)。 MNPK 和 NPK 土壤 EON 相对含量分别为
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40%—81%和 39%—81%,平均皆为 56%(图 2)。 No⁃F土壤可溶性有机氮的相对含量为 40%,显著低于 NPK
和 MNPK土壤(图 2)。
表 2  土壤耕层(0—15 cm)可溶性有机氮含量(kg / hm2)
Table 2  Soil extractable organic N content in 0—15 cm layer of soils under long⁃term different fertilization managements at different growth
stage of wheat
施氮处理
N treatments
采样时
Sampling times
不施肥
No fertilization
施用化肥
Application of inorganic
NPK fertilizer
有机肥配施化肥
Combined application of
inorganic NPK and manure
不施氮 拔节期 7.5 (1.7) A c 12.4 (1.7) B b 14.0 (1.9) C a
No application of N 开花期 9.2 (1.1) A c 17.4 (1.7) A b 25.6 (1.1) A a
收获期 9.2 (0.6) A c 12.4 (1.3) B b 16.1 (0.1) B a
平均 8.6 c 14.0 b 18.5 a
施氮 拔节期 8.4 (0.7) A b 12.8 (0.9) B a 12.2 (2.4) B a
Application of N 开花期 10.6 (3.5) A c 15.3 (1.3) A b 29.3 (4.5) A a
收获期 10.5 (0.7) A c 15.1 (0.2) A b 17.0 (1.7) B a
平均 9.9 c 14.4 b 19.5 a
    表中数据为平均值(标准差)(n= 3); 同一行不同小写字母和同一列不同大写字母表示差异在 0.05水平显著
表 3  不同施肥和生长时期对土壤可溶性有机氮影响的 F检验
Table 3  F⁃statistics of three⁃way ANOVA on soil extractable organic N
变异来源
Source of variation
自由度
Degree of freedom F P
施氮处理 N treatment 1 3.78 0.0594
长期施肥处理 Long⁃term fertilization 2 180.59 <0.0001
作物生长阶段 Growth stage 2 80.61 <0.0001
施氮处理×长期施肥处理 N treatment × long⁃term fertilization 2 0.03 1.000
施氮处理×作物生长阶段 N treatment × growth stage 2 2.1 0.1363
长期施肥处理×作物生长阶段 Long⁃term fertilization × growth stage 4 19.03 <0.0001
2.2  小麦不同生长阶段可溶性有机氮含量
3个采样时期中,开花期 EON含量最高,此时期 NPK和 MNPK土壤 EON含量较拔节期分别提高 48%和
82%。 小麦生长对 No⁃F土壤 EON含量无显著影响(表 2)。 生长时期显著影响 EON相对含量。 小麦开花期
可溶性有机氮相对含量最高,各处理范围为 38%—81%,平均为 64%;小麦收获期可溶性有机氮相对含量平均
为 50%;拔节期可溶性有机氮的相对含量最低,各处理平均为 39%(图 2)。
2.3  可溶性有机氮在土壤 0—100 cm剖面的分布
长期不同施肥主要影响 0—30 cm土层 EON含量,对 30 cm以下土层 EON 含量影响不大(图 3)。 No⁃F、
NPK和 MNPK土壤 CK处理 0—100 cm土壤剖面 EON累积量分别为 43.1、51.6、55.2 kg / hm2(图 4);MNPK和
NPK土壤中 EON累积量无显著差异,两者均显著高于 No⁃F土壤。 在种植前未施氮肥处理不同土壤 40—100
cm累积的可溶性有机氮分别占可溶性总氮的 43%—50%。 种植前施用氮肥使土壤 EON 增加 14%—34%,
No⁃F、NPK和 MNPK土壤分别达到 58.1、67.2、63.2 kg / hm2(图 4)。
3  讨论
3.1  土壤可溶性有机氮的含量
在本试验中,长期不同施肥土壤耕层 EON含量为 8—27 kg / hm2,No⁃F,NPK和 MNPK 3 种施肥处理的土
壤 EON占可溶性总氮的比例分别为 13%—67%,38%—82%和 44%—57%。 Jensen 等[14]研究表明,在沙土和
沙壤土可溶性有机氮含量范围分别为:8—20、15—30 kg / hm2。 Mcneill等[15]的研究中可溶性有机氮占可溶性
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图 2  长期不同施肥和小麦不同生长时期土壤耕层(0—15 cm)可溶性有机氮相对含量
Fig.2  Effect of long⁃term fertilization and growth stage of wheat on percent of soil extractable organic N in soil extractable N
图 3  长期不同施肥土壤不施氮(a)和施氮(b)处理 0—100 cm剖面可溶性有机氮含量
Fig.3  Soil extractable organic N content in 0—100 cm layers of soils under long⁃term different fertilization managements
总氮的比例为 55%—66%。 可见,农田土壤中可溶性有机氮含量与矿质态氮含量相当,是农田土壤中一个重
要的氮库。
3.2  长期不同施肥对土壤可溶性有机氮的影响
与不施肥土壤相比,长期施用化肥显著提高土壤可溶性有机氮含量。 在林地[16]和草地[17]中的研究也表
明可溶性有机氮含量随化学氮肥投入的增加而增加。 可溶性有机氮的增加与植物残体归还土壤数量增加有
关[18]。 据估算[19],长期不施肥处理和长期施用化肥处理每年通过植物残体归还到土壤的有机碳分别为 0.89
Mg C / hm2和 3.75 Mg C / hm2。 但Cˇerny′等[20]发现,长期施用化学氮肥处理土壤 EON 含量显著低于不施肥处
理。 结果不同是因为长期施用化肥对土壤中有机碳和全氮影响不同所致。 土壤可溶性有机氮含量与土壤有
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图 4  长期不同施肥土壤可溶性有机氮在 0—100 cm剖面的累积
Fig.4  Accumulative soil extractable organic N in 0—100 cm layers
of soils under long⁃term different fertilization managements
机碳和全氮含量呈显著正相关关系[21⁃22]。 在该试验中
长期施用化肥显著提高土壤有机碳和全氮含量,但在
Cˇerny′等[20]的研究中,由于用作青贮饲料的玉米收获
后,仅有极少数的作物残体留在土壤中,从而导致长期
施用化学氮肥降低土壤有机碳的含量,进而降低 EON
的含量。 可溶性有机氮的增加还可能与施用化学氮肥
增加土壤酶活性[23],改善土壤微生物数量和结构有
关[24]。 在本研究中,长期施用化肥土壤较不施肥土壤
土壤微生物量氮含量提高了 54%[25]。
与长期施用化肥相比,长期有机肥配施化肥显著提
高土壤 EON含量以及可溶性有机氮占可溶性总氮的百
分比,其他学者也得出相同的结论[26⁃ 27]。 增加的可溶
性有机氮一方面来源于施入的有机肥[28],另一方面来
源于增加的作物根系脱落物等残体[18⁃19]。 另外,长期有机无机配施土壤中微生物量氮是施用化肥土壤的 1.3
倍,微生物量的增加也可提高 EON含量[25]。
3.3  短期施用氮肥对土壤可溶性有机氮的影响
施入土壤的氮素除被作物吸收、微生物固持和损失外,还有一部分可在生物和非生物因素下转化为可溶
性有机氮。 在林地酸性土壤中,Dail 等[29]研究指出,在对照、辐射灭菌和高温灭菌土壤中分别大约有 30%、
40%和 55%所加入的硝态氮转化为土壤可溶性有机氮。 Compton等[30]和 Perakis等[31]也得出,硝态氮加入土
壤之后,有很大一部分迅速地转化为土壤可溶性有机氮。 Davidson 等[32]研究发现,硝态氮加入土壤之后,在
铁锰等化合物的作用下转化为亚硝态氮,而亚硝态氮与土壤有机物结合转化为可溶性有机氮。 但其他学
者[33⁃ 34]通过试验,并没有发现大量硝态氮向可溶性有机氮的转化。 在本研究中,各小麦生长时期各土壤中有
0.5%—2.8%的可溶性有机氮来源于当季施用的肥料氮,占当季施入氮肥的 0.5%以下。 说明化学氮肥向可溶
性有机氮的转化比较缓慢,没有发生快速大量转化的情况。 肥料氮在施肥当季转化为土壤可溶性有机氮的机
理包括:(1)在肥料氮施入土壤之后,通过土壤微生物的固持与转化,部分肥料氮以可溶性有机氮的形态释放
到土壤中[1];(2)施入的肥料氮可通过作物吸收及其分泌分泌物转化为土壤可溶性有机氮[35]。
3.4  小麦生长阶段对土壤可溶性有机氮的影响
作物的生长对土壤可溶性有机氮含量有显著的影响[36]。 本研究中,在小麦开花期土壤可溶性有机氮含
量和占可溶性有机氮的比例皆为最高。 这说明旺盛生长的作物增加土壤可溶性有机氮的含量,其他学者也得
出相同的结论[37⁃ 38]。 这是因为在旺盛生长阶段,作物根系、根系脱落物和土壤微生物量都较高所致。 研究表
明,在作物开花期根系脱落物的碳可达根系碳含量的两倍[39]。 一方面,根系的分泌物及脱落物本身含有大量
的可溶性有机氮;另一方面,较多的有机碳为土壤微生物提供了大量的能源物质,从而增加了土壤微生物的数
量,而微生物数量与土壤可溶性有机氮含量呈显著正相关关系[20,37]。
3.5  可溶性有机氮在土壤剖面的分布
长期有机肥配施化肥显著提高 0—15 cm土层可溶性有机氮含量,但对 20 cm 以下土壤可溶性有机氮含
量无影响,MNPK土壤 40—100 cm剖面中累积的 EON与 No⁃F和 NPK 土壤相当。 说明长期有机肥配施化肥
仅增加土壤耕层可溶性有机氮含量。 但 Dyke等[40]指出,与单施化肥相比,施用有机肥使更多的可溶性有机
氮淋溶到土壤下层。 结果不同的原因可能与 Dyke等[40]的研究中有机肥的施用量更高(每年有机肥提供的氮
量为 240 kg / hm2)和试验进行的时间更长(156a)有关。 在种植前未施氮肥处理不同土壤 40—100 cm累积的
可溶性有机氮分别占可溶性总氮的 43%—50%。 Madou 等[41]研究表明,土壤中通过淋溶损失的氮素中土壤
可溶性有机氮占 17%—32%,说明可溶性有机氮的淋溶损失是氮素损失的重要途径之一。 Van Kessel等[7]也
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报道指出,可溶性有机氮是农田土壤中氮素淋溶损失的重要形态,尤其是在降雨量氮或灌溉地区。 因此,在评
价农田氮素淋溶损失时,应该考虑可溶性有机氮的损失。
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