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ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｈｙｄｒａｔｉｏｎｏｆ３（４ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）ｇｌｕｔａｒｏｎｉｔｒｉｌｅ
ＬＩＱｉａｎ，ＲＥＮＪｉｅ，ＦＥＮＧＪｉｎｈｕｉ，ＷＵＱｉａｑｉｎｇ，ＺＨＵＤｕｎｍｉｎｇ
（ＮａｔｉｏｎａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＥｎｚｙｍｅｓ，ＴｉａｎｊｉｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００３０８，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｎｉｔｒｉｌｅｈｙｄｒａｔａｓｅ（ＮＨａｓｅ）ｉｓｔｈｅｋｅｙｅｎｚｙｍｅｓｏｆｎｉｔｒｉｌｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．ＧｅｎｏｍｅＭｉｎｉｎｇｗａｓｕｔｉｌｉｚｅｄ
ｔｏａｃｑｕｉｒｅｔｈｅＮｈａｓｅｇｅｎｅ（ｈｓｎ１）ｆｒｏｍＨｅｒｂａｓｐｉｒｉｌｕｍｓｅｒｏｐｅｄｉｃａｅＳｍＲ１．Ｔｈｅｐｌａｓｍｉｄｈｓｎ１／ｐＥＴＤｕｅｔ１ｗａｓ
ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＥ．ｃｏｌｉＢＬ２１．Ｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｅｎｚｙｍｅ（ＨＳＮ１）ｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓａｃｏｂａｌｔ
ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｔｙｐｅＮＨａｓｅ．ＴｈｅｓｕｂｓｔｒａｔｅｐｒｏｆｉｌｅｏｆＨＳＮ１ｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙｔｈｅｗｈｏｌｅｃｅｌｒｅａｃｔｉｏｎｓ．ＨＳＮ１ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈｅｅｘｃｅｌｅｎｔｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙａｎｄ ｔｈｅｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙｆｏｒｔｈｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ ｏｆ３（４ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）
ｇｌｕｔａｒｏｎｉｔｒｉｌｅ．Ｔｈｅ３（４ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）４ｃｙａｎｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｅｃｏｕｌｄｂｅｇｉｖｅｎ，ｔｈｕｓｉｔｃｏｕｌｄｂｅｃｏｎｖｅｒｔｅｄｔｏ
ｂａｃｌｏｆｅｎｂｙｏｎｅｓｔｅｐｃｈｅｍｉｃａｌｒｅａｃｔｉｏｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：３（４ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）４ｃｙａｎｏｂｕｔｙｒａｍｉｄｅ；ｈｙｄｒａｔｉｏｎ；ｎｉｔｒｉｌｅｈｙｄｒａｔａｓｅ
　　
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［１］　ＨｏｕｒａｉＳ，ＭｉｋｉＭ，ＴａｋａｓｈｉｍａＹ，ｅｔａｌ．Ｃｒｙｓｔａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｎｉｔｒｉｌｅ
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［２］　ＮａｇａｓｈｉｍａＳ，ＮａｋａｓａｋｏＭ，ＤｏｈｍａｅＮ，ｅｔａｌ．Ｎｏｖｅｌｎｏｎｈｅｉｎｅｉｒｏｎ
ｃｅｎｔｅｒｏｆｎｉｔｒｉｌｅｈｙｄｒａｔａｓｅｗｉｔｈａｃｌａｗｓｅｔｉｎｇｏｆｏｘｙｇｅｎａｔｏｍｓ
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［３］　ＢｉｓｈｏｐＡＯＴ，ＳｅｗｅｌＴ．Ａｎｅｗａｐｐｒｏａｃｈｔｏｐｏｓｓｉｂｌｅｓｕｂｓｔｒａｔｅ
ｂｉｎｄｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｆｏｒｎｉｔｒｉｌｅｈｙｄｒａｔａｓｅ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓ
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［４］　ＮｏｊｉｒｉａＭ，ＮａｋａｙａｍａｃＨ，ＯｄａｋａＭ，ｅｔａｌ．Ｃｏｂａｌｔｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄｆｅ
ｔｙｐｅｎｉｔｒｉｌｅｈｙｄｒａｔａｓｅｏｆＲｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．Ｎ７７１［Ｊ］．ＦＥＢＳＬｅｔ，
２０００，４６５：１７３１７７．
［５］　
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［Ｊ］．
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ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆＩＳ１１６４ｔｈａｔｅｘｉｓｔｓｉｎｔｈｅｈｉｇｈｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｓｓ
ｎｉｔｒｉｌｅ ｈｙｄｒａｔａｓｅ ｇｅｎｅ ｃｌｕｓｔｅｒ ｏｆｔｈｅ ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｍｉｃｒｏｂｅ
ＲｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓｒｈｏｄｏｃｈｒｏｕｓＪ１［Ｊ］．ＰｒｏｃＪｐｎＡｃａｄＢ：ＰｈｙｓＢｉｏｌＳｃｉ，
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ｄｅｓｙｍｍｅｔｒｉｚａｔｉｏｎｏｆ３ａｌｋｙｌａｎｄ３ａｒｙｌｇｌｕｔａｒｏｎｉｔｒｉｌｅｓ，ａｓｉｍｐｌｅ
ａｎｄ ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｏｐｔｉｃａｌｙ ａｃｔｉｖｅ ４ａｍｉｎｏ３
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ｍｉｎｉｎｇｄａｔａｗｉｔｈｔｈｅＵＣＳＣｇｅｎｅｓｏｒｔｅｒ［Ｊ］．ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ，２００５，
１５：７３７７４１．
［１３］　ＬｉＭｉｃｈａｅｌＨＴ，ＵｎｇＰｅｔｅｒＭＵ，ＺａｊｋｏｗｓｋｉＪ，ｅｔａｌ．Ａｕｔｏｍａｔｅｄ
ｇｅｎｏｍｅｍｉｎｉｎｇｆｏｒｎａｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．ＢＭＣＢｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，
２００９，１０：ｄｏｉ．１０．１１８６／１４７１２１０５１０１８５．
［１４］　ＰｅｄｒｏｓａＦＯ，ＭｏｎｔｅｉｒｏｌＲ Ａ，Ｗａｓｓｅｍ Ｒ，ｅｔａｌ．Ｇｅｎｏｍｅｏｆ
ＨｅｒｂａｓｐｉｒｉｌｕｍｓｅｒｏｐｅｄｉｃａｅｓｔｒａｉｎＳｍＲ１，ａｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｉｃ
ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｏｆｔｒｏｐｉｃａｌｇｒａｓｓｅｓ［Ｊ］．ＰｌｏｓＧｅｎｅｔ，７（５）：ｅ１００２０６４．
ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｇｅｎ．１００２０６４．
［１５］　ＭｉｙａｎａｇａＡ，ＦｕｓｈｉｎｏｂｕＳ，ＩｔｏＫ，ｅｔａｌ．Ｃｒｙｓｔａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｃｏｂａｌｔ
ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｎｉｔｒｉｌｅｈｙｄｒａｔａｓｅ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ，
２００１，２８８：１１６９１１７４．
［１６］　ＢｒａｄｙＤ，ＢｅｅｔｏｎＡ，ＺｅｅｖａａｒｔＪ，ｅｔａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｌａｓｅ
ａｎｄｎｉｔｒｉｌｅｈｙｄｒａｔａｓｅｂｉｏｃａｔａｌｙｔｉｃｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌ
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００４，６４：７６８５．
［１７］　ＫｕｂáＤ，ＫａｐｌａｎＯ，ＥｌｉáｋｏｖáＶ，ｅｔａｌ．Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆ
ｎｉｔｒｉｌｅｓｔｏａｍｉｄｅｓｕｓｉｎｇｓｏｌｕｂｌｅａｎｄｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄｎｉｔｒｉｌｅｈｙｄｒａｔａｓｅ
ｆｒｏｍＲｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓｅｒｙｔｈｒｏｐｏｌｉｓＡ４［Ｊ］．ＪＭｏｌＣａｔａｌＢ：Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ，
２００８，５０：１０７１１３．
［１８］　ＳｈｉＹｕｅ，ＹｕＨｕｉｍｉｎ，ＳｕｎＸｕｄｏｎｇ，ｅｔａｌ．Ｃｌｏｎｉｎｇｏｆｔｈｅｎｉｔｒｉｌｅ
ｈｙｄｒａｔａｓｅｇｅｎｅｆｒｏｍＮｏｃａｒｄｉａｓｐ．ｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉａｎｄＰｉｃｈｉａ
ｐａｓｔｏｒｉｓａｎｄ ｉｔｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ｓｉｔｅｄｉｒｅｃｔｅｄ
ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．ＥｎｚｙｍｅＭｉｃｒｏｂＴｅｃｈｎｏｌ，２００４，３５：５５７５６２．
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