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ChineseJournalofBioprocessEngineering
Vol.10No.1
Jan.2012
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2012.01.005
OPQI
:2011-10-14
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ScreeningofhigherhypocrelinAwithstrainsofShiraia
bambusicolabygenomeshufling
DONGTing1,PANWeisong2,ZHAOYilu1,LEIXiaoheng1,CHENKejia1,WANGJianwen1
(1.SchoolofPharmaceuticalSciences,MedicalColege,SoochowUniversity,Suzhou215123,China;
2.JintanglangSchoolofArchitectureandUrbanEnvironment,SoochowUniversity,Suzhou215123,China))
Abstract:Twomutantstrains,i.e.,NU12andUV4,ofShiraiabambusicola,treatedbyUVandnitrosog
uanidinemutagenesiswerebreedingcandidatesforhigherproductionofhypocrelinAbygenomeshuf
ling.Theprotoplastswereinactivatedbyheatat60℃ for5minandUVtreatmentfor90s,respectively.
Theinactiveprotoplastswerefusedandregeneratedinthepresenceofpolyethyleneglycol(PEG6000,
30%,W/V)for20min.Theselectiveplateswithhypocrelinpigmentforobservationandtheassayof
highperformanceliquidchromatographywereusedtoscreenthemutantstrainofhigherproductionof
hypocrelinA.Aftertworoundsofgenomeshufling,sixstrainsofmutantswithhigheryieldwereob
tained.TheproductionofhypocrelinAbymutantFII21reached80.4mg/L,anditincreasedby
589%-1671% thanthatoftheoriginalstrains.Theproductionofthemutantwasverifiedtobegenet
icalystable.
Keywords:hypocrelinA;protoplastfusion;Shiraiabambusicola
XYZ[(hypocrelinA)
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