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ＬＩＵＸｕｅ，ＸＵＥＹａｐｉｎｇ，ＬＩＵＺｈｉｑｉａｎｇ，ＷＡＮＧＹａｊｕｎ，ＺＨＥＮＧＹｕｇｕｏ
（ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＢｉｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎａｎｄＢｉｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，
ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００１４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＣｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｐｅｎｉｃｉｌｉｎＧａｃｙｌａｓｅｗｅｒｅ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｏｗｓ：ｓｏｌｕｂｌｅｓｔａｒｃｈ１００ｇ／Ｌ，ｐｅｐｔｏｎｅ１２
ｇ／Ｌ，ｙｅａｓｔｅｘｔｒａｃｔ３ｇ／Ｌ，ａｎｄＮａＣｌ１０ｇ／Ｌ；ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ３７℃，ｆｌａｓｋｃｏｌｕｍｎ８０ｍＬｉｎ５００ｍＬ
ｆｌａｓｋ，ａｎｄｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｔｉｍｅ２８ｈ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｐｅｎｉｃｉｌｉｎＧａｃｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ
ｆｒｏｍ７３４Ｕ／ｍＬｔｏ１８２３Ｕ／ｍＬ．（Ｓ）２ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅｗａｓｒｅｓｏｌｖｅｄｂｙｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅｃａｔａｌｙｔｉｃｏｆ
Ｎｐｈｅｎｙｌａｃｅｔｉｃ（Ｒ，Ｓ）２ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅｉｎａｑｕｅｏｕｓｐｈａｓｅｆｏｒｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｐｅｎｉｃｉｌｉｎＧａｃｙｌａｓｅｆｒｏｍ
ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ．Ｗｈｅｎｔｈｅｓｕｂｓｔｒａｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓ１００ｍｍｏｌ／Ｌａｎｄｔｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓ
４ｈ，ｔｈｅｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｒｅａｃｈｅｄ４４．２％．（Ｓ）２ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｍｉｘｔｕｒｅｏｆ８０
ｍｍｏｌ／Ｌｓｕｂｓｔｒａｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｉｃａｌｙｐｕｒｅｆｏｒｍ（＞９９．９％ ｅ．ｅ．）ａｎｄ９４２９％ ｙｉｅｌｄ．
Ｎｐｈｅｎｙｌａｃｅｔｉｃ（Ｒ）２ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅｗａｓｒａｃｅｍｉｚｅｄａｔ１７０℃ ｆｏｒｒｅｃｙｃｌｉｎｇ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｅｎｉｃｉｌｉｎＧａｃｙｌａｓｅ；（Ｓ）２ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅ；ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ；ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ
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６．５ ５．２５±０．７１ １０．０９±０．２８ ７７．３８
７．０ ５．３５±０．３５ １２．６２±０．５２ ９６．７８
７．５ ５．６３±０．２５ １３．０４±０．１４ １００
８．０ ５．３５±０．４２ １２．７４±０．５２ ９７．７０
８．５ ５．２０±０．２５ １１．６５±０．６３ ８９．３４
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ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄａｎｄｕｓｅａｓｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ：ＵＳ，
６５７３３８１Ｂ１［Ｐ］．２００３０６０３．
［２］　ＨｅｒｂｅｒｔＪ Ｍ，ＳａｖｉＰ，Ｍａｆｒａｎｄ Ｊ Ｐ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄ
ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌ：ａｎｅｗＡＤＰｒｅｃｅｐｔｏｒ
ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ［Ｊ］．ＥｕｒＨｅａｒｔＪＳｕｐｐｌ，１９９９，１（Ｓｕｐ）：３１４０．
［３］　ＣａｍｐｏＧ，ＦｉｌｅｔｉＬ，ｄｅＣｅｓａｒｅＮ，ｅｔａｌ．Ｌｏｎｇｔｅｒｍｃｌｉｎｉｃａｌｏｕｔｃｏｍｅ
ｂａｓｅｄｏｎａｓｐｉｒｉｎａｎｄｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓｓｔａｔｕｓａｆｔｅｒ
ｅｌｅｃｔｉｖｅｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｃｏｒｏｎａｒｙｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＡｍＣｏｌｅｇｅ
Ｃａｒｄｉｏｌ，２０１０，５６（１８）：１４４７１４５５．
［４］　
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［Ｊ］．
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，２０１１，３１（５）：３０３４．
［５］　Ｌｉｎ Ｓ ＳＳ，Ｃｈｅｎ Ｃ Ｃ．Ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ２
ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｎｄｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｉｃａｌｙｓｅｐａｒａｔｉｏｎ：
ＵＳ，２００４０１７６６３７［Ｐ］．２００４０９０９．
［６］　
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．（＋）
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［Ｊ］．
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，２００７，１７（３）：１６３１６５．
［７］　
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，
１０１１２１７２０Ａ［Ｐ］．２００８０２１３．
［８］　
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，１０１７８７０３２Ａ［Ｐ］．２０１００７２８．
［９］　ＭａｈｅｓｈｗａｒｉＫＫ，ＳａｒｍａＲＫ，ＪｏｓｈｉＳＶ，ｅｔａｌ．Ｒａｃｅｍｉｚａｔｉｏｎｏｆ
ｏｐｔｉｃａｌｙ ａｃｔｉｖｅ ２ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ ｐｈｅｂｙｌ ｇｌｙｃｉｎｅ ｅｓｔｅｒｓ：ＵＳ，
２００４００７３０５７［Ｐ］．２００４０４１５．
［１０］　ＢａｔｕｌａＳＲ．Ａ ｐｒｏｃｅｓｓｆｏｒｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ（２
ｃｈｌｏｐｒｏｐｈｅｎｙｌ）ａｃｅｔａｔｅ：ＷＯ，２００６００３６７１Ａ１［Ｐ］．２００６０１１２．
［１１］　
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，１０１４９７５７５Ａ［Ｐ］．２００９０８０５．
［１３］　ＫａｔｏｈＯ，ＵｒａｇａｋｉＴ，ＮａｋａｍｕｒａＴ．Ｐｒｏｃｅｓｓｆｏｒｐｒｏｄｕｃｉｎｇｏｐｔｉｃａｌｙ
ａｃｔｉｖｅαａｍｉｎｏａｃｉｄａｎｄｏｐｔｉｃａｌｙａｃｔｉｖｅαａｍｉｎｏａｃｉｄａｍｉｄｅ：
ＷＯ，０１８７８１９Ａ１［Ｐ］．２００１１１２２．
［１４］　ＡｓａｎｏＹ，ＩｎｏｕｅＡ．Ｌａｍｉｎｏａｃｉｄａｍｉｄｅａｓｙｍｍｅｔｒｉｃｈｙｄｒｏｌａｓｅａｎｄ
ｅｎｃｏｄｉｎｇｔｈｅｓａｍｅ：ＥＰ，１７７０１６６Ａ１［Ｐ］．２００７０４０４．
［１５］　
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［１６］　ＦｅｒａｂｏｓｃｈｉＰ，ＭｉｅｒｉＭ Ｄ，ＧａｌｉｍｂｅｒｔｉＦ．Ｃｈｅｍｏｅｎｚｙｍａｔｉｃ
ａｐｐｒｏａｃｈｔｏｔｈｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｔｈｅａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌ［Ｊ］．
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，２０１０，２１：２１３６２１４１．
［１７］　ＨｗａｎｇＳＯ，ＫｉｍＫＳ，ＫｉｍＹＪ．Ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｐｒｅｐａｒｉｎｇｃｌｏｐｉｄｏｇｒｅｌ
ａｎｄｉｔｓｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ：ＷＯ，２００９１５１２５６Ａ２［Ｐ］．２００９１２１７．
［１８］　ＦａｄｎａｖｉｓＮＷ，ＤｅｖｉＶＡ，ＪａｓｔｉＬＳ．Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆｒａｃｅｍｉｃ２
ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅｗｉｔｈｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄｐｅｎｉｃｉｌｉｎＧａｃｙｌａｓｅ［Ｊ］．
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，２００８，１９：２３６３２３６６．
［１９］　
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［２０］　ＣｈｅｎＣＳ，ＦｕｊｉｍｏｔｏＹ，ＧｉｒｄａｕｋａｓＧ，ｅｔａｌ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｅｓ
ｏｆｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｋｉｎｅｔｉｃｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓｏｆｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ［Ｊ］．ＪＡｍＣｈｅｍ
Ｓｏｃ，１９８２，１０４：２９４１２９９
［２１］　ＤｅＬｅｏｎＡ，ＧａｌｉｎｄｏＥ，ＲａｍｉｒｅｚＯＴ．Ａｐｏｓｔｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｖｅｓｔａｇｅ
ｉｍｐｒｏｖｅｓｐｅｎｉｃｉｌｉｎａｃｙｌａｓｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｙａｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＥ．ｃｏｌｉ
［Ｊ］．ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌＬｅｔ，１９９６，１８（１８）：９２７９３２．
［２２］　ＤｅＬｅｏｎＡ，ＨｅｒｎａｎｄｅｚＶ，ＧａｌｉｎｄｏＥ，ｅｔａｌ．Ｅｆｅｃｔｓｏｆｄｉｓｓｏｌｖｅｄ
ｏｘｙｇｅｎｔｅｎｓｉｏｎｏｎｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｅｎｉｃｉｌｉｎａｃｙｌａｓｅ
ｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ［Ｊ］．ＥｎｚｙｍｅＭｉｃｒｏｂＴｅｃｈｎｏｌ，２００３，３３（５）：
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