全 文 :!10
"!
6
#
2012
$
11
%
A
á
Ö
u
â
ChineseJournalofBioprocessEngineering
Vol.10No.6
Nov.2012
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2012.06.008
STUM
:2011-11-14
OGV!
:
XrA£¤ñAîNâv¦°N_£(çèéêë
WX.Y
:
ÞñÒ
(1988—),
ø
,
+ìû
,
hý£¤A
,
£¤"ö
:
ôNEÊå6
;
Þ°,
(
û
),
£¤Ì
,Email:yangsk@cib.ac.cn
« »¼yhcdùomo¯h
g¤¥
1,
g¦§
2,
m
¨
3,
©ª
2
(1.
«¬./
®¯°/3
,
±²
610041;2.
©Y³/3 ±²78
]^_
,
±²
610041;3.
±²./ 78´-/3
,
±²
610000)
7
i
:
ÀÁÄ\,kS*+Ú-É
,
m.ç./0Â1ìÞvþþù21ìÇ34
。
9:Ö0Â1ì
Çë5Ä
,
6Ä 76S8Ä9¯
,
1ÚÞÒ¯q:Ç;Ú-<á¡þù21ì
。
ÁÈÈÉ/0Â1ìÞvþ
þù21ì
,
Ò&éª
69%,
=>é
457%,
ª(kÂl®¯Á?]
。
jkl
:
0Â1ìÞvþ
;
Ä\,k
;
*+Ú-
;
21ì
mnopq
:TQ6549+8
6rsFt
:A
6u?q
:1672-3678(2012)06-0038-04
Separationofstigmasterolfromphytosterolmixturebychemical
derivatizationandsolventcrystalization
YANGJianhong1,YANGShunkai2,ZENGHui3,WUZhongliu2
(1WestChinaSchoolofClinicalMedicine,SichuanUniversity,Chengdu610041,China;
2ChengduInstituteofBiology,ChineseAcademyofSciences,Chengdu610041,China;
3SchoolofBiologicalIndustry,ChengduUniversity,Chengdu610000,China)
Abstract:Todevelopaprocessfortheseparationofstigmasterolfromphytosterolmixturebychemicalde
rivatizationandsolventcrystalization.Itsperformanceprocedure,includingacetylation,bromization,
debromination,andsaponificationofphytosterolmixture,andcrystalizationwithsolvent,wasusedatthe
grammelevelonatestbench.Theyieldofstigmasterolis69% andtherecoveryrateis457%.The
phytosterolmixturewasseparatedbythemethod.Thisilustratethatthemethodwasfeasibleandsuitable
forapilotrun.
Keywords:phytosterolmixture;chemicalderivatization;solventcrystalization;stigmasterol
y823v:v8#_^
Q-vgZ³8/8ÙÚNA6
Y],£¤ÿ
[1]。
n8°|v
,
S/4
WrfôA62.óYH3X\1x¸
,
¡
~4µ3ÓAaóG}|(Ål
AD(D)
E
9α OH ADY0[W。S¼¶¾æØf:r
È
:
Ì.
,
v6Y8S¢ç[&3X/øE
40Hrf
,
t§#3X1¦8LA
lË=Y7W
;
Ìu
,
v8ïYMð8
v%40
,
S|z8ÅlNF¨
C 22、
C 23
V$&&²On5-(ÅlA}|
GY?Z
[2],
y:f&:[Y
C 17
ø
ëQW6
AD(D)
E
9α OH AD。
ë7
,
v"+,:´Ð
、
Kw
/<=
,
7
2
Á"Ov
、
Z³
g/}³XYAíÈ
[35],
lÙÚNA6
8Y,æ
。
Ø
,
ã^F&238vU
v8QW£¤
,
2#:[8á3
R38NFAv8
。
^
,
<=
v:~§÷ø
[6-9]。
L&x¸&*4Y8
3
p+,X
v
,
ÏÐβ58,8/À*8,ÌU8
Ål
C 22,23
VOd²
,
[:S6NNFAY
ÎÈ
,
¤:[NFA <=82
3Uv:[g%8v
,
/#4:v
8¡.C¬}E
。
1
ÄÅo
11
ÄÅvw|
8
(
8HJv½
1513%,
;PQ
¸Aæ¬:Å
)
78
;
9:
;
;
;
5%(
H
Jv½
)
6Y3ì«
、
<=
、
7>
、
e8
、
!
、
ø
、
*>
、
ì«?*4¼@vwZ
。
WFH 203
]^vwJ
(
9ùÇæ_g:Å
)
EA/
GF254
*#ã6
(
¬ùòNÖö
)
6
{
;BUCHIRotavaporR 200
zP´5J
(
Qý}@
:Å
);DF 101B
Å
³ëìBÄÒÓÈ
(
9
ù._g:Å
);SHB 3
CW³§[D
(
iÅEæÖF:Å
)。
¸GJ
(Thiele)
HÈ
¯J
,
ì³ãÐï±
。
12
ÄÅxy|ü
121
Z7«?
Z7«?"1Ï)2
[10]。
122
7N8
Ë¢8
(
?A÷
)10g
&
250mL
Y
íI~U
,
áèZNïì«?
100mL
/
1mL
<
=
。
á
¢ì
80~90℃
§8=><|
,
<¯=
>J=
。
Ã
138℃
;<
,
2TSÅ
1h,
åïKÌyå
Ç
,
w6W
,
R°|L5
,
*
,
ò01¨?A
W
99g。
R
2
ÑË¢
8g
8
,
]X/9%%
,
v¥ò¢H
77
/
77g。
9¢HO78<¯U
]
,¯
ò]¢H
(m.p133~134℃)。
123
6N8ì«L
Ë¢87N
10g,
áè
100mL
7><¯
SÅÃde<|
;
OBÄÒÓCD¾
,
Fáè
5%
6Y3ì«<¯
125mL,
åïO
0℃
CD¾3ü
2h,
òyå¢H
,mp190~192℃。
ñò¢H
O!âe8
(
W²4
1∶1)
<¯]
3
Ñ
,
ZN
¢H
mp197~198℃。
Rv¥¢!
2
êÑ
、
!
3
êÑ87N
10、51g
]X9%%
。
Kñ
ò:HÈ&
190℃
Y
(
sã
11g)
RÑ°
|]
,
g&
190℃
YW¢H3D
,
¾.}v
%%
。
124
6
K6NY8ì«LHÈg&
190℃
Y¢
H3D
,
sã
428g;
Ë¢
428g
;
,
O
100mL
3ì«/
100mL
78ÇZ23Uá
SÅ
2h,
M
u5
,
z<;
;
åïá{5¯U
,
¢5¯
`òN9ïRÑu5
,
òWH
;
KWH
O78U°|íÑ]
,
òvY87N
340g,
×
794%,m.p136~138℃(
)2%
mp140~41℃)。
125
ON
K
340g
87NO
100mL
78/
100mL50%KOH
<¯Uá
SÅ
2h,
3{Çw6
?AP¨ôõ
;
L5
,95%
Y78ÇX]
,
Sò8?A¢H
180g,mp168~
169℃(
)2%
mp170℃)。TLC
<=V2
:
①V(*>)∶V(7«7L)=7∶1;②V(!)∶
V(
7«7L
)=6∶2;③V(Q)∶V(ø)=9∶1;O
o
3
<= v¥ÈH8¢H/QHs
w
,Rf
%v¥4
051,040
/
065;
R 3
MS,1HNMR,IR
Aª«½å²nvw:Ų
。
2
`)
21
hg
ã68¢HX4 β 58484%;
8
151%;
À*8
285%;
ÀR8
38%。
tuNFAònZLB
1。
$B
1
S
_
:
tu7NS/K7NÇZ48¼
v
A
W
C 3
¡YZ
,
4ïU8Ål
NF¨
C 22,23
Vd²Y6NÇZ¡v3
¬YÇZ
。
¡
1 3
"ghÑR
Table1 Dataofacetalationwithphytosterol
pË
m/g
!
1
ê !
2
ê !
3
ê sã
8
100 80 80 260
8ì«L
99 75 77 251
93
!
6
# ÞñÒA
:
NFA <=823vUv8
f[NFAn8¢HUJß!
3
vY8°|=
v
。
o#R^$XY
NFÑAÛÜ6823vv
8YS|"
[11-13]。
22
h
K7NY8R°|6N
,
òY
B
2。
$B
2
S_
:
AXGPh¼¥Y6
NA
,
AXÓ
6N8
ì«L/Ín<|G~)Y
5,6
u6Nβ58
ì«L
。
23
«¦h
K876NR[;ÉÊ
,
O78
U]w6
,
dX6
,
òâÌfu6N β 5
8ì«L À*8ì«LAvvY8
7N
;
3ïÐON
(
<7N
),
ò~gZ³Q
W8¢H
。
¡
2 3
"ghæç
Table2 Resultsofexperimentalbromizationfromacetylphytosterol
êÑ
\1
HJ
/
g
!
1
Ñ6N¢H !
2
Ñ6N¢H !
3
Ñ6N¢H
HJ
/g
HÈ
/℃
HJ
/g
HÈ
/℃
HJ
/g
HÈ
/℃
!
1
ê
10 087 194~195 103 187~190 50 118~120
!
2
ê
10 131 197~198 050 191~194 45 117~119
!
3
ê
51 057 197~198 027 178~182 12 117~120
BC
:
8vU8J44
151%,
_^vò
69%,
>¢HQOJ©.
H
,
[:Z[25Í%
。
oÁ#y8v
8¼}%%1½ÐMNY±}
。
vï
YRA823
,
ÌUβ58%4MúY
A}|aóG(ÅlY0
,
̺ųSï¡g
60%
;<
[14]。
Sr*:AÖg[W
,
8S¢ç[&3X/øE40Hrf
,
#3
X8LY7W
;
ºÅY/ β 58,EÀ
*84+Y86{S¢ç[&
AD
5-A
6YÖg7W
。
3ï
,
%ò16O`p823vv
8NFA¼}ÇZE:;<=v%
%U
,
%T7:[
TLC
S¯uâETU¼}+
,ëQWHY<ö
。
ã]
,
O7
3
TLC
V
2= U
,
v¢HâQH8sw
,
¼A
«^*4.È
。
om±}Vv¢H#ëQ
8
,
Ø4OA×HU
TLC
vw{
,
tRf
%&
02
g&
08,
*SQzS
YA«*
。
oOXY¸G¿v¦WÊå
6YvvwU#x:[Y§GL¥T-
,
[
:zQjMSWYÎÈ
。
¢HâQH8Y
MS,1HNMR,IR
Aª«½å²nvw*YT.
。
3
)
:[NFA <=NFÊ"
,
tu
8Y7N
,
6N 6/ONÇZ}³
,
D
3ÍZ¢HY]%%
,
ñX.C8
v8Y¬W@
。
_^823
vv8×ò
69%,
S×
457%
Y
。
BCòã_XYNFA <=YNF
ÊvT-#_[Y
,
Sµ[&U¿*àNÖYg
25v8g%
(
H
)
UVW7W6{
,
:f&Zã8è¸Y¥³25
,
:[OYÖ
g[W
。
Q·6r
:
[1]
\à
.
238U¡¢8Y£¤°V
[J].
W?N
Ö
,2008,35(5):6668.
[2] FernandesP,CruzA,AngelovaB,etal.Microbialconversionof
steroidcompounds:recentdevelopments[J].EnzymMicrobTech
nol,2003,32:688705.
[3]
Ô]
,
Ôæã
,
ç¬^
.
8QWvÖ×£¤°V
[J].
Änâ*à
,2004(8):1415.
[4]
åód
,
A¹
,
_ÁC
.
8U¡¢8Y"
:
Uã
,200310108704.2[P].20050518.
[5]
Ôh`
,
añã
,
5)P
.
238U¡¢8Y"
:
Uã
,02115645.X[P].20021016.
[6]
gbc
,
def
.
<=ºÅ8Y£¤
[J].
Uã*à
,
2000,25(6):159162.
[7]
Ôgß
,
å)S
,
Ï.ú
.
]v238U
8
[J].
hÅhFF÷
:
yåæFO
,2002,5(2):5355.
[8]
å)S
,
ãCR
,
iÎ
,
A
.
8âjk«?QLNÇZÖ
×ELÄF£¤
[J].
AáÖuâ
,2006,4(2):6973.
[9]
Dl
,
5)P
.
t<=n8ºÅ²~
[J].
Änâ
04
A
á
Ö
u
â
!
10
"
*à
,2002(8),910.
[10] ArmaregoW LE,ChaiC.Purificationoflaboratorychemicals
[M].5thed.Burlington:ButerworthHeinemann,1999:66.
[11] SternMH,HawksOD,RochesterNY.Preparatinofstigmaster
ol:US,2870176[P].19590120.
[12] AnteroL.Aprocessfortheisolationofbetasitosterolfromaster
oidmixture:EP,0057075[P].19810127.
[13] HarnunenA.Processforthepurificationofβsitosterolisolated
fromtheunsaponifiablesincrudesoapformthesulphatecelulose
process:US,4422974[P].19810721.
[14]
Ajm
,
Ôè¬
.
8ÓAPNÊWôUVW
Y£¤°V
[J].
ÓAFt÷
,2006,33(2):
櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒
142146.
,012
,Â4Õ«?
:ãPnhF£¤ûÌXóÝA§È
,
°/@oèY"³°|4µÖ¯¢
,
¯6ûWp
¯
、
qr
、
ׯ/µ¯U´Y4ä³
。
oê¬ù¾u&XYA6}³
,
qS}§ÈYv
X¡
,
DSé}f[st°|4µÖ¯¢Y6
。
ÍF£¤g)5BO
《AdvancedMaterials》
YÁ9
。
óÝA§ÈÏÐ
3
p+,dv
:
udXYv®:
、
wv®1¦/4N@
。
ÌUYv®
:QxÓ¿Yyz{|
,
D:{|*Ï¡§p}~Yud
。
{|Yº>¡d`YNF²
,
¥wv®1¦S/Þ¡Oo/
。
v®:/wv®1¦Í3°X~´
,
ï4N@SÞ¡O
wv®1¦9
。
@K4PN4uN
,
DO~´96A.pZ
。
t\©¾
,
ONò[:v
®¨YA§ÈX{7
,
¾,Ð\XYYÉÊ}³
,
ÌUÏЪ
、
NFÉÊ
、
A
。
qov®:
{|Y)Ém#
,
ñò°O.Bê9A
,
ù¾Ð\o}³
,
ØSËò9#gNYÊÆaó
。
z4µÖ¯¢
,
ê¬kS[&§¯§ÁN3
。
ã]SK4N@B845½«N@x
¯JÏÐÀH5½«
,
/°|ç
z/GùzY¯¢
,
#¥[78N@xS¯WY1Ç
。
oÁ¯È¯ä³4
03μmol/LY4,²Ìf&ud、v®;ç3v®1¦AßHY
~NFA§Èy4ѧ
。
^
,
o§Èk~v¸y4/ׯUYµ«
、
é׫/n7½AÌfN3Y
Z
。
{¿AÇJ¡¢æçmO¢¢
Pã/hFY£¤ûÌ.Á®BU¡¢Y@S/OêNÇZU¢Û«
。
o꣤
S/8Ög9YêNÇZ
,
k:é&vvÖ
。
ÖYl¹BU:.
ÁÛZ4
TxtE
Y@
,
oÁ@sû¥êVN
,
êNÇZ`.½«
,
AXn:Y
H
,
À鮯UYEFf
,
¥ÌBê(^6¨YÖ`Ù
。
(
U°
)
14
!
6
# ÞñÒA
:
NFA <=823vUv8