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ｆｒｏｍＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ１６８ｕｓｉｎｇｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｙｄｉｖｅｒｓｅｐｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ
ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅｓａｎｄａｃｅｔｙｌａｔｅｄａｌｃｏｈｏｌｓ
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（ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｏｒｅａｃｔｏｒＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＥａｓｔＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００２３７，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｉｒｔｙｐｕｔａｔｉｖｅｈｙｄｒｏｌａｓｅｇｅｎｅｓｆｒｏｍＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ１６８ｗｅｒｅｃｌｏｎｅｄａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｅｄｂａｓｅｄｏｎ
ｔｈｅｐｕｂｌｉｓｈｅｄｇｅｎｏｍｉｃｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎＧｅｎＢａｎｋ．Ｓｅｖｅｎｅｎｚｙｍｅｓｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｉｐｏｌｙｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ
ｔｏｗａｒｄｓｐｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌｅｓｔｅｒｓ．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｔｈｅｓｅｅｎｚｙｍｅｓｂｅｌｏｎｇｔｏｆｉｖｅｓｕｂｆａｍｉｌｉｅｓ
ｏｆα／βｈｙｄｒｏｌａｓｅｆａｍｉｌｙ．ＨｉｇｈｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｃｒｅｅｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓｉｎｖｏｌｖｉｎｇｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓｕｂｓｔｒａｔｅｓａｎｄｐＨ
ｉｎｄｉｃｔｏｒｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｏｂｔａｉｎａｃｔｉｖｉｔｙｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｔｈｅｓｅｅｎｚｙｍｅｓｔｏｗａｒｄｓｅｓｔｅｒｓｏｆｃａｒｂｏｘｙｌｉｃａｃｉｄｓａｎｄ
ａｃｅｔａｔｅｓｏｆａｌｃｏｈｏｌｓ．Ｔｈｅｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅｓｅｅｎｚｙｍｅｓｔｏｗａｒｄｓｖａｒｉｏｕｓｃｈｉｒａｌｓｕｂｓｔｒａｔｅｓｗａｓａｌｓｏ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄ．ＩｔｗａｓｓｈｏｗｎｔｈａｔｔｈｅｅｓｔｅｒａｓｅＰｎｂＡ（ａｐａｒａｎｉｔｒｏｂｅｎｚｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ）ａｎｄＣａｈ
（ａｎＳｄｅａｃｙｌａｓｅ）ａｃｃｅｐｔｅｄａｂｒｏａｄｅｒｒａｎｇｅｏｆａｃｅｔｙｌｅｓｔｅｒｓｏｆａｌｃｏｈｏｌｓｔｈａｎｔｈｅｏｔｈｅｒｓ．ＴｈｅｅｎｚｙｍｅｓＰｎｂＡ
ａｎｄＮａｐ（ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅＮＰ）ｅｘｈｉｂｉｔｅｄｅｘｃｅｌｅｎｔｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ（Ｅ＞２００）ｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｏｆｄｌ
ｍｅｎｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ２ｃｈｌｏｒｏ１ｐｈｅｎｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅａｎｄ２ｎａｐｈｔｈｙｌｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ａｎｏｖｅｌｅｎｚｙｍｅＹｉｔＶ
ｗａｓａｃｔｅｄａｓａｎａｎｔｉＫａｚｌａｕｓｋａｓｃａｔａｌｙｓｔｉｎｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇ２ｃｈｌｏｒｏ１ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅｗｉｔｈｍｏｄｅｒａｔｅ
ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｃｔｉｖｉｔｙｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ；ｇｅｎｏｍｅｏｆＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ；ｈｉｇｈｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔａｓｓａｙ；ｈｙｄｒｏｌａｓｅｆａｍｉｌｙ；ｌｉｐａｓｅ
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Ｔａｂｌｅ２ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｓｏｆｔｈｅｓｅｖｅｎｅｎｚｙｍｅｓｉｎｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｏｆｓｅｖｅｒａｌ
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１．２
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１．１
（２Ｒ，３Ｓ） ３９ ６７．０ ７．６（Ｓ）
ＹｖａＫ ６５ ６０．２ ３．４（２Ｒ，３Ｓ） ５２ ８．２
１．３
（２Ｒ，３Ｓ） ｎ ｎ ｎ
ＹｉｔＶ ５６ ０．２ １．０（２Ｒ，３Ｓ） ５５ ３２．２
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Ｃａｈ ｎ ｎ ｎ ５１ ５．６ １．２（２Ｓ，３Ｒ） ｎ ｎ ｎ
ＰｎｂＡ ５６ ２２．５ １．７（２Ｒ，３Ｓ） ４７ ６．６
１．２
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ＬｉｐＢ ｎ ｎ ｎ ４８．３ ６４．２ ８．７（Ｓ） ３５．４ ８２．６ １６．５（Ｒ）
ＳｒｆＡＤ ｎ ｎ ｎ ４６．９ ２６．８ ２．２（Ｒ） ３４．１ １６．４ １．５（Ｒ）
Ｎａｐ ４７ ７３．８ １２．９（Ｒ） ５１．０ ９５．９ ＞２００（Ｓ） ４８．５ ９９．５ ＞２００（Ｒ）
ＹｖａＫ ｎ ｎ ｎ ５５．７ ７６．２ ２８．１（Ｓ） ４５．６ ９２．８ ２８．１（Ｒ）
ＹｉｔＶ ｎ ｎ ｎ ４６．９ ７４．６ １３．５（Ｒ） ３４．１ ９５．７ ７４．６（Ｒ）
Ｃａｈ ｎ ｎ ｎ ３６．９ ３４．１ ２．４（Ｒ） ３４．９ ４．２ １．１（Ｒ）
ＰｎｂＡ ｎ ｎ ｎ ５６．８ ７４．８ ３１．４（Ｓ） ４０．４ ９３．８ ６０．５（Ｒ）
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３０ ３１ ３２
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ＳｒｆＡＤ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ
Ｎａｐ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ
ＹｖａＫ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ０．４ ６５．８ ４．９（ｌ）
ＹｉｔＶ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ ｎ
Ｃａｈ ７９ ２４．５ ４．５（Ｒ） ５０ ６４．１ １４．５（ｌ） ＮＤｄ ｎ ｎ
ＰｎｂＡ ｎ ｎ ｎ １３ ９９．９ ＞２００（ｌ） １．０ ８４．１ １１．７（ｌ）
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ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｅｓｔｅｒ ｈｙｄｒｏｌａｓｅｓ ｆｒｏｍ
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ｅｎｚｙｍｅｓＬｉｐＡａｎｄＬｉｐＢｆｒｏｍＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｄｉｆｅｒｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ
ｏｆｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄｔｈｒｅｅｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ［Ｊ］．ＦＥＢＳＬｅｔ，２００１，５０２：８９９２．
［８］ ＥｇｇｅｒｔＴ，ＢｒｏｃｋｍｅｉｅｒＵ，ＤｒｇｅＭＪ，ｅｔａｌ．Ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒｌｉｐａｓｅｓ
ｆｒｏｍＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ：ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｅｎｚｙｍｅ
ａｃｔｉｖｉｔｙｂｙａｍｉｎｏａｃｉｄｓｕｐｐｌｙａｎｄｅｘｔｅｒｎａｌｐＨ［Ｊ］．ＦＥＭＳ
ＭｉｃｒｏｂｉｏｌＬｅｔ，２００３，２２５：３１９３２４．
［９］ ＤｒｇｅＭ Ｊ，ＢｏｓＲ，ＷｏｅｒｄｅｎｂａｇＨ Ｊ，ｅｔａｌ．Ｃｈｉｒａｌｇａｓ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ１，２Ｏｉｓｏｐｒｏｐｙｌｉｄｅｎｅｓｎ
ｇｌｙｃｅｒｏｌｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｓ［Ｊ］．ＪＳｅｐＳｃｉ，２００３，２６：７７１７７６．
［１０］ ＱｕａｘＷ，ＢｒｏｅｋｈｕｉｚｅｎＣ．ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｎｅｗＢａｃｉｌｕｓｃａｒｂｏｘｙｌ
ｅｓｔｅｒａｓｅｆｏｒｕｓｅｉｎｔｈｅｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆｃｈｉｒａｌｄｒｕｇｓ［Ｊ］．Ａｐｐｌ
ＭｉｃｒｏｂｉｏｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，１９９４，４１：４２５４３１．
［１１］ ＤｒｏｇｅＭＪ，ＢｏｓＲ，ＱｕａｘＷＪ．Ｐａｒａｌｏｇｏｕｓｇｅｎｅａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｓａ
ｈｉｇｈｌｙｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ１，２Ｏｉｓｏｐｒｏｐｙｌｉｄｅｎｅｇｌｙｃｅｒｏｌｃａｐｒｙｌａｔｅ
ｅｓｔｅｒａｓｅｏｆＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ［Ｊ］．ＥｕｒＪＢｉｏｃｈｅｍ，２００１，２６８：
３３３２３３３８．
［１２］ ＤｒｇｅＭＪ，ＢｏｓＲ，ＢｏｅｒｓｍａＹＬ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｉｎｔｒａｃｅｌｕｌａｒｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅｓ
ｏｆＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ［Ｊ］．ＪＭｏｌＣａｔａｌＢ：Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ，２００５，３２：
２６１２７０．
［１３］ ＺｏｃｋＪ，ＣａｎｔｗｅｌＣ，ＳｗａｒｔｌｉｎｇＪ，ｅｔａｌ．ＴｈｅＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｐｎｂＡ
ｇｅｎｅｅｎｃｏｄｉｎｇｐｎｉｔｒｏｂｅｎｚｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ：ｃｌｏｎｉｎｇ，ｓｅｑｕｅｎｃｅａｎｄｈｉｇｈ
ｌｅｖｅｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ［Ｊ］．Ｇｅｎｅ（Ａｍｓｔｅｒｄａｍ），
１９９４，１５１：３７４３．
［１４］ ＨｅｎｋｅＥ，ＢｏｒｎｓｃｈｅｕｅｒＵＴ．ＥｓｔｅｒａｓｅｓｆｒｏｍＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓａｎｄ
Ｂ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓｓｈａｒｅｈｉｇｈｓｅｑｕｅｎｃｅｈｏｍｏｌｏｇｙｂｕｔｄｉｆｅｒ
ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｙｉｎｔｈｅｉｒｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，
２００２，６０：３２０３２６．
［１５］ ＺｈｅｎｇＧＷ，ＹｕＨＬ，ＺｈａｎｇＪＤ，ｅｔａｌ．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｌ
ｍｅｎｔｈｏｌｂｙａｈｉｇｈｓｕｂｓｔｒａｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｔｏｌｅｒａｂｌｅｅｓｔｅｒａｓｅｆｒｏｍ
ｎｅｗｌｙｉｓｏｌａｔｅｄＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＥＣＵ０５５４［Ｊ］．ＡｄｖＳｙｎｔｈＣａｔａｌ，
２００９，３５１：４０５４１４．
［１６］ ＺｈｅｎｇＧＷ，ＰａｎＪ，ＹｕＨＬ，ｅｔａｌ．Ａｎｅｆｉｃｉｅｎｔｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓｆｏｒ
ｅｎｚｙｍａｔｉｃｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＬｍｅｎｔｈｏｌｗｉｔｈｈｉｇｈｒａｔｉｏｏｆｓｕｂｓｔｒａｔｅｔｏ
ｃａｔａｌｙｓｔｕｓｉｎｇ ｗｈｏｌｅ ｃｅｌｓ ｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＥ．ｃｏｌｉ［Ｊ］．Ｊ
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２０１０，１５０：１０８１１４．
［１７］ ＳｔｕｄｉｅｒＦＷ．Ｐｒｏｔｅｉｎｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｙａｕｔｏｉｎｄｕｃｔｉｏｎｉｎｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙ
ｓｈａｋｉｎｇｃｕｌｔｕｒｅｓ［Ｊ］．ＰｒｏｔｅｉｎＥｘｐｒＰｕｒｉｆ，２００５，４１：２０７２３４．
［１８］ ＺｈａｏＬＬ，ＸｕＪＨ，ＺｈａｏＪ，ｅｔａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄ
ｐｏｔｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆａｎｏｒｇａｎｉｃｓｏｌｖｅｎｔｔｏｌｅｒａｎｔｌｉｐａｓｅｉｓｏｌａｔｅｄ
ｆｒｏｍＳｅｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓＥＣＵ１０１０［Ｊ］．ＰｒｏｃｅｓｓＢｉｏｃｈｅｍ，２００８，
４３：６２６６３３．
［１９］ ＱｉａｎＬ，ＬｉｕＪＹ，ＬｉｕＪＹ，ｅｔａｌ．Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｌｉｐｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｍｅｓｗｉｔｈ
ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｐｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌｅｓｔｅｒｓｏｆｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｙｄｉｖｅｒｓｅｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ
ａｃｉｄｓ［Ｊ］．ＪＭｏｌＣａｔａｌＢ：Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ，２０１１，７３：２２２６．
［２０］ ＪａｎｅｓＬ Ｅ，ＬｏｗｅｎｄａｈｌＡ Ｃ，ＫａｚｌａｕｓｋａｓＲ Ｊ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ
ｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｈｙｄｒｏｌａｓｅｌｉｂｒａｒｉｅｓｕｓｉｎｇｐＨｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ：ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ
ａｃｔｉｖｅａｎｄｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅｈｙｄｒｏｌａｓｅｓ［Ｊ］．ＣｈｅｍＥｕｒＪ，１９９８，４：
２３２４２３３１．
［２１］ ＣｈｅｎＣＳ，ＦｕｊｉｍｏｔｏＹ，ＧｉｒｄａｕｋａｓＧ，ｅｔａｌ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｅｓｏｆ
ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｋｉｎｅｔｉｃｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓｏｆｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ［Ｊ］．ＪＡｍＣｈｅｍ
Ｓｏｃ，１９８２，１０４：７２９４７２９９．
［２２］ ＡｒｐｉｇｎｙＪＬ，ＪａｅｇｅｒＫＥ．Ｂａｃｔｅｒｉａｌｌｉｐｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｍｅｓ：ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ａｎｄｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｅｍＪ，１９９９，３４３：１７７１８３．
［２３］ ＴａｋｉｍｏｔｏＡ，ＹａｇｉＳ，ＭｉｔｓｕｓｈｉｍａＫ．Ｈｉｇｈｌｅｖｅｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，
ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ａｎｄｓｏｍｅｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆａｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎ
Ｃｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ［Ｊ］．ＪＢｉｏｓｃｉＢｉｏｅｎｇ，１９９９，８７：４５６４６２．
［２４］ ＫａｚｌａｕｓｋａｓＲＪ，ＷｅｉｓｓｆｌｏｃｈＡＮＥ，ＲａｐｐａｐｏｒｔＡＴ，ｅｔａｌ．Ａｒｕｌｅｔｏ
ｐｒｅｄｉｃｔｗｈｉｃｈｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｏｆａｓｅｃｏｎｄａｒｙａｌｃｏｈｏｌｒｅａｃｔｓｆａｓｔｅｒｉｎ
ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｅｓｔｅｒａｓｅ， ｌｉｐａｓｅ ｆｒｏｍ
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｅｐａｃｉａ，ａｎｄｌｉｐａｓｅｆｒｏｍＣａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ［Ｊ］．ＪＯｒｇ
Ｃｈｅｍ，１９９１，５６：２６５６２６６５．
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