全 文 ：植物学报 Chinese Bulletin of Botany 2013, 48 (5): 498–506, www.chinbullbotany.com
doi: 10.3724/SP.J.1259.2013.00498
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收稿日期: 2013-01-18; 接受日期: 2013-05-23
基金项目: 齐齐哈尔大学青年教师科研启动支持计划(No.2012k-M20)
* 通讯作者。E-mail: fairy39809079@126.com
大豆转录因子GmERF5的克隆、表达及功能分析
翟莹1*, 杨晓杰1, 孙天国1, 赵艳1, 余春粉2, 王秀文1
1齐齐哈尔大学生命科学与农林学院, 遗传重点实验室, 齐齐哈尔 161006; 2长春市农业学校, 长春 130504
摘要 ERF转录因子是植物中特有的转录因子家族之一, 在植物响应生物和非生物胁迫过程中发挥重要的调控作用。通过
对大豆(Glycine max)吉林32未成熟胚的表达谱分析, 利用RT-PCR技术从大豆中克隆了1个新的ERF转录因子GmERF5。
GmERF5具有237个氨基酸残基, 分子量为26.09 kDa, 等电点为6.85, 其开放阅读框长714 bp。该转录因子蛋白与Gh-
ERF2蛋白的同源性最高, 它们同属ERF亚家族的第IV亚类。实时荧光定量PCR分析表明, 该蛋白基因在大豆的根中表达量
最高, 且受干旱、高盐、低温及乙烯、脱落酸和茉莉酸甲酯的诱导上调表达。亚细胞定位实验结果表明, GmERF5蛋白定
位于细胞核中。转录激活能力分析结果显示, GmERF5可以激活报告基因的表达, 为转录激活子。综合以上结果, 认为
GmERF5可能作为转录调控因子参与大豆生物和非生物胁迫的应答。
关键词 ERF转录因子, 表达分析, 大豆, 亚细胞定位
翟莹, 杨晓杰, 孙天国, 赵艳, 余春粉, 王秀文 (2013). 大豆转录因子GmERF5的克隆、表达及功能分析. 植物学报 48,
498–506.
植物在生长发育过程中不可避免地会遭受各种
生物和非生物胁迫的危害。植物体感受到外界环境刺
激信号后, 会激活体内的胁迫响应信号转导途径而诱
导一系列基因的表达, 从而合成不同的蛋白质(如酶
类、转录因子和分子伴侣等), 来抵御各种逆境胁迫(Li
et al., 2010)。其中, 转录因子由于可以调节多个基因
的表达而在植物的胁迫响应中发挥重要作用, 逐渐成
为人们的研究热点(Singh et al., 2002)。
乙烯响应因子(ethylene-responsive factor, ERF)
分属于植物中特有的AP2/ERF转录因子超家族的
ERF亚家族, 最初从烟草(Nicotiana tabacum)中分离
得到(Ohme-Takagi and Shinshi, 1995)。它们广泛参
与植物的细胞发育、激素应答、抗病和抗生物与非生
物胁迫等反应(Gutterson and Reuber, 2004)。ERF
蛋白共同含有1个保守的由58－59个氨基酸残基组成
的ERF结合域。此结合域由3个β折叠和1个α螺旋组
成, 可以特异地结合GCC-box和DRE/CRT等逆境相
关元件, 而这些元件通常位于植物的病程相关蛋白基
因和干旱、高盐、冷诱导等相关基因的启动子中
(Ohme-Takagi and Shinshi, 1995; Hao et al., 1998;
Park et al., 2001), 从而使ERF调控下游基因的转录
或参与植物的抗逆信号转导。
目前, 已从拟南芥(Arabidopsis thaliana)、烟草、
番茄 (Lycopersicon esculentum)、水稻 (Oryza sa-
tiva)、小麦 (Triticum aestivum)和棉花 (Gossypium
hirsutum)等不同植物中克隆到大量的ERF转录因子
(Ohta et al., 2000; Gu et al., 2002; Nakano et al.,
2006; Xu et al., 2007; Zuo et al., 2007), 但在大豆
(Glycine max)中其研究相对较少。截至目前仅报道过
5个ERF转录因子的功能。2002年, 大豆中的第1个
ERF转录因子GmEREBP1被克隆, 将其在大豆中超
表达可以激活PR1、PR2和PR3的表达并可提高转基
因大豆和拟南芥对孢囊线虫的抗性(Mazarei et al.,
2002, 2007)。随后, Zhang等又从大豆中分离并鉴定
了另外2个ERF转录因子。其中, GmERF3为转录激活
子, 其过量表达可提高转基因烟草对青枯病、赤星病
和烟草花叶病毒的抗性, 还可提高其抗盐性和抗旱性
(Zhang et al., 2009); 而GmERF4为转录抑制子, 其
过量表达可提高转基因烟草对高盐和干旱的抗性, 但
并未表现出对细菌病害的抗性(Zhang et al., 2010)。
·研究报告·
翟莹等: 大豆转录因子 GmERF5的克隆、表达及功能分析 499
我们在前期工作中也分离并鉴定了2个ERF转录因
子, 它们分别提高了转基因植物的抗盐性和抗旱性
(Zhai et al., 2013a, 2013b)。
单子叶植物和双子叶植物中均可能存在大量的
ERF基因。据报道, 拟南芥和水稻的基因组中分别有
122和139个ERF基因(McGrath et al., 2005; Nakano
et al., 2006); 大豆数据库中也存在98个包含完整
AP2/ERF结构域的独立基因(Zhang et al., 2008)。鉴
于ERF转录因子在植物应对逆境中发挥重要作用, 对
大豆ERF家族中其它成员作进一步鉴定十分必要。本
研究从大豆中分离出1个新的ERF转录因子基因
GmERF5, 探讨了该基因在不同组织中的表达差异
及在逆境胁迫下的表达模式, 并对其蛋白的亚细胞定
位和转录激活能力进行了鉴定, 以期为丰富大豆ERF
转录因子的基因资源及GmERF5的进一步应用奠定
理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料
大豆(Glycine max L.)吉林32由吉林大学植物种质资
源与利用研究室提供。拟南芥(Arabidopsis thaliana
L.)Columbia生态型和烟草 (Nicotiana tabacum L.)
NC89由本实验室保存。载体pBI121-GFP、pCAM-
BIA1301和pBI121均由本实验室保存。吉林32未成熟
胚表达谱的测序及所用引物的合成均由北京六合华
大基因公司完成。引物序列如表1所示(酶切位点用下
划线标示)。
1.2 方法
1.2.1 GmERF5基因的克隆
使用试剂TIANGEN(RNAplant plus reagent)提取大
豆未成熟胚总RNA, 按照M-MLV reverse transcrip-
tase试剂盒(Takara)操作说明书合成第1链cDNA。将
大豆吉林32的3个时期(20、30和50天)的未成熟胚基
因表达谱中序列在NCBI数据库中进行Blast比对, 获
得一个与植物中ERF转录因子序列同源性较高的未
知cDNA序列。利用软件Primer5设计引物P1(表1),
以反转录得到的大豆未成熟胚第1链cDNA为模板进
行PCR扩增。PCR反应程序为94°C8分钟; 94°C40秒,
55°C40秒, 72°C1分钟, 30个循环; 72°C延伸8分钟。
PCR产物经切胶回收后连接至pMD-18T载体上, 送
北京六合华大基因公司测序。

1.2.2 生物信息学分析
用在线软件Compute pI/Mwtool, ExPASy(http://expa-
sy.org/tools/pi_tool.html)预测GmERF5蛋白的分子
量和等电点。用在线软件PSORT(http://psort.hgc.
jp/)进行转录因子核定位信号预测。使用DNAMAN
软件进行系统进化分析。在GmGDB(http://www.pl-
antgdb.org/GmGDB/)数据库中搜索GmERF5的内含
子。

1.2.3 表达模式分析
参照Zhang等(2009)的方法用乙烯(ethylene, ET)、脱
落酸(abscisic acid, ABA)和茉莉酸甲酯(methyl jas-
monate, MeJA)喷施处于四叶期的水培大豆幼苗。将
大豆幼苗分别于含20%PEG8000和200 mmol·L–1
NaCl的Hoaglands营养液中进行干旱和高盐胁迫处
理。在4°C培养箱中进行低温处理。分别在处理0、1、
2、5、10和24小时取样, 将剪取的叶片迅速置于液氮
中, −80°C保存备用。使用试剂TIANGEN提取大豆不
同组织和不同处理时间点叶片的总RNA, 按照
M-MLV reverse transcriptase试剂盒(Takara)操作说
明书合成第1链cDNA。
根据GmERF5的cDNA序列设计定量PCR引物
P2(表1)。以大豆组成型表达基因β-Tubulin(GenBank
登录号为GMU12286)为内参基因。利用ABI PRISM-
7500实时定量PCR仪以大豆根、茎、叶、花、20天
胚和各胁迫处理取样点的cDNA为模板进行real-time
RT-PCR分析。反应体系含10 μL 2×SYBR Premix Ex
Taq (Takara)、0.14 μL ROX Reference Dye II、2 μL
cDNA、0.4 μL Primer F、0.4 μL Primer R, 补水至
总体积20 μL。反应程序为95°C30秒 ; 95°C5秒 ,
58°C34秒, 72°C30秒, 40个循环; 95°C15秒, 60°C1
分钟, 95°C15秒。扩增结果使用7500 Software进行
分析, 根据其Ct值计算出对β-Tubulin的相对表达量。
每个取样点设3次技术重复, 实验共设3次生物学重
复。

1.2.4 亚细胞定位分析
以质粒pMD18-T-GmERF5为模板, 用亚细胞定位引
500 植物学报 48(5) 2013
表1 所用引物序列
Table 1 Sequences of primers
Primers Sequences Restriction enzyme cutting sites
P1 5′-GAAGAAACATGTGTGGAGGT-3′
5′-GAAGAGACAAAACAGCAGAAG-3′
None
β-Tubulin 5′-GGAAGGCTTTCTTGCATTGGTA-3′
5′-AGTGGCATCCTGGTACTGC-3′
None
P2 5′-TACAGAGGAATCAGGCAAAGG-3′
5′-GTCCAGCATCCACAGGTCAT-3′
None
P3 5′-GCTCTAGAATGTGTGGAGGTGCTATC-3′
5′- GCTCTAGAGTAAATTAAGTGACGGTTG-3′
XbaI
XbaI
P4 5′-GGGAATTCATTATTTTCTTGAGTC-3′
5′-GGCCATGGGATGATTATTACTATT-3′
EcoRI
NcoI
P5 5′-GCTCTAGA GAAGAAACATGTGTGGAGGT-3′
5′-CCCCATGG GAAGAGACAAAACAGCAGAAG-3′
XbaI
KpnI


物P3进行PCR扩增。扩增产物与用同样酶酶切的
pBI121-GFP载体连接 , 构建成组成型表达的pBI-
121-GmERF-GFP融合蛋白植物表达载体, 并将其转
化根癌农杆菌EHA105。参考刘肖飞和梁卫红(2009)
的方法, 利用农杆菌介导法转化洋葱(Allium cepa)表
皮细胞。将共培养后的洋葱表皮用MS液体培养基清
洗后, 置于载玻片上, 经用90%甘油封片后, 在激光
共聚焦显微镜下观察并拍照。

1.2.5 转录激活能力分析
参照Universal genomic DNA Extraction Kit (Takara)
说明书提取拟南芥叶片DNA。以拟南芥基因组DNA
为模板, 用引物P4进行PCR扩增, 得到AtPDF1.2启
动子序列(AtPDF1.2P, 起始密码子ATG上游346 bp
序列 , 包含 1个 GCC-box)。用 AtPDF1.2P替换
pCAMBIA1301载体上的CaMV35S启动子构建报告
质粒表达载体; 利用引物P5, 将GmERF5构建到植
物表达载体pBI121的多克隆位点上, 由CaMV35S启
动子所启动, 作为效应质粒表达载体。用报告质粒表
达载体、效应质粒表达载体和pCAMBIA1301表达载
体分别转化农杆菌EHA105。
农杆菌介导的烟草叶片的转化参照Yang等
(2000)的方法进行。共培养48小时后 , 参照Jeffer-
son(1987)的方法对烟草叶片中GUS报告基因的表达
量进行检测。将处理后的烟草叶片剪下进行GUS组织
化学染色 : 加入GUS染色液(张庆林等 , 2011), 于
37°C温育过夜, 75%乙醇脱色, 直至底色完全消失。
将其余叶片(0.1 g)在液氮中研磨成粉末, 加入600 µL
酶提取缓冲液, 在4°C下离心, 用Bradford (1976)法
测定上清液中的蛋白浓度。取出部分上清液加入GUS
反应底物4-MUG, 于37°C反应10分钟, 在荧光分光
光度计上进行GUS荧光值的测定。实验设置3次生物
学重复。用获得的荧光值除以蛋白浓度和时间得到
GUS相对活性。
2 结果与讨论
2.1 GmERF5的克隆和序列分析
将吉林32未成熟胚测序所得序列输入NCBI数据库中
进行Blast比对, 获得1个与植物中ERF转录因子序列
同源性较高的未知cDNA序列, 全长1 020 bp。经
ORF Finder预测, 发现该序列具完整的开放阅读框
(open reading frame, ORF), 长714 bp, 预测其为大
豆中的一个新的ERF转录因子基因 , 命名为GmE-
RF5 (GenBank登录号为JN416600)。进一步设计
PCR引物, 通过RT-PCR从大豆吉林32的20天胚中
克隆了包含完整ORF的基因产物(图1)。序列分析表
明, GmERF5蛋白由237个氨基酸残基构成, 预测分
子量为26.09 kDa, 等电点为6.85。GmERF5蛋白有1
个包含58个氨基酸残基的AP2/ERF结合域, 在结合
域两侧含有2个预测的核定位信号(K62KKK和P152-
PSKKQRC)和1个未知功能的N末端MCGGAI(I/L)元
件。搜索大豆基因组序列发现GmERF5定位于大豆的
第9条染色体上, 且DNA序列内含有1个1 255 bp的
内含子(在ORF序列的164 bp与165 bp之间)。
将GmERF5的氨基酸序列与GenBank中已登录
翟莹等: 大豆转录因子 GmERF5的克隆、表达及功能分析 501


图1 GmERF5的核苷酸及氨基酸序列
下划线代表AP2/ERF结合域; 斜体代表核定位信号; 黑体代表MCGGAII元件; *: 终止密码子

Figure 1 Nucleotide and deduced amino acid sequence of GmERF5
The AP2/ERF domain was underlined, two nuclear localization signals were shown in italics, and the MCGGAII motif was shown
in boldface. *: Stop codon


的11个植物的ERF转录因子的氨基酸序列比对并构
建系统进化树, 进行系统发育分析。进化树分析所得
结果(图2)符合Tournier等(2003)对ERF转录因子家
族的分类方法: GmERF5与GhERF2的同源性最高,
它们一同被归到第IV亚类。此亚类中的ERF转录因子
均为转录激活子, 且都含有MCGGAI(I/L)元件。
2.2 GmERF5的组织表达分析
利用实时荧光定量PCR对GmERF5在大豆不同组织
中的表达情况进行检测。结果如图3所示。GmERF5
在大豆根中的表达量最高 , 大约是叶中表达量的5
倍。表达量由高到低依次为: 根﹥花﹥叶﹥20天胚﹥
茎。以上结果表明, GmERF5在各组织中均有表达,
但不具有明显的组织特异性; GmERF5主要在大豆的
根部行使一定的调控功能。
2.3 GmERF5的诱导表达分析
用干旱、高盐、低温及ABA、ET、MeJA处理大豆幼
苗, 以实时荧光定量PCR法分析其表达动态(图4)。结
果显示, GmERF5在各种胁迫处理下均存在表达上调
502 植物学报 48(5) 2013



图2 系统进化树
Figure 2 Phylogenetic tree
AtERF1: NP188965; Pti4: ACF57857; AtERF5: NP568679;
LeERF4: NP001234313; GhERF2: AAV51937; GmERF5:
AEQ55265; GmERF3: NP001238300; GmERF7: AEQ55266;
JERF1: NP001234513; OsEREBP1: AF193803; TaERF1:
AAX13280; AtERF4: NP188139; GmERF4: ACE76905



图3 GmERF5在大豆不同组织中的表达

Figure 3 Expression analysis of GmERF5 in tissues of
soybean


图4 GmERF5在逆境处理下的表达

Figure 4 Expression of GmERF5 in various stress treat-
ments


的趋势。对于干旱和低温处理, GmERF5的表达量在5
小时达到最大值; 而ET和MeJA处理后, 其表达量在
10小时才达到最大值; 高盐和ABA处理后其表达量
一直呈上升状态, 直到处理24小时才达到最大值。由
此推断GmERF5对非生物胁迫的响应依赖于ABA信
号转导途径。
2.4 GmERF5的亚细胞定位
采用农杆菌介导的遗传转化法将对照空载体pBI121-
GFP和pBI121-GmERF5-GFP分别转化到洋葱表皮
细胞中。激光共聚焦显微镜观察结果显示(图5), 在转
化pBI121-GFP的洋葱表皮细胞中, 绿色荧光蛋白在
整个细胞中都表达, 观察不到明显的细胞核; 而在转
化pBI121-GmERF5-GFP的洋葱表皮细胞中 , 绿色
荧光蛋白仅在细胞核中表达, 表明GmERF5蛋白定
位于细胞核中。
2.5 GmERF5的转录激活活性分析
利用烟草瞬时表达实验来验证GmERF5是否可以在
植物体内通过调控含有GCC-box的启动子来激活或
抑制下游报告基因的表达。通过农杆菌注射, 将报告
质粒载体单独或与效应质粒载体一起共转化烟草叶
片, 另外将pCAMBIA1301载体也单独转化烟草叶片,
翟莹等: 大豆转录因子 GmERF5的克隆、表达及功能分析 503


图5 GmERF5蛋白的亚细胞定位

Figure 5 Subcellular localization of GmERF5


共培养48小时后进行GUS组织化学染色和GUS荧光
定量分析。GUS组织化学染色结果(图6)显示, 未转化
的烟草叶片不能被X-Gluc溶液染成蓝色(图6A); 单独
转化pCAMBIA1301载体时 , 因pCAMBIA1301载体
上的CaMV35S启动子启动能力较强, 叶片染色较深
(图6B); 单独转化报告质粒载体时, 因AtPDF1.2启动
子序列较短, 启动能力较弱, 叶片染色较浅(图6C);
当报告质粒载体与效应质粒载体共转化时, GmERF5
通过调节AtPDF1.2启动子启动活性, 激活了GUS基
因的表达, 叶片染色较深(图6D)。GUS荧光定量结果
(图6E)与GUS染色结果基本吻合。未转化的烟草叶片
GUS荧光值较低 ; 单独转化pCAMBIA1301载体时
GUS荧光值最高; 单独转化报告质粒载体时GUS荧
光值较未转化的烟草叶片GUS荧光值有所升高; 当
报告质粒载体与效应质粒载体共转化时, 其GUS荧
光值比单独转化报告质粒载体时的GUS荧光值明显
升高。
2.6 讨论
大豆是具有重要经济价值的油料作物, 也是植物蛋白
质的主要来源。然而干旱、低温、土壤盐渍化和病害
等不良环境因子每年都会给大豆生产带来巨大的损
失。因此, 运用分子生物学技术研究大豆的抗逆机制
并克隆相关抗逆基因显得尤为重要。本研究从大豆中
克隆了1个新的ERF转录因子基因GmERF5。ERF转
录因子亚家族与DREB转录因子亚家族都含有1个保
守的AP2/ERF结合域。根据Sakuma等(2002)的报道,

图6 GmERF5在烟草叶片中的转录激活活性分析
(A)–(D) 烟草叶片的GUS组织化学染色; (E) 烟草叶片的GUS
活性

Figure 6 Transcriptional activation analysis of GmERF5 in
tobacco leaves
(A)–(D) GUS histochemical stain of tobacco leaves; (E) GUS
activity of tobacco leaves

这两个亚家族的区别在于AP2/ERF结合域中有2个保
守氨基酸残基不同, ERF亚家族的第14和19位分别为
丙氨酸和天冬氨酸残基, 而DREB亚家族分别为缬氨
酸和谷氨酸残基。GmERF5蛋白在相应位置上分别含
有丙氨酸和天冬氨酸残基, 因此GmERF5属于ERF
转录因子亚家族。转录因子在细胞内的区室化是一种
重要的调节机制(Igarashi et al., 2001), 目前鉴定的
ERF转录因子大部分均定位于细胞核中(Park et al.,
504 植物学报 48(5) 2013
2001; Zhang et al., 2009)。蛋白序列分析结果显示,
GmERF5含有2个预测的核定位信号, 经亚细胞定位
实验证实GmERF5蛋白定位于细胞核中。
之前的大量研究表明, ERF转录因子可以被多种
信号分子所诱导, 如ET、水杨酸(salicylic acid, SA)、
茉莉酸(jasmonic acid, JA)和ABA等, 但这些信号途
径间的交叉运行机制目前仍不甚明确(Dempsey et
al., 1999; Glazebrook, 1999; Knight and Knight,
2001)。不同的ERF转录因子对不同的信号分子、病
原物及环境胁迫会产生不同的响应。Zhang等(2009)
报道, GmERF3可以被ABA、SA、JA、ET和干旱胁
迫所诱导, 但并不被低温胁迫所诱导。而JcERF能被
高盐、干旱、ET和机械伤害快速诱导, 但对ABA处理
无明显反应(Tang et al., 2007)。本研究选用了6种处
理, 其中干旱、高盐和低温是3种代表性的非生物胁
迫 , ABA一般是非生物胁迫的信号物质 , 而ET和
MeJA一般是生物胁迫的信号物质, 选择这些处理可
以较全面地反映GmERF5在非生物胁迫及生物胁迫
中的应答机制。研究显示, 随着时间的变化, 6种处理
均能不同程度地诱导GmERF5表达, 表明GmERF5
对不同的逆境存在不同的应答机制, 其可在多条逆境
信号转导途径中发挥调控功能。Oñate-Sánchez和
Singh (2002)认为转录因子之所以会对不同的逆境信
号产生不同的响应, 可能是由于DNA结合特性不同
或者是存在翻译后水平调控, 也有可能是与不同蛋白
相互作用的结果。
不同的ERF类转录因子与GCC-box元件的结合
活性及转录激活能力均存在差异(Fujimoto et al.,
2000)。本研究利用含有GCC-box的启动子构建报告
载体, 检测GmERF5蛋白及其与DNA顺式元件结合
后的转录激活能力。结果显示GmERF5可以激活下游
报告基因的表达, 为转录激活子, 这与进化分析结果
相一致。已有报道显示, ERF类转录因子还可以与
DRE/CRT等元件相结合(Stockinger et al., 1997)。因
此, 构建含不同顺式元件的报告载体, 可以研究ERF
类转录因子与这些顺式元件结合后的转录激活活性。
目前发现, 大部分具转录激活活性的ERF转录因子基
因在植物抗病和抗逆反应中起着正向调控作用, 如拟
南芥的AtERF1(Berrocal-Lobo and Molina, 2004)、
AtERF2(McGrath et al., 2005)以及大豆的GmERF3
(Zhang et al., 2009)和GmERF7(Zhai et al., 2013a)
等在植物体内超表达后, 可以诱导下游许多抗逆基因
的表达, 提高植物对生物和非生物胁迫的耐受性。本
研究证明了GmERF5在植物体内具转录激活功能 ,
且被多种逆境所诱导, 由此推测GmERF5可能在植
物抗生物和非生物胁迫中起重要的调控作用。关于
GmERF5在植物抗逆反应中的具体功能尚需进一步
验证。
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Cloning, Expressing and Functional Analysis of GmERF5
from Soybean
Ying Zhai1*, Xiaojie Yang1, Tianguo Sun1, Yan Zhao1, Chunfen Yu2, Xiuwen Wang1
1Key Laboratory of Genetics, College of Life Science and Agro-Forestry, Qiqihaer University, Qiqihaer 161006, China
2Changchun Agriculture School, Changchun 130504, China
Abstract Ethylene-responsive factors (ERFs) are a subfamily of the AP2/ERF transcription factor superfamily in plant,
whose members play an important role in regulating gene expression in plant responses to biotic and abiotic stresses. A
soybean mRNA sequence encoding an ERF protein was cloned and designated GmERF5 from gene expression profiles
of Jilin 32 immature embryo by use of RT-PCR. The GmERF5 consists of an ORF of 714 bp and encodes 237 amino
acids (26.09 kDa) with an isoelectric point of 6.85. GmERF5 is grouped with Class IV ERF transcription factors and is
related most closely to GhERF2. Real-time quantitative RT-PCR analysis revealed that GmERF5 expressed highly in root.
GmERF5 was upregulated when Jilin 32 was treated by drought, high salt, low temperature, ethylene, abscisic acid and
methyl jasmonate. GmERF5 protein was localized in the nucleus by subcellular localization assay in onion epidermal
cells. The regulation ability of GmERF5 was analyzed in tobacco leaves by transient expression. GmERF5 activation of a
reporter gene indicated that GmERF5 had transcription activation activity. GmERF5 may be involved in soybean biotic
and abiotic stress responses as a transcription factor.
Key words ERF transcription factor, expression analysis, soybean, subcellular localization
Zhai Y, Yang XJ, Sun TG, Zhao Y, Yu CF, Wang XW (2013). Cloning, expressing and functional analysis of GmERF5
from soybean. Chin Bull Bot 48, 498–506.
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* Author for correspondence. E-mail: fairy39809079@126.com
(责任编辑: 孙冬花)