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SCREENING OF ANTIOXIDANT ACTIVITIES OF CAROTENOID EXTRACTS FROM Deinococcus

奇球菌属类胡萝卜素提取物的抗氧化活性研究



全 文 :核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊远冤院园怨园园 耀 园怨园缘
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员员鄄员圆鄄园怨摇 接受日期院圆园员圆鄄园员鄄园远
基金项目院国家野愿远猿冶项目渊圆园园苑粤粤园圆员猿园缘冤袁国家自然科学基金重点资助项目渊猿园愿猿园园园远冤袁重大新药创制科技重大专项渊圆园园怨在载允园怨园园员鄄园猿源冤袁转
基因生物新品种培育重大专项项目渊圆园园怨在载园愿园园怨鄄园苑缘月冤袁 农业部行业专项野核技术农业应用冶渊圆园园愿园猿园猿源冤袁中央高校基本科研业务
费专项基金
作者简介院王飞渊员怨愿苑鄄冤袁男袁 山东莱芜人袁硕士研究生袁研究方向为极端微生物适应机理遥 栽藻造院园缘苑员鄄愿远怨苑员圆缘员曰耘鄄皂葬蚤造院 员员源怨怨猿苑苑苑愿岳 择择
通讯作者院华跃进渊员怨缘怨鄄冤袁男袁浙江东阳人袁博士生导师袁教授袁研究方向为生物物理学遥 栽藻造院园缘苑员鄄愿远怨苑员苑园猿曰耘鄄皂葬蚤造院赠躁澡怎葬岳 扎躁怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园远鄄园怨园园鄄园远
奇球菌属类胡萝卜素提取物的抗氧化活性研究
王摇 飞摇 封摇 琼摇 刘程智摇 林摇 琳摇 田摇 兵摇 华跃进
渊浙江大学原子核农业科学研究所 辕农业部核农学重点开放实验室袁浙江 杭州摇 猿员园园圆怨冤
摘摇 要院从不同种奇球菌属渊阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤冤细菌中分离提取类胡萝卜素袁并利用高效液相色谱分析了提取物
的组成和性质遥 通过 阅孕孕匀自由基和超氧自由基清除试验袁比较了不同菌种来源的类胡萝卜素提取物
的抗氧化能力袁结果发现袁阅援 则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽 和 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 提取物的体外抗氧化能力最强袁在浓度为
园郾 远滋早 辕 皂造时 阅孕孕匀自由基清除率都达到 源远豫左右曰阅援 则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽 提取物的超氧自由基清除活性较
强袁在浓度为 猿滋早 辕 皂造时清除率达到 源圆郾 怨怨豫 遥 同时袁采取体外蛋白质氧化抑制试验和脂类氧化抑制能
力测定分析比较了不同种类提取物对大分子的保护作用袁结果表明 阅援 则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽和 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽提
取物具有较强的生物大分子氧化防护功能遥 以上研究为从具有极端环境适应能力的奇球菌属筛选抗氧
化活性类胡萝卜素袁并进一步研究其作用机制提供了基础遥
关键词院奇球菌属曰类胡萝卜素曰抗氧化活性
杂悦砸耘耘晕陨晕郧 韵云 粤晕栽陨韵载陨阅粤晕栽 粤悦栽陨灾陨栽陨耘杂 韵云 悦粤砸韵栽耘晕韵陨阅
耘载栽砸粤悦栽杂 云砸韵酝 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽
宰粤晕郧 云藻蚤摇 云耘晕郧 匝蚤燥灶早摇 蕴陨哉 悦澡藻灶早鄄扎澡蚤摇 蕴陨晕 蕴蚤灶摇 栽陨粤晕 月蚤灶早摇 匀哉粤 再怎藻鄄躁蚤灶
渊运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 枣燥则 晕怎糟造藻葬则鄄粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽 燥枣 悦澡蚤灶藻泽藻 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 葬灶凿 在澡藻躁蚤葬灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁
陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 晕怎糟造藻葬则鄄粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 在澡藻躁蚤葬灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡蚤躁蚤葬灶早摇 猿员园园圆怨冤
粤遭泽贼则葬糟贼院悦葬则燥贼藻灶燥蚤凿泽 枣则燥皂 贼澡藻 泽责藻糟蚤藻泽 燥枣 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤 憎藻则藻 藻曾贼则葬糟贼藻凿 葬灶凿 葬灶葬造赠扎藻凿 遭赠 怎泽蚤灶早 匀孕蕴悦 枣燥则 贼澡藻蚤则 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶
葬灶凿 责则燥责藻则贼赠援 月赠 皂藻葬泽怎则藻皂藻灶贼泽 燥枣 阅孕孕匀 则葬凿蚤糟葬造 葬灶凿 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽袁 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 糟葬责葬糟蚤贼蚤藻泽 燥枣
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责蚤早皂藻灶贼泽 枣则燥皂 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 憎藻则藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 糟葬则燥贼藻灶燥蚤凿 藻曾贼则葬糟贼泽 燥枣 阅援
则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽 葬灶凿 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 澡葬凿 泽贼则燥灶早藻则 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 糟葬责葬糟蚤贼蚤藻泽 蚤灶 增蚤贼则燥袁 憎澡蚤糟澡 葬遭燥怎贼 源远豫 阅孕孕匀 则葬凿蚤糟葬造泽 憎藻则藻
泽糟葬增藻灶早藻凿 葬贼 贼澡藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 园郾 远滋早 辕 皂造援 悦葬则燥贼藻灶燥蚤凿 藻曾贼则葬糟贼 枣则燥皂 阅援 则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡藻 泽贼则燥灶早藻泽贼 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻
则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬皂燥灶早 葬造造 贼澡藻 贼藻泽贼藻凿 泽葬皂责造藻泽袁 憎蚤贼澡 源圆郾 怨怨豫 燥枣 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 则葬凿蚤糟葬造泽 憎藻则藻 泽糟葬增藻灶早藻凿 葬贼 贼澡藻
糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 猿滋早 辕 皂造援 云怎则贼澡藻则皂燥则藻袁 贼澡藻 责则燥贼藻糟贼蚤增藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 藻曾贼则葬糟贼泽 燥灶 遭蚤燥皂葬糟则燥皂燥造藻糟怎造藻 遭赠 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 燥枣
责则燥贼藻蚤灶 燥曾蚤凿葬贼蚤燥灶 葬灶凿 责则燥贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 造蚤责蚤凿 燥曾蚤凿葬贼蚤燥灶 憎藻则藻 糟燥皂责葬则藻凿援 砸藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 藻曾贼则葬糟贼泽 枣则燥皂 阅援 则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽
葬灶凿 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 澡葬凿 泽贼则燥灶早 责则燥贼藻糟贼蚤增藻 葬遭蚤造蚤贼蚤藻泽 燥枣 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 皂葬糟则燥皂燥造藻糟怎造藻泽 葬早葬蚤灶泽贼 燥曾蚤凿葬贼蚤增藻 凿葬皂葬早藻援 栽澡藻 责则藻泽藻灶贼
泽贼怎凿赠 澡藻造责泽 泽糟则藻藻灶蚤灶早 贼澡藻 糟葬则燥贼藻灶燥蚤凿泽 憎蚤贼澡 泽贼则燥灶早 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 糟葬责葬遭蚤造蚤贼赠 枣则燥皂 贼澡藻 藻曾贼则藻皂藻 遭葬糟贼藻则蚤葬 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽袁 葬灶凿
责则燥增蚤凿藻泽 贼澡藻 遭葬泽蚤泽 枣燥则 枣怎则贼澡藻则 则藻泽藻葬则糟澡 燥灶 贼澡藻蚤则 葬糟贼蚤燥灶 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽曰 糟葬则燥贼藻灶燥蚤凿泽曰 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠
园园怨
摇 远 期 奇球菌属类胡萝卜素提取物的抗氧化活性研究
摇 摇 奇球菌属渊阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤冤中大多数细菌有较强的耐
辐射等极端抗性袁其中研究最多的是耐辐射奇球菌
渊阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽袁阅砸冤袁它被认为是迄今为止发
现的最抗辐射的细菌之一袁可以耐受超过 员缘噪郧赠 的电
离辐射袁这种能力比大肠杆菌高 员园园 倍以上咱员暂 遥 经过
长期研究袁我们发现 阅砸 所产生的特殊的类胡萝卜素
对其耐辐射抗性有重要贡献咱圆暂 遥 而这种色素本身袁不
仅具有较强的抗氧化能力袁对生物大分子也有一定的
保护作用遥
类胡萝卜素 凿藻蚤灶燥曾葬灶贼澡蚤灶是 阅砸 特有的一种色素袁
含有 员猿 个共轭双键袁在 悦圆 和 悦员爷位各含一个羟基咱猿暂 遥
研究表明袁较长的共轭双键系统和活性基团取代被认
为对类胡萝卜素清除自由基能力有重大贡献遥
阅藻蚤灶燥曾葬灶贼澡蚤灶作为 阅砸 菌非酶类抗氧化系统中的一种
特殊天然化合物袁能有效清除活性氧自由基袁已有的研
究证明这种特殊结构的类胡萝卜素比其他类胡萝卜
素袁包括番茄红素渊 造赠糟燥责藻灶藻冤和 茁 原 胡萝卜素等渊 茁鄄
糟葬则燥贼藻灶藻冤有更高的自由基清除能力咱源暂 袁而且其清除效
果与其浓度呈正比袁这种高效的自由基清除能力可能
主要归功于 凿藻蚤灶燥曾葬灶贼澡蚤灶的特殊结构如 悦猿爷袁源爷鄄双键尧
悦员爷鄄羟基和 悦源鄄酮基取代咱圆暂 遥 在奇球菌属中袁其他种
细菌对辐射尧氧化等极端环境压力也有着很强的抗性袁
而其中大多数种也能够产生类胡萝卜素袁目前在已经
获得基因组序列的奇球菌中均有类胡萝卜素合成基因
同源物袁并能合成色素遥 因此袁这些类胡萝卜素可能对
细菌的抗性有着很大的贡献遥
本研究目的是通过对奇球菌属 苑 种细菌类胡萝卜
素进行分离提取和分析袁比较不同类胡萝卜素提取物
的抗氧化活性袁以为筛选具有较强抗氧化能力的类胡
萝卜素和研究其作用机制袁以及开发其抗氧化功效在
医疗尧保健等领域的应用价值提供基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
员郾 员郾 员 摇 菌 种 摇 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 凿藻泽藻则贼蚤 阅杂酝 员苑园远缘栽袁
阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 则葬凿蚤燥责澡蚤造怎泽 阅杂酝 圆园缘缘员栽袁 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽
责则燥贼藻燥造赠贼蚤糟怎泽 阅杂酝 圆园缘源园袁 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 澡燥责蚤藻灶泽蚤泽 阅杂酝
员愿园源怨袁阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽 阅杂酝 员圆园圆苑 购自德国
阅杂酝在公司曰阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 砸员 渊粤栽悦悦 员猿怨猿怨冤
和 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 早藻燥贼澡藻则皂葬造蚤泽 阅杂酝 员员猿园园 为实验室保存遥
员郾 员郾 圆 摇 培养基和培养条件 摇 阅援 责则燥贼藻燥造赠贼蚤糟怎泽尧 阅援
则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽院栽郧再培养基渊每升含有 缘早蛋白胨袁猿早酵母
提 取 物袁 员早 葡 萄 糖 冤袁 培 养 温 度 为 猿园益遥 阅援
责则燥贼藻燥造赠贼蚤糟怎泽院 栽郧再 培养基袁 培养温度为 猿苑益遥 阅援
早藻燥贼澡藻则皂葬造蚤泽院栽郧再 培养基袁培养温度为 缘园益 咱缘暂 遥 阅援
凿藻泽藻则贼蚤袁阅援 则葬凿蚤燥责澡蚤造怎泽袁阅援 则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽院酪蛋白大豆肉汤
培养基渊每升含 猿园早 酪蛋白大豆肉汤袁猿早 蛋白胨冤袁培
养温度为 猿园益遥
员郾 员郾 猿摇 主要试剂及仪器摇 鲁米诺渊 造怎皂蚤灶燥造冤袁过氧化
氢渊匀圆韵圆冤袁邻苯三酚袁三氯乙酸袁乙酸乙酯袁过氧化氢
酶均为分析纯渊上海生工生物工程有限公司冤遥 圆远怨缘
型 匀孕蕴悦液相分析仪渊宰葬贼藻则泽 公司冤曰化学发光分析仪
渊月藻则贼澡燥造凿 公司冤曰酝缘 型酶标仪渊酝燥造藻糟怎造葬则 阅藻增蚤糟藻泽 公
司冤遥
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 类胡萝卜素的提取与含量测定咱远暂 摇 取 韵阅 值
为 圆郾 园 左右的菌体培养物 缘园园皂造 经 愿园园园则 辕 皂蚤灶 离心
缘皂蚤灶后袁去上清加入丙酮颐甲醇渊苑颐 圆冤混合溶液 圆缘皂造袁
冰浴震荡 猿园皂蚤灶袁离心袁去上清袁向沉淀继续加入溶剂袁
重复直至菌体颜色变白遥
类胡萝卜素含量采用分光光度法测定院在 源愿园灶皂
下测定色素的吸光度袁总胡萝卜素含量渊皂早冤 越光密度
值 伊总体积渊皂造冤 伊稀释倍数 伊 员园 辕 圆缘园园袁其中 圆缘园园 为
类胡萝卜素平均摩尔消光系数遥
员郾 圆郾 圆摇 高效液相色谱分析 摇 色谱柱条件院分析柱
杂怎灶云蚤则藻栽皂 悦员愿 缘怎皂渊源郾 远 伊 圆缘园皂皂 悦燥造怎皂灶冤曰流动相院乙
腈渊 阅援 凿藻泽藻则贼蚤曰 阅援 则葬凿蚤燥责澡蚤造怎泽曰 阅援 责则燥贼藻燥造赠贼蚤糟怎泽 和 阅援
澡燥责蚤藻灶泽蚤泽冤曰甲醇颐 乙腈 颐 异丙醇渊缘 颐 源 颐 员袁灾颐 灾颐 灾冤 渊阅援
则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽曰 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 和 阅援 早藻燥贼澡藻则皂葬造蚤泽冤曰流
速院员皂造 辕 皂蚤灶曰柱温院猿缘益曰测定波长 源愿园灶皂曰每次进样
圆园滋造遥
员郾 圆郾 猿摇 抗氧化能力分析
员郾 圆郾 猿郾 员摇 阅孕孕匀 自由基清除活性分析咱苑暂 摇 将不同浓
度梯度的类胡萝卜素提取物袁各取 员皂造袁加入 猿皂造 浓度
为 园郾 园源早 辕 蕴的 阅孕孕匀溶液袁混合均匀袁避光反应 猿园皂蚤灶
后袁在 缘愿园灶皂处测定吸光值遥
阅孕孕匀自由基清除率渊豫 冤 越 咱员 原 渊粤蚤鄄粤躁 冤 辕 粤糟暂 伊员园园
其中院粤蚤院加抗氧剂时 阅孕孕匀溶液的吸光度曰粤躁院提
取液在测定波长时的吸光度曰粤糟院未加抗氧剂时 阅孕孕匀
溶液的吸光度遥
员郾 圆郾 猿郾 圆摇 超氧阴离子自由基清除活性分析咱愿袁怨暂 摇 反
应混合物中含有 缘园滋造 鲁米诺 渊 员皂皂燥造 辕 蕴 冤袁 苑园园滋造
缘园皂皂燥造 辕 蕴 的 碳 酸 缓 冲 盐 溶 液 渊 责匀 值 员园郾 圆 含
园郾 员皂皂燥造 辕 蕴耘阅栽粤冤袁加入 员园滋造 不同浓度待测样品后袁
加入 员园园滋造邻苯三酚渊员园皂皂燥造 辕 蕴冤启动反应袁化学发光
分析仪每秒记录发光强度遥
员园怨
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
自由基清除率渊豫 冤 越 咱渊悦糟燥灶贼则燥造 原 悦遭造葬灶噪冤 原 渊悦泽葬皂责造藻 鄄悦遭造葬灶噪冤暂 辕 渊悦糟燥灶贼则燥造 原 悦遭造葬灶噪冤 伊 员园园
其中袁悦 表示 员皂蚤灶 内发光的积分面积袁悦糟燥灶贼则燥造代表
利用双蒸水代替色素袁加入邻苯三酚和鲁米诺的对照
组袁悦泽葬皂责造藻代表加入不同色素的试验组袁悦遭造葬灶噪代表没有
加入鲁米诺和邻苯三酚的空白对照遥
员郾 圆郾 源摇 类胡萝卜素对生物大分子氧化的防护作用
员郾 圆郾 源郾 员摇 栽月粤砸杂 法测定色素对脂类氧化的保护作
用咱源暂 摇 取 员园园滋造 待测样品与 缘园园滋造 鸡蛋卵磷脂混合
渊缘园皂早 辕 皂造 冤袁然后加入 员园园滋造 云藻杂韵源 渊 员皂皂燥造 辕 蕴 冤 和员园园滋造 抗坏血酸 渊园郾 员皂皂燥造 辕 蕴冤于 猿苑益暗反应 员澡袁再加
入 园郾 缘皂造 员园豫冷的三氯乙酸及 园郾 苑皂造 园郾 远苑豫 栽月粤袁加
热煮沸 猿园皂蚤灶袁冷却至室温袁缘园园园早 离心 员园皂蚤灶遥 取上
清于 缘猿圆灶皂处测 韵阅值遥
氧化抑制率渊豫 冤 越 咱渊粤糟燥灶贼则燥造 原 粤遭造葬灶噪冤 原 渊粤泽葬皂责造藻 原粤遭造葬灶噪冤暂 辕 渊粤糟燥灶贼则燥造 原 粤遭造葬灶噪冤 伊 员园园
其中 粤糟燥灶贼则燥造为不加色素用双蒸水代替的对照组的
光吸收值袁粤泽葬皂责造藻为试验组的光吸收值袁粤遭造葬灶噪为不加云藻杂韵源和样品的空白组的光吸收值遥
员郾 圆郾 源郾 圆摇 蛋白氧化抑制作用咱苑暂 摇 取 圆园园滋造 小牛血清
蛋白 月杂粤 渊员皂早 辕 皂造冤与 员园园滋造不同样品混合袁然后加入
员园园滋造 云藻杂韵源 渊员皂皂燥造 辕 蕴冤和 员园园滋造 匀圆韵圆 渊园郾 员皂皂燥造 辕 蕴冤袁
于 猿苑益孵育 猿园皂蚤灶 后袁加入 员缘 单位过氧化氢酶终止
反应遥 再加入 远园园滋造 阅晕孕匀袁暗反应 员澡 后袁加入 员园豫
三氯乙酸 怨园园滋造袁经 员猿园园则 辕 皂蚤灶 离心 员缘皂蚤灶袁去上清袁加
入 员皂造乙醇 辕乙酸乙酯渊员颐 猿冤洗掉多余 阅晕孕匀袁员苑园园园则 辕
皂蚤灶离心 员缘皂蚤灶袁沉淀用 员皂造 远皂燥造 辕 蕴 的盐酸胍溶解袁离
心后取上清液于 猿苑园灶皂下测 韵阅值遥
氧化抑制率渊豫 冤 越 咱渊粤糟燥灶贼则燥造 原 粤遭造葬灶噪 冤 原 渊粤泽葬皂责造藻 鄄粤遭造葬灶噪冤暂 辕 渊粤糟燥灶贼则燥造 原 粤遭造葬灶噪冤 伊 员园园
其中 粤糟燥灶贼则燥造为不加色素用双蒸水代替的对照组的
光吸收值袁粤泽葬皂责造藻为试验组的光吸收值袁粤遭造葬灶噪为不加云藻杂韵源和样品的空白组的光吸收值遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 菌体类胡萝卜素的提取和组成分析
利用有机溶剂提取法对 苑 种奇球菌中的类胡萝卜
素进行提取袁并用 匀孕蕴悦 对类胡萝卜素组成进行了分
析和比较遥 图 员 中 粤袁 月袁 悦袁 阅 分别为 阅援 凿藻泽藻则贼蚤尧阅援
则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽尧阅援 澡燥责蚤藻灶泽蚤泽尧阅援 则葬凿蚤燥责澡蚤造怎泽 中提取的类胡
萝卜素的 匀孕蕴悦分析结果袁阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 砸员 提取物的
匀孕蕴悦分析结果见已发表论文咱愿暂 遥 其他 圆 种细菌的类
胡萝卜素提取物由于没有明显的主要产物峰袁所以未
被列出遥 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 的主要产物在本试验条件下
吸收峰一般出现在 猿郾 缘 耀 源皂蚤灶 左右袁产物峰最大吸收
波长在 源苑怨灶皂和 缘园源灶皂咱员园暂 遥 从图中可以看出院渊员冤类
胡萝卜素提取物较为纯净袁不属于类胡萝卜素的物质
较少遥 前期试验结果表明通过丙酮颐 甲醇渊苑 颐 圆冤提取
的细菌类胡萝卜素提取物除类胡萝卜素袁杂质多为没
有氧化活性的小脂类分子曰渊圆冤对于不同的类胡萝卜
素提取物而言袁其组分的液相色谱保留时间或最大吸
收波长有所不同袁说明不同菌种中类胡萝卜素提取物
的组成和产物结构可能有一定的差异袁可以推断不同
的菌种里类胡萝卜素的种类是不同的遥 其中 阅援
则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽和 阅援 澡燥责蚤藻灶泽蚤泽 的类胡萝卜素组成与 阅援
则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽相近袁特征吸收较为相似袁主要峰在 源苑怨灶皂
和 缘园苑灶皂处出现最大吸收 渊图 员 月袁悦冤袁但其产物结构
有待进一步通过质谱尧核磁共振等方法分析确定遥 而
阅援 则葬凿蚤燥责澡蚤造怎泽中有 圆 个主要的类胡萝卜素产物峰渊图
员阅冤袁其吸收光谱特征不同于已发现的 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽
类胡萝卜素 凿藻蚤灶燥曾葬灶贼澡蚤灶袁可能具有不同的结构特征遥
圆郾 圆摇 体外抗氧化活性比较
圆郾 圆郾 员摇 阅孕孕匀 自由基清除率比较 摇 阅孕孕匀 自由基是
一种较稳定的以氮为中心的自由基袁它的乙醇溶液呈
紫色袁自由基清除剂可以与其单电子配对袁将溶液还原
并呈现浅黄色遥 由图 圆 可以看出袁不同的类胡萝卜素
提取物均表现出一定的 阅孕孕匀自由基清除能力遥 在较
低浓度情况下袁阅孕孕匀 自由基清除能力随浓度的升高
而不断升高袁但是袁在浓度到达 园郾 远滋早 辕 皂造 后袁色素浓
度的升高对自由基的清除能力不再增加遥 由图 圆 还可
看到袁不同色素对 阅孕孕匀 自由基清除的能力也是有所
不同的袁当浓度为 园郾 远滋早 辕 皂造 时袁阅援 则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽 和 阅援
则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 圆 种细菌的类胡萝卜素提取物对 阅孕孕匀 清
除率达 源远豫左右袁而 阅援 凿藻泽藻则贼蚤 的类胡萝卜素提取物
对 阅孕孕匀自由基的清除效率只在 猿园豫左右遥
圆郾 圆郾 圆摇 超氧自由基清除率比较摇 化学发光方法测定
的原理是激发态的活性氧自由基返回基态时袁一部分
能量以光子的形式释放袁产生化学发光袁所以发光强度
与活性氧自由基的数量呈线形关系袁当有抗氧化物质
存在时袁发光强度受到抑制遥 各物质对超氧阴离子自
由基的清除效果如图 猿 所示遥 阅援 则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽袁阅援
凿藻泽藻则贼蚤袁阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽袁阅援 早藻燥贼澡藻则皂葬造蚤 的类胡萝卜素提
取物能够对 韵圆 原窑 起到明显的抑制作用袁而且随着浓度
的升高抑制作用呈线性增强袁在提取物浓度为 猿滋早 辕 皂造
时袁阅援 则葬凿蚤燥责怎早灶葬灶泽 的抑制作用达到 源圆郾 怨怨豫 袁 阅援
责则燥贼藻燥造赠贼蚤糟怎泽 的类胡萝卜素提取物对 韵圆 原窑 的氧化作用几
乎没有影响袁另外 圆 种细菌产生的类胡萝卜素提取物
圆园怨
摇 远 期 奇球菌属类胡萝卜素提取物的抗氧化活性研究
图 员摇 奇球菌类胡萝卜素提取物的 匀孕蕴悦分析
云蚤早援 员摇 匀孕蕴悦 葬灶葬造赠泽藻泽 燥枣 责蚤早皂藻灶贼泽 藻曾贼则葬糟贼泽 枣则燥皂 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤
渊粤冤阅援 凿藻泽藻则贼蚤 渊月冤阅援 则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽 渊悦冤 阅援 澡燥责蚤藻灶泽蚤泽 渊阅冤阅援 则葬凿蚤燥责澡蚤造怎泽
图 圆摇 各物质对 阅孕孕匀自由基的清除能力
云蚤早援 圆摇 阅孕孕匀 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 则葬贼藻 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂葬贼藻则蚤葬造
对 韵圆 原窑 的氧化作用不但没有抑制作用反而随着色素浓
度的提高袁促进了 韵圆 原窑 的氧化作用袁具体原因还有待于
更进一步的研究遥
圆郾 猿摇 类胡萝卜素对生物大分子氧化的防护作用
圆郾 猿郾 员摇 对脂类氧化的保护作用摇 栽月粤砸杂 测定脂类氧
化作用是通过被氧化的脂类与硫代巴比妥酸渊栽月粤冤反
图 猿摇 各物质对超氧阴离子自由基的清除能力
云蚤早援 猿摇 杂糟葬增藻灶早蚤灶早 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂葬贼藻则蚤葬造 燥灶 韵圆 原窑
应生成粉红色物质袁在 缘猿圆灶皂 处有最大吸收峰袁而通
过加入抑制剂袁可以抑制粉红色物质的形成袁使得反应
产物在 缘猿圆灶皂处 韵阅值减少遥 各物质对脂质氧化的抑
制效果如图 源 所示遥 部分菌的色素对脂类氧化的抑制
作用明显袁如 阅援 则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽 和 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 的色
素在浓度为 猿滋早 辕 皂造 时袁对脂类氧化的抑制作用达到
猿园怨
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
猿圆豫左右袁而 阅援 凿藻泽藻则贼蚤 和 阅援 澡燥责蚤藻灶泽蚤泽 的提取物在相
同浓度下袁抑制率只有 员员豫 和 怨豫 左右袁仅为 阅援
则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽和 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽的三分之一左右遥
图 源摇 对脂类氧化的抑制作用
云蚤早援 源摇 陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责蚤早皂藻灶贼泽
燥灶 造蚤责蚤凿 燥曾蚤凿葬贼蚤燥灶
圆郾 猿郾 圆摇 对蛋白氧化损伤的抑制作用摇 为测定不同类
胡萝卜素提取物对蛋白氧化作用的影响袁本研究通过
牛血清蛋白体外氧化试验进行分析测定渊由于在试验
过程中 阅援 澡燥责蚤藻灶泽蚤泽 的类胡萝卜素提取物与蛋白质作
用均未能产生沉淀袁故未能测定其对蛋白质氧化的抑
制作用冤遥 图 缘 表明袁在浓度为 猿滋早 辕 皂造 的条件下袁不
同类胡萝卜素提取物对牛血清蛋白氧化损伤的影响有
很大差别袁 阅援 则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽袁 阅援 早藻燥贼澡藻则皂葬造蚤泽 和 阅援
则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 猿 种细菌的类胡萝卜素提取物对牛血清蛋
白的抑制率分别达到 苑员豫 袁远圆豫和 远苑豫 袁表现出显著
的蛋白质氧化抑制作用遥 值得注意的是袁来自 阅援
则葬凿蚤燥责澡蚤造怎泽的类胡萝卜素提取物袁非但没有抑制蛋白
的氧化作用袁反而一定程度上促进了蛋白的氧化袁这种
促氧化效应的具体原因有待进一步研究遥
图 缘摇 类胡萝卜素提取物对蛋白氧化抑制作用
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猿摇 讨论
阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽被认为是现今为止地球上
发现的抗辐射能力最强的细菌之一袁其所在的奇球菌
属渊阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤冤已经发现了超过 猿园 种以上的细菌咱员员暂 袁
而且已经得到了其中部分菌种的全基因组序列袁对于
阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤属的细菌而言袁他们有许多特点袁然而其中
最明显的特点在于其对紫外线尧电离辐射和氧化压力
等极端环境压力具有极强的抗性咱员圆暂 遥 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟怎泽 属
的这种特性与它们对活性氧的防护以及修复细胞内大
分子能力有关遥 虽然国内外学者已经做了很多关于
阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤属基因组修复方面的研究袁但对 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤
属细菌极端抗氧化能力的原因仍然并不完全明朗遥
阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽 中的类胡萝卜素渊阅藻蚤灶燥曾葬灶贼澡蚤灶冤已
被证明有很强的抗氧化能力袁对菌体的抗性有重要的
贡献遥 我们推断 阅藻蚤灶燥糟燥糟糟蚤 属的其他细菌所含有的类
胡萝卜素提取物对氧化压力也有很强的抗性遥 阅孕孕匀
及超氧阴离子自由基清除试验结果表明袁不同种类的
类胡萝卜素提取物其体外抗氧化能力有所不同袁而其
中较强的是 阅援 则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽的类胡萝卜素提取物袁在
相同浓度下袁它与我们前期主要研究的 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽
类胡 萝 卜 素 产 物 抗 氧 化 能 力 相 类 似遥 且 阅援
则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽和 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽类胡萝卜素提取物对脂
类尧蛋白质等大分子的损伤具有较好的抑制作用遥
阅援 则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽最早在美国马萨诸塞州的黑线鳕
组织 和 南 极 洲 的 风 化 石 中 发 现咱员猿暂 袁 对 于 阅援
则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽的研究远远低于 阅援 则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽袁目前仅
对其 阅晕粤鄄遭蚤灶凿蚤灶早蛋白的研究有进展袁有希望开发成
为新的生物药物咱员源暂 遥 然而对其类胡萝卜素提取物的
研究 仍 处 于 起 步 阶 段袁 本 研 究 结 果 表 明 阅援
则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽 的类胡萝卜素提取物可能是除 阅援
则葬凿蚤燥凿怎则葬灶泽类胡萝卜素之外的又一种抗氧化活性较强
的物质袁但其组成和结构有待进一步的分析和鉴定遥
研究证明不饱和双键的数目和羟基的有无及数目多寡
对类胡萝卜素的抗氧化能力具有非常重要的作用遥 共
轭双键越长袁共轭双键的分子轨道重叠程度越高袁其通
过加成反应清除活性氧的能力就越强袁所以我们认为
阅援 则葬凿蚤燥责滋早灶葬灶泽中色素应该比其他细菌的色素有更多
的双键和羟基遥 另外袁需要用体内试验等进一步证实
这些类胡萝卜素在生物体内的抗氧化作用机制及其应
用价值遥 希望通过本研究开启一个新的抗氧化生物药
物筛选和作用机制研究工作袁为下一步的药理学研究
奠定基础遥
源园怨
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参考文献院
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渊责任编辑摇 邱爱枝冤
缘园怨