全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员源袁圆愿渊缘冤院园愿远怨 耀 园愿苑缘允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园远鄄圆园摇 接受日期院圆园员猿鄄员园鄄员苑
基金项目院宁波市科技攻关项目渊圆园员圆园员悦员园员员园远圆冤袁浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室开放基金渊圆园员员耘员园园园圆 原 园苑冤袁浙江省重中之重
学科开放基金渊运云圆园员圆园园源冤
作者简介院夏珊珊袁女袁主要从事农产品加工研究遥 耘鄄皂葬蚤造院曾蚤葬泽澡葬灶泽澡葬灶员园猿圆园岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
通讯作者院戚向阳袁女袁教授袁主要从事天然产物化学研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 择蚤曾蚤葬灶早赠葬灶早愿缘岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员源冤园缘鄄园愿远怨鄄园苑
响应面法优化马面鱼皮胶原蛋白提取
工艺及胶原组成分析
夏珊珊员 摇 曹少谦员 摇 刘摇 亮圆 摇 戚向阳员
渊员 浙江万里学院生物与环境学院袁浙江 宁波摇 猿员缘员园园曰圆 浙江医药高等专科学校生物与食品系袁浙江 宁波摇 猿员缘员园园冤
摘摇 要院本文旨在采用响应面法优化马面鱼皮中胶原蛋白的提取工艺袁并对其进行氨基酸组成分析袁为马
面鱼皮精深加工及高值化利用提供一定的理论基础遥 结果表明袁胶原蛋白提取前处理条件为院采用
员园豫异丙醇脱脂袁料液比 员颐 员缘袁时间 圆园澡曰采用 苑郾 缘豫 晕葬悦造溶液除杂蛋白袁料液比 员颐 员园袁时间 圆源澡遥 胶原
蛋白最佳提取工艺为院园郾 猿愿皂燥造窑蕴 原员乙酸溶液袁料液比 员颐 猿园袁时间 猿猿澡袁此条件下实际得率为 猿远圆郾 缘皂早窑
早 原员遥 氨基酸分析表明袁甘氨酸含量为 圆源郾 员圆豫 袁其残基数占总残基的 员 辕 猿 左右袁羟脯氨酸含量为
怨郾 猿员豫 袁未检测到色氨酸袁符合胶原蛋白的特征遥
关键词院马面鱼曰鱼皮曰胶原蛋白曰提取曰氨基酸分析
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员源郾 园缘援 园愿远怨
摇 摇 胶原蛋白是生物体内一种重要细胞外基质结构的
天然高分子化合物袁由三条肽链拧成螺旋形纤维
状咱员 原 圆暂 袁分子含糖及大量甘氨酸尧脯氨酸尧羟脯氨酸
等咱猿 原 源暂 遥 胶原蛋白作为结缔组织的物质基础袁能支撑
器官和保护肌体咱缘暂 袁具有独特的功效和生理活性袁如
促进伤口愈合尧止血袁抗原性较低袁可促进骨骼的形成尧
增强皮肤代谢袁还与细胞增生尧运动尧分化尧免疫等功能
密切相关咱远暂 遥 胶原蛋白主要存在于动物的皮肤尧软
骨尧肌腱尧韧带咱苑暂等组织中袁在鱼皮和鱼鳞中也有大量
分布遥 目前袁胶原蛋白在食品业尧医药业尧皮革业尧影像
业和化妆品工业中都有广泛的应用咱愿 原 员园暂 遥 虽然通过
猪皮尧牛皮提取胶原蛋白的应用较为广泛袁但是鱼皮价
格低廉尧来源丰富和提取比较容易遥 我国水产品产量
位居世界第一咱员员暂 袁每年有大量的鱼皮及鱼鳞等废弃物
产生袁如不充分利用袁污染环境的同时袁还对资源造成
极大的浪费袁因此研究从鱼类下脚料中提取胶原蛋白
具有深远意义遥
马面鱼渊晕葬增燥凿燥灶 泽藻责贼藻灶贼则蚤燥灶葬造蚤泽冤学名绿鳍马面鲀袁
又称橡皮鱼尧剥皮鱼尧面包鱼袁是一种习暖性近底层鱼
类咱员圆 原 员猿暂 袁鱼皮较厚且硬袁加工过程中皮通常剥除丢弃遥
目前袁其鱼皮的开发利用主要有制革咱员源暂 尧生产可溶性
蛋白粉和分离纯化精氨酸和脯氨酸咱员缘暂 遥 草鱼鱼鳞尧刺
参尧斑点叉尾鮰鱼骨等胶原蛋白的研究均有报
道咱员远 原 员愿暂 袁而有关马面鱼皮胶原蛋白提取及应用鲜见报
道遥 胶原蛋白提取方法主要有酸法尧碱法尧酶法等袁后
两者易造成肽键水解袁对胶原蛋白结构的完整性有一
定影响遥 因此袁本文对马面鱼皮胶原蛋白酸法提取条
件进行优化袁并对其进行氨基酸组成分析袁以期为马面
鱼皮的综合利用及其胶原蛋白的开发提供一定参考遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料和仪器
员郾 员郾 员摇 试验材料摇 马面鱼皮收集于宁波水产批发市
场袁清洗后沥干袁用组织捣碎机将其制成小碎块袁置于
原 圆园益保存备用遥
员郾 员郾 圆摇 主要试验试剂摇 冰乙酸尧异丙醇尧晕葬悦造 等均为
国产分析纯曰羟脯氨酸标准品购于上海 粤造葬凿凿蚤灶
陨灶凿怎泽贼则蚤葬造 悦燥则责燥则葬贼蚤燥灶遥
员郾 员郾 猿 摇 主要仪器设备 摇 冷冻离心机 渊 缘愿园源砸袁
怨远愿
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
耘责责藻灶凿燥则枣冤尧冷冻干燥仪渊粤蕴孕匀粤圆 原 源袁悦匀砸陨杂栽冤尧全自
动氨基酸分析仪渊蕴愿怨园园 日本袁日立冤遥
员郾 圆摇 实验方法
员郾 圆郾 员摇 羟脯氨酸含量的测定摇 采用氨基酸分析仪测
定羟脯氨酸含量遥 胶原蛋白含量渊豫 冤 越羟脯氨酸含
量渊豫 冤 伊员员郾 员
员郾 圆郾 圆摇 脂肪含量的测定摇 采用索氏抽提法咱员怨暂 遥
员郾 圆郾 猿摇 蛋白质含量的测定摇 采用考马斯亮蓝法咱圆园暂 遥
员郾 圆郾 源摇 前处理条件的优化
员郾 圆郾 源郾 员摇 脱脂条件优化 选取正己烷尧正丁醇尧石油
醚尧异丙醇分别对样品进行脱脂袁料液比 员 颐 员园袁源益下
处理 圆园澡袁计算脱脂率袁从而选择最佳脱脂溶剂遥 按表
员 进行正交实验对脱脂条件进行优化遥
脱脂率 越 渊员 原脱脂后样品含脂量 辕脱脂前样品含
脂量冤 伊 员园园豫
表 员摇 脱脂前处理正交试验方案
栽葬遭造藻 员摇 耘曾责藻则蚤皂藻灶贼 凿藻泽蚤早灶 枣燥则 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥枣 凿藻早则藻葬泽蚤灶早
水平
蕴藻增藻造
因素 云葬糟贼燥则
浓度 粤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 豫
料液比 月
杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥
时间 悦
栽蚤皂藻 辕 澡
员 缘 员院缘 员园
圆 员园 员院员园 员缘
猿 员缘 员院员缘 圆园
员郾 圆郾 源郾 圆摇 除杂蛋白条件优化 将脱脂后的鱼皮分别用
不同 浓 度 晕葬悦造 溶 液 渊 圆郾 缘豫 尧 缘豫 尧 苑郾 缘豫 尧 员园豫 尧
员圆郾 缘豫 冤尧不同时间渊远尧员圆尧员愿尧圆源尧猿园澡冤尧不同料液比渊员
颐 缘尧员颐 员园尧员颐 员缘尧员颐 员园尧员颐 圆缘冤处理袁测定上清液中胶原蛋
白和杂蛋白质的含量遥 上清液中总蛋白含量减去胶原
蛋白含量即为杂蛋白含量遥
员郾 圆郾 缘摇 响应面法优化马面鱼皮胶原蛋白提取工艺
员郾 圆郾 缘郾 员摇 酸的选择摇 先将鱼皮进行前处理袁再分别选
用 园郾 猿皂燥造窑蕴 原员盐酸尧乙酸尧柠檬酸袁料液比 员 颐 员园袁源益
下提取 圆源澡袁以胶原蛋白得率为指标袁从而确定提取所
用的最佳酸种类遥 胶原蛋白得率渊皂早窑早 原员冤 越提取所
得胶原蛋白的量 辕鱼皮干重曰胶原蛋白提取率渊豫 冤 越
提取所得胶原蛋白的量 辕鱼皮所含胶原蛋白的量 伊
员园园豫 遥
员郾 圆郾 缘郾 圆摇 旋转正交实验 以酸浓度尧料液比尧提取时间
为影响因素袁胶原蛋白的得率为响应值袁采用 凿藻泽蚤早灶
藻曾责藻则贼苑郾 园 进行三因素三水平旋转正交实验设计袁见
表 圆遥
员郾 圆郾 远摇 马面鱼皮胶原蛋白氨基酸组成分析摇 提取所
得胶原蛋白经 悦藻造造怎造燥泽藻 阅耘 原 缘圆 柱层析脱色及纯化袁
冷冻干燥后袁取 缘园皂早 样品于具塞试管中袁经 员园皂蕴
远皂燥造窑蕴 原员盐酸于 员员缘益水解 圆源澡袁水解液转移至 缘园皂蕴
容量瓶定容袁过滤后取 园郾 圆皂蕴 上清液袁氮气吹干袁再加
入 圆皂蕴 园郾 园圆皂燥造窑蕴 原员盐酸袁吸取 圆皂蕴至氨基酸自动分
析仪分析其氨基酸组成遥
表 圆摇 响应面实验因素水平表
栽葬遭造藻 圆摇 云葬糟贼燥则泽 葬灶凿 造藻增藻造泽 燥枣 砸粤杂 贼藻泽贼
水平
蕴藻增藻造
浓度 粤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕
渊皂燥造窑蕴 原员 冤
料液比 月
杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥
时间 悦
栽蚤皂藻 辕 澡
原 员 园郾 员 员院员园 员圆
园 园郾 猿 员院圆园 圆源
员 园郾 缘 员院猿园 猿远
员郾 圆郾 苑摇 数据统计分析摇 实验均重复 猿 次袁采用 耘曾糟藻造
进行统计分析袁并计算标准偏差遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 马面鱼皮前处理条件优化
圆郾 员郾 员摇 脱脂条件优化摇 由图 员 可知袁相同条件下袁异
丙醇的脱脂率最高袁为 远圆郾 源缘豫 曰正丁醇次之袁为
源源郾 怨苑豫 曰石油醚和正己烷分别为 圆远郾 远苑豫和 圆远郾 远员豫 遥
因此袁选择异丙醇作为脱脂溶剂遥 按照表 员 进行 蕴怨
渊猿猿冤正交实验袁结果见表 猿遥
图 员摇 不同溶剂的脱脂效果
云蚤早援 员摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽燥造增藻灶贼泽 燥灶 凿藻早则藻葬泽蚤灶早
摇 摇 由表 猿 可见影响脱脂效果的因素依次为院脱脂时
间 跃异丙醇浓度 跃料液比袁最优脱脂条件为 悦猿粤圆月猿袁
即异丙醇浓度 员园豫 袁料液比 员颐 员缘袁脱脂时间 圆园澡遥
园苑愿
摇 缘 期 响应面法优化马面鱼皮胶原蛋白提取工艺及胶原组成分析
表 猿摇 正交试验结果分析
栽葬遭造藻 猿摇 粤灶造赠泽蚤泽 燥枣 燥则贼澡燥早燥灶葬造 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼
试验号
悦燥凿藻
因素 云葬糟贼燥则
浓度 粤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕
渊皂燥造窑蕴 原员 冤
料液比 月
杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿
则葬贼蚤燥
时间 悦
栽蚤皂藻 辕 澡
脱脂率
阅藻早则藻葬泽蚤灶早
则葬贼藻 辕 豫
员 员 员 员 缘怨郾 怨猿
圆 员 圆 圆 猿怨郾 远缘
猿 员 猿 猿 远员郾 圆苑
源 圆 员 圆 缘苑郾 远员
缘 圆 圆 猿 苑愿郾 圆缘
远 圆 猿 员 缘远郾 远园
苑 猿 员 猿 缘苑郾 圆愿
愿 猿 圆 员 源怨郾 怨远
怨 猿 猿 圆 缘怨郾 怨园
运员 员远园郾 愿缘 员苑源郾 愿圆 员远远郾 源怨
运圆 员怨圆郾 源远 员远苑郾 愿远 员缘苑郾 员远
运猿 员远苑郾 员源 员苑苑郾 苑苑 员怨远郾 愿
噪员 缘猿郾 远圆 缘愿郾 圆苑 缘缘郾 缘园
噪圆 远源郾 员缘 缘缘郾 怨缘 缘圆郾 猿怨
噪猿 缘缘郾 苑员 缘怨郾 圆远 远缘郾 远园
砸 员园郾 缘源 猿郾 猿园 员猿郾 圆员
圆郾 员郾 圆摇 除杂蛋白条件优化 摇 晕葬悦造 浓度尧处理时间及
料液比对除杂蛋白的影响如图 圆 耀 图 源 所示袁苑郾 缘豫
晕葬悦造溶液尧处理 圆源澡尧料液比 员颐 员园 时袁既可较大限度除
去杂蛋白袁又使胶原蛋白的损失量较小遥
图 圆摇 不同浓度的 晕葬悦造溶液对除杂蛋白的影响
云蚤早援 圆摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 晕葬悦造 燥灶 贼澡藻
则藻皂燥增葬造 燥枣 灶燥灶鄄糟燥造造葬早藻灶 责则燥贼藻蚤灶泽
圆郾 圆摇 响应面法优化马面鱼皮胶原蛋白提取工艺
圆郾 圆郾 员摇 不同酸对马面鱼皮胶原蛋白提取的影响摇 不
图 猿摇 不同处理时间对除杂蛋白的影响
云蚤早援 猿摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 贼则藻葬贼皂藻灶贼 贼蚤皂藻 燥灶 贼澡藻
则藻皂燥增葬造 燥枣 灶燥灶鄄糟燥造造葬早藻灶 责则燥贼藻蚤灶泽
图 源摇 不同料液比对除杂蛋白的影响
云蚤早援 源摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥 燥灶 贼澡藻
则藻皂燥增葬造 燥枣 灶燥灶鄄糟燥造造葬早藻灶 责则燥贼藻蚤灶泽
同酸处理对胶原蛋白得率的影响如图 缘 所示袁用盐酸尧
柠檬酸及乙酸提取时的得率分别为 远圆郾 愿远尧员员园郾 怨 和
圆源怨郾 缘皂早窑早 原员袁故选用乙酸为提取所用酸遥
圆郾 圆郾 圆摇 响应面设计对胶原蛋白得率的影响摇 实验结
果如表 源 所示遥 以编码值 粤袁月袁悦为自变量袁以胶原蛋
白得率 再为响应值袁采用 月燥曾鄄月藻澡灶噪藻灶 程序进行响应
面分析试验袁得到结果如表 缘袁因子经过回归拟合得出
马面鱼皮提取胶原蛋白的二次回归模型为院再 越 原
猿圆苑郾 远苑 垣 怨愿远郾 源员鄢粤 垣员郾 愿怨鄢月 垣 圆源郾 怨源鄢悦 垣 园郾 圆苑鄢月
鄢悦 原员怨圆愿郾 员员鄢 粤圆 原 园郾 远园鄢悦圆
员苑愿
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
表 源摇 旋转正交试验设计及结果
栽葬遭造藻 源摇 阅藻泽蚤早灶 葬灶凿 则藻泽怎造贼泽 燥枣 砸杂酝 葬灶葬造赠泽蚤泽
序号
悦燥凿藻
酸浓度 粤
粤糟蚤凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
料液比 月
杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥
提取时间 悦
耘曾贼则葬糟贼蚤灶早 贼蚤皂藻
得率 再
再蚤藻造凿 辕 皂早窑早 原员
员 园援 缘园 圆园援 园园 猿远援 园园 员苑远援 怨猿
圆 园援 猿园 圆园援 园园 圆源援 园园 圆远怨援 怨源
猿 园援 猿园 员园援 园园 猿远援 园园 员员圆援 愿猿
源 园援 猿园 圆园援 园园 圆源援 园园 圆员愿援 苑苑
缘 园援 员园 员园援 园园 圆源援 园园 员园员援 园怨
远 园援 员园 圆园援 园园 员圆援 园园 圆愿援 圆缘
苑 园援 猿园 猿园援 园园 员圆援 园园 员圆远援 愿
愿 园援 缘园 员园援 园园 圆源援 园园 员员圆援 源
怨 园援 猿园 圆园援 园园 圆源援 园园 圆猿员援 怨愿
员园 园援 猿园 圆园援 园园 圆源援 园园 圆愿缘援 苑愿
员员 园援 猿园 猿园援 园园 猿远援 园园 猿苑缘援 苑
员圆 园援 猿园 员园援 园园 员圆援 园园 怨员援 远怨
员猿 园援 猿园 圆园援 园园 圆源援 园园 圆远源援 猿
员源 园援 缘园 圆园援 园园 员圆援 园园 怨园援 猿怨
员缘 园援 缘园 猿园援 园园 圆源援 园园 圆远远援 怨怨
员远 园援 员园 猿园援 园园 圆源援 园园 员远园援 苑远
员苑 园援 员园 圆园援 园园 猿远援 园园 远怨援 愿猿
表 缘摇 二次多项模型方差分析表
栽葬遭造藻 缘摇 栽憎燥 皂怎造贼蚤灶燥皂蚤葬造 皂燥凿藻造 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 增葬则蚤葬灶糟藻 贼葬遭造藻
变异来源
灾葬则蚤葬贼蚤燥灶 泽燥怎则糟藻泽
均方
酝藻葬灶 泽择怎葬则藻
云比值
云鄄则葬贼蚤燥泽
孕值
孕鄄增葬造怎藻
模型 员圆猿苑园援 圆圆 圆猿援 缘员 园援 园园园圆鄢鄢
粤 员园圆愿园援 猿缘 员怨援 缘源 园援 园园猿员鄢鄢
月 圆员圆源圆援 苑猿 源园援 猿苑 园援 园园园源鄢鄢
悦 员员员员圆援 源圆 圆员援 员圆 园援 园园圆缘鄢鄢
粤月 圆圆缘圆援 源缘 源援 圆愿 园援 园苑苑猿
粤悦 缘园缘援 猿缘 园援 怨远 园援 猿缘怨苑
月悦 源园愿园援 远缘 苑援 苑远 园援 园圆苑员鄢
粤圆 圆缘园源缘援 园园 源苑援 远园 园援 园园园圆鄢鄢
月圆 员员苑苑援 园圆 圆援 圆源 园援 员苑愿源
悦圆 猿园怨园怨援 猿愿 缘愿援 苑缘 园援 园园园员鄢鄢
残差 缘圆远援 员源
失拟 员怨缘援 远猿 园援 圆缘 园援 愿缘远圆
误差 苑苑源援 园员
砸圆 越 园援 怨远愿园 砸圆粤凿躁 越 园援 怨圆远愿
注院鄢鄢表示 孕 约 园郾 园员袁差异极显著曰鄢 表示 孕 约 园郾 缘袁差异显著袁下同遥
晕燥贼藻院 鄢鄢皂藻葬灶泽 孕 约 园郾 园员袁 藻曾贼则藻皂藻造赠 泽蚤早蚤灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻曰 鄢 皂藻葬灶泽
孕 约 园郾 缘袁 泽蚤早灶蚤枣蚤糟藻灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻援
图 缘摇 不同种酸处理对胶原蛋白得率的影响
云蚤早援 缘摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 葬糟蚤凿 贼赠责藻 燥灶 贼澡藻 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 燥枣 糟燥造造葬早藻灶
摇 摇 方差分析渊表 缘冤显示二阶多项式能准确的描述胶
原蛋白得率的变化遥 模型回归极其显著 渊 孕 越
园郾 园园园圆冤袁说明该模型回归高度可靠曰一次项袁二次项
的交互作用显著袁说明该模型不是简单的线性关系曰失
拟项不显著渊孕 越 园郾 愿缘远圆冤袁说明该方程对试验拟合度
高袁试验误差小遥 因此袁可以用此回归方程代替真实的
试验点对结果进行分析遥 由表 缘 可知袁对方程影响程
度由大到小依次为料液比尧提取时间尧酸浓度袁而且 猿
圆苑愿
摇 缘 期 响应面法优化马面鱼皮胶原蛋白提取工艺及胶原组成分析
者对胶原蛋白得率的影响均是极显著的袁说明这 猿 个
因素的取值直接关系到胶原蛋白的得率遥 多元相关系
数 砸圆 越 园郾 怨远愿园袁表示响应值胶原蛋白得率的变化
怨远郾 愿园豫来自于所选因变量袁表明此模型与实际真实试
验拟合情况非常好袁可以代替真实试验点用于预测实
验范围内不同条件处理后胶原蛋白的得率遥 因此袁可
以用该回归模型确定最佳提取工艺遥
注院粤院酸浓度 月院料液比遥
晕燥贼藻院 粤院 粤糟蚤凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 月院 杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥援
图 远摇 酸浓度和料液比对胶原蛋白提
取率的影响
云蚤早援 远摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 葬糟蚤凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 葬灶凿 泽燥造蚤凿鄄
造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥 燥灶 贼澡藻 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 燥枣 糟燥造造葬早藻灶
图 远 耀图 愿 反映了乙酸浓度尧料液比尧提取时间 猿
个因素对胶原蛋白得率的影响遥 由图 远 可知袁当乙酸
浓度不变时袁胶原蛋白的得率随料液比的增加而增大袁
料液比一定时袁得率随乙酸浓度增加先增大后减小袁说
明酸浓度过高或者过低袁都不利于提取遥 图 苑 表明袁酸
浓度一定时袁随提取时间的延长袁得率先增大后又逐渐
减小袁而当提取时间一定时袁随着酸浓度的变化袁得率
呈现相同的变化趋势遥 从图 愿 可以看出袁料液比一定
时袁随着提取时间的延长袁得率先逐渐增大后又减小袁
而当提取时间一定时袁随着料液比的增加袁得率增大趋
势不明显袁因此袁应在经济的情况下选择合适的料液
比遥
综上所述袁胶原蛋白得率与乙酸浓度尧料液比尧提
取时间息息相关袁而且这 猿 个因素存在最佳组合可以
满足理论最高得率的要求遥 经过软件分析得到最优提
取工艺为院酸浓度 园郾 猿愿皂燥造窑蕴 原员袁料液比 员 颐 猿园袁时间
猿猿澡袁理论得率为 猿远缘郾 苑皂早窑早 原员遥 此条件下进行试验袁
注院粤院酸浓度 悦院提取时间遥
晕燥贼藻院 粤院 粤糟蚤凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 悦院 耘曾贼则葬糟贼蚤灶早 贼蚤皂藻
图 苑摇 酸浓度和提取时间对胶原蛋白提
取率的影响
云蚤早援 苑摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 葬糟蚤凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 葬灶凿
藻曾贼则葬糟贼蚤灶早 贼蚤皂藻 燥灶 贼澡藻 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 燥枣 糟燥造造葬早藻灶
注院月院料液比 悦院提取时间
晕燥贼藻院 月院 杂燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥 悦院 耘曾贼则葬糟贼蚤灶早 贼蚤皂藻
图 愿摇 料液比和提取时间对胶原蛋白提
取率的影响
云蚤早援 愿 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽燥造蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 则葬贼蚤燥 葬灶凿 藻曾贼则葬糟贼蚤灶早
贼蚤皂藻 燥灶 贼澡藻 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 赠蚤藻造凿 燥枣 糟燥造造葬早藻灶
实际得率为 猿远圆郾 缘 皂早窑早 原员袁与理论值基本相符遥
圆郾 猿摇 马面鱼皮胶原蛋白氨基酸组成分析
马面鱼皮胶原蛋白的氨基酸组成及含量如表 远 所
示袁未检测到色氨酸袁酪氨酸尧异亮氨酸尧组氨酸的含量
也很少袁但谷氨酸尧甘氨酸尧丙氨酸尧脯氨酸尧羟脯氨酸
猿苑愿
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
的含量较高袁甘氨酸残基数占总残基的 员 辕 猿 左右袁脯氨
酸和羟脯氨酸的含量达到 员缘豫以上遥
表 远摇 马面鱼皮酸溶性胶原蛋白的氨基酸组成
栽葬遭造藻 远摇 粤皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 燥枣 糟燥造造葬早藻灶
枣则燥皂 晕葬增燥凿燥灶 泽藻责贼藻灶贼则蚤燥灶葬造蚤泽 泽噪蚤灶
氨基酸
粤皂蚤灶燥 葬糟蚤凿
含量
悦燥灶贼藻灶贼 辕 豫
残基窑员园园园 个氨基酸总残基 原 员
砸藻泽蚤凿怎藻泽窑员园园园则藻泽蚤凿怎藻泽 原 员
天冬氨酸渊粤泽责冤 缘郾 缘猿 源缘
苏氨酸渊栽澡则冤 圆郾 愿员 圆远
丝氨酸渊杂藻则冤 源郾 猿缘 源缘
谷氨酸渊郧造怎冤 员园郾 圆缘 苑缘
甘氨酸渊郧造赠冤 圆源郾 员圆 猿源怨
丙氨酸渊粤造葬冤 员员郾 源猿 员猿怨
缬氨酸渊灾葬造冤 圆郾 猿远 圆圆
酪氨酸渊栽赠则冤 园郾 圆苑 员
甲硫氨酸渊酝藻贼冤 员郾 远猿 员圆
异亮氨酸渊陨造藻冤 园郾 怨员 苑
亮氨酸渊蕴藻怎冤 员郾 苑圆 员源
苯丙氨酸渊孕澡藻冤 员郾 愿员 员圆
赖氨酸渊蕴赠泽冤 猿郾 缘源 圆远
组氨酸渊匀蚤泽冤 员郾 园园 苑
精氨酸渊粤则早冤 愿郾 远圆 缘猿
脯氨酸渊孕则燥冤 员园郾 猿源 怨苑
羟脯氨酸渊匀赠责冤 怨郾 猿员 苑园
猿摇 讨论
鱼皮中含有一定的脂肪袁脂肪的存在会影响胶原
蛋白的提取袁所以必须将鱼皮中的脂肪除去遥 由于鱼
皮中除胶原蛋白外还含有其他杂蛋白咱圆员 原 圆圆暂 袁在后续的
提取试验中会随胶原蛋白一起溶出袁影响产品纯度袁因
此在提取之前需先将杂蛋白除去遥 本文采用 晕葬悦造 溶
液除去杂蛋白袁但除杂蛋白过程中胶原蛋白也会随着
一并溶出袁因此要选择合适条件袁在最大限度除杂蛋白
的同时使胶原蛋白损失最少遥 对原料进行脱脂及除杂
蛋白的前处理袁是胶原蛋白提取的关键袁本实验优化所
得前处理条件经济高效袁满足了后继提取的需求遥
在响应面法优化所得的胶原蛋白提取条件下袁实
际得率为 猿远圆郾 缘皂早窑早 原员袁与理论值基本相符遥 本试验
中胶原蛋白的提取率为 缘源郾 缘怨豫 袁楚水晶等咱员缘暂人采用
酶法提取马面鱼皮胶原蛋白的提取率为 缘苑郾 怨缘豫 袁
杂蚤贼贼澡蚤责燥灶早 晕葬造蚤灶葬灶燥灶等咱圆猿暂用胃蛋白酶从大眼梅鲷皮中
提取胶原蛋白袁提取率为 缘猿郾 远愿豫 袁均与本试验结果相
当遥
对提取所得胶原蛋白进行氨基酸分析袁结果显示
此胶原蛋白不含色氨酸和半胱氨酸袁酪氨酸尧异亮氨
酸尧组氨酸的含量很少袁但是甘氨酸尧丙氨酸尧脯氨酸尧
羟脯氨酸的含量较高袁均符合胶原蛋白的特征咱圆源 原 圆缘暂 遥
源摇 结论
马面鱼皮脱脂除杂蛋白袁对胶原蛋白的质量起到
重要的作用遥 试验表明最适脱脂条件为院员园豫异丙醇
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同酸提取溶剂对胶原蛋白的得率影响很大袁乙酸效果
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参考文献院
咱 员 暂摇 代菊红援重组类人胶原蛋白玉的分离纯化研究咱阅暂援 陕西院西北
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及其在化妆品中的应用咱 允暂 援 日用化学工业袁 圆园园缘袁 猿缘渊远冤院 猿愿愿
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东农业科学袁 圆园员员袁渊圆园冤院 员园园 原 员园猿
咱圆圆暂摇 张虹袁卓素珍袁戴志远援 鮟鱇鱼皮中胶原蛋白的提取及性质研究
咱允暂 援中国食品学报袁圆园园怨袁怨渊远冤院 员愿 原 圆源
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