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Analysis of Genetic Diversity and Establishment of Molecular ID for 16 Walnut Varieties Based on ISSR Markers

基于ISSR标记的16个核桃品种遗传多样性分析及分子身份构建



全 文 :核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊员园冤院员愿愿源 耀 员愿怨圆
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员缘鄄园源鄄圆苑摇 接受日期院圆园员缘鄄园愿鄄员苑
基金项目院山东省农业良种工程项目 渊鲁科字 咱 圆园员源 暂 怨远 冤袁山东省农业科学院青年基金项目 渊 圆园员缘再匝晕猿源 冤袁国家科技计划课题
渊圆园员猿月粤阅员源月园员园圆冤
作者简介院李国田袁男袁助理研究员袁主要从事核桃资源育种与分子生物学研究遥 耘鄄皂葬蚤造院造蚤早贼圆园园愿岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院张美勇袁男袁研究员袁主要从事核桃遗传育种与栽培技术研究遥 耘鄄皂葬蚤造院扎赠躁远圆缘岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤员园鄄员愿愿源鄄园怨
基于 陨杂杂砸标记的 员远个核桃品种遗传多样性分析
及分子身份构建
李国田员 摇 张美勇员 摇 相摇 昆员 摇 徐摇 颖员 摇 沈广宁员 摇 薛培生员 摇 杨摇 军圆
渊员 山东省果树研究所袁 山东 泰安摇 圆苑员园园园曰圆 邹城市千泉街道办事处林业站袁 山东 邹城摇 圆苑猿缘园园冤
摘摇 要院为了分析 员远 个核桃栽培品种的遗传关系和构建分子身份证袁以核桃幼叶为材料提取其基因组
阅晕粤袁利用 陨杂杂砸分子标记方法袁从 圆愿 条引物中筛选出 员园 条引物对 员远 个核桃栽培品种进行标记分析遥
结果表明袁员园 条 陨杂杂砸引物共扩增出 员员缘 个位点袁每条引物可获得 怨 耀 员缘 条 阅晕粤 片段袁平均为 员员郾 缘 条袁
其中多样性位点 怨怨 个袁多态性百分比达 愿远郾 园怨豫 袁员远 个核桃品种之间的平均有效等位基因数渊晕藻冤为员郾 缘园愿园袁晕藻蚤忆泽基因多样性指数渊匀冤为 园郾 猿园源员袁杂澡葬灶灶燥灶信息指数渊 陨冤 为 园郾 源缘苑苑袁遗传相似系数渊郧杂冤变幅
为 园郾 源圆 耀 园郾 愿圆遥 采用 哉孕郧酝粤方法构建的聚类图表明袁员远 个核桃品种可以划分为 源 个组袁品种间遗传信
息差异比较大袁具有丰富的遗传多样性袁能够通过 陨杂杂砸 标记方法将 员远 个品种区分开遥 此外从 员园 条引
物中筛选出 猿 条引物作为 员远 份核桃品种资源种质鉴定的核心引物袁构建了每个核桃品种的分子身份
证遥 本研究通过构建 员远 个核桃品种的分子身份袁为核桃品种鉴定和品种权保护提供了依据袁也为核桃
育种亲本的选配和种质资源鉴定奠定了基础遥
关键词院核桃曰品种曰陨杂杂砸曰遗传多样性曰分子身份证
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 员园援 员愿愿源
摇 摇 核 桃 渊 允怎早造葬灶泽 则藻早蚤葬 蕴援 冤 属 于 胡 桃 科
渊允怎早造葬灶凿葬糟藻葬藻冤核桃属渊 允怎早造葬灶泽冤多年生木本植物袁是
世界上主要的木本油料树种袁居四大干果之首遥 核桃
除含脂肪尧蛋白质尧碳水化合物外袁还含钙尧磷尧铁尧硫胺
素尧核黄素和尼克酸等多种成分袁具有很高的营养尧药
用和经济价值遥 我国是世界核桃重要的起源地之一袁
核桃资源极为丰富袁栽培历史悠久袁截止到 圆园员园 年核
桃收获面积达 猿园 多万 澡皂圆袁产量达到 员园远 万 贼袁栽培面
积和产量均居世界首位咱员暂 遥 近年来袁随着我国退耕还
林政策的实施和农村产业结构的调整袁核桃产业发展
迅猛袁特别是核桃新品种的选育与示范推广遥 同时我
国核桃品种化栽培有了迅速的发展袁但与美国核桃优
良品种栽培占总面积的 怨园豫相比袁还相差甚远咱圆暂 遥 虽
然国内外利用 砸粤孕阅尧粤云蕴孕尧杂杂砸尧陨杂杂砸 等分子标记技
术手段对核桃种属间亲缘关系进行了相关报道咱猿 原 远暂 袁
利用 杂杂砸标记技术结合核桃表型特征对不同品种间
的亲缘关系和种质鉴定方面进行了研究咱苑 原 员园暂 袁但利用
陨杂杂砸标记法对核桃栽培品种的遗传信息和分子身份
构建方面的研究相对较少遥
陨杂杂砸渊简单重复间区序列袁 蚤灶贼藻则鄄泽蚤皂责造藻 泽藻择怎藻灶糟藻
则藻责藻葬贼冤是基于 杂杂砸发展起来的一种分子标记技术袁在
杂杂砸的 猿忆端或 缘忆端加锚 员 耀 源 个嘌呤或嘧啶碱基袁由此
组成的单引物进行重复序列间 阅晕粤 的 孕悦砸 扩增遥
砸藻凿凿赠等咱员员暂研究结果表明袁陨杂杂砸分子标记具有高多态
性特点袁在遗传多样性尧系统发育尧基因标记及图谱构
建等方面研究具有重要意义遥 与 杂杂砸尧砸云蕴孕尧粤云蕴孕 相
比袁陨杂杂砸更快捷尧稳定尧成本较低尧阅晕粤用量小尧安全性
较高遥 该技术已在水稻咱员圆暂 尧小麦咱员猿暂 尧苹果咱员源暂 尧梨咱员缘暂 尧
桃咱员远暂 尧茶咱员苑暂等作物的群体遗传学尧种质鉴定和遗传图
谱构建等方面得到迅速应用袁并成功应用于核桃资源
亲缘关系和遗传多样性方面的研究遥 李国田等咱远暂利
用 陨杂杂砸标记技术对我国核桃不同地域实生居群进行
源愿愿员
摇 员园 期 基于 陨杂杂砸标记的 员远 个核桃品种遗传多样性分析及分子身份构建
了遗传多样性分析袁表明陕西核桃居群遗传多样性程
度最高遥 翟梅枝等咱员愿暂利用 陨杂杂砸和 杂杂砸分析了不同核
桃品种的遗传多样性袁将 员愿 个核桃种质分成四大类遥
悦澡则蚤泽贼燥责燥怎造燥泽 等咱员怨暂利用 陨杂杂砸 标记技术对希腊国内和
世界其他地区共 缘远 个核桃品种的遗传多样性和遗传
关系进行了研究袁指出希腊国内核桃品种多样性非常
丰富袁对核桃品种育种具有重要意义遥 孕燥贼贼藻则 等咱圆园暂用
陨杂杂砸标记分析了 源愿 个核桃品种的遗传关系袁指出由
于 陨杂杂砸呈显性遗传袁在分析品种间的遗传关系上可能
比 杂杂砸标记更有优势遥 因此袁本试验利用 陨杂杂砸 分子
标记技术袁以新疆尧山西尧山东尧北京等核桃产区的 员远
个主栽品种为研究试材袁在分子水平上研究了我国 员远
个核桃主栽品种的遗传关系袁构建了不同品种的指纹
图谱和分子身份证袁为快速便捷地鉴定核桃品种提供
技术支撑袁同时也为核桃杂交育种提供科学的参考依
据遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
员远 份核桃主栽品种样本采自国家果树种质泰安
核桃板栗圃袁以核桃当年生新叶作为提取基因组 阅晕粤
的材料袁放入带有标记的 员郾 缘 皂蕴 离心管中袁 原 圆园益冰
箱中保存备用遥 核桃主栽品种及属性特征见表 员遥
表 员摇 供试材料一览表
栽葬遭造藻 员摇 栽澡藻 贼藻泽贼藻凿 憎葬造灶怎贼 皂葬贼藻则蚤葬造泽
编号
晕燥援
品种
灾葬则蚤藻贼蚤藻泽
种属类型
杂责藻糟蚤藻泽
品种特性
悦澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 增葬则蚤藻贼蚤藻泽
员 丰辉云藻灶早澡怎蚤
亲本为上宋 缘 号 伊阿克苏 怨 号
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树姿较直立袁树冠呈圆柱形袁坚果长椭圆形袁果个中等袁壳面光滑袁
核仁饱满袁出仁率 远圆郾 缘豫 遥 丰产性强袁抗细菌性褐班病遥
圆 中核 圆 号在澡燥灶早澡藻 晕燥援 圆
新疆核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
坚果椭圆形袁顶部微尖袁果基圆袁壳面光滑袁黄色袁缝合线平而紧袁
部分坚果顶部易开裂袁 果形美观袁大小整齐遥
猿 晋龙 员 号允蚤灶造燥灶早 晕燥援 员
山西晚实核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
幼树树势较旺袁坚果近圆形袁壳面较光滑袁核仁饱满袁易取整仁袁
出仁率 远员豫左右遥
源 晋龙 圆 号允蚤灶造燥灶早 晕燥援 圆
山西晚实核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
生长势强袁树姿开张袁坚果圆形壳面光滑袁可取整仁袁出仁率 缘远豫
左右袁仁色淡黄白袁风味香甜袁品质上等遥
缘 元林再怎葬灶造蚤灶
亲本为元丰 伊强特勒
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树姿直立或半开张曰生长势强袁坚果长圆形袁果个大核仁充实饱满袁
出仁率 缘缘郾 源圆豫左右袁早实抗晚霜品种遥
远 中核 员 号在澡燥灶早澡藻 晕燥援 员
新疆核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
果大壳薄袁易取整仁袁早果丰产袁坐果率高袁连年丰产袁树势中庸袁
树姿开张袁 树冠圆头形遥
苑 元丰再怎葬灶枣藻灶早
新疆核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树势生长中庸袁树冠开张袁呈半圆形袁坚果卵圆形袁果个中大袁壳面较光
滑美观遥 核仁充实饱满袁出仁率 源怨郾 苑豫 遥 丰产尧抗逆性强遥
愿 岱丰阅葬蚤枣藻灶早
丰辉核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树势较强袁树姿直立袁坚果长椭圆形袁果个中大袁壳面较光滑袁核仁饱满袁
味香袁出仁率 缘愿郾 怨豫 袁坚果品质上等遥 较抗旱尧抗黑斑病遥
怨 香玲载蚤葬灶早造蚤灶早
亲本为上宋 缘 号 伊阿克苏 怨 号
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树势中等袁树姿直立袁分枝力强袁坚果圆形袁壳面光滑美观袁浅黄色袁缝合
线窄而平袁结合紧密袁核仁充实饱满袁味香不涩袁坚果品质上等遥
员园 清香匝蚤灶早曾蚤葬灶早
日本晚实品种
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树体中等大小袁树姿半开张袁幼树生长较旺袁坚果近圆锥形袁果个较大袁
壳面光滑袁种仁饱满袁出仁率 缘圆豫 原缘猿豫 遥 结果早尧丰产性强遥
员员 上宋 远 号杂澡葬灶早泽燥灶早 晕燥援 远
新疆核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树势中庸袁树姿开张袁坚果卵形袁中等大小袁壳面光滑袁
核仁饱满袁可取整仁遥
员圆 扎 猿源猿在葬 猿源猿
新疆核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树势强袁树姿开张袁坚果卵圆形袁中等大小袁壳面光滑袁缝合窄而平袁
易取整仁袁出仁率 缘源郾 园豫 袁耐干旱袁较耐粗放管理袁抗病害力较强遥
员猿 新巨丰载蚤灶躁怎枣藻灶早
新疆核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树势强袁树姿开张袁坚果长椭圆形袁坚果大袁壳面光滑袁可取整仁袁
出仁率 源愿郾 缘豫 遥 较耐寒尧耐干旱袁抗病性较强遥
员源 新新 圆 号载蚤灶曾蚤灶 晕燥援 圆
新疆核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树势中庸袁树姿直立袁坚果中等大袁坚果圆形或长圆形袁壳面光滑美观袁
核仁饱满袁易取整仁袁出仁率 缘远郾 远豫 遥 抗病尧耐贫瘠遥
员缘 温 员愿缘宰藻灶员愿缘
新疆核桃实生后代
渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤
树势较强袁树姿较开张遥 坚果似桃形袁果个中大袁壳面较光滑袁核仁饱满袁
易取整仁袁出仁率高达 远缘郾 怨豫 袁早期丰产性极强袁抗逆尧抗寒性强遥
员远 鸡心允蚤曾蚤灶
河北核桃
渊允援 澡燥责藻蚤藻灶泽蚤泽 匀怎冤 文玩核桃袁纹路网状多见袁纹理大较疏袁顶较钝袁底大而平遥
缘愿愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
员郾 圆摇 阅晕粤的提取
将核桃当年生嫩叶放入液氮中研磨袁采用改良的
悦栽粤月法咱圆员暂对样本基因组 阅晕粤进行提取与纯化遥 所提
取的 阅晕粤 用 哉灾鄄缘员园园型紫外分光光度计渊上海精密仪
器仪表有限公司冤检测纯度袁用 员郾 缘豫的琼脂糖凝胶电
泳检测质量和浓度袁最后用 凿凿匀圆韵稀释到 圆园 灶早窑滋蕴 原员袁
放入 原圆园益冰箱储存备用遥
员郾 猿摇 孕悦砸扩增和电泳检测
陨杂杂砸引物根据加拿大哥伦比亚大学公布的引物
序列渊哉月悦 孕则蚤皂藻则 杂藻贼 裕怨冤袁由北京赛百盛生物技术公
司合成遥 扩增反应在 酝葬泽贼藻则悦赠糟造藻则 藻责 梯度 孕悦砸 仪渊德
国 耘责责藻灶凿燥则枣公司冤上进行遥 反应体系为 圆缘 滋蕴院员园 伊
孕悦砸 遭怎枣枣藻则 圆郾 缘 滋蕴袁员郾 缘 皂皂燥造窑蕴 原员 酝早悦造圆 圆郾 园 滋蕴袁圆郾 缘
皂皂燥造窑蕴 原员 凿晕栽孕泽 圆滋蕴袁缘 滋皂燥造窑蕴 原员引物 员 滋蕴袁缘 哉窑滋蕴
栽葬择 酶 园郾 圆 滋蕴袁阅晕粤 模板 圆郾 缘 滋蕴 渊缘园 灶早冤袁其余用
凿凿匀圆韵补足遥 员园 伊 孕悦砸 缓冲液尧酝早悦造圆尧栽葬择 酶尧凿晕栽孕泽
均购自生工生物工程渊上海冤股份有限公司遥 孕悦砸 扩
增反应条件为 怨源 益预变性 缘 皂蚤灶袁怨源 益变性 猿园 泽袁源愿 耀
缘圆 益退火渊不同引物温度不同冤源缘 泽袁苑圆 益延伸 圆 皂蚤灶袁
源缘 个循环袁最后 苑圆 益延伸 员园 皂蚤灶遥 扩增产物在 员郾 缘豫
的琼脂糖凝胶上电泳袁经 耘月 染色后于 粤造责澡葬陨皂葬早藻则 匀孕
凝胶成像分析仪渊美国 粤造责澡葬 陨灶灶燥贼藻糟澡 公司冤上观察尧
记录 陨杂杂砸 扩增谱带袁并保存于计算机中遥
员郾 源摇 电泳谱带的记录及数据统计分析
陨杂杂砸 为显性标记袁同一引物扩增产物中电泳迁
移率一致的条带被认为具有同源性袁属于同一位点
的产物袁以 阅晕粤 酝葬则噪藻则 阅蕴 圆园园园 作为相对分子量标
准袁电泳图谱中每一条扩增带均代表了引物与模板
阅晕粤互补的一对结合位点袁根据 孕悦砸 扩增产物的电
泳结果袁在凝胶的某个相同迁移率位点上有 阅晕粤 条
带的记为野员冶袁无 阅晕粤 条带的记为野园冶袁剔除模糊不
清的扩增条带袁统计形成以野员冶和野园冶组成的 陨杂杂砸标
记表型数据矩阵遥 利用 晕栽杂再杂责糟渊灾藻则泽蚤燥灶 圆郾 员园藻冤软
件进行遗传相似系数计算袁并依据遗传相似系数采
用 哉孕郧酝粤 法进行聚类分析遥 采用多样性分析软件
孕燥责早藻灶藻造援 猿圆 对 陨杂杂砸 扩增结果进行遗传分析袁计算多
态位点百分率尧杂澡葬灶灶燥灶 信息多样性指数渊 陨冤尧晕藻蚤忆泽遗
传多样性指数渊匀冤和有效等位基因数渊晕藻冤等遗传参
数遥 根据 陨杂杂砸 表型数据矩阵袁以 阅晕粤 酝葬则噪藻则 为参
照袁以扩增条带数目和条带分子大小作为种质甄别
的主要依据袁按照 悦韵阅耘员圆愿 码制作成便于识别的条
形码分子身份证遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 不同引物扩增多态性分析
从加拿大哥伦比亚大学公布的 员园园 条 陨杂杂砸 序列
渊哉月悦 孕则蚤皂藻则 杂藻贼 裕怨冤中选择了 圆愿 条引物进行引物合
成渊北京赛百盛基因公司冤袁通过 孕悦砸扩增和电泳分析
对合成的引物进行了筛选遥 经过多次重复和比较袁最
终从中选出带型清晰尧稳定性较好尧特异性强尧具多态
性的引物 员园 条遥 员园 条引物共扩增检测到 员员缘 个位
点袁平均 员员郾 缘 个袁其中多态性位点 怨怨 个袁占检测位点
总数的 愿远郾 园怨豫 袁每条引物扩增条带分子量大小在 圆园园
耀 圆 园园园 遭责之间遥 试验结果表明袁员远 个核桃主栽品种
具有较高的多态性袁多态性百分率高达 愿远郾 园怨豫 曰筛选
出的 员园 条引物具有很好的多态性袁但不同 陨杂杂砸 引物
扩增位点和多态性有所差异袁其中引物 哉月悦愿苑猿尧
哉月悦愿圆怨 和 哉月悦愿缘园 扩增位点比较多袁扩增条带最多达
员缘 条袁引物 哉月悦愿圆远 多态性百分率最高袁为 员园园豫 袁最
少的也在 愿园豫以上袁说明 陨杂杂砸 标记能够有效标记 员远
份核桃主栽品种的多态性渊表 圆冤遥
晕燥贼藻院 酝院 阅晕粤 酝葬则噪藻则 阅蕴 圆园园园援
图 员摇 引物 哉月悦愿苑猿 对 员远 核桃品种 孕悦砸
扩增产物的电泳图谱
云蚤早援 员摇 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥枣蚤造藻 燥枣 员远 憎葬造灶怎贼
增葬则蚤藻贼蚤藻泽 怎泽蚤灶早 责则蚤皂藻则 哉月悦愿苑猿
圆郾 圆摇 品种之间的遗传相似性
利用 孕燥责早藻灶藻员郾 猿圆 软件分析了 员远 个核桃主栽品
种的遗传关系和多样性袁晕藻蚤忆泽 遗传相似度为 园郾 源圆 耀
园郾 愿圆袁平均 园郾 苑猿袁遗传距离为 园郾 圆园 耀 园郾 愿苑 渊表 猿冤袁其
中袁员 号丰辉与 愿 号岱丰尧员圆 号扎 猿源猿 与 员源 号新新 圆
号品种之间遗传相似系数比较高袁分别为 园郾 愿圆 和
园郾 愿员袁遗传距离比较近袁分别为 园郾 圆园 和 园郾 圆员袁而 圆 号中
核 圆 号与 员远 号鸡心尧源 号晋龙 圆 号与 员源 号新新 圆 号品
种之间遗传相似系数最低为 园郾 源圆袁遗传距离最远为
园郾 愿苑遥 各品种之间的平均有效等位基因数渊晕藻 冤为
远愿愿员
摇 员园 期 基于 陨杂杂砸标记的 员远 个核桃品种遗传多样性分析及分子身份构建
摇 摇 摇 摇 表 圆摇 引物优化条件及扩增多态性
栽葬遭造藻 圆摇 孕则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶凿 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶
引物编号
孕则蚤皂藻则 糟燥凿藻
引物序列
孕则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻
退火温度
粤灶灶藻葬造蚤灶早 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 辕 益
总带数
晕燥援 燥枣 遭葬灶凿泽
多态性带
晕燥援 燥枣 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟
多态性带百分率
孕藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 遭葬灶凿泽 辕 豫
哉月悦 愿猿远 渊粤郧冤愿再粤 缘圆 员圆 员园 愿猿郾 猿猿
哉月悦 愿圆缘 渊粤悦冤愿栽 缘圆 员园 愿 愿园郾 园园
哉月悦 愿圆怨 渊栽郧冤愿悦 缘员 员猿 员员 愿源郾 远圆
哉月悦 愿源源 渊悦栽冤愿砸悦 缘员 怨 愿 愿愿郾 愿怨
哉月悦 愿苑猿 渊郧粤悦粤冤源 缘员 员缘 员猿 愿远郾 远苑
哉月悦 愿圆远 渊粤悦冤愿悦 缘员 员员 员员 员园园郾 园园
哉月悦 愿源员 渊郧粤冤愿再悦 缘圆 员员 员园 怨园郾 怨员
哉月悦 愿源圆 渊郧粤冤愿再郧 缘圆 员员 怨 愿员郾 愿圆
哉月悦 愿源愿 渊悦粤冤愿砸郧 缘园 员园 愿 愿园郾 园园
哉月悦 愿缘园 渊郧栽冤愿再悦 缘圆 员猿 员员 愿源郾 远圆
摇 摇 注院 砸 越 粤 辕 郧袁再 越 悦 辕 栽袁由生工生物工程渊上海冤股份有限公司生产遥
晕燥贼藻院 砸 越 粤 辕 郧袁 再 越 悦 辕 栽援 孕则燥凿怎糟藻凿 遭赠 杂澡葬灶早澡葬蚤 杂葬灶早燥灶 月蚤燥贼藻糟澡 悦燥援 袁 蕴贼凿援
表 猿摇 员远 个核桃主栽品种的 晕藻蚤忆泽遗传相似系数渊对角线上方冤和遗传距离渊对角线下方冤
栽葬遭造藻 猿摇 晕藻蚤忆泽 早藻灶藻贼蚤糟 蚤凿藻灶贼蚤贼赠 渊葬遭燥增藻 凿蚤葬早燥灶葬造冤 葬灶凿 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻 渊遭藻造燥憎 凿蚤葬早燥灶葬造冤 燥枣 员远 憎葬造灶怎贼 增葬则蚤藻贼蚤藻泽
样本
杂葬皂责造藻泽 员 圆 猿 源 缘 远 苑 愿 怨 员园 员员 员圆 员猿 员源 员缘 员远
员 园郾 苑缘 园郾 缘猿 园郾 缘园 园郾 远猿 园郾 苑缘 园郾 远怨 园郾 愿圆 园郾 苑苑 园郾 缘园 园郾 远远 园郾 远源 园郾 远源 园郾 缘苑 园郾 缘苑 园郾 缘员
圆 园郾 圆怨 园郾 远远 园郾 缘苑 园郾 苑员 园郾 苑源 园郾 苑园 园郾 远苑 园郾 苑猿 园郾 缘苑 园郾 缘愿 园郾 远园 园郾 远猿 园郾 缘苑 园郾 缘缘 园郾 源圆
猿 园郾 远猿 园郾 源员 园郾 苑苑 园郾 缘愿 园郾 远员 园郾 缘缘 园郾 缘源 园郾 远圆 园郾 远远 园郾 源缘 园郾 源怨 园郾 源怨 园郾 源愿 园郾 缘圆 园郾 缘员
源 园郾 远愿 园郾 缘苑 园郾 圆苑 园郾 缘园 园郾 远圆 园郾 缘源 园郾 缘缘 园郾 缘怨 园郾 远圆 园郾 缘猿 园郾 源源 园郾 源愿 园郾 源圆 园郾 缘员 园郾 源怨
缘 园郾 源缘 园郾 猿源 园郾 缘源 园郾 远愿 园郾 缘苑 园郾 苑怨 园郾 远远 园郾 远猿 园郾 远员 园郾 缘远 园郾 远猿 园郾 远源 园郾 远苑 园郾 远源 园郾 缘员
远 园郾 圆怨 园郾 猿园 园郾 缘园 园郾 源愿 园郾 缘远 园郾 远员 园郾 苑园 园郾 苑园 园郾 远园 园郾 远圆 园郾 远苑 园郾 远圆 园郾 缘苑 园郾 缘苑 园郾 源怨
苑 园郾 猿愿 园郾 猿远 园郾 远园 园郾 远圆 园郾 圆猿 园郾 缘园 园郾 远远 园郾 苑圆 园郾 缘远 园郾 远猿 园郾 远愿 园郾 远员 园郾 远缘 园郾 远源 园郾 源源
愿 园郾 圆园 园郾 源园 园郾 远圆 园郾 远园 园郾 源员 园郾 猿缘 园郾 源员 园郾 苑缘 园郾 缘员 园郾 远园 园郾 远园 园郾 远圆 园郾 缘苑 园郾 缘缘 园郾 源苑
怨 园郾 圆远 园郾 猿员 园郾 源愿 园郾 缘猿 园郾 源缘 园郾 猿远 园郾 猿猿 园郾 圆怨 园郾 缘圆 园郾 远源 园郾 缘怨 园郾 远源 园郾 缘缘 园郾 远远 园郾 缘园
员园 园郾 远愿 园郾 缘苑 园郾 源员 园郾 源愿 园郾 缘园 园郾 缘员 园郾 缘怨 园郾 远苑 园郾 远缘 园郾 缘缘 园郾 远圆 园郾 远园 园郾 远员 园郾 缘苑 园郾 缘圆
员员 园郾 源员 园郾 缘源 园郾 苑怨 园郾 远猿 园郾 缘怨 园郾 源愿 园郾 源苑 园郾 缘员 园郾 源源 园郾 远园 园郾 苑圆 园郾 远怨 园郾 远愿 园郾 苑圆 园郾 缘苑
员圆 园郾 源源 园郾 缘员 园郾 苑圆 园郾 愿员 园郾 源苑 园郾 源园 园郾 猿怨 园郾 缘员 园郾 缘猿 园郾 源愿 园郾 猿猿 园郾 愿园 园郾 愿员 园郾 苑园 园郾 缘源
员猿 园郾 源源 园郾 源缘 园郾 苑圆 园郾 苑源 园郾 源源 园郾 源愿 园郾 缘园 园郾 源愿 园郾 源源 园郾 缘员 园郾 猿愿 园郾 圆圆 园郾 苑缘 园郾 苑圆 园郾 缘远
员源 园郾 缘苑 园郾 缘远 园郾 苑源 园郾 愿苑 园郾 源园 园郾 缘远 园郾 源猿 园郾 缘远 园郾 远园 园郾 缘园 园郾 猿怨 园郾 圆员 园郾 圆怨 园郾 愿园 园郾 缘园
员缘 园郾 缘远 园郾 远园 园郾 远缘 园郾 远苑 园郾 源源 园郾 缘苑 园郾 源源 园郾 远园 园郾 源员 园郾 缘苑 园郾 猿猿 园郾 猿缘 园郾 猿猿 园郾 圆圆 园郾 缘怨
员远 园郾 远苑 园郾 愿苑 园郾 远苑 园郾 苑圆 园郾 远苑 园郾 苑圆 园郾 愿员 园郾 苑远 园郾 苑园 园郾 远缘 园郾 缘远 园郾 远圆 园郾 缘怨 园郾 苑园 园郾 缘猿
员郾 缘园愿园袁晕藻蚤忆泽基因多样性指数渊匀冤为 园郾 猿园源员袁杂澡葬灶灶燥灶
信息指数渊陨冤 为 园郾 源缘苑苑遥 表明 员 号与 愿 号品种尧员圆 号
与 员源 号间亲缘关系最近袁而 圆 号与 员远 号尧源 号与 员源 号
亲缘关系最远袁但品种整体间的多态性水平差异较大袁
这与核桃异花授粉袁后代遗传分化比较大有很大的关
系遥
圆郾 猿摇 品种间的聚类分析
利用 晕栽杂再杂 圆郾 员 分析软件计算供试样品间的
允葬糟糟葬则凿遗传相似性系数并作 哉孕郧酝粤 聚类图遥 由图 圆
可知袁在遗传相似性系数为 园郾 缘园 时袁员远 份核桃品种分
苑愿愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
图 圆摇 员远 个核桃品种遗传相似性系数 哉孕郧酝粤聚类图
云蚤早援 圆 悦造怎泽贼藻则 凿藻灶凿则燥早则葬皂 燥枣 员远 憎葬造灶怎贼 增葬则蚤藻贼蚤藻泽
为 圆 大类袁其中 员缘 个主栽品种首先与麻核桃鸡心分开
聚为玉组袁表明这 员缘 个核桃品种遗传关系较近袁很容
易通过 陨杂杂砸标记与 员远 号麻核桃鸡心区分开遥 当相似
系数为 园郾 缘缘 时袁员缘 份核桃品种又分为 圆 个小组袁其中
晋龙 员 号尧晋龙 圆 号和清香核桃并为域组袁其余 员圆 个
核桃品种并为一组遥 当相似系数为 园郾 远员 时袁员圆 个核
桃品种又分为芋组和郁组袁其中丰辉尧岱丰尧中核 圆 号尧
中核 员 号尧元林和元丰聚为一个小组袁而上宋 远 号尧扎
猿源猿尧新巨丰尧新新 圆 号和温 员愿缘 聚为一个小组遥 结果
表明袁核桃 员远 个栽培品种在进行聚类时袁核桃种属间
遗传相似系数差异比较大袁核桃种的 员缘 个品种首先聚
为一组袁同时袁品种特性类似和地理位置较近的核桃栽
培品种聚在一起袁表明 陨杂杂砸标记能够将不同的品种明
显区分开袁能揭示出其分子水平上的遗传多样性遥
圆郾 源摇 构建分子身份证
任意 圆 个品种在某一引物下对应的带型不同袁表
明该引物可以用于鉴别这 圆 个品种遥 当同时鉴别多个
品种时袁如果利用单个引物不能同时鉴别供试品种袁可
以利用不同的引物组合咱圆圆暂 遥 本试验根据 员园 条 陨杂杂砸
引物种扩增条带的统计分析袁从中选择出带型清晰尧稳
定性较好尧多态性高和鉴别效率高的 猿 条引物
哉月悦 愿圆远尧哉月悦 愿源员尧哉月悦愿源源 作为种质鉴定的核心引
物袁利用 猿 条核心引物的扩增条带袁以扩增条带数目和
条带分子大小作为种质甄别的主要依据袁构建了 员远 份
核桃主栽品种的指纹图谱和分子身份证袁分子身份证
扩增条带情况以野园冶尧野员冶表示袁利用条形码生成器袁按
照 悦韵阅耘员圆愿 码制制作成便于识别的条形码分子身份
证渊图 猿尧表 源冤遥
猿摇 讨论
种质资源是遗传改良的基础袁只有了解种质资源
遗传变异信息及亲缘关系的远近袁才能有目的地选配
亲本袁进而培育出优良品种咱圆猿暂 遥 陨杂杂砸 分子标记技术
重复性好尧稳定性高尧操作简单尧多态性丰富袁已成功应
用于核桃咱圆源暂 尧红花檵木咱圆缘暂 尧中国芋咱圆远暂 尧梨咱圆苑暂 尧甘
薯咱圆愿暂 尧红麻咱圆怨暂等作物的品种亲缘关系和种质鉴定方
面遥 核桃种质资源丰富多样袁但长期以来针对核桃种
质鉴定方面的研究较少袁仅陈少瑜等咱圆源暂利用 陨杂杂砸 对
云南主要核桃品种分子鉴别进行了分析研究袁建立了
员员 个核桃品种的指纹图谱袁然而其研究的核桃试材主
要是适于南方生长的泡核桃种质袁而本研究所用核桃
品种资源为北方核桃主栽品种袁两者核桃种质类型差
别比较大遥 本研究通过 员园 条 陨杂杂砸 引物共扩增出 员员缘
个位点袁其中多态性位点占 愿远郾 园怨豫 袁员远 个品种间晕藻蚤忆泽
遗传相似度为 园郾 源圆 耀 园郾 愿圆袁遗传距离为 园郾 圆园 耀 园郾 愿苑袁
表明品种间遗传信息差异较大袁具有丰富的遗传多样
性袁说明 陨杂杂砸 标记能有效揭示核桃品种间的遗传差异
和多样性袁为核桃品种资源的种质鉴定和遗传亲本的
选配提供可靠的技术支撑和科学依据遥
聚类分析表明袁员远 份核桃品种划分为 源 个组袁其
中核桃种间遗传差异较明显遥 此方法首先将河北核桃
愿愿愿员
摇 员园 期 基于 陨杂杂砸标记的 员远 个核桃品种遗传多样性分析及分子身份构建
晕燥贼藻院月造葬糟噪 遭燥曾 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 贼澡葬贼 贼澡藻则藻 蚤泽 葬 遭葬灶凿袁 贼澡藻 憎澡蚤贼藻 遭燥曾 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 灶燥 遭葬灶凿援
图 猿摇 陨杂杂砸 标记构建 员远 份核桃品种资源指纹图谱
云蚤早援 猿摇 云蚤灶早藻则责则蚤灶贼泽 燥枣 员远 憎葬造灶怎贼 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 泽藻贼 怎责 遭赠 陨杂杂砸 皂葬则噪藻则
鸡心与其他 员缘 个核桃品种区分开袁单独聚为玉组袁说
明 陨杂杂砸在核桃种质亲缘关系分析和种质鉴定上具有
很好的应用性遥 清香核桃是由日本选育引入我国的晚
实核桃品种袁与我国的晚实核桃品种晋龙 员 号尧晋龙 圆
号聚为域组袁说明这 猿 个品种之间遗传相似度比较高袁
遗传关系较近袁日本清香核桃可能与山西晚实核桃具
有相似的遗传进化背景袁进而可推断我国是世界栽培
核桃的起源中心之一咱猿园暂 遥 同时它们的遗传信息明显
不同于其它的早实核桃品种袁表明 陨杂杂砸所用引物标记
位点与核桃早晚实属性具有相关性袁为下一步开展核
桃早晚实遗传特性的研究提供了借鉴遥 其余的几个品
种都属于新疆早实核桃后代袁它们先聚为芋组袁后又分
为 圆 个亚组袁其中丰辉与岱丰品种之间遗传相似系数
最高袁这与岱丰是丰辉的实生后代的遗传背景相
符咱猿员暂 遥 虽然芋组都属于早实核桃类型袁表型特征也非
常相似袁但 陨杂杂砸标记分析结果表明袁核桃品种间遗传
相似系数差异比较大袁具有丰富的遗传多样性袁与
悦澡则蚤泽贼燥责燥怎造葬泽等咱员怨暂对 缘远 个世界核桃品种的遗传多样
性的研究结果相似袁核桃不同品种间具有丰富的遗传
多样性袁这可能与核桃异花授粉后代遗传分化显著的
生物学特性具有重要关系遥 因此袁在今后核桃育种工
作中袁以具有优良和抗逆基因尧遗传距离较远的核桃品
种作为亲本袁将有助于提升子代优良品种的选育率袁提
高育种的工作效率袁丰富核桃栽培品种的基因库遥
摇 摇 果树分子身份证构建的目的是准确尧快速和便捷
地甄别不同种质的遗传信息袁因此袁在进行分子身份构
怨愿愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
摇 摇 摇 摇 表 源摇 员远 个核桃品种的条形码分子身份证渊哉月悦 愿圆远袁哉月悦 愿源员袁哉月悦愿源源冤
栽葬遭造藻 源摇 酝燥造藻糟怎造葬则 蚤凿藻灶贼蚤贼赠 燥枣 员远 憎葬造灶怎贼 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 泽藻贼 怎责 遭赠 陨杂杂砸 皂葬则噪藻则渊哉月悦愿圆远袁哉月悦愿源员袁哉月悦愿源源冤
建时袁不仅要求标记位点的多态性要丰富袁而且检测方
法要操作简便尧重复性强遥 本试验通过多条引物扩增
条带的统计分析袁筛选出 猿 条带型清晰尧稳定性较好尧
多态性高和重复性强的引物 哉月悦 愿圆远尧哉月悦 愿源员 和
哉月悦愿源源 作为 员远 份核桃种质鉴定的核心引物袁这 猿 条
引物分别由渊粤悦冤尧渊郧粤冤和渊 悦栽冤的简单重复构成遥
砸藻凿凿赠等咱员员暂研究表明由渊郧粤冤尧渊悦栽冤尧渊粤悦冤尧渊粤郧冤尧
渊悦粤冤和渊栽悦冤的简单重复形成的 陨杂杂砸 引物扩增多态
性比其他 圆尧猿 或 源 个核苷酸碱基重复的多态性要高袁
这与本试验研究结果相符遥 以这 猿 条引物作为核心引
物袁以扩增条带数目和条带分子大小作为种质甄别的
主要依据袁构建了 员远 份核桃主栽品种的指纹图谱和分
子身份证袁并按照 悦韵阅耘员圆愿 码制作成便于识别的条形
码分子身份证袁为核桃品种权信息的电子化和便捷化
提供技术支撑和数据参考遥
源摇 结论
本研究利用 陨杂杂砸分子标记技术对我国 员远 个核桃
栽培品种的遗传多样性进行了分析袁确定了不同品种
间的遗传距离袁为核桃优良品种的选配提供了科学依
据曰筛选出 猿 条 陨杂杂砸 引物作为 员远 个核桃品种鉴定的
核心引物曰构建了 员远 个核桃品种的指纹图谱和条形码
分子身份证袁为核桃品种鉴定和品种权保护提供依据袁
为下一步进行更多的核桃品种鉴定和分子身份构建提
供借鉴遥
参考文献院
咱 员 暂摇 潘月红袁周爱莲援我国核桃产业发展现状尧前景及对策分析咱 允暂 援
中国食物与营养袁圆园员圆袁员愿渊缘冤院圆圆 原 圆缘
咱 圆 暂摇 陆斌袁宁德鲁援美国核桃产业发展综述及其借鉴咱允暂 援林业调查规
划袁圆园员员袁猿远渊远冤院怨愿 原 员园圆袁员园缘
咱 猿 暂摇 吴燕民袁裴东袁奚声珂袁李嘉瑞援运用 砸粤孕阅对核桃属种间亲缘关
系的研究咱允暂 援园艺学报袁圆园园园袁圆苑 渊员冤院 员苑 原 圆圆
咱 源 暂摇 陈良华袁胡庭兴袁张帆袁李国和援用 粤云蕴孕技术分析四川核桃资源
的遗传多样性咱允暂 援植物生态学报袁圆园园愿袁猿圆 渊远冤院员猿远圆 原 员猿苑圆
咱 缘 暂摇 齐建勋袁郝艳宾袁朱艳袁吴春林袁王维霞袁冷平援核桃属种质资源的
耘杂栽鄄杂杂砸标记研究咱允暂 援园艺学报袁圆园员员袁猿愿渊猿冤院源源员 原 源源愿
咱 远 暂摇 李国田袁艾呈祥袁张力思袁魏海蓉袁刘庆忠援 核桃实生居群遗传多
样性 陨杂杂砸分析咱允暂 援植物遗传资源学报袁圆园员员袁员圆渊源冤院远源园 原 远源缘
咱 苑 暂摇 悦澡藻灶 蕴 晕袁 酝葬 匝 郧袁 悦澡藻灶 再 运袁 宰葬灶早 月 匝袁 孕藻蚤 阅援 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣
皂葬躁燥则 憎葬造灶怎贼 糟怎造贼蚤增葬则泽 早则燥憎灶 蚤灶 悦澡蚤灶葬 遭葬泽藻凿 燥灶 灶怎贼 责澡藻灶燥贼赠责藻泽 葬灶凿
杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 咱允暂 援 杂糟蚤藻灶贼蚤葬 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬藻袁 圆园员源袁 员远愿院 圆源园 原 圆源愿
咱 愿 暂摇 耘遭则葬澡蚤皂蚤 粤袁 云葬贼葬澡蚤 砸袁 在葬皂葬灶蚤 在援 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠
葬皂燥灶早 泽燥皂藻 孕藻则泽蚤葬灶 憎葬造灶怎贼 早藻灶燥贼赠责藻泽 渊 允怎早造葬灶泽 则藻早蚤葬 蕴援 冤 怎泽蚤灶早
皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 贼则葬蚤贼泽 葬灶凿 杂杂砸泽 皂葬则噪藻则泽 咱 允暂 援 杂糟蚤藻灶贼蚤葬 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬藻袁
圆园员员袁 员猿园渊员冤院员源远 原 员缘员
咱 怨 暂摇 孕燥责 陨 云袁 灾蚤糟燥造 粤 悦袁 月燥贼怎 酝袁 砸葬蚤糟葬 孕 粤袁 灾葬澡凿葬贼蚤 运袁 孕葬皂枣蚤造 阅援
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摇 员园 期 基于 陨杂杂砸标记的 员远 个核桃品种遗传多样性分析及分子身份构建
悦燥皂责葬则葬贼蚤增藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 责澡藻灶燥贼赠责蚤糟 葬灶凿 皂燥造藻糟怎造葬则 凿葬贼葬咱允暂 援 杂糟蚤藻灶贼蚤葬
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咱员园暂摇 晕蚤糟藻泽藻 云 孕袁 匀燥则皂葬扎葬 允 陨袁 酝糟郧则葬灶葬澡葬灶 郧 匀援 酝燥造藻糟怎造葬则
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿 早藻灶藻贼蚤糟 则藻造葬贼藻凿灶藻泽泽 葬皂燥灶早 憎葬造灶怎贼 渊 允怎早造葬灶泽 则藻早蚤葬
蕴援 冤 早藻灶燥贼赠责藻泽 遭葬泽藻凿 燥灶 砸粤孕阅 皂葬则噪藻则泽咱允暂 援 耘怎责澡赠贼蚤糟葬袁 员怨怨愿袁 员园员
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渊陨杂杂砸冤 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂 葬灶凿 蚤贼泽 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 蚤灶 责造葬灶贼 遭则藻藻凿蚤灶早 咱 允暂 援
耘怎责澡赠贼蚤糟葬袁圆园园圆袁员圆愿渊员冤院怨 原 员苑
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原 苑猿圆
咱员源暂摇 朱元娣袁李光晨袁李春雨袁董利民袁王涛援苹果柱型基因的 陨杂杂砸 分
子标记研究咱允暂 援园艺学报袁圆园园猿袁猿园 渊缘冤院缘园缘 原 缘员园
咱员缘暂摇 蕴怎蚤泽葬 酝 悦袁 蕴怎蚤泽 郧袁 悦则蚤泽贼蚤灶葬 韵援 陨杂杂砸 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 糟怎造贼蚤增葬则泽 燥枣 责藻葬则
葬灶凿 泽怎蚤贼葬遭蚤造蚤贼赠 燥枣 皂燥造藻糟怎造葬则 皂葬则噪藻则泽 枣燥则 糟造燥灶藻 凿蚤泽糟则蚤皂蚤灶葬贼蚤燥灶 咱 允暂 援
允燥怎则灶葬造 燥枣 贼澡藻 粤皂藻则蚤糟葬灶 杂燥糟蚤藻贼赠 枣燥则 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园员袁 员圆远
渊缘冤院缘员苑 原 缘圆圆
咱员远暂摇 杂澡蚤皂葬凿葬 栽袁 再葬皂葬皂燥贼燥 栽袁 匀葬赠葬皂葬 匀援 粤 早藻灶藻贼蚤糟 造蚤灶噪葬早藻 皂葬责
糟燥灶泽贼则怎糟贼藻凿 遭赠 怎泽蚤灶早 葬灶 蚤灶贼则葬泽责藻糟蚤枣蚤糟 糟则燥泽泽 遭藻贼憎藻藻灶 责藻葬糟澡 糟怎造贼蚤增葬则泽
早则燥憎灶 蚤灶 允葬责葬灶咱允暂 援 允葬责葬灶 杂燥糟蚤藻贼赠 枣燥则 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园园袁
远怨院缘猿远 原 缘源圆
咱员苑暂摇 沈程文袁黄建安袁赵世浩袁宁正祥袁李家贤袁赵超艺袁陈栋援 利用
杂砸粤孕 和 陨杂杂砸标记分析广东茶树种质资源的遗传多样性咱允暂 援核
农学报袁圆园员园袁圆源渊缘冤院怨源愿 原 怨缘缘
咱员愿暂摇 翟梅枝袁肖志娟袁许静袁孙宇栋援 陨杂杂砸 和 杂杂砸 体系优化及在分析
不同核桃品种遗传多样性上的应用咱 允暂 援 东北农业大学学报袁
圆园员源袁源缘渊员冤院 怨园 原 怨苑
咱员怨暂摇 悦澡则蚤泽贼燥责燥怎造燥泽 酝 灾袁 砸燥怎泽噪葬泽 阅袁 栽泽葬灶贼蚤造蚤 耘袁 月藻遭藻造蚤 孕 允援 郧藻则皂责造葬泽皂
凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿 早藻灶藻贼蚤糟 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽 葬皂燥灶早 憎葬造灶怎贼 渊 允怎早造葬灶泽 则藻早蚤葬 蕴援 冤
糟怎造贼蚤增葬则泽 葬灶凿 郧则藻藻噪 造燥糟葬造 泽藻造藻糟贼蚤燥灶泽 则藻增藻葬造藻凿 遭赠 陨灶贼藻则鄄杂蚤皂责造藻
杂藻择怎藻灶糟藻 砸藻责藻葬贼渊陨杂杂砸冤 皂葬则噪藻则泽咱允暂 援 杂糟蚤藻灶贼蚤葬 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬藻袁圆园员园袁
员圆缘渊源冤院缘愿源 原 缘怨圆
咱圆园暂摇 孕燥贼贼藻则 阅袁 郧葬燥 云 再袁 月葬早早藻贼贼 杂袁 酝糟噪藻灶灶葬 允 粤袁 酝糟郧则葬灶葬澡葬灶 郧 匀援
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凿藻贼藻则皂蚤灶蚤灶早 早藻灶藻贼蚤糟则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽 燥枣 憎葬造灶怎贼 渊 允怎早造葬灶泽 则藻早蚤葬冤 糟怎造贼蚤增葬则泽
咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 贼澡藻 粤皂藻则蚤糟葬灶 杂燥糟蚤藻贼赠 枣燥则 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻袁
圆园园圆袁员圆苑渊员冤院苑缘 原 愿员援
咱圆员暂摇 阅燥赠造藻 允 允袁 阅燥赠造藻 允 匀援 陨泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 责造葬灶贼 阅晕粤 枣则燥皂 枣则藻泽澡 贼蚤泽泽怎藻 咱允暂 援
云燥糟怎泽袁 员怨怨园袁员圆渊员冤院员猿 原 员缘
咱圆圆暂摇 郑海燕袁粟建光袁戴志刚袁李燕袁陈基权袁龚友援利用 陨杂杂砸和 砸粤孕阅
标记构建红麻种质资源分子身份证咱允暂 援中国农业科学袁圆园员园袁源猿
渊员苑冤院猿源怨怨 原 猿缘员园
咱圆猿暂摇 葛亚英袁张飞袁沈晓岚袁刘建新袁王炜勇袁田丹青袁张智援 丽穗凤梨
陨杂杂砸遗传多样性分析与指纹图谱构建 咱 允暂 援 中国农业科学袁
圆园员圆袁源缘渊源冤院苑圆远 原 苑猿猿
咱圆源暂摇 陈少瑜袁杨恩袁习学良袁范志远袁张雨援 云南主要核桃品种的 陨杂杂砸
分子鉴别咱允暂 援经济林研究袁圆园园远袁圆源 渊源冤院源员 原 源缘
咱圆缘暂摇 董海燕袁季孔庶袁侯伯鑫袁赵宏波援 基于 陨杂杂砸 标记的红花檵木品
种亲缘关系分析咱允暂 援园艺学报袁圆园员源袁源员渊圆冤院猿远缘 原 猿苑源
咱圆远暂摇 董红霞袁柯卫东袁黄新芳袁刘玉平袁刘义满袁李峰袁孙亚林援 基于
陨杂杂砸标记的中国芋种质资源遗传多样性分析咱 允暂 援 植物遗传资
源学报袁圆园员源袁员缘渊圆冤院圆愿远 原 圆怨员
咱圆苑暂摇 易琼袁殷海滨袁龚丽琼袁陈丽梅袁舒群袁李昆志援 愿 个云南主要栽培
梨品种亲缘关系的 陨杂杂砸分析咱允暂 援安徽农业科学袁圆园园怨袁猿苑 渊圆冤院
缘园远 原 缘园怨
咱圆愿暂摇 季志仙袁王美兴袁范宏环袁吴列洪袁朱金庆援 基于 陨杂杂砸 指纹的甘
薯食用品种的遗传多样性分析咱允暂 援核农学报袁圆园员源袁圆愿渊苑冤院员员怨苑
原 员圆园圆
咱圆怨暂摇 汪斌袁祁伟袁兰涛袁陈惠端袁徐建堂袁粟建光袁李爱青袁祁建民援应用
陨杂杂砸分子标记绘制红麻种质资源 阅晕粤 指纹图谱咱 允暂 援 作物学
报袁圆园员员袁猿苑渊远冤院员员员远 原 员员圆猿
咱猿园暂摇 郗荣庭援中国核桃渊 允怎早造葬灶泽 则藻早蚤葬 蕴援 冤起源考证咱 允暂 援河北农业大
学学报袁员怨怨园袁 员猿渊员冤院愿怨 原 怨源
咱猿员暂摇 徐颖袁张美勇袁安国宁援 早实核桃新品种要岱丰咱 允暂 援 园艺学报袁
圆园园员袁圆愿 渊员冤院愿苑
员怨愿员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员缘袁圆怨渊员园冤院员愿愿源 耀 员愿怨圆
粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 郧藻灶藻贼蚤糟 阅蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿 耘泽贼葬遭造蚤泽澡皂藻灶贼 燥枣 酝燥造藻糟怎造葬则 陨阅
枣燥则 员远 宰葬造灶怎贼 灾葬则蚤藻贼蚤藻泽 月葬泽藻凿 燥灶 陨杂杂砸 酝葬则噪藻则泽
蕴陨 郧怎燥贼蚤葬灶员 摇 在匀粤晕郧 酝藻蚤赠燥灶早员 摇 载陨粤晕郧 运怎灶员 摇 载哉 再蚤灶早员 摇 杂匀耘晕 郧怎葬灶早灶蚤灶早员 摇 载哉耘 孕藻蚤泽澡藻灶早员 摇 再粤晕郧 允怎灶圆
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匝蚤葬灶择怎葬灶 晕藻蚤早澡遭燥则澡燥燥凿 韵枣枣蚤糟藻泽袁在燥怎糟澡藻灶早袁杂澡葬灶凿燥灶早摇 圆苑猿缘园园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院陨灶 燥则凿藻则 贼燥 葬灶葬造赠扎藻 贼澡藻 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽 葬皂燥灶早 员远 憎葬造灶怎贼 渊允怎早造葬灶泽 则藻早蚤葬 蕴援 冤增葬则蚤藻贼蚤藻泽 葬灶凿 贼燥
藻泽贼葬遭造蚤泽澡 贼澡藻蚤则 皂燥造藻糟怎造葬则 蚤凿藻灶贼蚤贼蚤藻泽袁 员园 陨杂杂砸 责则蚤皂藻则泽 憎藻则藻 泽糟则藻藻灶藻凿 枣则燥皂 圆愿 责则蚤皂藻则泽 贼燥 葬皂责造蚤枣赠 贼澡藻 憎葬造灶怎贼 早藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤援
栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 员员缘 造燥糟蚤 憎藻则藻 凿藻贼藻糟贼藻凿 葬灶凿 怨怨 造燥糟蚤 憎藻则藻 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟袁 憎蚤贼澡 葬 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 则葬贼蚤燥 燥枣 愿远郾 园怨豫 援
耘枣枣藻糟贼蚤增藻 灶怎皂遭藻则 燥枣 葬造造藻造藻泽渊晕藻冤袁 晕藻蚤忆泽 早藻灶藻 凿蚤增藻则泽蚤贼赠渊匀藻冤 葬灶凿 杂澡葬灶灶燥灶爷泽 陨灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 蚤灶凿藻曾 渊 陨冤 燥枣 员远 泽葬皂责造藻泽 憎藻则藻
员郾 缘园愿园袁 园郾 猿园源员 葬灶凿 园郾 源缘苑苑袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 早藻灶藻贼蚤糟 泽蚤皂蚤造葬则蚤贼赠 糟燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 枣燥则 员远 憎葬造灶怎贼 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 则葬灶早藻凿 枣则燥皂 园郾 源圆 贼燥
园郾 愿圆援 哉灶憎藻蚤早澡藻凿 葬增藻则葬早藻泽 渊哉孕郧酝粤冤 糟造怎泽贼藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽 憎葬泽 怎泽藻凿 贼燥 糟燥灶泽贼则怎糟贼 葬 凿藻灶凿则燥早则葬皂 葬灶凿 员远 憎葬造灶怎贼 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 憎藻则藻
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