全 文 ：核 农学报 ,
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月一雌二醇主动免疫对公兔血浆 乒一 、
及肇丸重和间质细胞的影响
刘智喜 李 武 浩
西北农业大学普医系
键
杨陵
分别 以 份雌 二 醉 一 一 一狡 甲基 肪 一人血清 白蛋 白 试验 组 和 人 血 清 白 蛋 白
对照组 为抗原 , 按两个免疫程序 , 对 只 新西 兰公兔进行主动免疫 。 其中 , 一个 免反
程序
、
组 , 以 个 月为 问隔 , 给每兔行 皮 内多点注射 , 共 次 。 另一 个 免反 程序
、
组 , 先于 第 、 和 周给各兔肌 肉注射 , 又 于 第 、 和 周行耳静脉注射 。 在最 后 一
次注射 后 天 , 每 隔 小 时采集血样 次 , 连 续 , 卜时 。 用 测 定血 浆 各雌 二 醉
件 和 辛酮 浓度 。 然后摘除 辛丸 , 检 测 辛九重 量和 间质细胞 面积 。 结果表 明 ,
试验组各兔的血 浆 民雌二醉浓度均极 显著地低于对照组 士 ,
士 , 辛酮浓度 却极显著地 高于 对照 组 士 ,
士 , 。 试验组 的每侧 辛九重 童 和 间质 细胞 面积 , 均机 显著
地 大 于 对 照 组 士 和 士 拌 , , 士 和 士
“ , 和 。
以 上结果表 明 , 各雌二醉主 动 免疫 , 能使公兔辛酮水 平 显著升 高 , 辛九组 织增
重及 间质 细胞 面积增大 , 提示 各雌二醉 主 动免疫可 望成 为提 高雄性 动 物 生育 力 的
有效途径之一 。
关链词 各雌二醇 主动免疚 辛酮 间质细胞 辛丸 公兔
前 言
等 用生物学测定法 , 首次从大 鼠皋丸和男人尿中发现 了具有雌激素活性的物
质 。 等图又从 男性尿液中 , 分离出了第一种雄性体 内的雌激素一雌酮
。 此后 ,
随着测定技术的不断发展 , 特别是放射免疫分析法 , 人们已陆续在多种雄性动物内发现了雌激
素的存在 。于是 , 雌性动物雌激素的生理作用逐渐引起了人们越来越多的关注 。
多数雄性动物体内的雌激素中 , 以 各雌二醇的生物活性最强 关于雄性动物体内 卜
雌二醇的来源 , 一般认为主要是由雄激素转化而来闭 。但也有学者认为 , 动情期前公羊血中的
各雌二醇 , 主要来源于皋丸 〔‘ 〕。
此文于 年 月 日收到
。
国家 自然科学基金资助项 目
核 农 掌 报 卷
一些学者认为 , 在雌性动物体内 , 雌激素通过丘脑下部和垂体水平对促性腺激素的分泌起
抑 制作用 , ‘〕。但 等则认为 , 外周血浆中的 卜雌二醉对腺垂体并不表现 出反馈作
用川 。此外 , 雄性动物雌激素的另一重要生理作用 , 是影响皋丸间质细胞的功能 ’
· ”〕。还有人
认为 , 雌激素能抑制精子发生
, “ 〕, 并影响雄性动物的性行为
, ’ 〕。
在雄性动物内分泌的研究中 , 多年来常用药理学方法和体外培养方法 。 由于这些方法本身
存在一定的缺陷 , 影响着研究结果的可靠性 。所以 , 采用新的 、更趋于完善的研究手段 , 已成为
目前内分泌学和公畜科学领域的迫切需要 。激素免疫学 , 是近年来在免疫学 、 内分泌学 、 生物化
学等学科的基础上新兴的一门边缘学科 。 它的兴起和发展 , 已为内分泌学的基础及应用研究开
辟了一条新的途径 。雌激素免疫已广泛应用于母畜科学 , 已取得了很大进展 〕
。然而 , 雌激素
免疫用于雄性动物的研究迄今仅见公绵羊的报道
· ’ 〕。
本试验采用雌激素对公兔进行主动免疫 , 研究免疫后公兔雄激素水平及皋丸组织学变化
。
目的在于 , 验证公畜激素生理作用的某些理论 , 并探讨雌激素主动免疫对公兔生殖功能的影
响 。
材 料 与 方 法
实验动物 新西兰公兔 只 , 购 自陕西省农业科学院种兔场 。首次免疫时为 月龄 , 平均体
重 只 。
主要仪器及试剂 一 液体闪烁计数器 , 西安电子仪器厂 卜雌二醇 , 英国 公
司产品 , 熔点 卜雌二醉一 一 一狡甲基 肘标准品 , 美国 化学公司产品 人血
清 白蛋 白 , 卫生部上海生物制品研究所产品 , 批号 卜雌二醇抗血清 , 上海 内分
泌研究所 拿酮放射免疫分析药盒 , 上海内分泌研究所 弗氏完全佐剂 自制 百 日咳 、 白喉 、破
伤风三联疫苗 , 卫生部兰州生物制品研究所 , 批号 弗氏不完全佐剂 自制
。
动物免疫 公兔购 回后 , 在试验环境中饲养 个月 , 其间驱虫并接种兔瘟疫苗 。选择健康 、
大小相对平均的公兔 只 , 随机分为 、 、 、 组 , 每组各 只 。 其中 , 、 组为试验组 , 用
各雌二醇 一 一 一梭甲基 厉一人血清白蛋白为抗原进行主动免疫 。 、 组为对照组 , 以人血清
白蛋 白为抗原进行免疫 。
、 组采用皮 内多点注射免疫 ‘〕。 、 组采用肌肉注射配合静脉注射免疫 ’〕。 、 组 ,
在首次免疫前 , 行脊柱及其两侧背部剪毛 、脱毛 , 造成从颈背部至肾背部宽约 的无毛区 。
第 次免疫 , 每兔用 抗原 , 溶于 生理盐水中 , 再和 弗氏完全佐剂混合 , 乳化至稳定
的油包水状态 , 作无毛区皮 内多点注射 一 点 。 同时给每兔肌注百 日咳 、 白喉 、破伤风三联
疫苗 。 随后每隔 个月 , 每只兔用 抗原溶于 生理盐水 , 与 弗氏不完全佐剂乳化 ,
皮内多点注射同前 , 共追加 次 。 、 组 , 在第 、 和 周 , 每兔每次用 抗原与 生理盐水
及 弗氏完全佐剂乳化物 , 作肌肉注射 。 又于第 、 、 周 , 每次每兔用 抗原溶于 生
理盐水 , 作耳静脉注射 。
激素测定 于末次免疫后 , 以 为间隔 , 连续 , 由各兔耳静脉采集血样 , 用 测
定 各 卜雌二醉 和 皋酮 的浓度 。
来丸组织学检查 在最后一次免疫注射后 , 摘除各兔左侧皋丸 , 除去副辜及脂肪组织 ,
卜雌二醉主动免疫对公免血浆 卜 、 及举丸重和 间质细胞的影响
称重 。 比较试验组与对照组之间 , 皋丸重量有无显著差异 。 用 液固定皋丸样品 , 作石蜡
切片 , 染色 。镜检辜丸间质细胞的形态变化 。
统计分析 按《概率基础与数理统计户 。〕介绍的方法 , 用非配对 比较的 检验 , 分析试验组
与对照组之间 和 卜 的浓度 , 以及皋丸重量和间质细胞大小差异的显著性 。
结 果
一 血浆 和 了卜 浓度的变化
公兔血浆 和 卜 的质量控制指标均符合 认 质量控制要求
。 和 卜 测定结果见
表 。每只公兔的激素浓度 , 取间隔 采样所得的 个测定值平均数 。
表 和 移 浓度的测定结果
各
组别 兔数
浓度 变异系数
吐
卜 浓度
卜
变异系数
心
试验
卜 士 士
试验
民 血 士 士
试脸 十
卜 士 龙 士
对照 ’ 士 ’ 性 士
份
任
从表 可以看出 , 试验组皋酮浓度极显著地高于对照组 。 , 试验组 各 浓度又
极显著地低于对照组 。试验 组 卜 浓度极显著地低于试验 组 。 但
两试验组 和 组 之间 , 浓度差异却不显著 。
二 攀丸重
摘除所有公兔皋丸后 , 统一选取各兔左侧皋丸 , 除去副皋及脂肪组织 , 称重 , 统计分析 〕
。
结果表明 , 试验组每侧辜丸重量极显著地高于对照组 士 。 沼 士 。 , 。 ,
见表 。
三 率丸间质细胞 ’ 一
由于皋丸间质细胞形状不规则 , 测量其大小时 , 仅测其短径和长径 , 以两者的平均数作为
其直径 , 再换算成面积 , 作为圆形估量其大小 。
核 农 宇 报 卷
试验组各兔的间质细胞面积显著地大于对照组 士 拌 士 拌盯 ,
。统计分析 , 〕数据见表 。
表 塞丸实质盆 统计分析数据
组别
徉本数 平均值
上 夕 气班
标准差
扭
城
自由度 临界值
。
值
。
判别
又
试验组
卜
丁 。
对照组
表 寒丸间质细胞体积统计分析数据
,
组别
细胞数拭 直径
以 拜
士
面积
产
士
自由度 临界值
值
差异显著性
一
试验
日一 士 士
对照 士 士
, 每只兔测 界限清晰的间质细胞 个 。
一 ,
讨 论
一 关于 水平的升高
试验组外周血浆中的 水平极显著地高于对照组 。这表明 , 卜 主动免疫 ,
可使公兔 水平显著升高 。 是雄性动物体内最重要的雄激素 , 其生物活性也最强 。雄性动物
的 , 绝大多数是 由皋丸间质细胞合成和分泌的 。动物血中 水平的升高 , 是辜丸间质细胞合
成 、分泌 增加的必然结果 。
有关 件 主动免疫导致辜丸间质细胞合成 、分泌 增加的机理 , 可以从两个主要方面予
以解释 。首先 , 人们业 已普遍接受了关于雄性动物的雌激素对垂体促性腺激素的分泌具有负反
馈作用的理论 , 而这个理论 , 已在许多试验中得到 了验证 , 〕。 经雌激素免疫后 , 由于雌激素抗
体的中和作用 , 引起体 内雌激素水平的下降 , 从而削弱雌激素对促性腺激素分泌的抑制作用 ,
使促性腺激素的分泌增加 。雌激素免疫具有使促性腺激素的分泌升高的作用 , 已在公绵羊的试
卜雌二醉主动免疫对公兔血浆 各 、 及泉丸重和 间质细胞的影响
验中得到证实 卜 ”〕。辜丸间质细胞上 , 存在促黄体素 受体 , 与其受体的结合 , 刺激间
质细胞合成和分泌皋酮 , 而促卵泡素 增加 , 也可使间质细胞上的 受体增多 。 所以 , 由
于 卜 主动免疫 , 降低了公兔体内 件 对促性腺激素分泌的负反馈作用 , 引起促性腺素分
泌增加 , 导致了公兔 水平的上升 。
雄性动物体内的 压 , 主要是 由 在各种组织 内转化而来的 , 外周 血浆 中 , 约 的
尽一 均源于这一途径 。对促性腺激素的分泌起负反馈调节作用的 , 主要是 由此产 生的 卜
。然而 , 另一方面 , 雄性动物体内 卜 的另一主要来源是辜丸 。辜酮在辜丸的间质细胞和支
持细胞 , 主要是在支持细胞 , 经芳香化转化为 各
。 在 间质细胞核和胞质内均存在 卜 受
体 , 辜丸所产生的 件 通过局部途径 旁分泌或 和 自分泌 , 以调节间质细胞的功能 。 昆
可以干扰 与其受体的结合 , 以降低间质细胞对 的应答反应 , 致使肇酮的合成
、
分泌受
到抑制 。 同时 , 各 通过改变类固醇合成 中的一些酶的活性 , 并抑制 的合成 , 而使间质
细胞 合成减少 。 由于 各 免疫 , 导致公兔 件 水平降低 , 从而削弱了 日一 。对 间质细胞
合成 、分泌皋酮的抑制作用 , 引起公兔体 内 水平的上升 。 但是 , 各 抗体能否进入攀丸间质
和支持细胞 , 中和辜丸分泌的 一 , 有待于更深入研究予 以证实 。
二 关于间质细胞的变化及辜丸增重
试验组皋丸间质细胞面积极显著地大于对照组 , 表明 乒一 主动免疫可使公
兔皋丸间质细胞增大 。 前面 已经讨论了免疫引起 水平升高的机理
。 因为 为间质细胞所分
泌 , 水平的升高表明间质细胞功能活动增强 。 作者认为 , 由于主动免疫持续达 个月之久 , 间
质细胞增大是间质细胞长期处于功能活跃状态的必然结果 。 日一 主动免疫 , 可使公免肇丸间
质细胞增大 , 结果与绵羊上的报道一致〔, 卜 ‘’〕。
试验组辜丸重量也极显著地高于对照组 , 这也与绵羊上的报道一致 〔 下二。 研究
表明 , 辜丸体积的大小主要不在于 曲细精管直径的大小和 间质成分的多少 , 而是于 曲细精管长
度和数量的差异 。所以 , 虽然免疫引起 了公兔皋丸间质细胞面积的极显著增大 , 但这可能并非
是使皋丸组织增重的主要原因 。作者推测 , 可能是由于免疫引起了曲细精管的长度和数量的增
加 , 这在绵羊上 已得到证实 ’〕。 给公牛埋植 卜 , 可使其肇丸体积变小 , ‘ 〕, 给公鸡注射抗雌
激素药物 —它莫西芬
, 引起皋丸实质增重 , 这些试验都证实抗雌激素处理可以
增加皋丸体积 。
参 考 文 献
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核 农 学 报 卷
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即 西北农业大学主编 , 概率基础与数理统计 , 北京 农业出版社 ,
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