全 文 ：核 农 学 报 2011，25(2):0391 ～ 0396
Journal of Nuclear Agricultural Sciences
收稿日期:2010-06-08 接受日期:2010-10-12
基金项目:中国科学院“西部之光”项目(0860260XBO)，农业部转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08008-003，2009ZX08008-008B)，甘肃
省中青年科技基金计划项目(0806RJYA020)
作者简介:常卫华(1982-)，男，山东泰安人，在读硕士，研究方向为动物生殖细胞及体外早期胚胎的发育。 Tel:15002598785;E-mail:
changweihua112@ 163. com
通讯作者:张 勇(1970-)，男，陕西西安人，教授，博士生导师，研究方向为动物生殖生物学及兽医产科学。Tel:13893126652;E-mail:zhychy@
163. com
文章编号:1000-8551(2011)02-0391-06
重离子束辐照、激素 FSH /LH及丙酮酸钠对
绵羊卵母细胞体外成熟的影响
常卫华1 张 勇1 王燕玲2，3，4 张 红2，3，4 徐 鹏1 吴海凤1
(1. 甘肃农业大学动物医学院，甘肃 兰州 730070;2. 中国科学院近代物理研究所，甘肃 兰州 730000;3. 中国科学院重离子
束辐射生物医学重点实验室，甘肃 兰州 730000;4. 甘肃省重离子束辐射医学应用基础重点实验室，甘肃 兰州 730000)
摘 要:研究不同剂量重离子束辐照、FSH 与 LH 的配比及添加不同浓度丙酮酸钠对绵羊卵母细胞体外
成熟(in vitro maturation，IVM)的影响。结果显示 1. 0 和 1. 5Gy 辐照可以明显提高绵羊卵母细胞 IVM;
成熟液中添加 10μg /ml FSH 与 10μg /ml LH(1∶ 1，即Ⅱ组)时其 IVM 最高，显著高于Ⅰ组(1:2)、Ⅲ组(2
∶ 1)(p < 0. 05)，极显著高于Ⅳ组(5∶ 1)(p < 0. 01);另外成熟液中添加 0. 2g /L 的丙酮酸钠时，IVM 显著
高于添加 0. 1g /L(p < 0. 05)，极显著高于添加 0. 4g /L 和 0. 6g /L(p < 0. 01)的丙酮酸钠组和对照组。结
果表明，1. 0 和 1. 5Gy 剂量辐照对绵羊卵母细胞 IVM 具有促进作用，FSH∶ LH 为10μg /ml∶ 10μg /ml(1 ∶
1)时可以获得最佳的成熟效果，在绵羊卵母细胞成熟液中添加 0. 2g /L 的丙酮酸钠可以获得最优的
IVM。
关键词:重离子束辐照;FSH:LH;丙酮酸钠;卵母细胞;体外成熟
EFFECTS OF HEAVY ION IRRADIATION，FSH /LH RATIO AND SODIUM PYRUVATE
CONCENTRATION ON THE in vitro MATURATION OF SHEEP OOCYTES
CHANG Wei-hua1 ZHANG Yong1 WANG Yan-ling2，3，4 ZHANG Hong2，3，4 XU Peng1 WU Hai-feng
(1. College of Veterinary Medicine，Gansu Agricultural University，Lanzhou，Gansu 730070;
2. Institute of Modern Physics，Chinese Academy of Sciences，Lanzhou，Gansu 730000;
3. Key Laboratory of Heavy Ion Radiation Biology and Medicine of Chinese Academy of Sciences，Lanzhou，Gansu 730000;
4. Key Laboratory of Heavy Ion Radiation Medicine of Gansu Province，Lanzhou，Gansu 730000)
Abstract:This project evaluated the different effects of heavy-ion irradiation，the ratio of FSH /LH，and sodium pyruvate
concentration on the in vitro maturation (IVM)sheep oocytes. Results showed that irradiation with 1. 0 and 1. 5Gy could
significantly improve IVM of sheep oocytes compared with the unirradiated control (p < 0. 05). Addition with 10 μg /ml
FSH and 10 μg /ml LH (1 ∶ 1，Ⅱ group)in the maturation medium resulted in the highest of IVM compared with Ⅰ
group(1∶ 2)，Ⅲ group(2∶ 1) (p < 0. 05)and Ⅳ (5 ∶ 1)group (p < 0. 01). IVM rate of the maturation medium with
0. 2g /L of sodium pyruvate was significantly higher than that with 0. 1g /L (p < 0. 05)，0. 4g /L(p < 0. 01)，0. 6g /L (p
< 0. 01)and the control group (p < 0. 01). These datas indicated that the heavy-ion irradiation to sheep oocytes with
1. 0 and 1. 5Gy significantly promoted its maturation，and exposure to maturation medium with FSH and LH for 10μg /ml
(1∶ 1)resulted in optimum maturity and the best maturing rate with 0. 2g /L of sodium pyruvate.
193
核 农 学 报 25 卷
Key words:heavy-ion irradiation;FSH∶ LH;sodium pyruvate;oocytes;in vitro maturation
胚胎移植技术是胚胎工程技术的基础，而卵母细
胞体外成熟的质量又是决定胚胎移植技术成功的关
键。体外成熟可以为体细胞核移植提供大量的受体细
胞，也为体外受精提供大量的 MⅡ期卵母细胞，因此体
外成熟已成为胚胎体外生产和体外受精的重要环节之
一。卵母细胞体外成熟是指通过活体取卵或从屠宰的
动物上获得卵母细胞，在一定的实验室条件下模拟动
物体内生理生化环境，使卵母细胞恢复减数分裂的技
术。
近几年来，国内外很多学者都对卵母细胞体外成
熟的影响因素做了深入研究，并取得了飞速发展。随
着辐射在治疗癌症及育种方面的应用，重离子辐射的
生物效应研究日益受到学者们的重视，然而辐射对哺
乳动物卵母细胞及早期胚胎影响的报道却很少。李天
强［1］报 道，体 外 成 熟 液 中 同 时 添 加 FSH (follicle
stimulating hormone)和 LH(luteinizing hormone)，在适
当的范围内可以促进细胞质的成熟。许多文献报道，
同时添加 FSH 和 LH 对卵母细胞的体外成熟是有利
的，可是二者以什么比例添加各有不同。毛晓霞等［2］
在研究中指出，成熟液中添加 12μg /ml FSH、10μg /ml
LH 时，第一极体排出率最高。而曲杨燕［3］研究认为，
在成熟液中添加 10μg /ml FSH 和 10μg /ml LH 时，体
外成熟效果最好。Geshi 等［4］的研究结果表明，丙酮
酸钠有利于牛卵丘 － 卵母细胞复合体(COCs)尤其是
无卵丘 细 胞 包 裹 的 卵 母 细 胞 体 外 成 熟 (71. 9%
vs19. 6%)，并发育到囊胚期;然而丙酮酸钠的添加是
否有利于绵羊卵母细胞体外成熟以及添加浓度是多
少，目前未见报道。在现有研究成果的基础上，本研究
就重离子束辐照、成熟液中添加丙酮酸钠对绵羊卵母
细胞的体外成熟会造成怎样的影响，以及 FSH 与 LH
以什么浓度配比对卵母细胞的体外成熟最有利等进行
了研究，以期提高绵羊卵母细胞体外成熟率，获取更多
优质成熟卵母细胞。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 供试材料 供试绵羊卵巢，采自兰州马忠华屠
宰场。
1. 1. 2 主要药品与试剂 TCM-99 购自 Gibco 公司，
17β-E2 购自 Sigma 公司，FSH 购自加拿大的 Bioniche
公司，LH 购自宁波第二激素厂，其余试剂均购自甘肃
凯驰新达生物技术有限公司。
1. 2 绵羊卵巢的采集及运输
屠宰场采集到的新鲜卵巢先用 75%酒精喷洗，然
后放入水温 27℃ ～ 33℃、加入双抗(浓度为 100IU /
ml)的自制灭菌生理盐水中。卵巢采后，在 2 ～ 4h 内
运回实验室。
1. 3 卵母细胞的获取及体外培养
从保温桶中取出卵巢，用预热的生理盐水冲洗 3
遍，剪掉输卵管等多余组织。处理好的卵巢放入预先
加有 PBS(无 Ca2 +、Mg2 +)磷酸缓冲液的平皿中，用切
割法将 2 ～ 8mm 的卵泡切开，卵母细胞随着卵泡液流
出。实体显微镜下拣出外周有三层以上致密卵丘细
胞、卵母细胞质均匀并充满于透明带内(A 级)和外周
有一到三层卵丘细胞、卵母细胞胞质均匀的(B 级)卵
丘卵母细胞复合体(COCs，图 1)，用洗卵液洗 3 次，然
后移入成熟液中，按照 1. 5 中试验设计方案进行体外
成熟培养。采用直径为 35mm 的一次性塑料培养皿培
养，提前用移液器在培养皿内做好液滴，每个液滴为
60μl 成熟液，上面覆盖石蜡油，在 CO2 培养箱预平衡
2h 后用于后续试验。为方便分组辐照，用于重离子辐
照的卵母细胞移入 1. 5μl Eppendorf 管，辐照转入 96
孔板，每孔加成熟液 100μl 进行培养。所有试验的培
养条件均为:38. 5℃、5% CO2、饱和湿度，培养 22h。
图 1 未培养的卵母细胞
Fig. 1 Uncultured oocytes(COCs，100 ×)
1. 4 卵母细胞体外成熟效果的观察
卵丘细胞的扩展常用作判断卵母细胞体外成熟的
一个指标，本试验依照 Hunter 和 Moor［5］的方法将绵羊
卵母细胞成熟后卵丘细胞扩展情况分为 3 级:1 级成
熟卵为“卵丘细胞完全扩展”，卵丘细胞团至少向外扩
293
2 期 重离子束辐照、激素 FSH /LH 及丙酮酸钠对绵羊卵母细胞体外成熟的影响
展 3 倍于裸卵直径(图 2);2 级成熟卵为“卵丘细胞中
等扩展”，卵丘细胞向外扩展约 2 倍于裸卵直径;3 级
成熟卵为“卵丘细胞轻度扩展”，卵丘细胞仍紧紧地粘
贴在透明带上。检查第一极体(Polar body，PB)排出:
先将 COCs 置于 H-199 中吹打 3min，再将其放在含有
0. 25%的透明质酸酶中吹打 5min(注意边吹打边观
察，以防将胞质吹散)去除卵丘细胞，使卵母细胞成为
裸卵，在体式显微镜下观察卵母细胞第一极体(图 3)
排出情况，并记录排出第一极体的卵母细胞数。
图 2 颗粒细胞扩散
Fig. 2 Diffusion of granulose cells(100 ×)
箭头所示为颗粒细胞扩散
diffusion of granulosa cells indicated by arrow
图 3 极体排出
Fig. 3 Listing of PB(100X)
箭头所示为极体排出
listing of PB indicated by arrow
1. 5 试验设计
1. 5. 1 重离子束辐照 将收集到的卵母细胞分 6 个
试验组(重离子束辐照处理)和 1 个对照组(未辐照，
即 0 吸收剂量组)进行试验。重离子束辐照在中国科
学院近代物理研究所的重离子研究装置(Heavy Ion
Research Facility in Lanzhou，HIRFL)辐照终端进行，
束流为12 C6 + 离子束，能量为 90MeV /u，LET(linear
energy transfer)为 28 keV /μm，吸收剂量率约 0. 5Gy /
min，吸 收 剂 量 分 别 是 0. 1、0. 2、0. 5、1. 0、1. 5 和
2. 0Gy。用空气电离室监测剂量，剂量数据获取由计
算机控制，所有样品辐照都在室温下进行。辐照后用
38. 5℃水温的保温桶迅速带回实验室并转移到 96 孔
板中进行培养。
1. 5. 2 不同 FSH 与 LH 浓度配比 基础液:9. 5mg /
ml M199 + 2. 2mg /ml NaHCO + 1μg /ml E2 + 10% FBS
+ 100IU /ml PS。Ⅰ 组:基础液 + 10μg /ml FSH +
20μg /ml LH(1 ∶ 2);Ⅱ组:基础液 + 10μg /ml FSH +
10μg /ml LH(1 ∶ 1);Ⅲ组:基础液 + 20μg /ml FSH +
10μg /ml LH(2 ∶ 1);Ⅳ组:基础液 + 100μg /ml FSH +
20μg /ml LH(5∶ 1)。基础液组即为对照组。在配好基
础液的基础上，以 FSH∶ LH 按不同比例分别配成以上
4 组成熟液，过滤除菌待用。
1. 5. 3 不同浓度丙酮酸钠添加 在 1. 5. 2 试验的基
础液中添加 10μg /ml FSH 和 10μg /ml LH 构成本试验
的基础液。(1)基础液 + 0. 1g /L 丙酮酸钠;(2)基础
液 + 0. 2g /L 丙酮酸钠;(3)基础液 + 0. 4g /L 丙酮酸
钠;(4)基础液 + 0. 6g /L 丙酮酸钠。基础液组即为对
照组。在配好基础液的基础上，添加不同浓度的丙酮
酸钠配成以上 4 组成熟液，过滤除菌待用。
以上 3 个试验组分别进行处理，各自独立完成，具
体操作过程如 1. 3 中所描述。
1. 6 数据分析
所有试验重复 3 次以上，试验数据用 SPSS 16. 0
统计软件进行方差分析，并做多重比较。
2 结果与分析
2. 1 重离子束辐照对绵羊卵母细胞体外成熟的影响
不同剂量的重离子束辐照卵母细胞后对其体外成
熟的影响结果见表 1。从表中可以看出，不同剂量的
重离子束对卵母细胞体外成熟有着显著影响。0. 1、
0. 2 和 0. 5Gy 剂量组与对照组差异不显著;1. 0 和
1. 5Gy 剂量组的卵母细胞体外成熟率分别为 61. 3%和
56. 7%，相比对照组的 46. 2%，1. 0 和 1. 5Gy 剂量组卵
母细胞体外成熟率极显著升高(p < 0. 01);2. 0Gy 组卵
母细胞的体外成熟率为 31. 3%，较对照极显著降低(p
< 0. 01)。结果表明在 1. 0 和 1. 5Gy 的剂量辐照下可
以促进卵母细胞的体外成熟，且 1. 0Gy 的促进效果更
好。而 2. 0Gy 则抑制卵母细胞体外成熟，可能是高剂
393
核 农 学 报 25 卷
量重离子束对细胞 DNA 的双链有一定破坏作用［6］，造
成细胞死亡，从而使卵母细胞体外成熟率下降。
2. 2 不同浓度 FSH 与 LH 的配比对卵母细胞体外成
熟的影响
成熟液中添加不同配比的 FSH 与 LH 对绵羊卵母
细胞体外成熟影响的结果见表 2。从表中可以看出
FSH 和 LH 的不同配比显著影响卵母细胞的体外成
熟。其中Ⅱ组卵母细胞体外成熟率最高，为 61. 2%，
显著高于Ⅰ组的 51. 8%、Ⅲ组的 51. 0%(p < 0. 05)，极
显著高于Ⅳ组的 46. 8%(p < 0. 01);Ⅰ组、Ⅲ组差异不
显著，但均显著高于Ⅳ组。说明成熟液中激素的浓度
变化对绵羊卵母细胞体外成熟有着非常重要的影响。
表 1 重离子辐照对卵母细胞体外成熟的影响
Table 1 Effects of heavy ion irradiation on the IVM of sheep oocytes
剂量
dose(Gy)
0 0. 1 0. 2 0. 5 1. 0 1. 5 2. 0
卵母细胞总数
total of oocytes
26 30 25 28 31 30 32
第一极体的释放数
number of PB
12 14 12 13 19 17 10
成熟率
maturate rate(%)
46. 2 ± 0. 5196 46. 7 ± 0. 6928 48. 0 ± 0. 5196 46. 4 ± 0. 2309 61. 3 ± 0. 6928 56. 7 ± 0. 2887 31. 3 ± 0. 9328
注:表示在 0. 01 水平上差异极显著。
Note:indicated significantly different at 0. 01 probability level.
表 2 成熟液中不同配比的 FSH∶ LH 对卵母细胞体外成熟的影响
Table 2 Effect of different FSH /LH ratio in the maturation medium on the IVM of sheep oocytes
FSH∶ LH(μg /ml∶ μg /ml) Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
卵母细胞总数
total of oocytes
137 160 143 201
第一极体的释放数
number of PB
71 98 73 94
成熟率
maturate rate(%)
51. 8 ± 0. 3464b 61. 2 ± 1. 0392aA 51. 0 ± 1. 5011b 46. 8 ± 0. 1732cB
注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组是分别在基础液中添加 FSH /LH，其比例分别为 1∶ 1、1∶ 2、2∶ 1和 5∶ 1。
同行不同大小写字母表示各组间在 0. 01、0. 05 水平上差异显著，下同。
Note:FSH /LH was added to Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ group in the base fluid，the ratio was 1∶ 1，1∶ 2，2∶ 1and 5∶ 1
The different capital and small letters indicated different at 0. 01 and 0. 05 probability level. The same as following tables.
2. 3 不同浓度丙酮酸钠对卵母细胞体外成熟的影响
从表 3 中可以看出，在成熟液中加入不同浓度的
丙酮酸钠后，各处理的卵母细胞成熟率和对照组有显
著差异。0. 2Gy 剂量组体外成熟率为 65. 9%，较
0. 1Gy 剂量组和对照组的 62. 8%和 61. 2%，成熟率明
显升高(p < 0. 05);0. 1 Gy 剂量组与对照组相比无明
显变化;0. 4 Gy 剂量组体外成熟率为 57. 8%，较对照
组及 0. 1 和 0. 2Gy 剂量组体外成熟率明显降低(p <
0. 05);0. 6 Gy 剂量组体外成熟率为 49. 6%，较对照组
和0. 2、0. 4Gy剂量组极明显降低(p < 0. 01)。该结果
表 3 成熟液中添加不同浓度丙酮酸钠后卵母细胞体外成熟情况
Table 3 Effects of different sodium pyruvate concentration in the maturation medium on the IVM of sheep oocytes
丙酮酸钠浓度
concentration of
sodium pyruvate(g /L)
CK 0. 1 0. 2 0. 4 0. 6
卵母细胞总数
total of oocytes
160 148 179 116 123
第一极体的释放数
number of PB
98 93 118 67 61
成熟率
maturate rate(%)
61. 2 ± 1. 0392bA 62. 8 ± 0. 1732bA 65. 9 ± 1. 0970aA 57. 8 ± 0. 8660cA 49. 6 ± 0. 3464dB
493
2 期 重离子束辐照、激素 FSH /LH 及丙酮酸钠对绵羊卵母细胞体外成熟的影响
说明成熟液中添加 0. 2g /L 的丙酮酸钠可以促进绵羊
卵母细胞体外成熟，如果添加浓度过高，反而会抑制卵
母细胞体外成熟。成熟液中添加 0. 4g /L 的丙酮酸钠，
成熟率显著下降，添加 0. 6g /L 其体外成熟率会极显著
下降。
3 讨论
3. 1 重离子束辐照对绵羊卵母细胞体外成熟的影响
重离子是指原子序数(Z)等于和大于 2 的原子被
剥掉或部分剥掉外周电子后带正电荷的原子核。重离
子束辐照是一种致密的电离辐射，与传统的 X 射线、γ
射线相比具有高 LET、能量沉积密集、局部剂量大、相
对生物学效应高等特点［6］。随着重离子辐照在癌症
治疗、育种方面的应用，其生物效应日益受到研究人员
的重视，然而对动物早期胚胎的影响研究报道却很少。
有报道称［7］，在不引起胚胎死亡的剂量下，重离子辐
照有助于早期胚胎的卵裂。对于重离子辐照对绵羊卵
母细胞体外成熟的影响，目前国内外研究很少。我们
与中国科学院近代物理研究所合作研究了重离子辐照
对绵羊卵母细胞体外成熟的影响。本研究结果显示，
剂量为 1. 0 和 1. 5Gy 辐照组的卵母细胞体外成熟率分
别为 61. 3% 和 56. 7%，相比未进行辐照的对照组的
46. 2%，1. 0 和 1. 5Gy 辐照组有极显著升高 (p <
0. 01);0. 1、0. 2 和 0. 5Gy 和对照组差异不显著;2. 0Gy
和对照组卵母细胞的体外成熟率分别为 31. 3% 和
46. 2%，较 2. 0Gy 辐照组极显著降低(p < 0. 01)。说
明在 1. 0 和 1. 5Gy 的剂量下可以促进卵母细胞的体外
成熟。陈仕生［8］在研究电离辐射对人脐静脉内皮细
胞影响时总结出:在低剂量辐照下，HUVE-12 会分泌
一定量的血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生
长因子(bFGF)。据此我们推断 1. 0 和 1. 5Gy 剂量辐
照能提高绵羊卵母细胞的体外成熟率，可能是促进了
颗粒细胞某些生长因子的释放，从而促进了卵母细胞
的体外成熟，但其具体机理还有待探索。而 2. 0Gy 剂
量下抑制成熟，可能是高剂量重离子束造成了卵母细
胞 DNA 的双链断裂［6］，对细胞构成重大伤害。总的来
说，本试验卵母细胞体外成熟率相对都比较低，这与卵
母细胞辐照后运回实验室重新培养有关。在运输过程
中，保温桶水温的变化、液体的冲击等对卵母细胞都是
额外的应激，但 1. 0 和 1. 5Gy 的辐照对卵母细胞体外
成熟的促进作用还是显而易见的。
3. 2 成熟液中添加不同配比的 FSH 与 LH 对卵母细
胞体外成熟的影响
激素是哺乳动物卵母细胞核成熟的基本调节物
质。FSH 能促进颗粒细胞加速有丝分裂并分泌卵泡
液，还能活化卵丘细胞芳香化酶的作用，芳香化酶将来
自内膜细胞的雄激素转化成 17β － E［9］2 ，后者协同 FSH
使颗粒细胞增生、内膜细胞分化，从而促进卵母细胞的
成熟。同时 FSH 还能合成各种肽类并获得 LH 受体，
在调节卵丘细胞分化中起着主要作用。LH 可使卵母
细胞恢复减数分裂［10］。因排卵前卵泡卵母细胞的成
熟分裂恢复与 LH 峰的时间基本一致，由此认为，LH
是卵母细胞体内成熟的诱导者［11］。赵兴绪等曾报道
FSH 与 LH 在血液中达到一定浓度且成一定比例时引
起动物排卵;也有报道表明，FSH 和 LH 配合使用好于
单独用 FSH 或 LH［12］。本试验在不同的 FSH、LH 浓度
配比试验组中，绵羊卵母细胞体外成熟后第一极体排
出率有差异，Ⅱ组排出率最高，为 61. 2%，显著高于Ⅰ
组的 51. 8%、Ⅲ组的 51. 0%(p < 0. 05)，极显著高于Ⅳ
组的 46. 8% (p < 0. 01)，说明在成熟液中添加 10μg /
ml FSH 与 10μg /ml LH 即二者以 1:1 的浓度配比时其
体外成熟率最高。
3. 3 成熟液中添加不同浓度的丙酮酸钠对卵母细胞
体外成熟的影响
卵母细胞的成熟和早期卵裂的能量底物是丙酮酸
钠，随后是乳酸，含有丙酮酸钠的培养基对卵母细胞的
作用优于只含葡萄糖的培养基［13］。而最近的研究表
明，丙酮酸钠还可作为抗氧化剂保护卵母细胞抵抗外
界环境的不利影响［14］。本试验结果表明，成熟液中添
加 0. 2g /L 丙酮酸钠对绵羊卵母细胞体外成熟效果明
显优于添加 0. 1 和 0. 4g /L 丙酮酸钠及对照组，极显著
优于 0. 6g /L。这与 Geshi［4］等的研究结果有所不同，
他们的研究结果表明，丙酮酸钠 (0. 2mmol /L 即
0. 02g /L)有 利 于 牛 COCs 体 外 成 熟 (78. 5%
vs77. 7%)，尤其是促进无卵丘细胞包裹的卵母细胞体
外成熟(71. 9% vs19. 6%)，并发育到囊胚期，显示出发
育成为正常个体的能力。两者研究的结果都有利于卵
母细胞的体外成熟，但浓度不同，这可能与种属差异有
关。对于本试验结果来说，0. 1g /L 丙酮酸钠不足以支
持绵羊卵母细胞发育到成熟，而 0. 4g /L、0. 6g /L 丙酮
酸钠似乎破坏了成熟液自身的离子平衡，从而降低了
卵母细胞的体外成熟率。
4 结论
1. 0 和 1. 5Gy 剂量的重离子辐照对绵羊卵母细胞
的体外成熟具有促进作用，2. 0Gy 剂量的重离子辐照
593
Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2011，25(2):0391 ～ 0396
对卵母细胞具有杀伤作用，降低了卵母细胞的体外成
熟率;成熟液中激素 FSH ∶ LH 添加量为 10μg /ml ∶
10μg /ml(1∶ 1)时可以获得最佳的卵母细胞成熟效果，
在相同的条件下添加 0. 2g /L 的丙酮酸钠可以促进卵
母细胞的体外成熟。
参考文献:
［1 ］ 李天强 .天祝白牦牛卵母细胞体外成熟的研究［D］. 甘肃兰州:
甘肃农业大学，2008
［2 ］ 毛晓霞，万双秀 .生殖激素对绵羊卵母细胞体外成熟的影响［J］.
上海畜牧兽医通讯，2009，1:33 － 34
［3 ］ 曲杨燕，赵雁伟，李 凯 . FSH 对绵羊卵母细胞体外核成熟的影响
［J］.中国畜牧兽医，2008，35(12):80 － 83
［4 ］ Geshi M，Takenouchi N，Yamauchi N，Nagai T. Effects of sodium
pyruvate in nonserum maturation medium on maturation，
fertilization，and subsequent development of bovine oocytes with or
without cumulus cells［J］. Biology of Reproduction，2000，63(6):
1730 － 1734
［5 ］ Hunter A G，Moor R M. Stage-dependent effects of inhibiting
ribonucleic acid and protein synthesis on meiotic maturation of bovine
oocytes in vitro［J］. Journal of Dairy Sci，1987，70(8):1646 － 1651
［6 ］ 袁 雄，叶常青，周平坤 .重离子辐射的 DNA 链断裂效应［J］. 航
天医学与医学工程，1997，8(10)，4:309 － 311
［7 ］ Philip E Hildreth. Developmental effects of X-rays on embryos of
drosophila melanogaster［J］. Genetics，1967，58:1924 － 1929
［8 ］ 陈仕生 .电离辐射对人脐静脉内皮细胞影响的研究［D］. 广东汕
头:汕头大学，2005
［9 ］ 赵兴绪 .兽医产科学(第三版)［M］.北京:中国农业出版社，2006
［10］ 李晟阳，罗光彬，张晓华 . FSH、LH 对猪卵母细胞核成熟及体外
成熟时间对去核效率的影响［J］. 黑龙江畜牧兽医，2006，11:37
－ 39
［11］ 张晓建，安志兴 .不同添加成分对绵羊卵母细胞体外成熟的影响
［J］.动物医学进展，2008，29(6):28 － 31
［12］ 施巧婷 .牛卵母细胞体外成熟体外受精及胚胎体外培养的研究
［D］.新疆乌鲁木齐:新疆大学，2001
［13］ Cekleniak N，Combelles C，Ganz D. Anovel system for in vitro
maturation of human oocytes［J］. Fertil Steril，2001，75:1185 －
1193
［14］ Gonzales-Figueroa H，Gonzales-Molfino H M. Maturation of pig
oocytes in vitro in a medium with pyruvate［J］. Braz J Med Biol
Res，2005，38(6):869 － 872
(责任编辑 邱爱枝
櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀
)
(上接第 357 页)
［6 ］ 王忠孝 . 山东玉米［M］. 山东省农业科学院，1999
［7 ］ 黄绍敏，杨先明，皇甫湘荣，宝德俊，介晓磊 . 不同栽培因子对
河南玉米产量的影响程度［J］. 玉米科学，2006，14(3):116 －
119
［8 ］ 张泽民，任和平 . 不同生态环境对玉米产量和穗粒性状的影响
［J］. 华北农学报，1991，6(1):28 – 34
［9 ］ 冯春生，尹芝瑞，赵述文，李维岳 . 耐密型玉米光合速率与产量
的关系［J］. 核农学报，1994，8(2):80 － 86
［10］ 于凤义，张 萍，周洪杰 . 玉米功能叶片碳同化物在果穗不同部
位籽粒中的分配［J］. 核农学报，1996，10(1):35 － 38
［11］ 童淑媛，宋凤斌，徐洪文 . 玉米不同叶位叶片 SPAD 值的变化及
其与生物量的相关性［J］. 核农学报，2008，22 (6):869 － 874
［12］ 刘淑云，董树亭，胡昌浩，白 萍，吕 新 . 玉米产量和品质与生态
环境的关系［J］. 作物学报，2005，31(5):571 － 576
［13］ 刘淑云，董树亭，胡昌浩 . 生态环境因素对玉米子粒品质影响
的研究进展［J］. 玉米科学，2002，10(1):41 － 45
［14］ 陆卫平，陈国平，郭景伦，王忠孝，饶春富 . 不同生态条件下玉
米产量源库关系的研究［J］. 作物学报，1997，(23)6:727 － 733
［15］ 龚绍先主编 . 粮食作物与气象［M］. 北京:北京农业大学出版
社，1987:245 － 248
［16］ Stevenson J C，Goodman M M. Ecology of exotic races of maize. I.
Ieaf number and tillering of 16 racl-under four temperatures and two
photoperiods［J］. Crop Sci，1972，12(6):864 － 868
(责任编辑 邱爱枝
櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀
)
(上接第 362 页)
［22］ 谢祖彬，朱建国，张雅丽，马红亮，刘钢，韩勇，曾青，蔡祖聪 .
水稻生长及其体内 C、N、P 组成对开放式空气 CO2 浓度增高和
N、P 施肥的响应［J］.应用生态学报，2002，13(10):1223 ～ 1230
［23］ 马红亮，朱建国，谢祖彬，刘 钢，曾 青，韩 勇 .开放式空气 CO2
浓度升高对冬小麦 P、K 吸收和 C∶ N，C∶ P 比的影响［J］. 农业
环境科学学报，2005，24(6):1192 － 1198
［24］ Rogers A， Allen D J， Davey P A. Leaf photosynthesis and
carbohydrate dynamics of soybeans grown throughout their life-cycle
under Free-Air carbon dioxide enrichment ［J］. Plant，Cell and
Environment，2004，27:449 – 458
［25］ Kimball BA. Influence of elevated CO2 on crop yield / /Enoch HZ，
Kimball，eds. Carbon Dioxide Enrichment of Greenhouse Crops
［M］. Boca Raton，USA. CRC Press Inc，1986:105 － 115
［26］ Bazzaz F A，Fajer E D. Plant life in a CO2 -rich world［J］.
Scientific American，1992，266:68 － 74
［27］ Kimball B A. Carbon dioxide and agricultural yield:An assemblage
and analysis of 430 prior observations［J］. Agronomy Journal，1983，
75:779 － 788
(责任编辑 邱爱枝)
693