全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 8期,2009年 8月800
收稿 2009-04-29 修定 2009-07-02
* 通讯作者(E-mail: gufugen64@163.com; Tel: 0512-
6 5 8 8 0 1 7 2 )。
心叶日中花的组织培养与快速繁殖
王小红, 毕锦华, 陆智伟, 杨晓军, 顾福根 *
苏州大学医学部, 江苏苏州 215123
Tissue Culture and Rapid Propagation of Mesembryanthemum cordifolium L. F.
WANG Xiao-Hong, BI Jin-Hua, LU Zhi-Wei, YANG Xiao-Jun, GU Fu-Gen*
Medicine Department, Suzhou University, Suzhou, Jiangsu 215123, China
1 植物名称 心叶日中花(Mesembryanthemum
cordifolium L. F.), 实验用植株购自苏州市相城区
花木城。
2 材料类别 当年生枝条的带节茎段。
3 培养条件 以MS 为基本培养基。(1 )初代培养
基: MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1; (2)增
殖培养基: MS+6-BA 1.0+NAA 0.4; (3)生根培养基:
1/2 MS+NAA 0.2。以上培养基均附加 30 g·L-1蔗
糖和 8 g·L-1琼脂粉, pH 5.78~5.80。培养温度为
(25±3) ℃, 光照强度为 30~40 µmol·m-2·s-1, 光照时
间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体的灭菌 选取长势良好的当年生枝条, 从
节间中部切开, 剪去叶片, 放入干净烧杯中, 流水冲
洗 10 min后, 用 0.1% HgCl2处理 8~10 min, 用无菌
水漂洗 4~5次, 每次4~5 min, 切去茎段两端过长部
分, 在节的上下各留约 5 mm, 接种到培养基(1)上,
每瓶接一个外植体, 共接 200瓶。接种 14 d后观
察统计, 共有 6个外植体污染, 2个外植体死亡, 无
菌外植体成活率为 96%。
4.2 增殖培养 将无菌外植体在培养基上培养 28 d
后, 萌发出的腋芽约有 10 mm高, 腋芽切下后转接
到培养基(2)上进行增殖培养(刘秀贤等 2006), 28 d
后平均增殖系数达到 6.2±2.8, 最多的可达 11.6。
在增殖培养试验中有一定比例的玻璃化苗出现,
MS培养基中不加NH4NO3成份(Phan和 Hegedus
1986)可以完全抑制心叶日中花试管苗的玻璃化, 且
对试管苗的增殖无影响。
4.3 生根培养 将丛生苗分割成单株后, 接入培养基
(3)中进行生根培养(高铤等 2006)。在此培养基上,
心叶日中花试管苗在接种后第8天就开始长根, 第
13天开始长出侧根, 第 21天时生根率为 100%, 平
均每苗生根(8.4±2.6)条, 最多的有 13条。在此培
养基上生长的试管苗伸长生长明显, 有利于移栽。
4.4 炼苗与移栽 将生根后的试管苗移至自然室温
和散射光条件下炼苗7 d, 打开瓶盖, 在培养瓶中加
入少许自来水, 继续炼苗 3 d。取出试管苗, 用自
来水冲洗净试管苗基部的培养基, 移栽至草炭土:珍
珠岩:菜园土=2:1:1 (体积比)的基质中, 盆面用5 000
倍多菌灵喷洒杀菌, 以后每 3 d浇一次透水。移栽
14 d后大多数小苗长出新叶, 21 d后成活率为
9 5 %。
5 意义与进展 心叶日中花, 又名花蔓草、露花, 是
番杏科日中花属(中国植物志编委会1996)的多年生
常绿草本植物, 原产非洲南部, 我国引种栽培供观
赏。花顶生, 深玫瑰红色, 中心淡黄, 形似菊花, 花
瓣狭小, 具有光泽, 花期长, 自仲春至秋末陆续开
放, 白天开放晚上闭合; 叶对生, 肉质肥厚、鲜亮
青翠; 枝条有棱角, 伸长后呈半匍匐状, 枝叶茂密,
宜作垂吊花卉栽培, 可供家庭阳台和室内向阳处布
置。心叶日中花一般采用扦插繁殖, 而用组织培养
技术快速繁殖, 对其未来进行规模化生产可能有一
定的潜在应用参考价值。心叶日中花的组织培养
与快速繁殖尚未见报道。
参考文献
高铤, 陈继敏, 杨镇明(2006). 海芋的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 42 (5): 910
刘秀贤, 李正红, 邓缰(2006). 青阳参的组织培养和植株再生. 植
物生理学通讯, 42 (5): 902
中国植物志编委会(1996). 中国植物志(第 26 卷). 北京: 科学出
版社, 33
Phan CT, Hegedus P (1986). Possible metabolic basis for the
developmental anomaly observed in in vitro culture, called
“vitreous plants”. Plant Cell Tiss Org Cult, (6): 83~94