全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 6期, 2010年 6月 607
收稿 2010-03-18 修定 　2010-03-31
资助 云南省科技计划项目(2 008 CA006 )。
* 通讯作者(E-mail: lp2148@swfc.edu.cn; Tel: 0871-3863023)。
三裂碱毛茛的组织培养与快速繁殖
孙成江 1, 普晓兰 2, 林萍 3,*, 李艳芳 1
1文山学院, 云南文山 663000; 西南林学院 2资源学院, 3园林学院, 昆明 650224
Tissue Culture and Rapid Propagation of Halerpestes tricuspis (Maxim.) Hand.-
Mazz.
SUN Cheng-Jiang1, PU Xiao-Lan2, LIN Ping3,*, LI Yan-Fang1
1Wenshan University, Wenshan, Yunnan 663000, China; 2Faculty of Natural Resouces, 3Faculty of Forestry, Southwest Forestry
University, Kunming 650224, China
1 植物名称 三裂碱毛茛[Halerpestes tricuspis
(Maxim.) Hand.-Mazz.]。
2 材料类别 茎尖和带腋芽茎段。
3 培养条件 基本培养基为加入0.05%内生菌型抑
菌剂 “ 山农一号 ”的MS培养基。(1)初代培养基:
MS+KT 0.1 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1+6-BA 0.1;
(2)增殖培养基: MS+KT 0.1+NAA 0.1+6-BA 0.1; (3)
生根培养基: 1/2MS+IBA 0.1。以上培养基均附加
30 g·L-1蔗糖和5.5 g·L-1卡拉胶, pH 6.4, 在121 ℃高
温下灭菌 15 min, 取出在接种箱放置 2~3 d后备
用。培养条件为光强约 40 μmol·m-2·s-1, 光照时间
为 10~12 h·d-1, 培养温度为(20±2) ℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料获得 从三裂碱毛茛母株上剪取幼嫩
茎段用洗洁精水浸泡 10~15 min, 用小毛刷仔细刷
洗材料表面附着的灰尘泥土等, 然后在自来水下冲
洗 30~60 min, 用蒸馏水清洗外植体后放入 70%酒
精中浸蘸10 s, 立即取出放入加有1~2滴吐温80的
0.1%升汞溶液(每 100 mL升汞溶液加约 1滴吐温)
中先灭菌4 min, 用无菌水清洗3~5次, 再放入0.1%
升汞溶液(不能再加吐温, 如再次加入, 外植体呈煮
熟样, 接种后死亡率增高)中灭菌 3 min, 最后用无
菌水清洗 4~5次。用滤纸吸干水后切成 1~2 cm长
的小段, 接种到培养基(1)上。
4.2 芽诱导与增殖 接种到培养基(1)上的茎尖、
带腋芽茎段培养5 d后开始萌发(图1), 原芽位上长
出许多新叶, 10 d左右从幼苗叶腋长出匍匐茎(图
2)。30 d统计, 萌发率可达 90%。经过 30 d培养,
苗达 2.5 cm左右。15 d左右切取幼苗, 转接入培
养基(2)中, 经过 2~3周培养可形成大量丛芽和 2~3
枝匍匐茎(图 3)。每 2周转接一次, 月增殖系数为
6.5。三裂碱毛茛增殖培养过程中容易产生玻璃
图 1 三裂碱毛茛的腋芽萌发
图 2 三裂碱毛茛的匍匐茎
植物生理学通讯 第 46卷 第 6期, 2010年 6月608
图 3 三裂碱毛茛的增殖培养
图 4 三裂碱毛茛的玻璃化苗情况缓解
图 5 三裂碱毛茛的生根培养
图 6 三裂碱毛茛的花
4.3 生根与移栽 在培养基(3)中, 转接的小苗3 d左
右就开始生根, 30 d统计时生根率达 100% (图 5)。
组培苗生根后不需炼苗, 直接移栽到有底泥的小方
盆中, 注入清水浸没组培苗并注意遮荫, 待苗长出
1~2片新叶后逐渐降低水位, 最后保持完全浸没根
系的常水位, 在自然条件下即可正常生长。
5 意义与进展 三裂碱毛茛为毛茛科(Ranunculaceae)
碱毛茛属多年生湿生草本植物, 生长在高山草甸草
坡水边或石上, 产于巧家、禄劝、大理、丽江、
中甸、维西、德钦、贡山等区, 分布于西藏、四
苗, 通过降低 6-BA浓度(<0.1 mg·L-1) 或在增殖 1~2
代后停止使用 6-BA一段时间, 待增殖明显降低时,
再使用低浓度6-BA; 用透气膜代替塑料封口膜以及
降低组培室温度(<25 ℃)等措施, 能有效防止三裂
碱毛茛玻璃化苗的发生(图 4)。
川西北部、陕西、甘肃、青海、新疆(傅立国等 2000;
刘尚武1997)。它是高寒湿地内的一种典型多年生
无性繁殖植物, 也是高寒沼泽化草甸的主要伴生种,
可以入药, 具有利水、消肿、祛风除湿、治疗关
节炎及水肿等功效, 是青海高寒湿地中重要的经济
及盐碱地指示性植物(郭本兆 1987)。三裂碱毛茛
叶色油绿奇特, 花亮黄蜡质(图 6), 观赏价值较高。
该植物具高耐盐碱特性, 在滇池生态污染治理中用
量较大, 具有较高的开发利用价值, 但目前种苗供
不应求, 且结实率低, 组培是其扩繁首选方法之一。
三裂碱毛茛组培快繁尚未见报道。
参考文献
傅立国, 陈潭清, 郎楷永, 洪涛主编(2000). 中国高等植物(第三
卷). 青岛: 青岛出版社, 579
刘尚武(1997). 青海植物志(第 1卷). 西宁: 青海人民出版社, 67~
6 9
郭本兆(1987). 青海经济植物志(第 2卷). 西宁: 青海人民出版社,
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