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角蒿的离体培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 46卷 第 10期, 2010年 10月 1075
收稿 2010-09-06 修定  2010-09-14
资助 陕西省自然科学基金( S J 0 8 B 0 8 )和陕西省教育厅基金
(09JS080, 09JK775)。
* 通讯作者(E-mail: buhy@nwu.edu.cn; Tel: 029-88303484)。
角蒿的离体培养与快速繁殖
李娜, 毕彦博, 王英娟, 步怀宇 *
西北大学西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室, 陕西省生物技术重点实验室, 西安 710069
In vitro Culture and Rapid Propagation of Incarvillea sinensis Lam.
LI Na, BI Yan-Bo, WANG Ying-Juan, BU Huai-Yu*
Shaanxi Provincial Key Laboratory of Biotechnology, Key Laboratory of Resource Biology and Biotechnology in Western China,
Ministry of Education, Northwest University, Xi’an 710069, China
1 植物名称 角蒿(Incarvillea sinensis Lam.)。
2 材料类别 种子萌发的无菌苗下胚轴和子叶。
3 培养条件 基本培养基为MS。(1)种子萌发培养
基: 1/2MS; (2)丛生芽诱导培养基: MS+6-BA 2 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.2; (3)丛生芽增殖培养基: MS+
6-BA 0.5+NAA 0.2; (4)生根培养基: 1/2MS+IBA 0.2。
上述培养基均加入30 g·L-1蔗糖和7 g·L-1琼脂粉, pH
5.8~6.2。培养温度为(25±2) ℃, 光照时间为 12 h·d-1,
光照强度为 30~40 μmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取角蒿成熟开裂的蒴果内种
子, 在超净工作台上用 70%乙醇消毒 30 s, 0.1%升
汞溶液浸泡灭菌 6 min, 无菌蒸馏水冲洗 5次, 然后
接种到培养基(1)上, 15 d后种子开始萌发。
4.2 丛生芽的诱导和增殖培养 取 1.5~2.0 cm无菌
苗, 将其子叶切成 0.3 cm宽的小块, 下胚轴切成 0.5
cm长的切段, 接种到培养基(2)上。一周左右, 子
叶和下胚轴切口处膨大, 生成黄绿色愈伤组织, 20
d左右分化出大量绿色芽点(图1), 继续培养获得丛
生芽(图 2), 分化频率 100%。培养 40 d后将芽丛
切割后分成数个, 转接到培养基(3)上, 进行丛生芽
的继代增殖。继代培养的间隔时间一般为30~40 d,
此过程中丛生芽叶片长大伸展, 长成丛生苗(图 3)。
4.3 生根及移栽 将展开的丛生芽苗切成单株后, 接
种到培养基(4)上生根培养。培养 10 d左右, 小苗
基部可见根突, 逐步伸长。20 d后即可生根, 生根
率达 87%。45 d后苗高可达到 2~3 cm, 每苗可分
化出细长的根 5~8条(图 4)。选根系发达小苗将瓶
口揭开, 炼苗 5~7 d, 洗去小苗根部培养基, 移栽于
盆土(蛭石:腐殖土:田园土=2:1:1)中, 注意保湿培养,
成活率达 72% (图 5)。
图 1 角蒿愈伤组织
图 2 角蒿丛生芽增殖和伸长
图 3 角蒿丛生芽伸长
植物生理学通讯 第 46卷 第 10期, 2010年 10月1076
5 意义与进展 角蒿为紫葳科角蒿属一年生至多年
生草本植物, 全草入药, 始载于唐朝《备急千金要
方》。在我国北方和东北地区称做 “透骨草 ”, 亦
称 “羊角透骨草 ”, 用于祛风湿, 活血, 止痛(陈修源
和陈家锋1989)。从角蒿分离出的单萜生物碱角蒿
酯碱具有强的镇痛活性, 已成为开发非麻醉性强力
镇痛新药的重要先导化合物(迟玉明等 2005)。角
蒿花颜色鲜艳, 具有极高的观赏价值(图6), 已在一
些欧洲国家的园林中应用(杨静全等 2003)。角蒿
野生资源很少, 不同年份因气候变化而波动。为满
图 4 角蒿生根培养
图 5 角蒿移栽培养
足规模化开发的需求, 已进行了系统的驯化栽培研
究(刘新波和王臣 2007)。利用组织培养技术建立
无性繁殖体系, 可改变传统种植模式, 为进一步大
范围地利用野生资源寻找新的途径。紫葳科植物
组织培养仅见于凌霄属凌霄(齐雨等2007)和菜豆树
属麒麟紫葳(石洪凌等2005), 角蒿属植物的离体培
养和快速繁殖目前未见报道。
图 6 角蒿开花
参考文献
陈修源, 陈家锋(1989). 角蒿的本草考证. 中药材, 12 (4): 43
迟玉明, 中村基之, 赵唏瑛, 吉泽丰吉, 阎文玫, 桥本文雄, 野原稔,
弘樱田忍(2005). 角蒿生物碱及镇痛活性物质. 天然产物研
究与开发, 17 (3): 362~365
刘新波, 王臣(2007). 新镇痛药物资源角蒿(Incarvillea sinensis)
的种子生物学及栽培技术研究. 国土与自然资源研究, (3):
95~96
齐雨, 李森, 刘梦颖, 徐娜, 姜长阳(2008). 凌霄组织培养及快速繁
殖的研究. 河北林业科技, (4): 1~3
石洪凌, 陈超, 李小六(2005). 麒麟紫葳的组织培养和快速繁殖.
植物生理学通讯, 41 (2): 197
杨静全, 李兆光, 李燕, 和加卫, 解玮佳, 和秀云(2003). 云南丽江地
区角蒿属植物资源的初步调查. 西南农业学报, 16 (4): 53~55