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弦月的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 2期,2009年 2月 157
弦月的组织培养与快速繁殖
韵宇飞, 熊亚栋, 颜冰儿, 顾福根 *
苏州大学医学部, 江苏苏州 215123
Tissue Culture and Rapid Propagation of Senecio radicans (L. F.) Sch. Bip.
YUN Yu-Fei, XIONG Ya-Dong, YAN Bing-Er, GU Fu-Gen*
Medicine Department, Suzhou University, Suzhou, Jiangsu 215123, China
收稿 2008-12-12 修定 2008-12-30
* 通讯作者(E-mail: gufugen64@163.com; Tel: 0 512-
6 5 8 8 0 1 7 2 )。
1 植物名称 弦月[Senecio radicans (L. F.) Sch. Bip.],
实验用植株购于苏州花卉市场。
2 材料类别 当年生枝条的带节茎段。
3 培养条件 以MS 为基本培养基。(1 )初代培养
基: 不加任何激素的MS基本培养基(MS0培养基);
(2)增殖培养基: MS+6-BA 0.2 mg·L-1(单位下同)
+NAA 0.1; (3)生根培养基: 1/2MS+NAA 0.8。以上
培养基均附加30 g·L-1蔗糖和8 g·L-1琼脂粉, pH 5.8左
右。培养温度为(25±3) ℃, 光照强度为 30~40
µmol·m-2·s-1, 光照时间为 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体的灭菌 选取长势良好的当年生枝条, 从
节间中部切开, 放入干净烧杯中, 流水冲洗 30 min,
再用 75%酒精处理 1 min后, 将外植体分成 5组,
分别用 0.1%HgCl2处理 2、4、6、8、10 min, 用
无菌水漂洗4~5次, 每次4~5 min, 切去茎段两端过
长部分, 在节的上下各留约 5 mm, 保留珠叶, 接种
到MS0培养基上。接种 14 d后观察, 当灭菌时间
为 2 min时污染率就很低, 只有 5%, 灭菌时间为 4
min和6min时外植体无污染、无死亡, 灭菌时间
为 8 min以上时, 同样达到 100%的灭菌效果, 但外
植体开始出现死亡。因此, 用 0.1%HgCl2对弦月茎
段进行灭菌的时间以 4~6 min为宜。
4.2 丛生芽的诱导与增殖培养 将无菌外植体转接
到分别添加了 6-BA 0.1、0.2、0.3、0.4以及NAA
0.05、0.1、0.2的共 12个组合的MS培养基中进
行增殖培养(顾福根等 2006), 60 d后统计增殖率、
苗高等, 筛选出增殖系数较大、长势良好的最适增
殖培养基为MS+6-BA 0.2+NAA 0.1, 在此培养基
上, 平均增殖系数达到 9.4±2.2 (图 1), 最多的可达
16。当 6-BA浓度为 0.3以上时, 增殖系数增大, 但
试管苗开始出现畸形, 当 6-BA浓度为 0.1时, 增殖
系数稍小。NAA浓度与增殖系数关系不大, 但与
苗高关系密切, 当NAA浓度为 0.05时, 丛生苗成
紧密球状, 当NAA浓度为 0.2时, 丛生苗较高, 枝
条较细弱。因此诱导弦月丛生芽的培养基以
MS+6-BA 0.2+NAA 0.1较为合适。在 40 µmol·m-2·s-1
的光照强度下会出现珠叶黄化现象(图2), 将黄化苗
移到20 µmol·m-2·s-1的较弱光照下培养, 试管苗黄化
现象能逐步消失。当 6-BA的浓度为 0.4 mg·L-1时,
试管苗出现部分玻璃化, 转接至不加植物生长调节
物质的MS0培养基后, 玻璃苗能恢复成正常苗。
增殖培养过程中, 珠叶黄化与转绿的机制以及试管
图 1 弦月的增殖培养
图 2 弦月试管苗的黄化现象
植物生理学通讯 第 45卷 第 2期,2009年 2月158
苗玻璃化的预防措施等有待作进一步研究。
4.3 生根培养 将丛生苗分割成单株后接入分别加
入 NAA 0、0.2、0.5、0.8、1.0的 5种 1/2MS
培养基中生根培养(乔梦吉等 2007), 20 d后统计生
根数和根的长度等, 筛选出生根的最适培养基为1/
2MS+NAA 0.8, 在该培养基上, 弦月试管苗在接种
后第 5天就开始长根, 第 13天开始长出侧根, 20 d
时生根率为 92%, 平均每苗生根(3.4±1.1)条(图 3),
最多的有 9条。同时, 在此培养基上, 试管苗伸长
生长明显, 利于移栽。
图 3 弦月的生根培养
图 4 弦月试管苗的移栽育苗
透水(顾福根等 2008)。25 d后进行统计, 成活率
为 9 4 %。
5 意义与进展 弦月又名菱角掌, 为菊科千里光属
的多年生草本, 原产非洲西南, 抗热耐旱, 不需强
光, 叶色翠绿, 肥厚多汁, 随柔软的枝条垂挂于花盆
边缘, 犹如一串串翠绿的珍珠, 观赏价值极高。弦
月常采用扦插繁殖, 但因分枝较少, 繁殖速度较慢, 采
用组织培养技术快速繁殖, 可能有一定的潜在应用前
景。弦月的组织培养与快速繁殖尚未见报道。
参考文献
顾福根, 孙丙耀, 陈瑞卿(2008). 龙凤竹的组织培养. 植物资源与
环境学报, 15 (3): 55~59
顾福根, 万志刚, 宋卫平(2006).夏蜡梅的组织培养与植株再生. 植
物生理学通讯, 42 (5): 922
乔梦吉, 林善枝, 张志毅, 林灵(2007). 短穗柽柳的组织培养与快
速繁殖. 植物生理学通讯, 43 (1): 116
4.4 试管苗的炼苗与移栽 将生根后的试管苗移至
窗口, 在自然室温和散射光条件下炼苗7 d, 再打开
瓶盖炼苗3 d, 取出试管苗, 用自来水将试管苗基部
的培养基冲洗干净, 移栽至草炭土:珍珠岩:菜园土=
2:1:1的基质或纯珍珠岩基质中(图4), 每3 d浇一次