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杈杷果的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 3期,2009年 3月 277
杈杷果的组织培养与快速繁殖
胡海涛, 杨玲 *
浙江师范大学化学与生命科学学院, 浙江金华 321004
Tissue Culture and Rapid Propagation of Lonicera fragrantissima subsp.
standishii (Carr.) Hsu et H. J. Wang.
HU Hai-Tao, YANG Ling*
College of Chemistry and Life Sciences, Zhejiang Normal University, Jinhua, Zhejiang 321004, China
收稿 2009-01-05 修定  2009-02-11
* 通讯作者(E-mail: yangl@zjnu.cn; Tel: 0579-88282375)。
1 植物名称 杈杷果[Lonicera fragrantissima subsp.
standishii (Carr.) Hsu et H. J. Wang.], 又名苦糖果、
无核樱桃、健身果。
2 材料类别 带侧芽的幼嫩茎段和茎尖。
3 培养条件 以MS为基本培养基。(1)启动培养
基: MS+6-BA 2.2 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.2; (2)丛
生芽诱导和增殖培养基: MS+6-BA 3.4+NAA 0.2;
(3)壮苗培养基: MS+6-BA 1.1+NAA 0.2; (4)生根培
养基: 1/2MS+IBA 2.0。以上培养基中均加入
0.7%的琼脂和 3%的蔗糖, pH 5.8。培养温度为
(25±2) ℃; 光照强度为 20~30 µmol·m-2·s-1, 光照时间
16 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 启动培养 剪取当年生带侧芽的幼嫩茎段和茎
尖, 除去叶片, 洗洁精浸泡后, 在流水下冲洗1 h, 然
后在超净工作台上, 将带侧芽的茎段和茎尖切成
1.5 cm, 放入 75%的乙醇中浸泡 30 s, 再用 2%的
次氯酸钠(加 1滴 80%吐温)消毒 15~20 min, 无菌
水冲洗5次, 用无菌滤纸吸干外植体材料表面的水,
切去两端的褐化部分, 接种到培养基(1)上。接种
10 d后侧芽开始萌动, 幼嫩叶片开始长出, 茎基部
出现膨大, 30 d后有少量不定芽形成。
4.2 丛生芽的诱导和壮苗培养 将启动培养基上新
生不定芽切下来接种到培养基(2)上, 30 d后有大
量丛生芽生成。反复分切丛生芽, 接种到增殖培养
基(2)上培养, 可以获得大量的丛生芽(图 1), 增殖
率为4~5倍, 而且诱导获得的丛生芽大多是由腋芽
直接萌发形成, 没有经过愈伤组织阶段, 因此变异
率低。将获得的丛生芽切成单芽接种到培养基(3)
上, 培养 30 d后, 芽逐渐长高长壮。
4.3 生根与移栽 经壮苗培养后, 将高2.0~3.0 cm的
增殖苗切成单芽, 接种到生根培养基(4)上进行生根
图 1 杈杷果丛生芽的增殖
培养。60 d后小苗基部可长出数条长约 1 cm的
不定根, 苗高可达 5~8 cm, 生根率 95%以上。将
生根苗的培养瓶瓶盖打开, 炼苗 3 d, 轻轻取出小
苗, 洗净根系上的培养基, 移栽到泥炭、珍珠岩、
蛭石(1:1:1)混合成的基质中, 注意保温、保湿, 成
活率可达 90%以上(图 2)。
图 2 杈杷果的移栽苗
植物生理学通讯 第 45卷 第 3期,2009年 3月278
5 意义与进展 杈杷果是忍冬科忍冬属中一种特异
珍稀木本矮化野生果树, 果实为合生果, 呈罕见的
分叉状, 故称杈杷果, 主要分布于我国华中山区混
交林缘或灌木丛中, 其中以豫西秦岭山区700~1 000
m处分布尤为集中(晁无疾和王志刚 1989)。杈杷
果成熟早(3月中旬开花, 4月下旬果实成熟)、果
形特异、无污染、矿质营养含量高(晁无疾和王
志刚1989), 是我国特有的野生果树资源, 经过选择
培育大果型作为早熟鲜果供应有很大潜力。目前
杈杷果多处在野生状态, 资源破坏十分严重, 野生
资源稀少, 亟待保护。采用组织培养技术, 对保存
此种植物种质资源和以后的开发利用有一定的应用
价值。目前同属其他种植物的组织培养和快速繁
殖研究已有报道(李利改等 1987; 赵越等 2003; 唐
效蓉等 2005; 王晓明等 2006; 孙朝晖和尹会荣
2008), 但杈杷果的组织培养和快速繁殖的报道迄今
未见。
参考文献
晁无疾, 王志刚(1989). 杈杷果资源及其研究. 中国野生植物资
源, (4): 18~20
李利改, 郭龙, 秦金山(1987). 金银花的组织培养. 植物生理学通
讯, (4): 58~59
孙朝晖, 尹会荣(2008). 蕊帽忍冬的组织培养和快速繁殖. 植物
生理学通讯, 44 (1): 125~126
唐效蓉, 李午平, 彭晓锋(2005). 灰毡毛忍冬的组织培养与快速
繁殖. 植物生理学通讯, 41 (5): 642
王晓明, 易霭琴, 宋庆安, 聂启英, 李永欣(2006). 灰毡毛忍冬新
品种 ‘银翠蕾 ’的组织培养及快速繁殖. 植物生理学通讯, 42
(3): 474
赵越, 霍俊伟, 王立娟(2003). 蓝靛果的组织培养及植株再生. 植
物生理学通讯, 39 (5): 468