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矮杞树的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 8期,2009年 8月 803
收稿 2009-05-15 修定  2009-06-15
资助 国家自然科学基金( 3 0 6 7 0 2 0 9 )和四川省教育厅项目
(2 0 0 3A1 7 5 )。
* 通讯作者(E-ma i l : zxsu @mnu . edu .c n; T e l : 0 8 1 6 -
2 2 0 3 6 8 6 )。
矮杞树的组织培养和快速繁殖
杨敬天 1,2, 邹利娟 2, 贺静 2, 吴庆贵 2, 苏智先 2,*
1西华师范大学生命科学学院, 四川南充 637002;2绵阳师范学院, 四川省生态与环境技术重点实验室, 四川绵阳 621000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Decaisnea fargesii Franch.
YANG Jing-Tan1,2, ZOU Li-Juan2, He Jing2, WU Qing-Gui2, SU Zhi-Xian2,*
1College of Life Sciences, China West Normal University, Nanchong, Sichuan 637002, China; 2Sichuan Provincial Key Laboratory
of Ecology and Environmental Technology, Mianyang Normal University, Mianyang, Sichuan 621000, China
1 植物名称 矮杞树(Decaisnea fargesii Franch.)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 萌发培养基: (1) MS; (2) MS+GA3 1.0
mg·L-1 (单位下同); (3) 1/2MS; (4) 1/2MS+GA3 1.0;
(5) WPM; (6) WPM+GA3 1.0。芽的分化与增殖培
养基: (7) 1/2MS+NAA 0.2+6-BA 1.0+0.1%活性炭。
生根培养基: (8) 1/2MS+NAA 1.5+6-BA 1.0+0.1%
活性炭。上述培养基均附加 3%蔗糖和 0.6%琼脂,
pH 5.8~6.0。培养温度为 24~26 ℃, 光照时间为 12
h·d-1, 光照强度为 30~40 μmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取矮杞树成熟果实, 在水中挤
出种子, 清洗干净后晾干, 剥去外种皮, 40 ℃温水
中浸泡28 h, 在无菌条件下用0.1%升汞浸泡4 min,
无菌水漂洗6~8次, 吸干水后用解剖刀划破内种皮,
然后将种子接种到萌发培养基上。
4.2 种子萌发 接种于萌发培养基上的种子均萌发,
接种 10 d后, 种子开始膨大; 25 d时, 种胚突破种
皮, 有浅绿色的胚根长出; 50 d后, 开始长出顶端带
有叶原基的绿色的子叶; 70 d后长成 3~4 cm高的
植株。其中培养基(2)、(4)和(6)的萌发率和萌发
速度比其他几种培养基都好, 并且萌发长成的幼苗
比较健壮, 说明加入GA3有利于矮杞树种子的萌发
和无菌苗的生长。(4)号培养基的效果最好, 萌发率
高达 90% 以上。
4.3 芽的分化与增值 将培养基(4)中萌发产生的无
菌苗去根后接种到培养基(7)上, 培养 30 d后苗腋
芽部均开始出现绿色芽点, 继续培养 20 d, 丛生芽
可长至 1~3 cm, 每个茎段周围产生的丛生芽平均
数为 6个。将绿色丛生芽分离, 转接到培养基(7)
上, 25 d后每个芽又可分化出 5~7个丛生芽(图 1)。
丛生芽的增值系数为 6.0。
图 1 矮杞树丛生芽的分化
4.4 生根培养及移栽 将1~3 cm的小芽切下转入生
根培养基(8)中, 培养 25 d左右, 基部开始出现 2~3
条约 2 cm的白色根, 随后逐渐伸长(图 2), 生根率
达 90%以上。当根长约 3 cm时打开瓶盖炼苗 1周,
然后用镊子从培养罐中取出组培苗, 用自来水洗掉
根部培养基, 栽入已灭菌的腐殖质土和河沙(1:1)混
合基质中(图 3)。温度控制在 22~24 ℃, 湿度保持
80%以上, 定时浇水, 2个月后, 成活率达 90%以
上。
5 意义与进展 矮杞树的药材名称为猫儿屎, 属木
通科猫儿屎属, 是民间常用草药, 落叶灌木或小乔
木, 高 2~7 m。生于阴坡、灌丛或沟边, 性喜阴
湿, 分布于陕西、贵州、四川等地。根和果实可
以入药, 果实富含多种营养成分, 可以鲜食, 也可加
工果汁和饮料。其味甘、辛, 性平, 有多种医药
植物生理学通讯 第 45卷 第 8期,2009年 8月804
功效(国家药典委员会 2005; 孔杰 1996)。由于采
收及破坏, 其野生资源日益减少。本文结果对提高
繁殖速度可能有一定的潜在应用价值。矮杞树的
组织培养尚未见报道。
图 2 矮杞树组培苗生根 图 3 矮杞树组培苗移栽
参考文献
国家药典委员会(2005). 中华人民共和国药典. 北京: 化学工业出
版社
孔杰(1996). 猫儿屎植物的化学成分及其药效学研究. 西北师范
大学学报, 32 (3): 111