全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 11期, 2010年 11月 1177
收稿 2010-09-08 修定 　2010-09-16
资助 广西卫生厅自筹经费科研课题(Z20 09 34 5)。
* 通讯作者(E-mail: zzj1811@yahoo.com.cn; Tel: 0771-
5 6 0 3 8 2 4 )。
三苞唇柱苣苔的组织培养与快速繁殖
余海霞, 凌征柱, 黄雪彦, 吕惠珍, 韦莹, 张占江 *
广西壮族自治区药用植物园, 南宁 530023
Tissue Culture and Rapid Propagation of Chirita tribracteata W. T. Wang
YU Hai-Xia, LING Zheng-Zhu, HUANG Xue-Yan, LÜ Hui-Zhen, WEI Ying, ZHANG Zhan-Jiang*
Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plant, Nanning 530023, China
1 植物名称 三苞唇柱苣苔(Chirita tribracteata W.
T. Wang)。
2 材料类别 幼叶。
3 培养条件 (1)诱导培养基: MS+6-BA 0.5 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.1; (2)增殖培养基: MS+6-BA 0.1+
NAA 0.1; (3)生根培养基: 1/2MS+NAA 0.1。上述
培养基均加入 3.0%蔗糖和 0.5%琼脂, pH 5.8。培
养温度为(25±2) ℃; 在愈伤组织形成、芽分化和
生根过程中的光照时间为 12 h·d-1, 光照强度为
20~25 μmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体的消毒和接种 取三苞唇柱苣苔幼嫩叶
片, 自来水冲洗后放入 200 mL的烧杯中, 加水(同
时加入 3~5滴洗洁精)后震荡 15 min, 在此期间用
毛笔刷洗叶片表面, 除去表面污垢和气泡, 再用流
水冲洗 15 min。在超净台上, 先用 75%乙醇消毒
20 s, 无菌水冲洗 2次, 再用 0.1% HgCl2溶液浸泡 5
min, 之后用无菌水冲洗 5次。用剪刀将叶片剪切
成 1 cm×1 cm小块, 叶面朝上, 接种到诱导培养基
( 1 )内。
4.2 不定芽的诱导和增殖 15 d后, 外植体切口处出
现较为致密的愈伤组织, 呈翠绿色。约 25 d后, 部
分切口处出现不定芽(图 1)。将外植体切口处的不
定芽丛切下, 转移至增殖培养基(2)上, 不定芽丛继
续分化增殖(图 2)。
4.3 生根培养 切取高约 2 cm、生长健壮的不定
芽接种到培养基(3)上诱导生根, 一瓶一苗。12 d
后可见叶片明显增大, 且有根发生; 30 d内又可长
出 2~3对叶片, 4~6条根, 且较粗壮。之后, 从叶
腋部位还可生出新的腋芽。经过约 50 d的生根培
养, 株高约 5 cm, 生根率可达 90%以上(图 3)。
4.4 炼苗与移栽 生根培养50~60 d后, 于室内打开
瓶盖炼苗 3 d, 将健壮的生根苗从培养容器中小心
取出, 用温水洗净根部残留的培养基, 栽入经高压
灭菌的基质(河沙:腐殖土 =1:1)中。盖上透光率
50%的黑色遮阴网以保持较低光强, 2 d浇水 1次,
保持基质湿润。20~30 d后开始有新根长出, 揭开
图 1 三苞唇柱苣苔的初代诱导培养
图 2 三苞唇柱苣苔的增殖培养
植物生理学通讯 第 46卷 第 11期, 2010年 11月1178
遮阴网, 单株移栽入盆。盆底垫小鹅卵石, 上覆盆
土(河沙:泥炭土=1:3)。试管苗移栽不宜太深, 移栽
的成活率可达 90% (图 4)。
5 意义与进展 三苞唇柱苣苔属苦苣苔科唇柱苣苔
属植物。目前查明仅广西凤山一个自然分布点, 生
于石灰岩山岩洞中稍阴处, 野外现存植株数量稀少,
加上其生境遭到严重破坏, 已面临濒危。此种植物
叶绿脉清, 花冠蓝色, 花叶兼美。观赏价值高, 具
有一定的室内观赏盆花及园林景观开发前景。唇
柱苣苔属植物的组织培养已有报道(汤正辉等2004;
图 3 三苞唇柱苣苔的生根培养 图 4 三苞唇柱苣苔的移栽
温放等 2008; 李翠等 2010), 但三苞唇柱苣苔的组
织培养与快速繁殖尚未见报道。
参考文献
李翠, 吕惠珍, 凌征柱, 姚绍嫦, 黄雪彦, 张占江(2010). 菱叶唇柱苣
苔的组织培养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 46 (10): 1073~
1074
汤正辉, 陈维伦, 石雷, 苗琛, 邢全(2004). 刺齿唇柱苣苔的离体
快速繁殖. 植物生理学通讯, 40 (2): 211
温放, 张启翔, 任翔翔(2008). 黄花牛耳朵的离体培养和快速繁
殖. 植物生理学通讯, 44 (2): 301~302