全 文 ：植物生理学通讯 第46卷 第12期, 2010年12月 1267
收稿 2010-10-21 修定 　2010-11-01
资助 浙江农林大学科研基金(2008FK64)和浙江省临安市科研
基金(201011)。
* 通讯作者(E-mail: ligy1956@163.com; Tel: 0571-63741290)。
闽赣长蒴苣苔的组织培养和快速繁殖
王辉, 钟泰林, 夏国华, 李根有 *
浙江农林大学林学基础实验教学中心, 浙江临安311300
Tissue Culture and Rapid Propagation of Didymocarpus heucherifolius Hand.-
Mazz.
WANG Hui, ZHONG Tai-Lin, XIA Guo-Hua, LI Gen-You*
Basic Experiment Teaching Center of Forestry, Zhejiang Forestry College, Lin’an, Zhejiang 311300, China
1 植物名称 闽赣长蒴苣苔(Didymocarpus heuch-
erifolius Hand.-Mazz.)。
2 材料类别 幼叶。
3 培养条件 MS 为基本培养基。诱导不定芽分化
培养基: (1) MS+6-BA 0.1 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;
(2) MS+6-BA 1.0+NAA 0.5; (3) MS+6-BA 2.0+NAA
0.5。增殖继代培养基: (2); (3); (4) MS+6-BA 2.0+
NAA 1.0; (5) MS+6-BA 0.05+NAA 0.05。生根培
养基: (6) 1/2MS+NAA 0.5; (7) 1/2MS+0.5%活性炭;
(8) 1/2MS+0.1%活性炭。以上培养基均含30 g·L-1
蔗糖和7.0 g·L-1琼脂, pH 5.8。培养温度为(25±2)
℃, 光照强度约为30 mmol·m-2·s-1, 光照时间为16
h ·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 不定芽的诱导 取闽赣长蒴苣苔幼嫩叶片, 先用
自来水冲洗, 再放入烧杯内, 加水震荡10 min, 在此
期间用毛笔蘸取几滴洗洁精, 轻刷表面, 除去气泡
(叶表面密被绒毛), 最后用流水冲洗20 min。在超
净工作台上, 先用75%乙醇灭菌约20 s, 再用0.1%
HgCl2 浸泡 4~6 min, 之后用无菌水冲洗5次。将
叶片切成1 cm×1 cm的小方块, 接种到诱导不定芽
分化培养基(1)~(3)内。18 d后, 外植体呈卷曲隆
起状, 部分切口处膨大。约30 d后, 出现嫩绿色
不定芽(图1)。再培养12 d左右长成叶片形状(图
2 )。
4.2 增殖继代培养 将丛生的不定芽及长成1~2对
叶的小植株接种到增殖培养基(2)~(5)中, 培养20 d
后不定芽明显长大增多至原来的2倍以上, 小植株
明显长高至原来的2倍以上, 叶片增大, 并有新叶
长出。再培养15 d后不定芽大量发生(图3), 叶成
对生长。可继续转接至继代培养上增殖培养, 长势
良好、叶茎健壮的芽可转入生根培养。
4.3 生根培养 选择有3~5对新叶的生长健壮的芽
接种到培养基(6)~(8), 8 d后可见叶片明显增大, 且
有根发生; 25 d内又可长出2~4对叶片, 3~5条根,
图1 闽赣长蒴苣苔不定芽的萌发
图2 闽赣长蒴苣苔不定芽的增殖
植物生理学通讯 第46卷 第12期, 2010年12月1268
但较纤弱。经过约2个月的生根培养, 株高约5 cm,
生根率可达 95% 以上(图 4)。
图3 闽赣长蒴苣苔叶片的大量生长
图4 闽赣长蒴苣苔生根培养
4.4 炼苗与移栽 苗高约6 cm时, 将培养瓶盖打开,
放到全天自然光照, 温度25 ℃的通风条件下炼苗
7~10 d, 将生根试管苗小心地从培养容器中取出, 用
温水洗净根部残留的培养基, 栽入盛有50%珍珠岩
和50% 蛭石(经高压灭菌)基质的浅盆中。用塑料
薄膜覆盖, 保持湿度, 2 d浇水1次, 保持基质湿润。
20 d后新根长出。长势稳定后, 每天掀开薄膜少
许, 7 d后揭去薄膜(图 5)。移栽成活率可达90%
以上。
5 意义与进展 闽赣长蒴苣苔为苦苣苔科长蒴苣苔
属植物, 是中国特有种。目前资料显示仅在广东、
江西、福建、浙江、安徽、湖南发现有分布, 常
见于石灰岩山地(喻勋林等2007)。本种花期5月,
花粉紫色, 繁密可爱, 花叶兼美, 有较高的观赏价值
(图6), 具有一定的室内观赏盆花开发前景。其野
生植株数量较少, 且生境遭到严重破坏, 亟待保护。
用组织培养快速繁殖技术可能有助于此种的种质资
源保存。与长蒴苣苔不同属的半蒴苣苔及尖萼唇
柱苣苔等植物的组织培养工作已有发表(汤正辉等
2005; 梁桂友等2007), 但闽赣长蒴苣苔的组培快繁
尚未见报道。
图5 闽赣长蒴苣苔组培苗移栽
参考文献
梁桂友, 温放, 李湛东(2007). 尖萼唇柱苣苔的组织培养和快速繁
殖. 植物生理学通讯, 43 (2): 321
汤正辉, 石雷, 陈维伦, 苗琛, 李振宇(2005). 半蒴苣苔的组织培
养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 41 (3): 333
喻勋林, 刘克明, 谷志容(2007). 湖南省新记录植物. 中南林业科
技大学学报, 27 (3): 66~69
图6 闽赣长蒴苣苔开花