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龙须海棠组织培养与试管内开花



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 7期,2009年 7月692
收稿 2009-06-02 修定  2009-06-22
* 通讯作者(E-mail: hmliu@gmc.edu.cn; Tel: 0851-6909916)。
龙须海棠组织培养与试管内开花
刘红美 *, 方小波, 杨苏文, 夏开德
贵阳医学院医学生物技术教研室, 贵阳 550004
Tissue Culture and in vitro Flowering of Mesembryanthemum spectabile Flaw
LIU Hong-Mei*, FANG Xiao-Bo, YANG Su-Wen, XIA Kai-De
Department of Medical Biotechnology, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, China
1 植物名称 龙须海棠(Mesembryanthemum spectabile
Flaw)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基: (1) 1/2MS; 增殖继
代培养基: (2) MS+6-BA 2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA
0.2; (3) MS+6-BA 1.0+NAA 0.5; (4) MS+6-BA 0.5+
NAA 0.1; 生根培养基: (5) 1/2MS+NAA 0.1; (6) 1/5
MS+NAA 0.1+PP333 0.1。上述各培养基均附加 4.5
g·L-1琼脂粉和 3%蔗糖, pH 5.6~5.8。培养温度
(25±2) ℃, 每天光照 12 h, 光照强度为 50~60 μmol·m-2·
s-1。
4 生长与分化情况
4.1 种子萌发 用消毒好的棉布袋将极细的龙须海
棠种子包好, 浸于 70%酒精中进行表面消毒 30 s,
无菌水清洗 3次, 用 0.1%的升汞溶液灭菌 10 min,
中间反复摇动, 最后用无菌水洗涤多次。将灭菌好
的种子置于消毒好的滤纸上晾干, 接种在培养基
(1)。培养 3 d后, 观察到有种子发芽。15 d后,
种子萌发率为 96%。
4.2 丛生芽的诱导与增殖 种子萌发20 d左右, 将无
菌苗切段, 分别接种到培养基(2)~(4)中。3 d后,
茎段基部开始变得膨大和透明, 茎顶端伸长迅速。
20 d左右, 3种培养基都有丛生芽产生和腋芽长出,
培养基(2)的增殖倍数为 8~10倍, 优于培养基(3)、
(4)的 5~6倍, 但长势上, 培养基(2)、(3)的苗都出现
玻璃化现象, 而且底部的叶片枯黄。所以认为, 增
殖阶段以培养基(4)为最好。
4.3 生根培养 继续用培养基(4)增殖继代, 获得数
量多而长势健康的龙须海棠组培试管苗, 将健康的
组培苗接种到培养基(5)、(6)中, 进行生根。培养
20~30 d, 苗高可达 5 cm以上; 苗基部长出 5~8条
不定根。培养基(6)的生根率为 90%, 好于培养基
(5)的 85%。实验中还观察到大量的组培苗开花现
象。在植株形态上, 开花株与未开花株类似。龙
须海棠试管内的花朵颜色与原品种无明显差异, 有
黄花、也有红花, 只是花朵较原品种的小。
4.4 炼苗移栽 待苗根长达到 5 cm以上时, 揭开培
养瓶封口膜, 并注入少量清水淹没培养基表面, 于
室内自然光下炼苗 5 d。然后小心取出试管苗, 洗
净根部附着的培养基, 移栽到经百菌清消毒过的珍
珠岩和蛭石(2:1)混合的基质中。浇足定根水, 用薄
膜覆盖以保湿保温, 湿度保持在 90%左右, 温度控
制在 23~25 ℃, 期间注意适当遮荫和通风。移栽
1个月后, 成活率可达 92%以上。
5 意义与进展 龙须海棠, 又名秋叶菊、日中花,
因叶退化如 “龙须 ”而得名, 是番杏科日中花属多
年生常绿亚灌木状多肉植物, 原产于南非, 是我国
近年来引进的花卉新品种。龙须海棠植株矮小, 花
大色艳, 是极好的盆栽观赏植物, 成片布置, 观赏效
果更佳。它还能抗二氧化硫、氧化氢等有害气体,
所以许多化工厂都有用作为防污植物进行栽培。
同时它是医药原料, 全草可提取中枢神经兴奋剂、
麻醉剂。龙须海棠种子采收困难, 以扦插繁殖难以
满足需要, 用组织培养方法可加速苗的繁殖。其试
管开花对丰富花卉市场可能有一定的作用, 对花卉
试管内开花的生理研究来说, 也是值得考虑的一种
实验材料。龙须海棠的组织培养和试管内开花还
未见报道。