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波叶红果树离体培养及再生体系建立



全 文 :植物生理学通讯 第 46卷 第 9期, 2010年 9月 961
收稿 2010-06-17 修定  2010-06-24
资助 浙江林学院研究生科研创新基金(2112009016)和浙江省科
技厅优生主题重点农业项目(20 09C1 2090 )。
* 通讯作者(E-mail: linxz100@sohu.com; Tel: 0571-63740918)。
波叶红果树离体培养及再生体系建立
白伟琴 1, 林夏珍 1,*, 高德禄 2, 马毅 2
1浙江农林大学园林学院, 浙江临安 311300; 2浙江凤阳山国家级自然保护区管理处, 浙江龙泉 323700
Tissue Culture and Rapid Propagation of Stranvaesia davidiana Dcne. var.
undulata Rehd. & Wils.
BAI Wei-Qin1, LIN Xia-Zhen1,*, GAO De-Lu2, MA Yi2
1School of Landscape Architecture, Zhejiang A & F University, Lin’an, Zhejiang 311300, China; 2Management Office, Zhejiang
Fengyangshan National Nature Reserve, Longquan, Zhejiang 323700, China
1 植物名称 波叶红果树(Stranvaesia davidiana
Dcne. var. undulata Rehd. & Wils.)。
2 材料类别 成熟种胚。
3 培养条件 启动培养基: (1) MS+6-BA 1.0 mg·L-1
(单位下同)。不定芽诱导及增殖培养基: (2) MS+6-
BA 0.5; (3) MS+6-BA 2.0。生根培养基: (4) MS+
IAA 0.5; (5) MS+IAA 1.0; (6) MS+IAA 2.0; (7) 1/2
MS+IAA 0.5; (8) 1/2MS+IAA 1.0; (9) 1/2MS+IAA 2.0。
以上培养基均添加 30 g·L-1蔗糖和 7 g·L-1琼脂, pH
5.8。培养温度为(25±2) ℃, 光照强度为 40~50
μmol·m-2·s-1, 光照时间为 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料获得 将新鲜种子经 4 ℃低温沙藏进
行催芽, 待其种子解除休眠后备用。将解除休眠后
的种子进行消毒处理, 先用自来水冲洗干净, 放在
超净工作台上, 用 75%乙醇浸泡 15 s后再用 0.1%
HgCl2浸泡消毒15 min, 最后用无菌水冲洗4~5次。
剥去种子种皮, 挑选饱满的成熟胚接种到培养基(1)
上。5 d后子叶开始生长, 30 d后长成高约 2 cm
的小植株(图 1)。
4.2 不定芽诱导及增殖培养 将无菌播种获得的小
植株顶芽转移到培养基(1)~(3)中进行不定芽诱导,
30 d左右时培养基(1)和(2)可在切口处形成 3~4个
不定芽和大量愈伤组织; 培养基(3)可形成1~2个不
定芽。将诱导出的不定芽继续转接到相同培养基
上进行增殖培养。实验结果表明: 6-BA的浓度过
低时增殖系数低, 过高则植株生长状况不良。培养
基(1)是增殖和植株生长最好的培养基, 增殖系数可
达到 2.9 (图 2)。
4.3 生根与移栽 切取高约3 cm的嫩茎接种到培养
基(4)~(9)上进行生根培养, 5 d后开始形成愈伤组
织, 10 d后开始生根。30 d时, 培养基(5)、(7)~(9)
的生根率为 72%~87%, 平均生根数 6~8条, 平均根
图 1 波叶红果树的无菌播种
图 2 波叶红果树的增殖
植物生理学通讯 第 46卷 第 9期, 2010年 9月962
长 0.27~0.83 cm。培养基(4)和(6)生根率分别为
35%和 33%, 平均生根数 3~4条, 平均根长分别为
1.68和 2.28 cm。综合植株生长状况以培养基(9)
为最佳诱导生根培养基(图 3)。
5 意义与进展 波叶红果树隶属蔷薇科红果树属,
为红果树波叶变种。其花为白色, 秋季叶色朱红鲜
亮夺目, 红叶期可持续达一个月之久, 果实鲜红, 冬
季经久不落, 成为我国目前观赏类集观花、观叶、
观果于一身的珍贵树种。浙江省主要分布在淳
安、遂昌、龙泉、庆元、云和、景宁、泰顺
等地, 生于海拔 1 300~1 900 m的山坡、山顶、
河谷及灌丛中。波叶红果树作为浙江省蔷薇科野
生植物, 具有较高的观赏价值, 其植株生长缓慢, 耐
修剪, 可用于制作树桩盆景(王昌腾 2007), 也可开
发用作地被或绿篱, 从而能够丰富园林植物材料。
供试材料取自浙江龙泉凤阳山国家级自然保护区内
海拔 1 700~1 900 m的黄茅尖。在野外调查中发
现波叶红果树在浙江的自然分布面积狭小, 现有种
群少, 而且在自然种群中由种子萌发形成的幼苗极
少, 种群自我更新能力弱。通过种子萌发和扦插繁
殖方式成活率均很低(蒋挺等 2009)。通过组培快
繁技术, 操作不受季节限制, 且繁殖系数大, 短期内
即可获得大量植株。有关波叶红果树的组织培养
及快速繁殖国内外尚未见报道。
参考文献
蒋挺, 林夏珍, 刘国龙, 李美琴, 刘胜龙(2009). 波叶红果树种子萌
发特性. 浙江林学院学报, 26 (5): 682~687
王昌腾(2007). 浙江省蔷薇科野生观赏植物资源及园林应用. 安
徽农业科学, 35 (23): 7162, 7165
图 3 波叶红果树生根
图 4 波叶红果树组培苗移栽
图 5 波叶红果树组培苗移栽 10 d后生长情况
试管苗生根 20 d后, 将组培苗放置在实验室
窗台上, 不揭瓶盖在自然光下炼苗 1周。移栽时用
镊子从瓶中取出组培苗, 小心洗净基部残留的培养
基, 选择健壮苗移栽到消过毒的栽培基质中(蛭石:
泥炭 =1:1) (图 4), 浇足水, 遮荫处理。移栽后经常
喷水, 保持空气湿度。10 d后植株长出新根及嫩
叶, 成活率达82.5% (图5), 这时可转入正常土壤中
定植。